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现代显微成像技术及其在细胞生物学中的应用

解剖学报 2018年第6期49卷 846-851页

作者：杨治河闫丽李红林蔡亚非滁州城市职业学院解剖学教研室安徽滁州239000 临沂市人民医院肿瘤科山东临沂276003 上海市第十人民医院中心实验室上海200072 南京农业大学动物科技学院南京210095

具有高分辨率、能活体观察和三维成像的现代显微成像技术的产生和发展,为细胞生物学研究提供了有效的工具。我们在本文中阐述了几个重要的现代显微成像技术原理和技术要点以及在细胞生物学中应用的现状,包括光学显微术、电子显微术和荧... 详细信息

具有高分辨率、能活体观察和三维成像的现代显微成像技术的产生和发展,为细胞生物学研究提供了有效的工具。我们在本文中阐述了几个重要的现代显微成像技术原理和技术要点以及在细胞生物学中应用的现状,包括光学显微术、电子显微术和荧光探针技术及相关技术,并对现代显微成像术的发展进行了展望。

关键词：显微成像术分辨率活体观察三维成像人

LAIR-1对GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的调节作用及其对Mo7e细胞功能的影响

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医学研究杂志 2023年第11期52卷 39-44页

作者：张娅薇吴肖婕杨蕊樊翠周嘉迪薛江楠滨州医学院免疫学教研室 264003 滨州市人民医院中心实验室 256610 临沂市中医医院超声医学科 276000 陕西中医药大学附属医院检验科咸阳712000

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(leukocyte-associated immunoglobulin-like receptor-1,LAIR-1)对粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)依赖的Mo7e细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨LAIR-1调节GM-CSF功能的分子机制,为进一步研究LAIR-1在造血细胞分化中的作用提供资料。方法采用LAIR-1慢病毒表达载体(LV-LAIR-1)转染GM-CSF依赖的Mo7e细胞,建立稳定高表达LAIR-1的Mo7e-LAIR-1细胞株,并采用流式细胞术、Western blot法检测、反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)以及激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)鉴定LAIR-1分子的表达;采用CCK-8试剂盒、FITC Annexin V凋亡试剂盒以及Transwell实验分别检测LAIR-1对Mo7e细胞功能的影响;采用Western blot法检测LAIR-1对酪氨酸蛋白激酶/信号转导及转录激活因子(janus kinase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路影响。结果经LV-LAIR-1转染的Mo7e细胞高表达LAIR-1分子;与对照组比较,LAIR-1能够显著抑制Mo7e细胞的增殖(P0.05);GM-CSF能够上调JAK2、STAT1、STAT3和STAT5的磷酸化水平,而LAIR-1的表达能够明显抑制STAT1、STAT3和STAT5蛋白酪氨酸的磷酸化水平。结论免疫抑制性受体LAIR-1可能通过抑制细胞因子GM-CSF介导的JAK/STAT信号通路的活化,参与对髓系造血细胞分化的调节。

关键词： LAIR-1 GM-CSF 酪氨酸磷酸化增殖迁移凋亡

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TSHR小分子配体的研究进展

中国新药杂志 2016年第3期25卷 291-296页

作者：任航申慧芳李官成王滔李铭源牛少娜刘爱武崔国祯遵义医学院珠海校区生物工程系珠海519041 澳门大学中华医药研究院中药质量研究国家重点实验室澳门999078 临沂市人民医院临沂276003

促甲状腺激素受体(TSHR)是一种接受促甲状腺激素信号,刺激细胞生成甲状腺激素的跨膜受体,在调控Graves病和甲状腺癌等甲状腺疾病的发生和发展过程中扮演了重要的角色。目前用来治疗该类疾病的方法均有一定的毒副作用。最近的研究结果表... 详细信息

促甲状腺激素受体(TSHR)是一种接受促甲状腺激素信号,刺激细胞生成甲状腺激素的跨膜受体,在调控Graves病和甲状腺癌等甲状腺疾病的发生和发展过程中扮演了重要的角色。目前用来治疗该类疾病的方法均有一定的毒副作用。最近的研究结果表明,基于作用于TSHR的小分子配体研究为甲状腺疾病新药研发提供了新的思路与方向。本文对TSHR的功能、结构以及近几年发现的TSHR小分子配体的化学结构、生物活性及应用研究进展进行了较为详细的综述,并对其发展趋势进行了展望。

关键词：促甲状腺激素受体激动剂拮抗剂 Graves病甲状腺癌

须喙按蚊入侵中国对未来气候变化的响应及风险评估

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中国媒介生物学及控制杂志 2023年第2期34卷 145-153页

作者：李超杨海波梁莹王国政李阳王彬李泓运王君刘起勇临沂市人民医院互联网医院管理办公室/公共卫生管理部山东临沂276000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的评估未来气候变化情景下须喙按蚊入侵中国的风险,为监测预警提供依据。方法使用最大熵模型预测须喙按蚊近期在全球的潜在分布状况和预估未来在中国的潜在分布区变化趋势。基于环境因子的贡献率,分析影响须喙按蚊分布的主要环境因子... 详细信息

目的评估未来气候变化情景下须喙按蚊入侵中国的风险,为监测预警提供依据。方法使用最大熵模型预测须喙按蚊近期在全球的潜在分布状况和预估未来在中国的潜在分布区变化趋势。基于环境因子的贡献率,分析影响须喙按蚊分布的主要环境因子;构建病媒生物风险评估指标体系用于计算入侵物种的综合风险值。结果共筛选出须喙按蚊有效分布点99个;9月降雨量在影响须喙按蚊潜在适生区分布中占有主导作用;模型训练遗漏率与理论遗漏率大体一致,受试者工作特征曲线下面积(AUC)值为0.988;当前气候情景下,须喙按蚊在中国的潜在适生区主要集中在广东、广西、海南省(自治区)以及四川盆地东部等;须喙按蚊在未来2081-2100年共享社会经济路径(SSP)585气候情景下中国的潜在适生区范围最广(207.51×10^(4) km^(2)),未来各气候情景下适生区面积呈增加趋势;通过风险评估指标体系,计算得出须喙按蚊的综合风险值为0.57,属于中等入侵风险物种。结论须喙按蚊在中国属于中等入侵风险物种,未来应根据其适生区分布情况完善蚊媒监测系统,制定科学的防控策略。

关键词：最大熵模型气候变化潜在适生区入侵风险评估须喙按蚊

高压氧通过下调miR-720表达抑制卵巢癌SKOV-3细胞恶性生物学行为的研究

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中华航海医学与高气压医学杂志 2023年第4期30卷 424-428页

作者：杨冬梅殷桂云张晓飞临沂市人民医院妇科临沂276000

目的探讨高压氧(HBO)处理对卵巢癌SKOV-3细胞miR-720的表达及其恶性生物学行为的影响。方法卵巢癌SKOV-3细胞按照实验设计分为对照组和HBO组,对照组SKOV-3细胞常规培养,HBO组SKOV-3细胞常规培养完成后予以0.2 MPa HBO处理。同时将培养... 详细信息

目的探讨高压氧(HBO)处理对卵巢癌SKOV-3细胞miR-720的表达及其恶性生物学行为的影响。方法卵巢癌SKOV-3细胞按照实验设计分为对照组和HBO组,对照组SKOV-3细胞常规培养,HBO组SKOV-3细胞常规培养完成后予以0.2 MPa HBO处理。同时将培养好的卵巢癌SKOV-3细胞按照随机数字表法再分为3组,正常对照(NC)组、HBO组和HBO+miR-720组,其中HBO组按照HBO条件进行培养,HBO+miR-720组在HBO处理前转染miR-720质粒,HBO组和NC组同时转染NC质粒,转染24 h后收集细胞进行后续实验。应用qPCR检测SKOV-3细胞miR-720 mRNA表达水平,应用Western印迹法检测SKOV-3细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白(N-cadherin、E-cadherin、Vimentin)和miR-720蛋白的表达水平,应用CCK-8法检测SKOV-3细胞增殖能力,应用克隆形成实验检测SKOV-3细胞克隆形成能力,应用细胞划痕实验和Transwell实验检测SKOV-3细胞侵袭和迁移能力。结果应用HBO处理后,HBO组卵巢癌SKOV-3细胞的增殖能力、侵袭能力及克隆形成能力明显低于对照组,划痕宽度比高于对照组(P<0.01);HBO组卵巢癌SKOV-3细胞中miR-720 mRNA和蛋白表达水平均低于对照组(P<0.01)。转染后,HBO+miR-720组SKOV-3细胞中miR-720 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05);HBO+miR720组SKOV-3细胞的增殖能力、侵袭能力及克隆形成能力明显高于对照组,划痕宽度比明显低于对照组(P<0.01);HBO+miR-720组SKOV-3细胞中E-cadherin蛋白表达水平低于HBO组,Vimentin和N-cadherin蛋白表达高于HBO组(P<0.01)。结论 HBO处理能够明显抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成,其抑制作用与卵巢癌细胞中miR-720表达有关。

关键词：高压氧 miR-720 卵巢癌恶性生物学行为

心房颤动患者华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的影响因素研究

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中国全科医学 2024年第3期27卷 308-314页

作者：范彩霞李娇魏延津郭德群刘存飞李峥嵘邱石山东省临沂市人民医院药学部 276000 康复大学青岛医院(青岛市市立医院)药学部山东省青岛市266011 山东省临沂市人民医院心血管内科 276000 航天中心医院(北京大学航天临床医学院)神经内科北京市100049

背景心房颤动发病率高,是引起脑卒中、心血管疾病及全因死亡的重要危险因素,而适当的抗凝治疗是预防心房颤动相关性卒中的核心。华法林仍然是目前主要的抗凝药物,但其治疗窗较窄,固定剂量的华法林在治疗初期很容易导致过度或抗凝治疗不... 详细信息

背景心房颤动发病率高,是引起脑卒中、心血管疾病及全因死亡的重要危险因素,而适当的抗凝治疗是预防心房颤动相关性卒中的核心。华法林仍然是目前主要的抗凝药物,但其治疗窗较窄,固定剂量的华法林在治疗初期很容易导致过度或抗凝治疗不足,既往华法林抗凝过度的临床研究较少。目的分析心房颤动患者华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的流行病学和临床特征,并探讨发生抗凝过度的影响因素。方法该研究为单中心回顾性队列研究。纳入2017年1月—2022年12月临沂市人民医院收治的行华法林2.5 mg/d治疗的心房颤动患者552例为研究对象,收集患者临床资料,包括年龄、性别、体质量、心房颤动类型(非瓣膜型/瓣膜型)、合并疾病(高血压、糖尿病、低蛋白血症、转氨酶异常、心力衰竭)、联合用药情况(联合用药数量、联用抗菌药物、联用胺碘酮),收集患者治疗前实验室检查结果,包括血清白蛋白(Alb)、血清肌酐(Scr)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,收集患者治疗前国际标准化比值(INR)和用药7 d后INR。根据华法林治疗7 d后INR是否>3.0将患者分为抗凝过度组(INR>3.0,n=122)和未抗凝过度组(INR≤3.0,n=430),比较两组患者资料,并采用单因素及多因素Logistic回归分析探究华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的影响因素。结果抗凝过度组患者年龄,女性、瓣膜型心房颤动、低蛋白血症、转氨酶异常比例,联合用药数量,联用胺碘酮比例,AST高于未抗凝过度组;体质量、高血压比例、糖尿病比例、Alb、ALT低于未抗凝过度组(P5种(OR=1.976,95%CI=1.175~3.323,P=0.010)、Scr≥91μmol/L(OR=2.087,95%CI=1.222~3.561,P=0.007)是心房颤动患者华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的独立危险因素,而糖尿病(OR=0.424,95%CI=0.191~0.939,P=0.034)是心房颤动患者华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的保护因素。结论年龄≥65岁、体质量≤63 kg、联合用药数量>5种、Scr≥91μmol/L可能是心房颤动患者华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的危险因素,而糖尿病可能是心房颤动患者华法林抗凝治疗初期发生抗凝过度的保护因素。对于高龄、低体质量、多种药物联合使用、Scr水平升高的华法林抗凝治疗患者应密切监测INR水平。

关键词：心房颤动华法林国际标准化比值抗凝过度危险因素 Logistic模型

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齿状回环路中苔藓细胞功能的研究进展

临床神经病学杂志 2024年第3期 222-225页

作者：张丽苏明钊苏全平锦州医科大学研究生学院临沂市人民医院中心实验室

苔藓细胞(MC)是星形胶质细胞的一种，它在海马齿状回(DG)细胞中的比例相当大。然而，关于其结构、功能以及在神经系统疾病中的作用仍不清楚。在癫痫发作期间，MC局部回路输入的变化会改变环路的兴奋性-抑制性稳态平衡，从而导致疾病的... 详细信息

苔藓细胞(MC)是星形胶质细胞的一种，它在海马齿状回(DG)细胞中的比例相当大。然而，关于其结构、功能以及在神经系统疾病中的作用仍不清楚。在癫痫发作期间，MC局部回路输入的变化会改变环路的兴奋性-抑制性稳态平衡，从而导致疾病的变化。存活的MC可对海马网络产生净抑制作用，从而对癫痫发作起到保护作用。此外，MC中c-fos蛋白的表达增加可以加强对新奇事物的记忆，并通过减少焦虑来提高认知能力。本文综述了MC在DG环路中的作用以及其在疾病治疗中的价值。

关键词：齿状回苔藓细胞癫痫焦虑认知

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染色体平衡易位六例

中华医学遗传学杂志 2016年第2期33卷 278-279页

作者：于凤娜李琳山东省临沂市人民医院遗传研究所 276003 山东省临沂市人民医院外科 276003

例1男，30岁，结婚3年，其妻两次妊娠均于40天左右胚胎停止发育。患者表型、外生殖器发育无异常，精液常规检查正常。夫妻为非近亲结婚，否认有遗传病家族史。妻子月经规律，妇科检查、优生四项检查未见异常，孕期无患病及服药史，无有... 详细信息

例1男，30岁，结婚3年，其妻两次妊娠均于40天左右胚胎停止发育。患者表型、外生殖器发育无异常，精液常规检查正常。夫妻为非近亲结婚，否认有遗传病家族史。妻子月经规律，妇科检查、优生四项检查未见异常，孕期无患病及服药史，无有毒有害物质及放射线接触史。

关键词：染色体平衡易位胚胎停止发育精液常规检查有毒有害物质近亲结婚外生殖器月经规律妇科检查

熊果酸通过JAK2/STAT3信号通路对子宫内膜基质细胞铁死亡的影响

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中华内分泌外科杂志 2023年第3期17卷 317-322页

作者：王聪门贵香邵帅马丽娜临沂市人民医院产科临沂276000

目的探究熊果酸(ursolic acid,UA)对异位子宫内膜基质细胞(ectopic endometrial stromal cells,EESCs)增殖、迁移和铁死亡的影响及其作用机制。方法构建子宫内膜异位症小鼠模型,并分离原代EESCs,使用不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、50... 详细信息

目的探究熊果酸(ursolic acid,UA)对异位子宫内膜基质细胞(ectopic endometrial stromal cells,EESCs)增殖、迁移和铁死亡的影响及其作用机制。方法构建子宫内膜异位症小鼠模型,并分离原代EESCs,使用不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、50、80、100、200 μmol/L)的熊果酸处理细胞;并将细胞分为Control组(正常培养)、2.5 μmol/L UA组(2.5 μmol/L熊果酸处理)、5.0 μmol/L UA组(5.0 μmol/L熊果酸处理)、10.0 μmol/L UA组(10 μmol/L熊果酸处理)、和UA+DUSP19组(10 μmol/L熊果酸+50 μmol/L的JAK2/STAT3信号通路激活剂DUSP19处理)。使用CCK-8法检测细胞存活率;使用平板克隆法检测细胞增殖;使用Transwell小室实验检测细胞迁移能力;使用试剂盒检测各组细胞Fe2+水平以及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量;使用蛋白免疫印迹检测各组细胞Ki67、PCNA、CyclinD1、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、STAT3蛋白表达水平。结果 Control、2.5 μmol/L UA、5.0 μmol/L UA、10.0 μmol/L UA组克隆数分别为:(152.22±15.47)、(121.22±11.54)、(92.00±5.54)、(66.44±6.88)个;Ki67蛋白表达量分别为:1.08±0.10、0.73±0.07、0.61±0.06、0.45±0.02;PCNA蛋白表达量分别为:0.85±0.07、0.64±0.05、0.41±0.03、0.31±0.05;CyclinD1蛋白表达量分别为:0.98±0.11、0.65±0.06、0.51±0.05、0.42±0.07;迁移数目分别为(92.78±6.27)、(62.22±2.20)、(50.22±4.59)、(39.11±4.33)个;Fe2+水平分别为:(1.06±0.07)、(1.21±0.11)、(1.33±0.08)和(1.47±0.09)μmol/g;MDA含量分别为:(0.48±0.06)、(0.65±0.07)、(0.85±0.08)和(1.03±0.11)μmol/g;ROS含量分别为(19.85±1.21)%、(24.83±2.79)%、(29.04±1.86)%、(33.87±2.45)%;SOD含量分别为:(36.41±3.56)、(31.03±2.81)、(25.63±2.84)和(19.62±1.67)U/mg;p-JAK2蛋白表达量分别为:0.85±0.10、0.75±0.06、0.53±0.05、0.31±0.03;p-STAT3蛋白表达量分别为:1.08±0.11、0.79±0.06、0.63±0.07、0.42±0.03。UA组和UA+DUSP19组的p-JAK2蛋白含量分别为:0.38±0.05、0.75±0.08;p-STAT3蛋白表达量分别为:0.46±0.04、0.80±0.03;细胞存活率分别为:(52.55±2.44)%、(82.18±4.72)%;Fe2+水平分别为:(1.57±0.06)和(1.21±0.13)μmol/g。以上指标,Control组与2.5 μmol/L UA组、5.0 μmol/L UA组、10.0 μmol/L UA组之间差异均具有统计学意义(P<0.05);2.5 μmol/L UA组、5.0 μmol/L UA组、10.0 μmol/L UA组之间差异均具有统计学意义(P<0.05);UA组和UA+DUSP19组之间p-JAK2、p-STAT3、细胞存活率和Fe2+水平差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论熊果酸可通过调控JAK2/STAT3信号通路抑制EESCs细胞增殖、迁移,并诱导铁死亡,进而发挥对子宫内膜异位症的保护作用。

关键词：熊果酸子宫内膜异位症宫内膜基质细胞铁死亡迁移