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miR-155-5p介导PIK3R1负调控PI3K/AKT信号通路促进原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞增殖

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南方医科大学学报 2025年

作者：张玉如万磊方昊翔李方泽王丽文李柯霏闫佩文姜辉安徽中医药大学第一附属医院新安医学与中医药现代化研究所新安医学教育部重点实验室安徽中医药大学中医学院

目的探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞（pSSHSGECs）的影响。方法通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞，模拟pSS-HSGECs细胞模... 详细信息

目的探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞（pSSHSGECs）的影响。方法通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞，模拟pSS-HSGECs细胞模型；空白组：HSGECs，模型组：TRAIL+INF-γ+HSGECs，空转组：TRAIL+INF-γ+HSGECs+miR-155-inhibitor-NC;miR-155抑制组：TRAIL+INF-γ+IHSGECs+miR-155-inhibitor;CKK8法、流式细胞术、平板克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞周期及凋亡率、细胞增殖能力。ELISA、RT-PCR方法分别检测相关细胞因子、miR-155-5p表达。蛋白质免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。结果双荧光素酶检测结果表明，miR-155-5p与PI3K/AKT通路存在靶向关系，且PIK3R1mRNA为二者的结合位点。与空白组相比，模型组细胞活力、细胞克隆形成能力、IL-10、IL-4水平降低；细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率、PIK3R1mRNA蛋白相对表达显著升高（P<0.01）。与模型组及空转组相比，miR-155抑制组细胞活力、G1期比例、克隆形成能力、IL-10和IL-4水平上升；同时细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率及PIK3R1蛋白相对表达下降（P<0.05）。结论 miR-155-5p可靶向作用于PI3K1mRNA，负向调节PI3K/AKT信号通路的过表达，改善pSSHSGECs增殖与凋亡异常，调节炎症反应。

关键词：原发性干燥综合征 miR-155-5p PIK3R1 PI3K/AKT信号通路炎症因子

基于PI3K/Akt通路研究鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

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中国中药杂志 2025年

作者：蔺婷陶阳阳唐迎港袁菊杜慧平邓林宇周芳亮何迎春湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南中医药大学湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究中心湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学医学院湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学中西医结合院湖南中医药大学针灸推拿学院

为探讨鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制，采用鼻咽癌CNE1、CNE2细胞，体外实验分为对照组（30%空白血清培养基），鼻咽解毒胶囊低（10%含药血清+20%空白血清培养基）、中（20%含药血清+10%空白血清培养基）、高（... 详细信息

为探讨鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制，采用鼻咽癌CNE1、CNE2细胞，体外实验分为对照组（30%空白血清培养基），鼻咽解毒胶囊低（10%含药血清+20%空白血清培养基）、中（20%含药血清+10%空白血清培养基）、高（30%含药血清培养基）浓度组，干预24 h后，通过细胞增殖与活性检测（CCK-8法）、克隆形成实验和EdU染色法检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞增殖的影响；流式细胞术检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞凋亡的作用；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、生存素（survivin）、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达变化，以及PI3K/Akt通路相关蛋白的变化。结果显示，与对照组相比，鼻咽解毒胶囊中、高浓度组能够浓度依赖性地降低CNE1、CNE2细胞存活率（P<0.05，P<0.01）；EdU染色和克隆形成实验显示，鼻咽解毒胶囊中、高浓度组显著抑制CNE1、CNE2细胞增殖（P<0.05，P<0.01）；流式细胞术显示，鼻咽解毒胶囊各浓度组显著增加了CNE1、CNE2细胞的凋亡率（P<0.01），且呈浓度依赖性；Western blot显示，鼻咽解毒胶囊各浓度组XIAP、survivin、PCNA、p-PI3K、p-Akt蛋白表达量均显著下调（P<0.05，P<0.01），但PI3K和Akt蛋白的总表达变化差异无统计学意义。综上所述，鼻咽解毒胶囊能够抑制鼻咽癌细胞的增殖并诱导其凋亡，可能通过下调PI3K/Akt信号通路实现其作用。

关键词：鼻咽解毒胶囊鼻咽癌细胞凋亡细胞增殖 PI3K/Akt通路

敦土利水分期针灸治疗脾肾两虚型多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的临床疗效及与血清炎症因子的相关性研究

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世界科学技术-中医药现代化 2025年

作者：陈阳邢利威赵锐章小娟王菁夏小焱赵荣海南省妇女儿童医学中心南京中医药大学第一临床医学院云南中医药大学第一临床医学院

目的验证敦土利水分期针灸对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗（PCOS-IR）的临床疗效，分析针灸改善PCOS-IR临床指标与炎性因子水平变化的相关性。方法 70例PCOS-IR患者行饮食、运动指导等基础治疗并随机分为二甲双胍（对照）组及敦土利水分... 详细信息

目的验证敦土利水分期针灸对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗（PCOS-IR）的临床疗效，分析针灸改善PCOS-IR临床指标与炎性因子水平变化的相关性。方法 70例PCOS-IR患者行饮食、运动指导等基础治疗并随机分为二甲双胍（对照）组及敦土利水分期针灸（主穴取关元、中极、三阴交、足三里、丰隆，隔天针灸）联合二甲双胍组（针灸组），各35例，连续治疗3个月，分别采集治疗前后患者中医症候积分、体征评分（多毛评分、痤疮评分、黑棘皮评分）、性激素、血脂、空腹血糖、空腹胰岛素及血清炎症因子IL1β、IL18水平。结果对照组有效率为48.57%，针灸组有效率为94.29%，统计学差异显著（P中医症候积分、体征评分、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、LDL-C、LH、LH/FSH、T、PRL、IL18及IL1β均下降，而E2及P水平升高，有统计学差异（P0.40，P<0.05）。结论敦土利水针法联合二甲双胍可显著改善PCOS-IR患者糖脂代谢，缓解胰岛素抵抗，调节性激素水平，疗效优于单纯西药治疗。Pearson相关分析提示炎症因子可能是针灸显效的重要靶点之一。

关键词：敦土利水分期针灸脾肾两虚多囊卵巢综合征胰岛素抵抗炎症因子

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青羊参C21甾体类生物合成关键基因挖掘

中国药学杂志 2025年

作者：耿应敏周兴乾吴丽丽张体操郑兰平云南中医药大学中药学院

目的解析青羊参C21甾体类化合物的生物合成途径。方法本研究利用代谢组学和转录组学技术，比较分析青羊参根、茎、叶中C21甾体类化合物的相对含量，再通过KEGG数据库注释，筛选与C21甾体类生物合成相关的基因。最后通过实时荧光定量PC... 详细信息

目的解析青羊参C21甾体类化合物的生物合成途径。方法本研究利用代谢组学和转录组学技术，比较分析青羊参根、茎、叶中C21甾体类化合物的相对含量，再通过KEGG数据库注释，筛选与C21甾体类生物合成相关的基因。最后通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR， qRT-PCR）对部分差异表达基因（differentially expressed genes， DEGs）进行基因表达验证。结果青阳参苷元在根中显著上调，且在根中的相对含量约为叶中的73.10倍，约为茎中的19.05倍。转录组学分析发现，青羊参中有269条DEGs注释到了C21甾体类生物合成相关通路。通过分析各比较组间注释到的DEGs，在C21甾体类相关合成通路中筛选出了18个关键酶，且由87条基因编码，其中AACT等酶是其生物合成途径上游阶段的关键酶。进一步对其中8条DEGs进行qRT-PCR验证，其表达趋势与对应的转录组数据结果一致。结论本研究系统解析了青羊参中C21甾体类化合物的生物合成途径，筛选出多个关键酶及编码基因，丰富了青羊参的组学数据。这些发现为进一步研究青羊参C21甾体类化合物的生物合成机制奠定了基础。

关键词：青阳参苷元代谢组学转录组学生物合成途径

大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体的蛋白组学对比分析

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2683-2689页

作者：张鑫瑞韩悦雷蕾刘建宇耿承奎云南中医药大学第二临床医学院云南中医药大学呈贡校区云南省昆明市650000 昆明医科大学附属延安医院骨科云南省昆明市650000

背景:从蛋白组学方面分析脂肪间充质干细胞及其来源外泌体促进组织修复的研究较多,但缺少二者之间的蛋白组学对比分析。目的:对脂肪间充质干细胞及其外泌体进行蛋白组学分析。方法:分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,从细胞上清液中提取外... 详细信息

背景:从蛋白组学方面分析脂肪间充质干细胞及其来源外泌体促进组织修复的研究较多,但缺少二者之间的蛋白组学对比分析。目的:对脂肪间充质干细胞及其外泌体进行蛋白组学分析。方法:分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,从细胞上清液中提取外泌体并进行鉴定;运用DIA蛋白组学分析大鼠脂肪间充质干细胞及其外泌体差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行GO和KEGG分析。结果与结论:①脂肪间充质干细胞以长梭形为主,类似成纤维样;②经BCA法测定外泌体悬液的蛋白质量浓度为7.66 mg/mL;③外泌体呈典型的茶杯型,可见双层膜的囊泡结构,中央为低电子密度成分,外泌体粒径分布峰值为112.2 nm,浓度为7.5×10^(11)粒子/mL,平均直径在70-140 nm之间;④外泌体有表面标记蛋白CD9、TSG101高表达;⑤GO分析脂肪间充质干细胞及其外泌体的差异表达蛋白主要集中在细胞外基质和突触等位置,与离子结合和核糖体的结合能力相关,在细胞黏附和翻译过程中最为显著;⑥KEGG通路分析结果显示,差异表达蛋白主要参与细胞外基质受体交互、核糖体和细胞因子受体相互作用等,并且与胆固醇和甲状腺等多种代谢性疾病有关。

关键词：脂肪间充质干细胞外泌体蛋白组学对比分析组织修复

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灵芝多糖作为佐剂在黏膜免疫中的应用研究进展

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天然产物研究与开发 2025年

作者：翟哲陶玲玲刘旭菡程永现河南中医药大学药学院广东省中药有效成分与肠道微生物组学重点实验室深圳大学中医药守正创新研究院深圳大学马歇尔生物医学工程实验室深圳大学医学部药学院云南中医药大学基础医学院

黏膜免疫反应迅速，具有局部和全身免疫优势，是防控疾病感染的关键。灵芝多糖包括β-（1→3）、β-（1→6）糖苷键构型及三螺旋三维构象，具有免疫增强活性，作为佐剂具有极大应用潜力，但在黏膜免疫中报道较少。本文通过知网、PubMed... 详细信息

黏膜免疫反应迅速，具有局部和全身免疫优势，是防控疾病感染的关键。灵芝多糖包括β-（1→3）、β-（1→6）糖苷键构型及三螺旋三维构象，具有免疫增强活性，作为佐剂具有极大应用潜力，但在黏膜免疫中报道较少。本文通过知网、PubMed等数据库依据“灵芝多糖”“黏膜”“免疫佐剂”等关键词对近20年的相关文献进行了检索，阐述了黏膜免疫系统的组成和灵芝多糖对抗原呈递细胞、淋巴细胞等的激活效应，明确了其在肠、口腔等黏膜部位的免疫效应与机制，及其与纳米技术结合的应用前景，旨在为灵芝多糖在黏膜免疫上的研究提供借鉴。

关键词：灵芝灵芝多糖黏膜免疫免疫佐剂

灵芝多糖通过Akt/mTOR通路调控肝母细胞瘤细胞凋亡及自噬的机制研究

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中国中药杂志 2025年

作者：葛洋高航覃云鹏沈瑞吴华彰叶婷宋航安徽中医药大学中西医结合学院张家界学院医学院蚌埠医学院安徽省癌症转化医学重点实验室

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖... 详细信息

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖能力；Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况；Mrfp-GFP-LC3双荧光染色检测细胞自噬情况；采用HepG2细胞建立原位移植瘤动物模型，分别用生理盐水及100、200、300 mg·kg-1GLP处理小鼠，分析取材后肿瘤数目和大小的变化；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察肿瘤组织及主要脏器（心、肝、脾、肺、肾）组织病理情况；Western blot法检测细胞中肿瘤抑制蛋白53（tumor protein P53， P53）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bcl-2-associated X protein， Bax）、裂解半胱氨酸蛋白酶蛋白-3（cleaved-caspase-3）、苄氯素-1（Beclin-1）、自噬相关蛋白-5（autophagy related protein-5， Atg-5）、微管相关蛋白轻链-3Ⅰ（microtubule-associated protein-light chain-3Ⅰ， LC3Ⅰ）/LC3Ⅱ、自噬衔接蛋白62（autophagy adapter protein 62， P62）、蛋白激酶B（protein kinase B， Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）的蛋白表达。体外实验结果显示，与对照组相比，GLP处理后肿瘤细胞活力显著降低，细胞凋亡比例呈剂量依赖性增高，且自噬流被抑制。在体内实验中，与模型组相比，GLP处理后小鼠的肿瘤数目和大小显著下降；Western blot结果显示，与对照组或模型组相比，GLP处理后P53、Bax、cleaved-caspase-3、Beclin-1、Atg-5、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平显著升高，Bcl-2、P62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著降低。这些结果表明GLP能够通过调控Akt/mTOR途径诱导肝母细胞瘤细胞凋亡与自噬。

关键词：灵芝多糖肝母细胞瘤凋亡自噬 Akt/mTOR信号通路

龟鹿二仙胶含药血清对膝骨关节炎小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制研究

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中医正骨 2025年

作者：沈默金郑珍萍吴伟欣杨美鑫顾富城耿秋东王和鸣李楠福建中医药大学中医学院中医骨伤及运动康复教育部重点实验室

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药... 详细信息

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药液和生理盐水灌胃,连续灌胃1周后,采集腹主动脉血,制备龟鹿二仙胶含药血清和空白血清。取培养至第2代的C57BL/6小鼠膝关节软骨细胞,分为空白血清组、模型组、龟鹿二仙胶含药血清组。模型组、龟鹿二仙胶含药血清组加入终浓度为10 ng·mL-1的白细胞介素-1β,诱导培养24 h后,空白血清组、模型组加入10%空白血清,龟鹿二仙胶含药血清组加入10%龟鹿二仙胶含药血清,继续培养24 h。采用流式细胞分析仪检测各组软骨细胞凋亡率,采用电子显微镜观察各组软骨细胞自噬小体,分别采用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、UNC-51样自噬激活激酶1 （UNC-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1）、自噬相关蛋白5（autophagy related protein 5,ATG5）、微管相关蛋白1轻链3B（microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-13、趋化因子配体2（chemokine ligand 2,CCL2）的mRNA和蛋白表达水平。结果:（1）软骨细胞凋亡率检测结果。模型组软骨细胞凋亡率高于空白血清组（P=0.000）,龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞凋亡率低于模型组（P=0.000）。（2）软骨细胞自噬小体观察结果。空白血清组可见双层膜封闭的球状自噬小体,模型组自噬小体数量较空白血清组减少,龟鹿二仙胶含药血清组自噬小体数量较模型组增加。（3）软骨细胞自噬和凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平检测结果。模型组软骨细胞AMPK、ULK-1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均低于空白血清组（P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均高于空白血清组（P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000）;龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞AMPK、ULK1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均高于模型组（P=0.000,P=0.003,P=0.001,P=0.001,P=0.001;P=0.020,P=0.002,P=0.000,P=0.008,P=0.004）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均低于模型组（P=0.008,P=0.001,P=0.000,P=0.000;P=0.040,P=0.000,P=0.001,P=0.000）。结论:龟鹿二仙胶含药血清能够增强KOA软骨细胞自噬,抑制其凋亡与细胞外基质降解,且龟鹿二仙胶含药血清可能通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路发挥作用。

关键词：骨关节炎,膝龟鹿二仙胶软骨细胞自吞噬细胞凋亡信号传导 TOR丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶小鼠

青钱柳对棕榈酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积的影响及作用机制

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中国中医药信息杂志 2025年

作者：刘艺璇吴昊洋阳晶晶蔡昱哲罗政李定祥邓奕辉湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学针灸推拿与康复学院

目的探讨青钱柳对棕榈酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及潜在机制。方法通过CCK-8法测定棕榈酸钠、青钱柳冻干粉对HepG2细胞活力的影响，确定给药剂量。将细胞分为空白组、模型组、吡格列酮组和青钱柳低、中、高剂量组，采用35... 详细信息

目的探讨青钱柳对棕榈酸钠诱导的HepG2细胞脂质沉积的改善作用及潜在机制。方法通过CCK-8法测定棕榈酸钠、青钱柳冻干粉对HepG2细胞活力的影响，确定给药剂量。将细胞分为空白组、模型组、吡格列酮组和青钱柳低、中、高剂量组，采用350μmol/L棕榈酸钠诱导建立HepG2细胞脂质沉积模型，药物组分别予吡格列酮和低、中、高剂量青钱柳冻干粉（100、250、500μg/mL）干预12 h。采用尼罗红染色及BODIPY493/503荧光探针观察细胞内脂质沉积，ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6含量，Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、脂肪酸合成酶（FAS）、Bcl-2、Bax蛋白表达，qPCR检测脂肪甘油三酯酶（ATGL）、CD36 mRNA表达。结果与空白组比较，模型组HepG2细胞有大量脂质沉积，细胞上清液TNF-α、IL-6含量显著增加（P<0.01），细胞p-PI3K、p-Akt、SREBP-1、FAS、Bax蛋白表达显著升高，Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.01）,ATGL mRNA表达显著降低，CD36 mRNA表达显著升高（P<0.01）；与模型组比较，吡格列酮组和青钱柳各剂量组细胞内脂质沉积不同程度改善，细胞上清液TNF-α、IL-6含量降低，细胞p-PI3K、p-Akt、SREBP-1、FAS、Bax蛋白表达降低，Bcl-2蛋白表达升高，ATGL mRNA表达升高，CD36 mRNA表达降低，其中吡格列酮组和青钱柳高剂量组差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论青钱柳可能通过调控PI3K/Akt/SREBP-1/FAS信号通路影响TG代谢，改善棕榈酸钠诱导的HepG2模型细胞脂质沉积。

关键词：青钱柳 HepG2细胞脂质沉积 PI3K/AKt/SREBP-1/FAS信号通路