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大叶山楝中二萜类化学成分及其抗炎活性研究

中草药 2024年第14期55卷 4656-4662页

作者：陈彦伍秦天丽吴石丽蒋华夷何红平云南中医药大学中药学院云南昆明650500

目的研究大叶山楝Aphanamixis polystachya枝叶的化学成分及其抗炎活性。方法采用硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶及MCI等多种柱色谱技术进行分离纯化,根据理化性质结合波谱数据鉴定化合物结构。采用脂多糖(lipopolysaccharide,L... 详细信息

目的研究大叶山楝Aphanamixis polystachya枝叶的化学成分及其抗炎活性。方法采用硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶及MCI等多种柱色谱技术进行分离纯化,根据理化性质结合波谱数据鉴定化合物结构。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型,对化合物进行抗炎活性评价。结果从大叶山楝枝叶中分离得到11个二萜类化合物,分别鉴定为(4S)-4-[(E)-11-(15,15-dimethyl-14-oxo-14,15-dihydrofuran-12-yl)-11,18-dihydroxy-7-methyloct-6-en-5-yl]-3-methyl-1(4H)-furanone(1)、nemoralisin B(2)、aphapolin A(3)、nemoralisin G(4)、nemoralisin J(5)、nemoralisin I(6)、nemoralisin H(7)、nemoralisin D(8)、nemoralisin A(9)、aphanamene B(10)和反式植醇(11)。化合物11对LPS诱导的RAW 264.7细胞内NO的生成有微弱抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值为428.7μmol/L。结论化合物1为新化合物,命名为陵水暗罗素O(nemoralisin O);化合物3、8和11为首次从大叶山楝中分离得到;化合物11显示出微弱的抗炎活性。

关键词：大叶山楝二萜抗炎活性陵水暗罗素O 反式植醇 aphapolin A nemoralisin D

昆明杯冠藤与青羊参叶绿体基因组特征比较及系统发育分析

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药学学报 2024年第3期59卷 764-774页

作者：耿应敏周兴乾张体操郑兰平云南中医药大学中药学院云南昆明650500

昆明杯冠藤和青羊参隶属于夹竹桃科鹅绒藤属,是重要的药用植物。本研究对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组进行测序、组装,并对两者叶绿体基因组的结构特征及其系统发育位置进行了分析。结果表明,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组均具有... 详细信息

昆明杯冠藤和青羊参隶属于夹竹桃科鹅绒藤属,是重要的药用植物。本研究对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组进行测序、组装,并对两者叶绿体基因组的结构特征及其系统发育位置进行了分析。结果表明,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组均具有典型的四分体结构,注释到133个基因,两者总GC含量接近。密码子偏好性分析显示,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组中相对同义密码子使用度略有不同,但差异不大,且在密码子第3位有强烈的A或U偏好。在两者叶绿体基因组中分别检测到91个和103个简单重复序列,以A/T类型重复占比最大。核苷酸多态性分析显示,鹅绒藤属叶绿体基因组共有间区序列的核苷酸多态性值高于共有基因序列,基于共有间区序列的高变区设计了一对引物可对昆明杯冠藤和青羊参进行鉴别。系统发育分析表明,昆明杯冠藤和地梢瓜亲缘关系最近,青羊参、白首乌和隔山消在鹅绒藤属中形成稳定的单系分支,三者亲缘关系较近。对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组特征及其系统发育的比较分析将为两种植物的物种鉴定及鹅绒藤属植物的遗传多样性和系统进化研究奠定理论基础。

关键词：鹅绒藤属叶绿体基因组系统发育高通量测序 DNA条形码

“秩边”透“水道”对卵巢低反应小鼠卵巢组织内外凋亡相关因子表达的影响

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针刺研究 2024年

作者：任佳常博雅崔梦洁高珍曹玉霞王海军山西中医药大学第二临床学院

目的：观察“秩边”透“水道”对卵巢低反应（POR）小鼠内外凋亡相关因子的影响，探讨“秩边”透“水道”针刺对POR小鼠卵巢功能的保护机制。方法：C57BL/6N雌鼠按随机数字表法随机分为空白组、模型组和针刺组，每组23只。采用雷公藤多... 详细信息

目的：观察“秩边”透“水道”对卵巢低反应（POR）小鼠内外凋亡相关因子的影响，探讨“秩边”透“水道”针刺对POR小鼠卵巢功能的保护机制。方法：C57BL/6N雌鼠按随机数字表法随机分为空白组、模型组和针刺组，每组23只。采用雷公藤多苷片混悬液(50 mg·kg-1)灌胃制备POR模型。针刺组采用“秩边”透“水道”针刺，每次20 min，每日1次，连续干预14 d。选取30只同品系7～8周龄健康雄鼠与部分雌鼠进行1∶1合笼。采用阴道脱落细胞涂片观察雌鼠的动情周期变化；观察获卵数，测定卵巢湿重并计算卵巢指数；观察合笼后的妊娠率和胚胎数量；ELISA法检测雌鼠血清低水平抗米勒管激素（AMH）、促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成激素（LH）、雌二醇（E2）含量；HE染色法观察卵巢组织形态；TUNEL染色观察卵巢细胞凋亡率；RT-qPCR法和Western blot法分别检测卵巢组织半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、BCL-2关联X的蛋白（BAX）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、细胞因子受体超家族成员6（Fas）、凋亡相关蛋白调节因子（FADD）mRNA和蛋白表达水平。结果：与空白组相比，模型组小鼠动情周期紊乱率升高（P<0.01），妊娠率和胚胎数量明显减少（P<0.01），获卵数、卵巢湿重、卵巢指数明显降低（P<0.01）；血清中FSH和LH含量升高（P<0.01）,AMH和E2含量下降（P<0.01）；卵巢凋亡率明显升高（P<0.01），卵巢组织中闭锁卵泡明显增加、各级卵泡明显减少且颗粒细胞排列紊乱；卵巢组织中Caspase-3、Bax、Fas、FADD mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.01,P<0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01）。与模型组相比，针刺组小鼠动情周期的紊乱率下降（P<0.01），妊娠数和胚胎数量增多（P<0.01），获卵数、卵巢湿重和卵巢指数增加（P<0.01）；血清中FSH和LH含量下降（P<0.01）,AMH和E2含量上升（P<0.01）；卵巢颗粒细胞凋亡率明显降低（P<0.01），卵巢颗粒细胞排列整齐，闭锁卵泡减少、各级卵泡数量增加；卵巢组织中Caspase-3、Bax、Fas、FADD mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.01,P<0.05）。结论：“秩边”透“水道”针刺可以改善POR小鼠卵巢反应降低，其机制可能与调节卵巢组织内外凋亡相关因子的表达有关。

关键词：卵巢低反应“ 秩边”透“水道” 针刺凋亡

隔药饼灸干预TLR4/MyD88/NF-κB通路改善慢性疲劳综合征大鼠神经免疫炎症的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：翟春涛侯亚薇史林娟王一晓李玮田岳凤山西中医药大学第二临床学院

目的：基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路探讨经方逍遥散为药饼进行施灸改善慢性疲劳综合征（CFS）大鼠神经免疫炎症反应的作用机制。方法：50只6～8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组... 详细信息

目的：基于Toll样受体4/髓样分化因子88/核转录因子-κB（TLR4/MyD88/NF-κB）信号通路探讨经方逍遥散为药饼进行施灸改善慢性疲劳综合征（CFS）大鼠神经免疫炎症反应的作用机制。方法：50只6～8周龄SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、假药饼灸组、中药灌胃组、隔药饼灸组，每组10只。除对照组外其余各组进行持续21 d的造模，造模后进行行为学检测，隔药饼灸组与假药饼灸组对“神阙”“关元”“足三里”“期门”穴进行干预，中药灌胃组给予逍遥散悬浊液灌胃干预，连续干预10 d后进行行为学检测，ELISA检测各组大鼠血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量及海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB含量，HE染色观察大鼠海马组织的形态变化，Real-time PCR检测大鼠海马组织中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA水平，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中TLR4、MyD88、NF-κB、p65蛋白相对表达量；结果：与正常组比较，模型组旷场实验直立次数明显减少，（P<0.01），运动总距离、静止时间及中心区域持续时间明显缩短（P<0.01）；悬尾试验不动时间增加（P<0.01），挣扎次数减少（P<0.01）；血清、海马组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平，海马组织NF-κB水平及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。经治疗后，与模型组比较，各治疗组旷场实验运动总路程及直立次数明显增加（P<0.01），静止时间及中心持续时间明显延长（P<0.05，P<0.01）；悬尾实验不动时间明显缩短（P<0.01），挣扎次数明显增加（P<0.05）；血清、海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平，海马组织NF-κB水平及TLR4、NF-κB mRNA表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01）。与假药饼灸组比较，隔药饼灸组旷场实验中心区域持续时间明显延长（P<0.05），直立次数明显增加（P<0.01）；悬尾试验不动时间缩短（P<0.01），挣扎次数增加（P<0.01）；中药灌胃组血清TNF-α水平明显降低（P<0.01），中药灌胃组及隔药饼灸组血清、海马组织IL-6水平、海马组织IL-1β、TNF-α、NF-κB水平及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平明显降低（P<0.01，P<0.05）。与中药灌胃组比较，隔药饼灸组旷场实验直立次数明显增加（P<0.01）；悬尾实验不动时间缩短（P<0.01），挣扎次数增加（P<0.01）；血清IL-1β、海马组织TNF-α水平及TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平明显降低。结论：隔药饼灸能够有效改善CFS大鼠的疲劳状态与记忆功能，调控机体神经免疫炎性反应，其机制可能与调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

关键词：隔药饼灸神经免疫炎症慢性疲劳综合征逍遥散

基于网络药理学和分子对接探究健脾渗湿方治疗高尿酸血症的作用机制

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中药新药与临床药理 2024年第6期35卷 850-861页

作者：邓茜王兴强晏蔚田彭紫凝刘念万春平彭江云云南中医药大学第一临床医学院云南昆明650500 云南中医药大学第一附属医院云南昆明650032

目的运用网络药理学方法和和分子对接技术探讨健脾渗湿方(Jianpi Shenshi Formula)治疗高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)的潜在作用机制。方法通过TCMSP、BATMAN以及TCM-ID结合文献检索,筛选健脾渗湿方的活性成分,再通过SwissTargetPredic... 详细信息

目的运用网络药理学方法和和分子对接技术探讨健脾渗湿方(Jianpi Shenshi Formula)治疗高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)的潜在作用机制。方法通过TCMSP、BATMAN以及TCM-ID结合文献检索,筛选健脾渗湿方的活性成分,再通过SwissTargetPrediction获取成分对应的靶点。使用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分”网络,分析获取健脾渗湿方的主要活性成分。通过GeneCards、OMIM以及disgenet数据库获取高尿酸血症的相关靶点。将健脾渗湿方和高尿酸血症的交集靶点导入STRING数据库中进行蛋白互作(protein-protein interactions,PPI)网络分析,通过CytoHubba插件筛选网络hub靶点;同时使用R4.2.2软件对交集靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。运用CB-DOCK 2对hub靶点和主要成分进行分子对接。结果共筛选得到健脾渗湿方90个活性成分,其中槲皮素、山柰酚、木犀草素、豆甾醇、亚油酸乙酯等是主要活性成分,成分对应的837个靶点中有64个靶点与疾病相关靶点相交,其中CASP3、IL1B、IL6、PPARG、SIRT1、MAPK3、TNF、STAT3、TGFβ1、PTGS2、XDH等是hub靶点。潜在作用靶点主要富集在炎症、代谢、环境、细胞过程、生物系统及疾病等相关信号通路。结论健脾渗湿方可能通过槲皮素、山柰酚、木犀草素、豆甾醇、亚油酸乙酯等多种活性成分,对高尿酸血症相关的疾病信号通路(包括肿瘤、感染性疾病、代谢性疾病、心血管疾病等)以及代谢、免疫、炎症等生物学通路进行调节,发挥抑制尿酸生成和/或增加尿酸排泄、抗炎以及改善相关并发症的作用。

关键词：健脾渗湿方高尿酸血症网络药理学分子对接代谢免疫炎症

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痛风性关节炎中西医治疗研究进展

辽宁中医杂志 2024年

作者：肖妮沁沈嘉艳郑淑宇李兆福谢招虎云南中医药大学第一附属医院云南中医药大学

痛风性关节炎是目前临床的常见病、多发病。为了解痛风性关节炎目前的治疗研究进展，笔者通过查阅近年国内外相关文献的报道，对该病的中西医发病机制及常用药物和治疗方法进行了综述。结果发现西医在痛风性关节炎的免疫学相关信号通路... 详细信息

痛风性关节炎是目前临床的常见病、多发病。为了解痛风性关节炎目前的治疗研究进展，笔者通过查阅近年国内外相关文献的报道，对该病的中西医发病机制及常用药物和治疗方法进行了综述。结果发现西医在痛风性关节炎的免疫学相关信号通路发病机制研究方面较为深入，但治疗上仍无新的突破，而中医通过分期、分型以及外治法治疗该病疗效确切，但存在起效所依赖的物质基础及作用机制不明确等问题，严重制约了中医药的推广。而中西医结合对于该病的治疗具有诸多优势，值得深入研究。

关键词：痛风性关节炎发病机制中西医治疗综述

“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠SIRT1/PGC-1α/Nrf2信号通路的影响

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针刺研究 2024年第9期49卷 933-942页

作者：殷陆芸冯慧敏邱芳闫婧金晓飞山西中医药大学第二临床学院山西晋中030619

目的:观察“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ辅激活因子1α(PGC-1α)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨“秩边透水道”针法治疗POI的氧化应激机制。... 详细信息

目的:观察“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体-γ辅激活因子1α(PGC-1α)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨“秩边透水道”针法治疗POI的氧化应激机制。方法:随机将48只SD雌性大鼠平均分为空白组、模型组、浅刺组和秩边透水道组,每组12只。采用腹腔注射环磷酰胺制备POI大鼠模型。模型建立后,浅刺组采用0.20 mm×13 mm不锈钢毫针针刺大鼠双侧“秩边”,秩边透水道组采用0.20 mm×25 mm不锈钢毫针针刺大鼠双侧“秩边”并透向同侧“水道”,均每次30 min,每日1次,6次/周,连续4周。治疗结束后,ELISA法检测大鼠血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)和抗米勒管激素(AMH)含量;采用比色法检测卵巢组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量;HE染色法观察大鼠卵巢组织形态的变化并计算卵泡数目;免疫组织化学法、Western blot法检测大鼠卵巢组织SIRT1、PGC-1α、Nrf2蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织中SIRT1、PGC-1α、Nrf2 mRNA表达。结果:造模结束后,除空白组外,其余大鼠动情周期均紊乱,且FSH、LH含量较空白组升高(P<0.01),E2含量降低(P<0.01),提示造模成功。干预后,与空白组比较,模型组大鼠血清FSH、LH含量升高(P<0.01),E2、AMH含量降低(P<0.01),卵巢组织SOD、CAT活性降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01),生长卵泡数目减少(P<0.01),闭锁卵泡数目增加(P<0.01),SIRT1、PGC-1α、Nrf2蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.01,P<0.05)。相较于模型组,两针刺组大鼠血清FSH、LH含量降低(P<0.01),E2、AMH含量升高(P<0.01);秩边透水道组卵巢组织SOD、CAT活性上升(P<0.05)、MDA含量下降(P<0.01),生长卵泡数目增加(P<0.01),闭锁卵泡数目减少(P<0.01),SIRT1、PGC-1α、Nrf2蛋白及mRNA表达水平均上升(P<0.01,P<0.05)。与浅刺组比较,秩边透水道组大鼠血清AMH含量升高(P<0.01),卵巢组织SOD、CAT活性上升(P<0.05),MDA含量下降(P<0.05),生长卵泡数目增加(P<0.05),闭锁卵泡数目减少(P<0.05),SIRT1、PGC-1α、Nrf2蛋白及mRNA表达水平均升高(P<0.05)。结论:“秩边透水道”针法可以改善POI大鼠血清性激素水平及卵巢氧化应激水平,进而改善POI大鼠卵巢功能,其作用机制可能与SIRT1/PGC-1α/Nrf2信号通路的激活有关。

关键词：早发性卵巢功能不全秩边透水道氧化应激 SIRT1/PGC-1α/Nrf2信号通路

从脾肾两虚夹瘀与铁死亡的相关性探讨无症状性弱精子不育症的发病

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中华中医药杂志 2024年第5期39卷 2641-2646页

作者：徐磊史孟华陈雪松王绍年马天宇李泓莹林煦垚秦国政云南中医药大学第一临床医学院昆明650500 云南省中医医院/云南中医药大学第一附属医院昆明650021

无症状性弱精子不育症是一类症状、体征表现不明显或无症状、体征的不育症,其发病机制复杂,临床难以做到精准分证论治。铁死亡是一种以铁依赖性、脂质过氧化蓄积为特征的调节性细胞死亡形式,被认为是新发现的弱精子不育症病因。脾肾两... 详细信息

无症状性弱精子不育症是一类症状、体征表现不明显或无症状、体征的不育症,其发病机制复杂,临床难以做到精准分证论治。铁死亡是一种以铁依赖性、脂质过氧化蓄积为特征的调节性细胞死亡形式,被认为是新发现的弱精子不育症病因。脾肾两虚夹瘀是无症状性弱精子不育症发病的核心病机。脾虚运化无力在无症状性弱精子不育症铁死亡发病中起主导作用,生理状态下的铁为清,属水谷精微,受脾胃调控;病理状态下的铁为浊,为病理产物,致男性不育。脾生脂膏可导致脂质过氧化,这触发了铁死亡的关键环节。“脾-线粒体-铁死亡”与无症状性弱精子不育症关系密切。此外,肾虚不抵浊毒、久病血瘀入络可促进无症状性弱精子不育症铁死亡发病,致病情复杂难治。探讨脾肾两虚夹瘀与铁死亡的相关性及其在无症状性弱精子不育症发病中的作用,有助于丰富脾肾两虚夹瘀理论的科学内涵,也有助于中医药调控铁死亡以破解无症状性弱精子不育症无证可辨的临床辨治困局。

关键词：无症状性弱精子不育症脾肾两虚夹瘀铁死亡症状病机

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不同种属大鼠糖尿病视网膜病变模型比较研究

中药药理与临床 2024年

作者：左祥铎梅敉佳刘晓兰徐翔段俊华李学芳邱斌李静平云南中医药大学中药学院

目的：探究链脲佐菌素（STZ）诱导的两个种属大鼠糖尿病视网膜病变（DR）模型之间的差异。方法：健康成年雄性SPF级SD和BN大鼠，采用小剂量多次腹腔注射STZ诱发糖尿病模型，另设SD和BN正常对照组，10 只/组。实验全程观察各组动物一般... 详细信息

目的：探究链脲佐菌素（STZ）诱导的两个种属大鼠糖尿病视网膜病变（DR）模型之间的差异。方法：健康成年雄性SPF级SD和BN大鼠，采用小剂量多次腹腔注射STZ诱发糖尿病模型，另设SD和BN正常对照组，10 只/组。实验全程观察各组动物一般状态变化，每周测血糖、体质量等生理指标，4、8、12 周进行光学相干断层扫描技术(OCT)及荧光素钠血管造影(FFA)检测，HE染色检查大鼠视网膜组织病理变化。结果：相较SD大鼠，BN大鼠成模率高，死亡率低。随着病程的进展，两种属大鼠与正常对照组比较，模型对照组血糖明显升高、体质量降低；FFA结果显示，BN大鼠视网膜出现明显荧光素钠渗漏现象；OCT结果显示，BN大鼠模型对照组视网膜厚度增长缓慢，这与HE结果相应，且HE结果可知两种属大鼠模型对照组神经节细胞(RGCs)减少，视网膜各层细胞均出现不同程度损伤且排列紊乱，视网膜整体厚度逐渐变薄。结论：STZ诱导的DR模型，BN大鼠较SD大鼠模型成模率高、死亡率低；由于BN大鼠视网膜特有色素层，则OCT和FFA检测成像及HE切片效果均明显优于SD大鼠，其在病理变化方面与人类DR具有相同或相似的特征，更适宜用做DR发病和药物作用机制研究的动物模型。

关键词：大鼠糖尿病视网膜病变模型斯泼累格·多雷大鼠棕色挪威大鼠