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醒脾胶囊调节5-HT-RhoA/ROCK2通路干预脾虚腹泻型肠易激综合征大鼠的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王港崔伶雯刘相凝朱镕鑫黄明月孙颖焦伯阳王然李春北京中医药大学中医学院中药学院

目的：探讨醒脾胶囊（XPC）在治疗脾虚腹泻型肠易激综合征（IBS-D）中的功效，并阐明其潜在的分子机制。方法：采用番泻叶给药联合约束应激和游泳疲劳连续14 d制备大鼠脾虚IBS-D模型。取10只SPF级健康大鼠作为正常组；将造模成功后的SP... 详细信息

目的：探讨醒脾胶囊（XPC）在治疗脾虚腹泻型肠易激综合征（IBS-D）中的功效，并阐明其潜在的分子机制。方法：采用番泻叶给药联合约束应激和游泳疲劳连续14 d制备大鼠脾虚IBS-D模型。取10只SPF级健康大鼠作为正常组；将造模成功后的SPF级大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组(1.5 mg·kg-1)和XPC低、高剂量组(0.135、0.54 g·kg-1)，每组10只。正常组与模型组大鼠灌胃蒸馏水，其余各组灌胃相应药液，每天1次，连续14 d。每日观测大鼠体质量和粪便情况，记录粪便Bristol评分；采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清和结肠组织中5-羟色胺（5-HT）水平；利用透射电子显微镜观察结肠微绒毛和紧密连接等细微结构；通过检测苏木素-伊红（HE）染色法、免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法（Western blot）评价结肠屏障完整性、检测肠道运动及相关通路蛋白的表达情况。结果：与正常组比较，模型组大鼠体质量下降和稀便率、稀便级及Bristol评分升高均十分显著（P生明显增宽，结肠组织紧密连接蛋白Occludin、Claudin-5表达下调（P<0.01），血清和结肠组织中5-HT含量升高（P<0.01），小肠推进率明显上升（P<0.01），结肠组织收缩蛋白RhoA、ROCK2表达及MLC20的磷酸化程度均上调（P<0.01）。与模型组比较，各治疗组腹泻及其伴随症状和结肠组织的病理表现有不同程度缓解；其中，高剂量的XPC可有效缓解腹泻并促进结肠黏膜结构恢复整齐致密同时有效减轻充血水肿，显著上调Occludin、Claudin-5表达（P<0.01），降低血清和结肠组织中5-HT含量（P<0.01），显著减缓小肠推进率（P<0.01），明显下调结肠组织收缩蛋白RhoA、ROCK2表达及MLC20的磷酸化程度（P<0.01）。结论：XPC可有效缓解脾虚腹泻症状并调节脑肠肽的分泌。其特色主要体现在从肠道黏膜保护与抑制肠道平滑肌收缩2个方面缓解脾虚D-IBS，其机制与调控5-HT-RhoA/ROCK2通路表达密切相关。

关键词：腹泻型肠易激综合征醒脾胶囊 5-羟色胺(5-HT) RhoA/ROCK2途径

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大叶山楝中二萜类化学成分及其抗炎活性研究

中草药 2024年第14期55卷 4656-4662页

作者：陈彦伍秦天丽吴石丽蒋华夷何红平云南中医药大学中药学院云南昆明650500

目的研究大叶山楝Aphanamixis polystachya枝叶的化学成分及其抗炎活性。方法采用硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶及MCI等多种柱色谱技术进行分离纯化,根据理化性质结合波谱数据鉴定化合物结构。采用脂多糖(lipopolysaccharide,L... 详细信息

目的研究大叶山楝Aphanamixis polystachya枝叶的化学成分及其抗炎活性。方法采用硅胶、C18反相硅胶、Sephadex LH-20凝胶及MCI等多种柱色谱技术进行分离纯化,根据理化性质结合波谱数据鉴定化合物结构。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型,对化合物进行抗炎活性评价。结果从大叶山楝枝叶中分离得到11个二萜类化合物,分别鉴定为(4S)-4-[(E)-11-(15,15-dimethyl-14-oxo-14,15-dihydrofuran-12-yl)-11,18-dihydroxy-7-methyloct-6-en-5-yl]-3-methyl-1(4H)-furanone(1)、nemoralisin B(2)、aphapolin A(3)、nemoralisin G(4)、nemoralisin J(5)、nemoralisin I(6)、nemoralisin H(7)、nemoralisin D(8)、nemoralisin A(9)、aphanamene B(10)和反式植醇(11)。化合物11对LPS诱导的RAW 264.7细胞内NO的生成有微弱抑制作用,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值为428.7μmol/L。结论化合物1为新化合物,命名为陵水暗罗素O(nemoralisin O);化合物3、8和11为首次从大叶山楝中分离得到;化合物11显示出微弱的抗炎活性。

关键词：大叶山楝二萜抗炎活性陵水暗罗素O 反式植醇 aphapolin A nemoralisin D

昆明杯冠藤与青羊参叶绿体基因组特征比较及系统发育分析

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药学学报 2024年第3期59卷 764-774页

作者：耿应敏周兴乾张体操郑兰平云南中医药大学中药学院云南昆明650500

昆明杯冠藤和青羊参隶属于夹竹桃科鹅绒藤属,是重要的药用植物。本研究对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组进行测序、组装,并对两者叶绿体基因组的结构特征及其系统发育位置进行了分析。结果表明,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组均具有... 详细信息

昆明杯冠藤和青羊参隶属于夹竹桃科鹅绒藤属,是重要的药用植物。本研究对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组进行测序、组装,并对两者叶绿体基因组的结构特征及其系统发育位置进行了分析。结果表明,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组均具有典型的四分体结构,注释到133个基因,两者总GC含量接近。密码子偏好性分析显示,昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组中相对同义密码子使用度略有不同,但差异不大,且在密码子第3位有强烈的A或U偏好。在两者叶绿体基因组中分别检测到91个和103个简单重复序列,以A/T类型重复占比最大。核苷酸多态性分析显示,鹅绒藤属叶绿体基因组共有间区序列的核苷酸多态性值高于共有基因序列,基于共有间区序列的高变区设计了一对引物可对昆明杯冠藤和青羊参进行鉴别。系统发育分析表明,昆明杯冠藤和地梢瓜亲缘关系最近,青羊参、白首乌和隔山消在鹅绒藤属中形成稳定的单系分支,三者亲缘关系较近。对昆明杯冠藤和青羊参叶绿体基因组特征及其系统发育的比较分析将为两种植物的物种鉴定及鹅绒藤属植物的遗传多样性和系统进化研究奠定理论基础。

关键词：鹅绒藤属叶绿体基因组系统发育高通量测序 DNA条形码

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不同种属大鼠糖尿病视网膜病变模型比较研究

中药药理与临床 2024年

作者：左祥铎梅敉佳刘晓兰徐翔段俊华李学芳邱斌李静平云南中医药大学中药学院

目的：探究链脲佐菌素（STZ）诱导的两个种属大鼠糖尿病视网膜病变（DR）模型之间的差异。方法：健康成年雄性SPF级SD和BN大鼠，采用小剂量多次腹腔注射STZ诱发糖尿病模型，另设SD和BN正常对照组，10 只/组。实验全程观察各组动物一般... 详细信息

目的：探究链脲佐菌素（STZ）诱导的两个种属大鼠糖尿病视网膜病变（DR）模型之间的差异。方法：健康成年雄性SPF级SD和BN大鼠，采用小剂量多次腹腔注射STZ诱发糖尿病模型，另设SD和BN正常对照组，10 只/组。实验全程观察各组动物一般状态变化，每周测血糖、体质量等生理指标，4、8、12 周进行光学相干断层扫描技术(OCT)及荧光素钠血管造影(FFA)检测，HE染色检查大鼠视网膜组织病理变化。结果：相较SD大鼠，BN大鼠成模率高，死亡率低。随着病程的进展，两种属大鼠与正常对照组比较，模型对照组血糖明显升高、体质量降低；FFA结果显示，BN大鼠视网膜出现明显荧光素钠渗漏现象；OCT结果显示，BN大鼠模型对照组视网膜厚度增长缓慢，这与HE结果相应，且HE结果可知两种属大鼠模型对照组神经节细胞(RGCs)减少，视网膜各层细胞均出现不同程度损伤且排列紊乱，视网膜整体厚度逐渐变薄。结论：STZ诱导的DR模型，BN大鼠较SD大鼠模型成模率高、死亡率低；由于BN大鼠视网膜特有色素层，则OCT和FFA检测成像及HE切片效果均明显优于SD大鼠，其在病理变化方面与人类DR具有相同或相似的特征，更适宜用做DR发病和药物作用机制研究的动物模型。

关键词：大鼠糖尿病视网膜病变模型斯泼累格·多雷大鼠棕色挪威大鼠

灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸调控PI3K/Akt/FoxO3a通路延缓衰老的作用机制研究

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天然产物研究与开发 2024年第5期36卷 737-747页

作者：普元柱陈海丰苏灿云南中医药大学中药学院昆明650500 云南省科学技术院昆明650051

研究灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸(caffeoylquinic acid from Erigeron breviscapus,EBCQA)的抗衰老作用,并探讨其潜在作用机制。以线虫为模型,观察EBCQA对其寿命、氧化抗性、热抗性、运动能力、DAF-16入核、以及超氧化物歧化酶(superoxide d... 详细信息

研究灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸(caffeoylquinic acid from Erigeron breviscapus,EBCQA)的抗衰老作用,并探讨其潜在作用机制。以线虫为模型,观察EBCQA对其寿命、氧化抗性、热抗性、运动能力、DAF-16入核、以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响。腹腔注射D-半乳糖构建衰老大鼠模型,检测EBCQA对大鼠学习记忆能力、胸腺和脾脏系数、肝脏中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Akt/protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphp-Akt,p-Akt)、叉头框蛋白O3a(forkhead box class O3a,FOXO3a)、磷酸化FOXO3a(phosphp-FOXO3a,p-FOXO3a)表达,以及肝脏和血清中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量的影响。结果显示,EBCQA能够延长野生型线虫寿命,并提升其氧化抗性、热抗性和运动能力,但对线虫PI3K、Akt、FoxO3a同源体突变株寿命没有显著影响;EBCQA能促进DAF-16入核,通过DAF-16提升线虫的SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA水平。在D-半乳糖诱导衰老大鼠中,EBCQA给药显著改善大鼠的学习记忆功能,提升胸腺和脾脏系数,降低PI3K、Akt、p-Akt、p-FoxO3a表达和MDA含量,增强SOD、GSH-Px、CAT活性。以上结果表明,EBCQA具有延缓衰老的作用,其机制可能与抑制PI3K和Akt激活、降低FOXO3a磷酸化、促进FOXO3a入核和转录活性、提升抗氧化酶活性和抑制氧化应激相关。

关键词：灯盏细辛总咖啡酰奎宁酸线虫 D-半乳糖诱导衰老大鼠 PI3K/Akt/FOXO3a通路抗衰老

珠子参对慢性咽炎模型大鼠的干预作用及其急性毒性研究

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中药新药与临床药理 2024年第1期35卷 10-16页

作者：何旭东周连丽杨岚焜陶语萱刘志博王文博孙思琪俞捷杨兴鑫云南中医药大学中药学院云南昆明650500

目的探究珠子参对大鼠慢性咽炎的干预作用及急性毒性。方法单次最大体积灌胃昆明种小鼠74.4 g·kg^(-1)珠子参,通过检测小鼠存活状态、脏器系数、主要脏器组织形态、血常规和生化指标来评价珠子参毒性。SD大鼠随机分为对照组、模型组、... 详细信息

目的探究珠子参对大鼠慢性咽炎的干预作用及急性毒性。方法单次最大体积灌胃昆明种小鼠74.4 g·kg^(-1)珠子参,通过检测小鼠存活状态、脏器系数、主要脏器组织形态、血常规和生化指标来评价珠子参毒性。SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照(醋酸泼尼松片)组(6.25 mg·kg^(-1)),珠子参低、中、高剂量组(0.58,1.16,2.32 g·kg^(-1)),连续灌胃30 d,每天1次;除对照组外,其余各组采用乙型溶血性链球菌诱导大鼠感染慢性咽炎;处死大鼠后,测定血清炎症因子白细胞介素6(Interlukin-6,IL-6)、环氧合酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)、白细胞介素1β(Interlukin-1β,IL-1β)、细胞间黏附分子1(Intercellular celladhesion molecule-1,ICAM-1)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)水平,HE染色观察咽部组织形态改变。结果毒理研究发现,给予珠子参后,除小鼠血浆丙氨酸转氨酶(Alanine transaminase,ALT)水平(P生化指标无明显变化;药效研究发现,珠子参明显降低慢性咽炎模型大鼠血清炎症因子水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001),改善其咽部组织病理变化。结论珠子参可通过抑制炎症反应缓解乙型溶血性链球菌诱导的慢性咽炎,但对脾脏可能具有潜在毒性。

关键词：珠子参慢性咽炎毒性炎症大鼠小鼠

利用高通量测序挖掘柠檬醛型野草香中的香叶醇脱氢酶基因

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现代食品科技 2024年

作者：徐玉琪梁春茂成佳蕙李园园普春霞云南中医药大学中药学院

以药食两用植物柠檬醛型野草香为原料进行精油提取及GC-MS成分测定，并利用Illumina Nova Seq 6000高通量测序获得其转录组数据信息，挖掘其精油合成关键酶基因。结果表明，该野草香种质柠檬醛含量在80%以上，高通量测序后共获得22.08 G... 详细信息

以药食两用植物柠檬醛型野草香为原料进行精油提取及GC-MS成分测定，并利用Illumina Nova Seq 6000高通量测序获得其转录组数据信息，挖掘其精油合成关键酶基因。结果表明，该野草香种质柠檬醛含量在80%以上，高通量测序后共获得22.08 GB数据，147 186 998条高质量序列，利用Trinity组装获得33 720条unigenes，平均长度1 799 bp，均在7大公共数据库中成功获得功能注释。通过KEGG代谢通路分析显示有2条单萜代谢相关途径，为萜类骨架生物合成（编号为ko00900）和单萜类生合成（编号为ko00902），相关unigenes分别有109条和32条；扩增获得1 143 bp的香叶醇脱氢酶基因（Ge DH），编码380个氨基酸，具有保守的Zn2、NADP结合位点和类似于紫苏属植物的Zn1结构基团，为进一步研究香薷属植物特色精油中单萜生物合成途径解析寻找到新的切入点。Ge DH基因作为调控柠檬醛精油合成的关键酶，其挖掘为天然柠檬醛精油的开发利用提供了一定的帮助，为拓宽食用调味油、天然食品抗菌剂的种类奠定了基础。

关键词：高通量测序野草香柠檬醛精油香叶醇脱氢酶

多组学分析揭示三七镰刀菌属致病菌的生物学差异

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核农学报 2024年第3期38卷 443-454页

作者：张丽燕聂红艳闻进蕊廖洪新凌翠琼徐福荣董鲜云南中医药大学中药学院云南昆明650500

镰刀菌属病原菌是三七根腐病的主要病原菌。为探究不同种镰刀菌之间产生生物学差异的机制,本研究结合多组学数据,对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium)、层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)和腐皮镰刀菌(Fusarium solani)的生物学特性进... 详细信息

镰刀菌属病原菌是三七根腐病的主要病原菌。为探究不同种镰刀菌之间产生生物学差异的机制,本研究结合多组学数据,对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium)、层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)和腐皮镰刀菌(Fusarium solani)的生物学特性进行分析。采用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基培养菌株,同时对孢子萌发率、菌丝生长、孢子产量及致病力进行测定,并采用广泛靶向代谢组学和转录组学,对尖孢镰刀菌、层出镰刀菌和腐皮镰刀菌3种镰刀菌9个样本进行转录组高通量测序及代谢物分析,比较镰刀菌属不同种间的差异表达基因(DEGs)和差异代谢物(DAMs),并结合GO和KEGG数据库对DEGs和DAMs进行功能注释和代谢通路分析。结果显示,孢子萌发率表现为:尖孢镰刀菌生长及孢子产量表现为:尖孢镰刀菌>层出镰刀菌>腐皮镰刀菌;致病力表现为:尖孢镰刀菌>腐皮镰刀菌>层出镰刀菌。DAMs分析结果表明,氨基酸类化合物是主要的差异代谢物,其成分和含量的差异是造成这3种镰刀菌生长差异的主要因素。转录组数据结果显示,不同种镰刀菌中的DEGs功能主要与核糖体和氧化磷酸化相关。本研究结果为三七镰刀菌属根腐病害的防控提供了理论依据。

关键词：三七根腐病代谢组转录组氨基酸

核桃粕多酚提取物预防高尿酸血症的作用及机制

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食品工业科技 2024年

作者：徐冬月马雅鸽牛若楠赵声兰云南中医药大学中药学院

采用高尿酸血症(hyperuricemia，HUA)小鼠模型和边造模边灌胃造模药和核桃粕多酚提取物的方法，考察核桃粕多酚提取物预防HUA作用及机制。以30 g·kg-1酵母膏灌胃(ig)和300 mg·kg-1氧嗪酸钾腹腔注射(ip)联合给药建立高尿酸血症小鼠模... 详细信息

采用高尿酸血症(hyperuricemia，HUA)小鼠模型和边造模边灌胃造模药和核桃粕多酚提取物的方法，考察核桃粕多酚提取物预防HUA作用及机制。以30 g·kg-1酵母膏灌胃(ig)和300 mg·kg-1氧嗪酸钾腹腔注射(ip)联合给药建立高尿酸血症小鼠模型，检测血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平和黄嘌呤氧化酶(XOD)、谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT)活性，苏木素-伊红染色观测分析肾脏病理状况，LC-MS技术检测肝脏代谢组，Illumina技术检测小鼠肠道菌群。结果显示，与模型组相比，核桃粕多酚提取物各剂量预防组能显著降低肾脏指数、血清Cr、IL-6、UA水平及XOD、ALT、AST活力，除低剂量组UA的P生物标志物为犬尿酸和溶血磷脂，差异代谢主要涉及调控TCA循环、铁载体群非核糖体肽生物合成、牛磺酸和次牛磺酸代谢等通路。综上，核桃粕多酚提取物能显著预防高尿酸血症，其机制可能是有效降低血清XOD活性，阻止建模诱发的小鼠肠道优势乳杆菌相对丰度下降和调控肝脏代谢，有效降低肝脏溶血磷脂(P<0.05)和增加犬尿酸(P<0.05)。

关键词：高尿酸血症核桃粕多酚提取物预防代谢组肠道菌群