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蛋白质组学在脊柱相关疾病研究的现状

中国矫形外科杂志 2024年第20期 1858-1863页

作者：卜献忠卜保献钟远鸣麦威河南中医药大学第一附属医院骨伤一科广西中医药大学河南省洛阳正骨医院(河南省骨科医院) 广西中医药大学第一附属医院

目前蛋白质组学技术大致可分为双向电泳技术、生物质谱技术、液质联用技术等，其具备快速筛选及鉴定疾病的特异性生物标记物的优点，可以从蛋白质水平角度对机体内各种生理变化、病理转变过程进行全面的认识。目前蛋白质组学技术在医学... 详细信息

目前蛋白质组学技术大致可分为双向电泳技术、生物质谱技术、液质联用技术等，其具备快速筛选及鉴定疾病的特异性生物标记物的优点，可以从蛋白质水平角度对机体内各种生理变化、病理转变过程进行全面的认识。目前蛋白质组学技术在医学领域得到广泛应用。本文就其在脊柱相关疾病中的应用现状进行综述，包括椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）、脊髓损伤（spinal cord injury, SCI）发生与修复机制研究以及脊柱韧带骨化与肥厚、颈椎病（cervical spondylosis, CS）、强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis, AS）、脊柱侧弯、脊柱结核（spinal tuberculosis, STB）、神经管缺陷（neural tube defects,NTDs）生物标记物筛选和发生机制研究等。

关键词：蛋白质组学脊柱疾病发生机制生物标记物修复机制

基于有氧糖酵解探讨加味四君子汤合沙参麦冬汤提高EGFR-TKI耐药肺腺癌细胞顺铂敏感性的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：文艳萍姜怡沈丽萍肖海威杨晓风原苏芮刘苓霜上海中医药大学附属龙华医院中山大学孙逸仙纪念医院深汕中心医院

目的：基于有氧糖酵解探讨四君子汤合沙参麦冬汤加减化裁方(益气养阴解毒方（YQYYJD）)提高表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）耐药肺腺癌细胞顺铂敏感性的作用机制。方法：细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度YQYYJ... 详细信息

目的：基于有氧糖酵解探讨四君子汤合沙参麦冬汤加减化裁方(益气养阴解毒方（YQYYJD）)提高表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）耐药肺腺癌细胞顺铂敏感性的作用机制。方法：细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度YQYYJD(0， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8 g·L-1)和顺铂(0， 3， 6， 9， 12， 15， 18， 21， 24， 27 mg·L-1)干预24 h对PC9/GR细胞增殖活力的影响，分别计算其对PC9/GR细胞的半数抑制浓度(IC50)作为后续实验浓度；将PC9/GR细胞分为空白组（完全培养基）、YQYYJD组(5 g·L-1)、顺铂组(12 mg·L-1)、联合组(YQYYJD 5 g·L-1+ 顺铂12 mg·L-1)，按分组干预24 h后，采用CCK-8法检测细胞存活率；克隆形成实验检测细胞增殖能力；划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移能力；比色法检测细胞葡萄糖的消耗量、乳酸及三磷酸腺苷（ATP）的生成量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测糖酵解相关蛋白己糖激酶2（HK2）、P型磷酸果糖激酶（PFKP）、M2型丙酮酸激酶（PKM2）、乳酸脱氢酶A（LDHA）、葡萄糖转运体1（GLUT1）、单羧酸转运蛋白4（MCT4）表达水平。结果：YQYYJD与顺铂均呈浓度依赖性抑制PC9/GR细胞的活力，PC9/GR细胞对YQYYJD和顺铂的IC50值分别为5.15 g·L-1和12.91 mg·L-1。细胞增殖方面，与空白组比较，YQYYJD组、顺铂组、联合组的细胞存活率、克隆形成数目均显著下降（P<0.01）；与YQYYJD组、顺铂组比较，联合组的细胞存活率、克隆形成数目均显著下降（P<0.01）。细胞迁移方面，与空白组比较，YQYYJD组、顺铂组、联合组的细胞迁移率、穿过Transwell小室膜的细胞数均显著下降（P<0.01）；与YQYYJD组、顺铂组比较，联合组的细胞迁移率、穿过Transwell小室膜的细胞数均明显下降（P<0.01）。糖酵解方面，与空白组比较，YQYYJD组、顺铂组、联合组细胞的葡萄糖消耗量、乳酸及ATP生成量均显著下降（P<0.01）；与YQYYJD组、顺铂组比较，联合组葡萄糖消耗量、乳酸及ATP生成量均显著下降（P<0.05）。与空白组比较，YQYYJD组、顺铂组、联合组细胞中HK2、PFKP、PKM2、LDHA蛋白表达水平均显著下降（P<0.01）；与YQYYJD组、顺铂组比较，联合组上述蛋白表达水平明显下降（P<0.01）；而GLUT1、MCT4蛋白表达水平各组间无明显差异。结论：YQYYJD能协同顺铂抑制PC9/GR细胞的增殖、迁移，提高细胞对顺铂的敏感性，其机制可能与下调糖酵解相关限速酶HK2、PFKP、PKM2、LDHA的表达，抑制糖酵解水平有关。

关键词：肺腺癌表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药益气养阴解毒方糖酵解

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AP1S1诱导乳腺癌化疗耐药作用的研究

热带医学杂志 2024年

作者：李晨欣李启基张娣杨颖倩张煜浩王锐叶丽平中山大学附属第七医院骨科中山大学附属第七医院科研中心中山大学医学院

目的探究接头相关蛋白复合物1亚基σ1(AP1S1)基因表达水平与乳腺癌化疗患者预后之间的相关性，分析AP1S1在乳腺癌化疗耐药中作用。方法采用生物信息学方法，对癌症基因组图谱（TCGA）数据库中的乳腺癌患者和正常乳腺组织的AP1S1表达... 详细信息

目的探究接头相关蛋白复合物1亚基σ1(AP1S1)基因表达水平与乳腺癌化疗患者预后之间的相关性，分析AP1S1在乳腺癌化疗耐药中作用。方法采用生物信息学方法，对癌症基因组图谱（TCGA）数据库中的乳腺癌患者和正常乳腺组织的AP1S1表达水平差异进行分析。运用Kaplan-Meier生存分析法，探究AP1S1表达水平与乳腺癌化疗患者无复发生存预后的关联。通过细胞培养、RNA提取、实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹（Western blot）分析及药物敏感性实验等多种实验手段，基于AP1S1高表达的乳腺癌细胞模型，揭示了AP1S1基因高表达对乳腺癌细胞化疗耐药的影响，并考察了AP1S1过表达对肿瘤细胞干性及上皮-间充质转化（EMT）特性标志物表达的作用。结果乳腺癌组织中AP1S1基因的表达水平显著高于正常组织，差异有统计学意义（P<0.05）。在肿瘤不同分期，AP1S1基因的表达水平均表现出显著高于正常组织表达水平的趋势，差异均有统计学意义（P均<0.05）；其中第四期肿瘤的过表达水平更高，差异有统计学意义（P<0.05）。管腔（Luminal）型、人类表皮生长因子2(HER2)阳性型和三阴型乳腺癌组织较正常组织均表现出AP1S1基因高表达，差异均有统计学意义（P均<0.05）；其中在HER2阳性型和三阴型乳腺癌组织中AP1S1表达水平更高，差异有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析发现，AP1S1高表达的乳腺癌患者在化疗后无复发生存期显著短于低表达组，差异有统计学意义（P=0.038）；在Basal型、HER2阳性乳腺癌患者中，AP1S1的高表达与化疗后预后不良显著相关（P=0.037、0.017）;Luminal B型患者中，AP1S1高表达与较长的无复发生存期显著相关（P=0.007）。实时荧光定量PCR显示，与对照组比较，在AP1S1过表达的细胞系CAL-51-oe-AP1S1、Hs-578T-oe-AP1S1中AP1S1转录水平显著上调，差异均有统计学意义（t=23.510、6.217,P均<0.05）;Western blot结果显示，与对照组比较，在AP1S1过表达的细胞系CAL-51-oeAP1S1、Hs-578T-oe-AP1S1z A中P1S1蛋白水平显著上调，差异均有统计学意义（P均<0.05）；肿瘤药物敏感性基因组项目（GDSC）数据库中分析结果显示，乳腺癌细胞CAL-51、Hs-578T的半抑制浓度（IC50）分别为0.008 398、0.000935μmol/L；药物毒性实验结果显示，过表达AP1S1显著增强了乳腺癌细胞CAL-51、Hs-578T对化疗药物多西紫杉醇的耐受性，差异均有统计学意义（t=8.743、9.895,P均<0.05）；三维培养实验结果显示，过表达AP1S1的CAL-51细胞形成更多的球体细胞团，而对照组的结构在药物作用下显著恶化，差异有统计学意义（t=11.540,P<0.05）。与对照组比较，在CAL-51-oe-AP1S1、Hs-578T-oe-AP1S1乳腺癌细胞系中，AP1S1过表达在转录水平上显著上调了干细胞标志基因纳诺克同源盒（NANOG）、辛烷结合转录因子4(OCT4)、SRY相关HMG盒基因2(SOX2)、B细胞特异性分化基因1(BMI1)以及多药耐药相关基因ABCG2的表达，差异均有统计学意义（t=20.75、39.05、28.55、29.76、94.18,24.78、17.79、19.60、14.10、16.79,P均<0.05）；同时显著降低了上皮细胞钙粘蛋白（CDH1）和紧密连接蛋白1(TJP1)的mRNA表达，并增加了与EMT相关的标志物N-钙粘蛋白（CDH2）和波形蛋白（VIM）的表达，差异均有统计学意义（t=6.259、4.991、9.788、5.232,13.25、19.87、13.83、11.42,P均<0.05）。在CAL51细胞系中，Western blot结果显示，AP1S1的过表达导致干细胞标志基因SOX2的表达水平上升和多药耐药基因ABCG2的表达增加，同时显著抑制了细胞粘附蛋白E-cadherin的表达，并促进了N-cadherin的过表达，差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 AP1S1在乳腺癌中高表达，不仅促进化疗药物多西紫杉醇的耐药性，还促进乳腺癌细胞的干性增强并诱发EMT过程。

关键词： AP1S1 乳腺癌多西紫杉醇化疗耐药

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外泌体在胃癌远处转移和耐药性中的研究进展

实用医学杂志 2024年第6期40卷 870-876页

作者：陈舒张静蕾荣康张楠孙维义河南中医药大学郑州450046 中山大学附属第一医院广州510080 郑州大学第五附属医院消化内科郑州450052 河南中医药大学第一附属医院普外科郑州450003

胃癌(Gastric cancer)是最常见的肿瘤之一,是全球癌症相关死亡的第四大原因。因早期GC缺乏特异性体征,大多数病例确诊时已经是晚期,常伴有浸润和远处转移。化疗虽是胃癌最常用的疗法,但因耐药性的出现,许多患者在化疗后仍会复发,导致预... 详细信息

胃癌(Gastric cancer)是最常见的肿瘤之一,是全球癌症相关死亡的第四大原因。因早期GC缺乏特异性体征,大多数病例确诊时已经是晚期,常伴有浸润和远处转移。化疗虽是胃癌最常用的疗法,但因耐药性的出现,许多患者在化疗后仍会复发,导致预后不良。肿瘤微环境(tumor micro environment,TME)中的外泌体(exosome,EXOs)可参加细胞间通讯在GC远处转移及耐药中发挥着重要作用。目前GC远处转移及耐药性的详细机制尚不清楚,确定参与胃癌远处转移及耐药性的外泌体引发的机制可以帮助我们为胃癌转移及耐药的防治找到更可靠的治疗手段。本文就外泌体在胃癌远处转移及耐药中的作用机制作一综述,旨在为胃癌的诊治及研究提供帮助。

关键词：胃癌外泌体转移耐药化疗

基于Bcl-2/Bax/caspase-3通路探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍大鼠纹状体神经元凋亡的影响

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中国中药杂志 2024年

作者：王静朱康琳倪新强蔡文华杨宇婷章嘉琦周翀史美君广州中医药大学第四临床医学院深圳市中医院中山大学附属第七医院

基于B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）/Bcl-2相关X蛋白（Bax）/半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）信号通路探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍（ADHD）大鼠纹状体神经元凋亡的影响。将24只3周龄雄性自发性高血压病大鼠（SHR）随机分为模型组、哌甲酯组(2... 详细信息

基于B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）/Bcl-2相关X蛋白（Bax）/半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）信号通路探讨熟地黄对注意缺陷多动障碍（ADHD）大鼠纹状体神经元凋亡的影响。将24只3周龄雄性自发性高血压病大鼠（SHR）随机分为模型组、哌甲酯组(2 mg·kg-1·d-1)和熟地黄组(2.4 mg·kg-1·d-1)，同周龄雄性WKY大鼠设为正常组，每组8只，连续灌胃给药28 d。记录每组体质量和摄食量；旷场实验、高架十字迷宫测试评估大鼠多动、冲动行为；尼氏染色法检测纹状体神经元及尼氏体变化；原位末端标记法（TUNEL）荧光染色检测纹状体细胞凋亡；免疫印迹法（Western blot）检测纹状体中Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白的表达量。结果显示，与模型组相比，熟地黄可显著降低SHR大鼠在旷场实验中的总运动距离、平均运动速度和中心区停留时间，显著减少在高架十字迷宫中进入开臂的次数比、开臂停留时间和探头次数，明显增多纹状体神经元尼氏体，显著下调凋亡指数，显著升高Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值，降低Bax、caspase-3蛋白表达。总之，熟地黄可减少ADHD大鼠的多动、冲动行为，其作用可能与调控纹状体Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路，增强纹状体神经元抗凋亡能力有关。

关键词：熟地黄注意缺陷多动障碍纹状体 Bcl-2 Bax caspase-3 神经元凋亡

补骨脂素对溃疡性结肠炎小鼠肠道屏障及继发性肝损伤的改善作用

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天然产物研究与开发 2024年第7期36卷 1121-1129,1148页

作者：曹柳唐晓晴罗青牛梦园戴卫波广州中医药大学附属中山中医院中山市中医院中山528400

研究补骨脂素(psoralen,PSO)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的肠道屏障及继发性肝损伤的改善作用。40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(control,Con)、模型组(model,Mod)、阳性药柳氮磺吡啶组(sulfasalazine,SASP,200 mg/kg)、PSO低剂量组(PSO-L,20 mg/kg)和PSO高剂量组(PSO-H,40 mg/kg),通过自由饮用2.25%的葡聚糖硫酸钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)7 d构建UC模型。实验期间记录小鼠的体重,疾病活动指数(disease activity index,DAI)。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerasechain reaction,RT-qPCR)检测结肠中带状闭合蛋白-1(zonula occludens-1,ZO1)、闭合蛋白-1(Claudin-1)和闭锁蛋白(Occludin)的表达。生化试剂盒检测肝脏中谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量。酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肝脏脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)、C反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)含量。蛋白印迹(Western blot)法检测肝脏Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD88)以及磷酸化核因子κB(phosphorylated nuclear factor kappa-B,p-NF-κB)的表达。结果显示,与Mod组相比,经PSO治疗后,UC小鼠体重下降得到缓解、DAI评分下降、缓解了结肠长度的缩短;ZO1、Claudin-1和Occludin的mRNA的表达均上调;肝脏AST、ALT、AKP和LDH含量均下降;肝脏LPS、CRP、PCT、IL-6以及TNF-α含量均下降;下调了肝脏TLR4、MyD88以及p-NF-κB蛋白的表达。以上结果表明,PSO可以改善DSS诱导的小鼠肠道屏障功能,并通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善继发性肝损伤。

关键词：补骨脂素溃疡性结肠炎肠道屏障继发性肝损伤炎症

基于动物标本的机器人自主椎体穿刺压力与路径准确性的相关性研究

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中华骨科杂志 2024年第15期44卷 1018-1024页

作者：邢通黄俊燊李明李玉希梁育玮车圳陈恩铭黄霖中山大学孙逸仙纪念医院骨外科广州510120 上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科(上海市骨科内植物重点实验室) 上海200100 中山大学附属第八医院骨外科深圳518000

目的探讨骨科机器人在自主穿刺推进中不同骨质的压力峰值对穿刺路径偏移及骨水泥渗漏的影响。方法自行设计一种用于自主椎体穿刺和骨水泥推注的脊柱手术机器人系统,并对6具离体猪脊柱标本进行单节段或双节段模拟经皮椎体成形术。测量穿... 详细信息

目的探讨骨科机器人在自主穿刺推进中不同骨质的压力峰值对穿刺路径偏移及骨水泥渗漏的影响。方法自行设计一种用于自主椎体穿刺和骨水泥推注的脊柱手术机器人系统,并对6具离体猪脊柱标本进行单节段或双节段模拟经皮椎体成形术。测量穿刺路径准确性(Gertzbein-Robbins分级)、骨水泥渗漏分型及骨钻峰值压力,评估不同密度的椎体皮质骨与松质骨对骨科机器人执行自主椎体穿刺准确性及骨水泥渗漏情况。结果模拟穿刺64个离体猪椎体,其中Gertzbein-Robbins分级A级53椎,B级8椎,C级3椎。A级椎体的皮质骨压力(6.663±0.319)N,低于B级和C级的(8.348±0.418)和(11.500±0.600)N,差异有统计学意义(F=341.000,P骨科机器人在自主穿刺推进过程中穿过皮质骨穿刺压力较高时自主穿刺路径准确性降低,且侵犯椎弓根的概率增加;皮质骨与松质骨的穿刺压力对骨水泥渗漏的发生率无明显影响。

关键词：机器人手术最小侵入性外科手术椎体成形术穿刺术骨水泥成形术

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围术期护理超声培训需求调查和课程设计

中国继续医学教育 2024年第18期16卷 123-128页

作者：姚晓琴陈宇朱琼芳龚凤球冯霞刘家欣中山大学附属第一医院麻醉科广东广州510080 中山大学附属第一医院手术麻醉中心广东广州510080

目的调查我国围术期护理超声的临床应用和教学培训现状,以及继续教育需求。方法于2022年11月-2023年4月面向全国二级或以上医院麻醉科的医师和护士线上发放问卷调查,共收回264份有效问卷,其中医师120名,护士144名,了解其科室围术期护理... 详细信息

目的调查我国围术期护理超声的临床应用和教学培训现状,以及继续教育需求。方法于2022年11月-2023年4月面向全国二级或以上医院麻醉科的医师和护士线上发放问卷调查,共收回264份有效问卷,其中医师120名,护士144名,了解其科室围术期护理超声的临床应用与培训情况。对比麻醉科医师和护士掌握床旁超声技术的差异,汇总受访者对围术期护理超声的培训建议。结果受访麻醉科医师和护士在临床使用超声、对超声技术的熟悉程度和对超声知识的熟悉程度3个方面的差异有统计学意义(P<0.001)。203位(76.9%)受访者表示麻醉科护士极少或完全不使用床旁超声。有239名(90.5%)受访者支持学习与使用围术期护理超声,并给予培训项目和每项最低学习例数建议。根据调查结果,结合中国重症护理床旁超声标准,提出围术期护理超声继续教育课程设计框架。结论现阶段围术期护理超声临床应用率低、人员培训不足,处于待开发状态,需要建设课程和进行培训实践,通过继续教育提高其临床使用率和技术水平。

关键词：围术期护理床旁超声培训教学麻醉

浅析骨科手术室护理中潜在的风险与防范及对护理满意度的影响

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浅析骨科手术室护理中潜在的风险与防范及对护理满意度的影响