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细胞周期的检查点调控机制

细胞生物学杂志 1994年第4期16卷 145-150页

作者：吕吉宁左嘉客中科院上海细胞生物学研究所 200031

细胞周期是指细胞通过一系列有序的细胞内事件,实现细胞生长和分裂增殖的过程。细胞周期调控机制的研究主要包括两方面内容,一方面研究细胞是怎样起动和完成细胞内的重要事件,进而完成细胞分裂;另一方面研究细胞怎样保证这些事件按次序... 详细信息

细胞周期是指细胞通过一系列有序的细胞内事件,实现细胞生长和分裂增殖的过程。细胞周期调控机制的研究主要包括两方面内容,一方面研究细胞是怎样起动和完成细胞内的重要事件,进而完成细胞分裂;另一方面研究细胞怎样保证这些事件按次序正常地运行,以保证细胞能正常增殖与生存。细胞周期的检查点(cell cycle checkpoints)

关键词：细胞周期有丝分裂周期检查点调控机制

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Y-box结合蛋白的研究进展

细胞生物学杂志 1996年第2期18卷 57-63页

作者：吕吉宁左嘉客中科院上海细胞生物学研究所 200031

Y-box元件是指存在于一些基因的启动子或增强子中的一类顺式调控元件。其核心序列为“CCAAT”。对一些基因启动子中的CCAAT序列进行点突变和基因缺失的实验,证实这个顺式调控元件在基因转录调控中扮演重要角色。自1987年以来,人们从不... 详细信息

Y-box元件是指存在于一些基因的启动子或增强子中的一类顺式调控元件。其核心序列为“CCAAT”。对一些基因启动子中的CCAAT序列进行点突变和基因缺失的实验,证实这个顺式调控元件在基因转录调控中扮演重要角色。自1987年以来,人们从不同种类细胞核内检测到多种能与CCAAT元件结合的因子,如人类组织细胞中的CTF、NPI、YB1、CBP、CP1、CP2、dbp1、dbpB;

关键词：蛋白 Y-box结合蛋白结构功能

慢性髓性白血病细胞来源的树突状细胞大容量诱导及其功能的实验研究

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复旦学报（医学版） 2004年第3期31卷 293-296页

作者：陈勤奋谢彦晖陈彤戴振声谢弘谢毅复旦大学附属华山医院血液科上海200040 中科院上海生化与细胞生物学研究所上海200031

目的　探索大容量诱导慢性髓性白血病 (CML)细胞来源的树突状细胞 (DCs)的适宜方法 ;研究CML DCs刺激自体T淋巴细胞增殖并分泌γ 干扰素 (IFN γ)的能力。方法　用CS 30 0 0 plus血细胞分离机采集初诊CML病人的外周血单个核细胞 (PBMNCs... 详细信息

目的　探索大容量诱导慢性髓性白血病 (CML)细胞来源的树突状细胞 (DCs)的适宜方法 ;研究CML DCs刺激自体T淋巴细胞增殖并分泌γ 干扰素 (IFN γ)的能力。方法　用CS 30 0 0 plus血细胞分离机采集初诊CML病人的外周血单个核细胞 (PBMNCs) ;单采的CML PBMNCS转入组织培养袋 ,加入重组人粒巨细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白介素 4 (rhIL 4 ) ,培养诱导 7d ;在诱导前后 ,用流式细胞仪分别检测细胞表面HLA DR、CD1a、CD80和CD86的表达水平 ;用3 H TdR掺入法检测CML DCs和CML PBMNCs刺激自体和异体T细胞增殖的能力 ;用ELISA法检测在自体混合淋巴细胞培养 (MLR)时T细胞分泌的IFN γ浓度。结果　用血细胞分离机收集的CML PBMNCs ,在组织培养袋内经细胞因子培养诱导 ,HLA DR、CD1a、CD80、CD86的表达均有明显上调 ,细胞形态也表现典型的DC特征 ;CML DCs能显著刺激自体和异体T细胞增殖 ,而CML PBM NCs仅能刺激异体T细胞的增殖 ,刺激自体T细胞增殖的能力很弱 ;刺激自体T细胞增殖时分泌的IFN γ浓度 ,CML DCs组为 (877± 2 14 )pg/mL ;CML BPMNCs组仅为 (14± 1.7) pg/mL。结论　单采的CML PBMNCs转入组织培养袋 ,加入rhGM CSF和rhIL 4 ,可收获大容量的CML DCs;CML DCs在体外具有显著刺激自体T细胞增殖?

关键词：慢性髓性白血病细胞来源树突状细胞诱导实验研究

以腺病毒为载体表达猪α(1,3)半乳糖基转移酶反义RNA抑制Galα(1,3)Gal抗原表位的表达<英文>

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Acta Pharmacologica Sinica 2000年第11期21卷 47-52页

作者：邢力,夏国宏,白旭芳,费俭,郭礼和中国科学院上海细胞生物学研究所中国科学院上海细胞生物学研究所中国科学院上海细胞生物学研究所中国科学院上海细胞生物学研究所中国科学院上海细胞生物学研究所上海 200031 中国上海 200031 中国上海 200031 中国上海 200031 中国上海 200031 中国

目的:尝试以反义RNA的方法抑制Galα(1,3)Gal抗原表位(gal抗原)的表达.方法:以人腺病毒载体表达猪α(1,3)半乳糖基转移酶基因的反义RNA.流式细胞术比较H血型抗原和gal抗原的表达水平.结果:构建了表达反义RNA的重组腺病毒载体Ad5anti-sGT... 详细信息

目的:尝试以反义RNA的方法抑制Galα(1,3)Gal抗原表位(gal抗原)的表达.方法:以人腺病毒载体表达猪α(1,3)半乳糖基转移酶基因的反义RNA.流式细胞术比较H血型抗原和gal抗原的表达水平.结果:构建了表达反义RNA的重组腺病毒载体Ad5anti-sGT600和Ad5anti-sGT1100.反义RNA的表达使NIH3T3细胞表面的gal抗原表位下降约30％.另外,反义RNA与人分泌型α(1,2)岩藻糖基转移酶的共同作用可使gal抗原表位的水平进一步下降.结论:重组腺病毒Ad5anti-sGT600和Ad5anti-sGT1100可有效降低gal抗原表位的表达.

关键词：人腺病毒反义RNS 半乳糖基转移酶类岩藻糖基转移酶类基因表达表位

肝癌单克隆抗体与氨甲喋呤交联物的制备及细胞毒的研究

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肿瘤 1996年第5期16卷 535-537页

作者：潘惠忠张尚权谢弘上海第一肺科医院中科院上海细胞生物学研究所

在肝癌单克隆抗体Ｈｅｐａｍａ－１－人血清白蛋白－ＭＴＸ结合物的制备中，首先ＭＴＸ在二环己基碳二亚胺（Ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｍｉｄｅ，ＤＣＣ）作用下，与Ｎ－羟基琥珀酰亚胺（Ｎ－Ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎ... 详细信息

在肝癌单克隆抗体Ｈｅｐａｍａ－１－人血清白蛋白－ＭＴＸ结合物的制备中，首先ＭＴＸ在二环己基碳二亚胺（Ｄｉｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｃａｒｂｏｄｉｍｉｄｅ，ＤＣＣ）作用下，与Ｎ－羟基琥珀酰亚胺（Ｎ－Ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ，ＮＨＳ）反应，得到ＭＴＸ活性酯，中间载体ＨＳＡ与ＳＰＤＰ作用引入巯基，再与ＭＴＸ活性酯反应得到ＨＳ－ＨＳＡ－ＭＴＸ。然后与碘乙酰化单克隆抗体Ｈｅｐａｍａ－Ｉ反应，获得硫醚键连接的交联物。交联物中Ｈｅｐａｍａ－Ｉ：ＨＳＡ：ＭＴＸ克分子比为１１．６３０，对靶细胞ＢＥＬ－７４０５及对照细胞ＨｅＬａ的杀伤效率，以交联物按ＭＴＸ的克分子浓度计算，ＩＣ５０（５０％抑止率）分别为２．５×１０－８ｍｏｌ／Ｌ和６．４×１０－７ｍｏｌ／Ｌ。单独ＭＴＸ对上述二种细胞株不显示选择性杀伤，ＩＣ５０均为７．１×１０－８ｍｏｌ／Ｌ。

关键词：单克隆抗体导向药物氨甲喋呤肝肿瘤

过量表达Stat3诱导COS7细胞显著的形态变化

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第8期35卷 717-722页

作者：颜晔夏彩虹曹新民景乃禾中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子细胞生物学重点实验室、干细胞生物学重点实验室上海200031 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子细胞生物学重点实验室、干细胞生物学重点实验室中国科学院上海生命科学研究院分子细胞生物学研究所新加坡117609

信号转导和转录激活蛋白Stat3在细胞的生长、分化、存活和运动过程中扮演重要角色。通过免疫细胞化学染色 ,免疫沉淀结合免疫蛋白质印迹法 ,以及瞬时转染由Stat3特异识别DNA元件所指导的报道基因等技术 ,证明COS7细胞中存在活性Stat3蛋... 详细信息

信号转导和转录激活蛋白Stat3在细胞的生长、分化、存活和运动过程中扮演重要角色。通过免疫细胞化学染色 ,免疫沉淀结合免疫蛋白质印迹法 ,以及瞬时转染由Stat3特异识别DNA元件所指导的报道基因等技术 ,证明COS7细胞中存在活性Stat3蛋白的表达。Stat3cDNA和报道基因在COS7细胞中的共转染实验表明 ,外源的Stat3蛋白具有DNA结合活性 ,并可增强报道基因的表达。同时 ,过量表达Stat3的COS7细胞呈现显著的细胞形态变化 ,如细胞体积增大、胞体伸出突起 ,有些突起有分枝和伪足。这些结果提示 ,Stat3蛋白在细胞的粘附和迁移 ,以及细胞骨架的重建过程中可能具有重要功能。

关键词： COS7细胞 Stat3 过量表达细胞形态报道基因

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端粒酶激活机制研究进展

生物化学与生物物理进展 2000年第6期27卷 602-605页

作者：张如刚王兴旺谢弘中国科学院上海细胞生物学研究所上海200031

随着对端粒和端粒酶在衰老和肿瘤中重要性认识的不断深入 ,端粒酶的激活途径已日益成为这一研究领域的热点 .已发现 ,MYC原癌蛋白 (myelocytomatosisvirusoncoprotein ,MYC)在端粒酶的激活中起关键作用 .它可以与TERT基因启动子区域内的... 详细信息

随着对端粒和端粒酶在衰老和肿瘤中重要性认识的不断深入 ,端粒酶的激活途径已日益成为这一研究领域的热点 .已发现 ,MYC原癌蛋白 (myelocytomatosisvirusoncoprotein ,MYC)在端粒酶的激活中起关键作用 .它可以与TERT基因启动子区域内的E盒结合反式直接激活端粒酶 ,还可能介导了细胞内其他分子如人乳头瘤病毒E6癌蛋白 (humanpapillomavirusE6oncoprotein ,HPV E6 )和雌激素等对端粒酶的激活 .雌激素也可与雌激素受体形成复合物 ,直接与TERT基因启动子区域内的退化雌激素反应元件结合反式激活端粒酶 .此外 ,腺瘤样结肠息肉癌蛋白 (adenomatouspolyposiscoliprotein ,APC)、p5

关键词：衰老肿瘤端粒酶 MYC 激活机制激活途径

利用SPR原理研究mGAT-1基因5’区域和组织核蛋白的相互作用

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实验生物学报 1999年第3期32卷 221-225页

作者：王琼蔡国强费俭周美云郭礼和中科院上海细胞生物学研究所上海200031

用PCR方法扩增到小鼠GAT-1基因5’近侧序列-1775—-1594片段(F182DNA),通过生物素偶联到感应片(SA5)上,利用生物传感器,研究了小鼠肾、肝组织核蛋白提取液和F182DNA的相互作用,实验表明不同浓度的小鼠肾、肝核蛋白与F182DNA片段结合明显... 详细信息

用PCR方法扩增到小鼠GAT-1基因5’近侧序列-1775—-1594片段(F182DNA),通过生物素偶联到感应片(SA5)上,利用生物传感器,研究了小鼠肾、肝组织核蛋白提取液和F182DNA的相互作用,实验表明不同浓度的小鼠肾、肝核蛋白与F182DNA片段结合明显,并且它们的表观解离速率常数都是k_d=1.4E-5/秒。实验还发现,在F182序列中一人鼠保守的序列是一个蛋白主要的结合位点,证明这一保守序列在mGAT-1基因调控中可能起重要的作用。

关键词： mGAT-1 组织核蛋白转运蛋白神经递质基因调控

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CD8^+ T细胞活化与分化的分子机制

中国免疫学杂志 2017年第4期33卷 481-487页

作者：刘畅王红艳中科院上海生物化学与细胞生物学研究所系统生物学重点实验室/中科院分子细胞卓越中心上海200000

CD8^+ T细胞识别由MHCⅠ分子递呈的抗原肽,由于大多数有核细胞都表达MHCⅠ分子,因此CD8^+ T细胞在清除被病毒、胞内菌、寄生虫等感染的细胞或突变的肿瘤细胞中发挥着重要作用。识别病原微生物等抗原后,CD8^+ T细胞活化并分化形成多种类... 详细信息

CD8^+ T细胞识别由MHCⅠ分子递呈的抗原肽,由于大多数有核细胞都表达MHCⅠ分子,因此CD8^+ T细胞在清除被病毒、胞内菌、寄生虫等感染的细胞或突变的肿瘤细胞中发挥着重要作用。识别病原微生物等抗原后,CD8^+ T细胞活化并分化形成多种类型的效应和记忆细胞,不仅能及时清除被感染的细胞,也能形成长期保护。各亚群CD8^+ T细胞的表面分子、功能和定位不同,细胞存活的时间、再次感染时的增殖能力和效应功能也有所差别。本文主要讨论CD8^+ T细胞如何受到多条信号通路和转录因子调控,活化和分化成不同类型的效应和记忆细胞,并对临床应用T细胞抵御肿瘤和病原微生物的进展作一简单概述。

关键词：细胞毒性T细胞活化分化记忆T细胞效应T细胞