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安神定志方对D-半乳糖协同AβO诱导的小鼠阿尔茨海默病样行为的改善作用及机制研究

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药学学报 2024年第1期59卷 119-134页

作者：瞿艳吴欢朱国旗王训翠新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038 安徽中医药大学科研技术中心安徽合肥230038 中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽中医药大学分子生物学(脑病)重点实验室安徽合肥230012

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小... 详细信息

本研究旨在探讨安神定志方(ADP)对小鼠阿尔茨海默病(AD)样行为的改善作用及机制。采用超高效液相色谱-飞行时间质谱技术标定ADP的主要成分。以D-半乳糖(D-gal)协同Aβ1-42寡聚体(AβO)诱导小鼠AD样行为,运用多种行为学方法评估ADP对小鼠AD样行为的影响;Nissl染色与透射电镜观察海马组织的病理形态改变;ELISA检测氧化应激和炎症相关因子水平;Western blot检测Aβ、Tau和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。根据TCMSP和HERB数据库筛选ADP的活性成分,利用Swiss Target Prediction平台预测活性成分的作用靶点;通过TTD、OMIM、GeneCards和DisGeNET数据库预测AD的疾病靶点;运用Metascape数据库对共有靶点进行GO、KEGG富集分析。结合GO和KEGG分析结果进行体内实验验证,从PI3K/Akt、钙信号通路以及突触功能角度探究ADP改善小鼠AD样行为的潜在机制。最后使用Autodock Vina对ADP的核心成分与已验证靶点进行分子对接。动物实验经安徽中医药大学动物伦理委员会批准(批准号:AHUCM-mouse-2021080)。结果表明,ADP中含有ginsenoside Rg1、ginsenoside Rb1、tenuifolin、poricoic acid B、α-asarone等主要化学成分。ADP显著改善D-gal协同AβO诱导的AD小鼠焦虑样行为和记忆损伤,保护海马神经元,降低氧化应激和炎症水平,抑制Aβ、磷酸化Tau表达。网络药理学结果提示PI3K/Akt、钙信号通路以及与突触后膜相关的细胞组分可能是ADP改善AD的关键因素。动物实验进一步确证ADP作用可以上调小鼠海马N-甲基-D-天氡氨酸离子型谷氨酸受体2A(GluN2A)、突触后致密蛋白95(PSD95)、钙蛋白酶1(calpain-1)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达,抑制p-GluN2B和calpain-2表达。分子对接结果表明,ADP的核心成分panaxacol、dehydroeburicoic acid、deoxyharringtonine等与已验证靶点GRIN2A、GRIN2B、PSD95等均具有较强结合力。综上表明,ADP能够改善D-gal协同AβO诱导的小鼠AD样病理变化和行为改变,其调控机制可能和NMDAR/calpain、Akt/CREB/BDNF通路有一定的关联性。

关键词：安神定志方阿尔茨海默病氧化应激炎症反应突触缺失

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法辨识黄大茶化学成分

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色谱 2024年

作者：黄若童戎雪雯付晓洁陈畅储俊许娜吴欢安徽中医药大学科研技术中心安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室安徽省中药研究与开发重点实验室食药用菌功能活性与资源利用安徽省联合共建学科重点实验室

黄大茶是中国特有的茶叶品种,具有降脂、降糖、改善代谢综合征的保健功效,但由于缺乏对黄大茶化学轮廓的研究,其功效性物质基础尚未被完全揭示。本研究使用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q TOF/MS）作为检测工具,结合中性... 详细信息

黄大茶是中国特有的茶叶品种,具有降脂、降糖、改善代谢综合征的保健功效,但由于缺乏对黄大茶化学轮廓的研究,其功效性物质基础尚未被完全揭示。本研究使用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（UPLC-Q TOF/MS）作为检测工具,结合中性丢失和特征碎片离子等信息,对黄大茶的主要化学成分进行筛查和分析。选取Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1 mm, 1.7μm）进行分离,以0.1%甲酸水和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL/min,进样量2μL,柱温35℃。在电喷雾电离（ESI）的正/负离子模式下,利用全信息串联质谱（MSE）技术采集黄大茶样品溶液的质谱信息。通过查阅文献构建茶叶化学成分自建数据库,主要包括化学名称、分子式、结构式、准分子离子、碎片离子等信息,对自建数据库中的化学成分按照骨架结构进行归类;基于UPLC-Q TOF/MS测定结果,利用对照品对主要类别化合物的质谱裂解规律进行梳理,并总结其特征碎片离子和中性丢失特征;结合化合物的保留时间、准分子离子、碎片离子等信息对化合物结构进行表征。本研究从黄大茶中共鉴定出87种化学成分,包括10种儿茶素类、32种黄酮类、16种酚酸类、12种鞣质类、6种茶黄素类、以及11种其他类别化合物,其中14个成分经对照品予以验证。本文所建立方法能够全面阐明黄大茶的主要化学成分,为黄大茶功效性成分发现、品质评价提供科学依据和数据支撑。

关键词：超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱中性丢失特征碎片离子黄大茶化学成分

1,8-二川芎嗪基大黄酸与牛血清白蛋白相互作用研究

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分析科学学报 2024年第3期40卷 337-343页

作者：闫恳张燕燕卞在东张辉兰黄鹏倪佳黄和平安徽中医药大学药学院安徽合肥230038 中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012

本文采用紫外光谱法、荧光光谱法、圆二色谱法、电化学分析法和分子对接技术,对1,8-二川芎嗪基大黄酸(DBR)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制进行了研究。结果表明DBR和BSA间存在强相互作用,在温度290、300、310 K时,两者间的结合常数K... 详细信息

本文采用紫外光谱法、荧光光谱法、圆二色谱法、电化学分析法和分子对接技术,对1,8-二川芎嗪基大黄酸(DBR)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制进行了研究。结果表明DBR和BSA间存在强相互作用,在温度290、300、310 K时,两者间的结合常数Ka的数量级达10^(5),结合位点数为1.1,表明两者之间有着较强的相互作用并形成1∶1复合物;Kq两者的猝灭常数值分别为5.5924×10^(12)、4.9853×10^(12)、4.1665×10^(12)L·mol^(-1)·s^(-1),推测猝灭方式为静态猝灭。根据F9rster的非辐射能量转移机制求算出给体与受体间的结合距离r=4.8 nm、能量转移效率E=0.5793,推测两者之间存在非辐射能量转移;通过计算该体系的热力学参数得到ΔH<0,ΔS<0,ΔG<0,表明二者作用力类型为氢键和范德华力。另外,随着DBR的加入BSA的构象发生了改变,BSA的α-螺旋结构从60.55%减少到58.5%;电化学分析法表明两者形成了非电活性的超分子化合物;分子对接模拟结果推测出DBR分子进入了BSA分子的疏水腔内,其结合位置位于domainⅠA亚域。

关键词： 1 8-二川芎嗪基大黄酸牛血清白蛋白光谱法电化学法分子对接

基于谱-效关系筛选菊茎叶总黄酮抗氧化物质基础及其机制探讨

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天然产物研究与开发 2024年第3期36卷 464-477页

作者：巫梦莹陈慧芳程冉冉丁杨飞熊俊伟夏成凯吴德玲张伟安徽中医药大学药学院合肥230012 安庆医药高等专科学校安庆246052 亳州职业技术学院安徽中药材种植联合研究中心亳州236800 安徽中医药大学国家中医药管理局中药炮制技术传承基地省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230012

为探讨菊茎叶总黄酮(total flavonoids from stems and leaves of Chrysanthemum morifolium,TFCSL)抗氧化应激的活性成分,阐明其药效物质基础和作用机制。采用HPLC建立不同批次TFCSL指纹图谱;以高浓度葡萄糖诱导人脐静脉内皮细胞建立... 详细信息

为探讨菊茎叶总黄酮(total flavonoids from stems and leaves of Chrysanthemum morifolium,TFCSL)抗氧化应激的活性成分,阐明其药效物质基础和作用机制。采用HPLC建立不同批次TFCSL指纹图谱;以高浓度葡萄糖诱导人脐静脉内皮细胞建立氧化损伤模型,将丙二醛含量、乳酸脱氢酶含量和超氧化物歧化酶活性作为药效指标;采用灰色关联度和偏最小二乘法分析其谱-效关系确定抗氧化药效物质基础;基于网络药理学结合分子对接探究核心靶点及作用通路。从12批次TFCSL指纹图谱中确定12个共有峰,指认其中9个化学成分;各批次总黄酮样品均可减少细胞凋亡、降低丙二醛及乳酸脱氢酶含量、提高超氧化物歧化酶活性;综合2种数学模型确定峰5(芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷)、峰6(异绿原酸C)、峰7(香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷)为抗氧化物质基础;筛选出的3个活性成分作用于抗氧化应激的33个靶点;关键靶点为TNF、CASP3、EDNRA、XDH、PTGS2、MMP2,主要涉及脂质和动脉粥样硬化信号通路、IL-17信号通路、糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、TNF通路、MPKA通路等信号通路;分子对接结果显示活性成分与关键靶点之间均有较好的结合力。表明TFCSL抗氧化应激的物质基础可能为芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸C、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷,推测通过TNF、CASP3等靶点作用动脉粥样硬化信号通路、IL17信号通路发挥作用,体现菊茎叶多成分、多靶点抗氧化的作用特点。

关键词：菊茎叶总黄酮氧化应激谱效关系

广东省中药饮片当归的微生物污染调查与风险分析

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药物分析杂志 2024年第5期44卷 859-865页

作者：林铁豪张帆朱欢敏洪建文广东省药品检验所广东省药品监管局中药饮片污染微生物风险评估与控制重点实验室广州510663

目的:考察市售常用中药饮片当归微生物污染情况,分析其中可能存在的安全性风险。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》),进行需氧菌总数(TAMC)、霉菌酵母菌数(TYMC)、耐热菌总数、控制菌及耐胆盐革兰阴性菌检查;... 详细信息

目的:考察市售常用中药饮片当归微生物污染情况,分析其中可能存在的安全性风险。方法:参考2020年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)中药饮片微生物限度检查法>,进行需氧菌总数(TAMC)、霉菌酵母菌数(TYMC)、耐热菌总数、控制菌及耐胆盐革兰阴性菌检查;采用高通量测序技术分析样品中的优势污染菌属,确定样品中潜在的不可接受微生物。结果:市售当归饮片中污染微生物存在高度不确定性;TAMC为10^(2)~10^(6) CFU·g^(-1);耐胆盐革兰阴性菌的污染不均匀,其中具有潜在致病风险的微生物有鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌等;TYMC为10^(1)~10^(3) CFU·g^(-1)。结论:当归微生物污染严重且不均匀,需要积累更多的数据以完善其检验方法和评价标准,高通量测序能更准确地评估中药饮片样本中污染微生物的风险。

关键词：中药饮片当归微生物污染高通量测序不可接受微生物限度检查

基于智能感官技术与多元统计分析的黄芪蜜炙程度快速辨识研究

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中国中药杂志 2024年

作者：吴怡余荷蓉聂心如郭强沈哲苑张玖捌李铭轩梅茜郭志俊高波毛春芹陆兔林赵晓莉南京中医药大学药学院中药配方颗粒安徽省重点实验室

为分析黄芪蜜炙过程中颜色、气味和主要化学成分的差异及动态变化规律，该研究采用CM-5型分光测色计和Heracles NEO型超快速气相电子鼻对黄芪蜜炙过程中色泽及气味成分变化进行分析，采用高效液相色谱法对不同炮制程度炙黄芪饮片毛蕊异... 详细信息

为分析黄芪蜜炙过程中颜色、气味和主要化学成分的差异及动态变化规律，该研究采用CM-5型分光测色计和Heracles NEO型超快速气相电子鼻对黄芪蜜炙过程中色泽及气味成分变化进行分析，采用高效液相色谱法对不同炮制程度炙黄芪饮片毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷含量进行测定，结合PLS-DA、OPLS-DA、DFA、贝叶斯判别等多元统计分析方法，识别不同炮制程度炙黄芪饮片，并将饮片外观性状与内在化学成分进行相关性分析。结果表明色度值c*、b*、L*是导致生黄芪和炙黄芪颜色差异的主要变量，并根据主要差异颜色参数建立了生、炙黄芪饮片的颜色参考值范围。对黄芪蜜炙过程中可能存在的气味成分进行鉴定，共识别得到 18 种气味成分，发现cyclohexane、dimethyl sulfoxide等成分为区分不同炮制程度炙黄芪饮片的气味差异标志物。相关性分析结果表明毛蕊异黄酮含量与2-methylfuran、delta-nonalactone 2种气味成分具有显著的相关性。该研究实现了不同炮制程度炙黄芪饮片的快速区分，可为炙黄芪饮片炮制过程中的质量控制及“辨状论质”提供参考依据。

关键词：黄芪智能感官化学计量学快速辨识炮制程度

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水杨酸对高温胁迫下白术生理特性的影响

黑龙江农业科学 2024年第1期 37-45页

作者：李刚李靖琪魏庆红段伟伟陈娜亳州职业技术学院安徽中药材种植联合研究中心安徽亳州236800 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽亳州236800 安徽协和成药业饮片有限公司安徽亳州236800

为筛选出适宜缓解高温胁迫伤害的最佳SA浓度。研究喷施0.5,1.0和2.0 mmol·L^(-1)3种不同浓度的SA溶液,同时进行不同程度的高温处理后,测定盆栽白术苗叶片的叶绿素荧光参数、根系扫描参数及根系活力,研究水杨酸(SA)对高温胁迫下白术种... 详细信息

为筛选出适宜缓解高温胁迫伤害的最佳SA浓度。研究喷施0.5,1.0和2.0 mmol·L^(-1)3种不同浓度的SA溶液,同时进行不同程度的高温处理后,测定盆栽白术苗叶片的叶绿素荧光参数、根系扫描参数及根系活力,研究水杨酸(SA)对高温胁迫下白术种苗的缓解效应。结果表明,对叶绿素荧光测定的Fv′/Fm′、ΦPSⅡ、NPQ三个参数,高温胁迫下CK组NPQ值均大于处理组,而CK组的Fv′/Fm′和ΦPSⅡ值均小于处理组,且与对照组相比喷施0.5 mmol·L^(-1)的SA溶液效果最为显著。喷施0.5 mmol·L^(-1)SA对高温胁迫下白术种苗根系表面积能起到促进作用,喷施1.0 mmol·L^(-1)SA的促进作用在根长、投影面积及平均直径方面的作用较显著。同时喷施1.0 mmol·L^(-1) SA溶液的白术种苗根系活力的数值最高。综上,0.5 mmol·L^(-1)的SA能缓解高温对白术苗伤害的能力最强。

关键词：白术水杨酸高温胁迫叶片

大别山五针松根际微生物和内生菌群落特征及功能多样性

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广西植物 2024年

作者：项小燕阮思睿张颖赵菲菲徐伟芳安庆师范大学生命科学学院/皖西南生物多样性研究与生态保护安徽省重点实验室安徽中医药大学药学院/中药研究与开发安徽省重点实验室

为了探明大别山五针松根际微生物和内生菌群落特征及功能多样性，该研究以大别山五针松根际土壤和根部组织为研究对象，利用高通量测序技术分析根际微生物和根部内生菌群落特征，并利用PICRUSt和FUNGuild软件分别对细菌群落和真菌群落... 详细信息

为了探明大别山五针松根际微生物和内生菌群落特征及功能多样性，该研究以大别山五针松根际土壤和根部组织为研究对象，利用高通量测序技术分析根际微生物和根部内生菌群落特征，并利用PICRUSt和FUNGuild软件分别对细菌群落和真菌群落进行功能预测。结果表明：(1)根际微生物总操作分类单元(OTUs)数目和α多样性指数均明显大于根部内生菌。(2)根际微生物主要由厚壁菌门(如李斯特氏菌属)、变形菌门(如醋杆菌属)、子囊菌门(如镰刀菌属和毛壳属)等菌群构成，而根部内生菌则以厚壁菌门(如乳杆菌属和芽孢菌属)、子囊菌门(如枝孢菌属)、担子菌门(如须腹菌属和针菌属)菌群为主。(3)功能预测结果显示，根际细菌群落在细胞运动性、环境适应性、氨基酸代谢等功能方面较为突出，而根部内生细菌功能主要体现在酶家族、消化系统、能量代谢等方面；根际真菌群落和根部内生真菌均含有共生营养型、腐生营养型、病理营养型、及多种交叉营养型的真菌类群且外生菌根更多富集在根部组织中。该研究阐明，大别山五针松根际微生物与根部内生菌在菌群丰富度、群落结构组成及功能多样性上均存在差异。研究结果为认识大别山五针松根际微生物和内生菌的结构与功能提供了依据，也为后期开发促进大别山五针松生长、防治其病害的菌剂提供了一定的理论基础。

关键词：大别山五针松根际微生物内生菌高通量测序多样性

UPLC结合一测多评法测定药典中淫羊藿的13种化学成分

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 981-988页

作者：刘鑫何小英刘柏龙宋平顺甘肃中医药大学甘肃兰州730030 甘肃省药品检验研究院国家中药材及饮片质量控制重点实验室甘肃省中藏药检验检测技术工程实验室甘肃兰州730030

建立淫羊藿Epimedium brevieornu中13种化学成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法,考察该方法在评价不同产地和不同品... 详细信息

建立淫羊藿Epimedium brevieornu中13种化学成分新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法,考察该方法在评价不同产地和不同品种的淫羊藿药材质量中具有一定的可行性和准确性。通过对实验方法的科学性及准确性考察,采用外标法测定淫羊藿中13种化学成分的含量,同时,以淫羊藿苷为内标,分别建立淫羊藿苷与新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的相对较正因子,计算淫羊藿中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的含量,实现用一测多评法测定其含量,最后比较实测值与计算值的差异,来验证一测多评法在测定中的准确性及科学性。各成分相对校正因子重复性较好,外标法测定结果与一测多评测定结果无显著性差异。以淫羊藿苷为内标,同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅱ、箭藿苷A、淫羊藿次苷Ⅰ、宝藿苷Ⅰ的一测多评法可用于淫羊藿的定量分析。

关键词： UPLC 一测多评法淫羊藿淫羊藿苷相对校正因子