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中华口腔医学杂志 2024年第5期59卷 407-417页

作者：毛学理施松涛中山大学附属口腔医院华南颅颌干细胞转化研究中心·中山大学光华口腔医学院·广东省口腔医学重点实验室广州

口腔颅颌面系统是包含多种组织的复杂综合性系统, 具有独特的生物学特征, 并赋予个体形貌, 口腔颅颌面系统组织缺损后的再生具有重要意义, 也是当前口腔医学领域的一项重大挑战。本文回顾口腔颅颌面系统组织再生领域的研究历程, 总结当... 详细信息

口腔颅颌面系统是包含多种组织的复杂综合性系统, 具有独特的生物学特征, 并赋予个体形貌, 口腔颅颌面系统组织缺损后的再生具有重要意义, 也是当前口腔医学领域的一项重大挑战。本文回顾口腔颅颌面系统组织再生领域的研究历程, 总结当前研究的现状和面临的问题, 聚焦口腔颅颌面系统间充质干细胞在组织再生中的关键作用, 并对未来该领域的发展进行探讨和展望, 旨在增进口腔医学工作者对本领域的了解, 并为口腔颅颌面系统组织再生领域的创新性治疗方法和临床实践提供可能的方向。

关键词：再生医学组织工程口腔颅颌面系统间充质干细胞牙髓牙周组织

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机械敏感离子通道在牙源性细胞中作用的研究进展

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中华口腔医学研究杂志（电子版） 2024年第1期18卷 54-60页

作者：徐志清杜宇中山大学附属口腔医院光华口腔医学院广东省口腔医学重点实验室广东省口腔疾病临床医学研究中心广州510055

机械敏感离子通道(MS离子通道)是一类能感知机械应力的重要蛋白,将细胞外机械刺激信号转化为电化学信号,导致离子跨膜流通,继而传递至胞内调控下游靶基因。牙源性细胞胞膜表面有多种MS离子通道表达,但其如何调控细胞功能和具体机制仍不... 详细信息

机械敏感离子通道(MS离子通道)是一类能感知机械应力的重要蛋白,将细胞外机械刺激信号转化为电化学信号,导致离子跨膜流通,继而传递至胞内调控下游靶基因。牙源性细胞胞膜表面有多种MS离子通道表达,但其如何调控细胞功能和具体机制仍不明确。本文就MS离子通道的分类及其在牙源性细胞的表达和功能作一综述。

关键词：机械敏感通道牙再生压电离子通道瞬时受体电位离子通道

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调节性细胞死亡在不同阶段牙髓病变的相关性研究

调节性细胞死亡在不同阶段牙髓病变的相关性研究

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：王奔毛学理韦曦施松涛中山大学光华口腔医学院附属口腔医院华南颅颌干细胞转化研究中心广东省口腔医学重点实验室中山大学干细胞与组织工程教育部重点实验室中山大学光华口腔医学院附属口腔医院牙体牙髓科

目的牙髓炎是指发生于牙髓组织的炎性病变,研究显示牙髓炎病损中存在多种调节性细胞死亡。组织学上牙髓炎症分为可逆和不可逆阶段。然而,不同阶段牙髓炎症具体发生哪种调节性细胞死亡目前尚不明确。本课题通过临床炎症牙髓样本染色及蛋...

目的牙髓炎是指发生于牙髓组织的炎性病变,研究显示牙髓炎病损中存在多种调节性细胞死亡。组织学上牙髓炎症分为可逆和不可逆阶段。然而,不同阶段牙髓炎症具体发生哪种调节性细胞死亡目前尚不明确。本课题通过临床炎症牙髓样本染色及蛋白质印迹法探究调节性细胞死亡在不同阶段牙髓病变的相关性。方法本课题共收集30个年龄在18-40岁之间患者的智齿,组织学上将其分为三类:(1)健康牙髓(Healthy pulp,HP):牙髓可见清晰成牙本质细胞层及髓核等结构,无炎症及纤维化等慢性病变;(2)可逆性牙髓病变(Reversible pulp disease,RPD):牙髓个别炎症细胞浸润,但未出现局部坏死;(3)不可逆性牙髓病变(Irreversible pulp disease,IPD):牙髓组织可见大量炎症细胞浸润,且出现局部液化性坏死。以上三组各10例样本。通过免疫组化染色检测细胞凋亡标记物活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、细胞焦亡标记物消皮素D(GasderminD,GSDMD)、细胞坏死性凋亡标记物混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)、中性粒细胞胞外陷阱驱动的细胞死亡标记物髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)在三组牙髓样本中的表达水平及分布,并通过Western blot方法验证细胞凋亡、细胞焦亡、细胞坏死性凋亡及中性粒细胞胞外陷阱驱动的细胞死亡相关标记物在HP、RPD、IPD组织的表达水平。结果1.与健康牙髓组相比,可逆性牙髓病变的cleaved caspase3、MLKL蛋白表达略升高,GSDMD蛋白表达则显著升高,未检测到MPO蛋白表达;免疫组化结果显示cleaved caspase3、MLKL及GSDMD主要分布在炎症细胞浸润区域。2.与健康牙髓和可逆性牙髓病变相比,不可逆性牙髓病变的cleaved caspase3、GSDMD以及MPO蛋白表达显著升高,且免疫组化结果显示cleaved caspase3、GSDMD以及MPO主要表达在坏死区及其周围区域;MLKL蛋白水平较可逆性牙髓病变组降低。结论与健康牙髓相比,可逆性牙髓病变发生细胞凋亡、细胞坏死性凋亡及细胞焦亡,其中以细胞焦亡为主;不可逆性牙髓病变坏死区发生细胞凋亡、细胞焦亡及中性粒细胞胞外陷阱驱动的细胞死亡。

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焦亡囊泡通过调节B细胞治疗脓毒血症的研究

焦亡囊泡通过调节B细胞治疗脓毒血症的研究

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：黄韦莹王奔欧乾民张晓何依帆毛学理韦曦寇晓星中山大学光华口腔医学院附属口腔医院华南颅颌干细胞转化研究中心广东省口腔医学重点实验室北京大学口腔医学院口腔修复科国家口腔疾病临床研究中心口腔医学数字化与材料技术国家工程实验室北京市数字口腔医学重点实验室中山大学干细胞与组织工程教育部重点实验室中山大学光华口腔医学院附属口腔医院牙体牙髓科

目的细胞焦亡是一种与炎症相关的程序性细胞死亡,其主要特征是细胞膜破裂和大量炎症因子及细胞内容物的释放。非炎性细胞凋亡过程中产生凋亡囊泡(apoptotic vesicles,apoVs)的特征已被系统地研究,并发现其具有多种生理功能和治疗潜力。... 详细信息

目的细胞焦亡是一种与炎症相关的程序性细胞死亡,其主要特征是细胞膜破裂和大量炎症因子及细胞内容物的释放。非炎性细胞凋亡过程中产生凋亡囊泡(apoptotic vesicles,apoVs)的特征已被系统地研究,并发现其具有多种生理功能和治疗潜力。焦亡的细胞也会产生大量的囊泡。但是,细胞焦亡产生的囊泡其特性目前尚不明确。本课题研究了体外和体内焦亡囊泡(Pyroptotic extracellular vesicles,Pyro EVs)的特征及其在治疗脓毒血症中的作用。方法本课题在体外诱导人骨髓来源的间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)焦亡,并分离出pyroEVs。同时,我们也从脓毒血症小鼠体内分离出循环囊泡,并对这两种囊泡进行表征和功能鉴定。进一步评估通过系统注射MSCs来源pyroEVs治疗脓毒血症的作用。结果1.焦亡的MSCs能够产生囊泡样结构;***来源的pyroEVs可特异性表达含有半胱天冬氨酸蛋白酶募集结构域焦点的凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain foci,ASC);3.脓毒血症小鼠血浆中可分离出表达ASC蛋白的内源性pyroEVs;4.全身输注MSCs来源的pyroEVs可治疗脓毒血症;***来源的pyroEVs富集在脾脏和骨髓B细胞周围,通过ASC抑制TLR4来减少B细胞焦亡,从而治疗脓毒血症。结论1.体外和体内pyroEVs均表达焦亡特异性ASC蛋白;2.来源于MSCs的pyroEVs可以治疗脓毒血症;3.来源于MSCs的pyroEVs通过减少小鼠体内B细胞焦亡来治疗脓毒血症。

关键词：焦亡焦亡囊泡间充质干细胞含有半胱天冬氨酸蛋白酶募集结构域焦点的凋亡相关斑点样蛋白脓毒血症 B细胞

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心理应激诱导的循环外泌体let-7k通过激活自噬抑制间充质干细胞对小鼠结肠炎的疗效

心理应激诱导的循环外泌体let-7k通过激活自噬抑制间充质干细胞对...

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2019年中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第九次全...

作者：田俊施松涛中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院华南颅颌干细胞转化研究中心广东省口腔医学重点实验室

目的:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)具有广泛的免疫调节能力,已被应用于治疗各种自身免疫和炎症性疾病。宿主微环境(如TNF-α和IFN-γ水平等)直接影响了MSCs的治疗效果。心理应激在炎症性疾病患者中普遍存在且显著影响体...

目的:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)具有广泛的免疫调节能力,已被应用于治疗各种自身免疫和炎症性疾病。宿主微环境(如TNF-α和IFN-γ水平等)直接影响了MSCs的治疗效果。心理应激在炎症性疾病患者中普遍存在且显著影响体内微环境,本研究旨在探讨心理应激是否影响MSCs对结肠炎的疗效及其相关机制。材料与方法:利用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL6小鼠结肠炎10天,期间

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凋亡囊泡缓解红斑狼疮小鼠免疫异常症状及其可能调节机制的研究

凋亡囊泡缓解红斑狼疮小鼠免疫异常症状及其可能调节机制的研究

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2020年中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第十次全...

作者：何依帆寇晓星施松涛中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院华南颅颌干细胞转化研究中心

目的:骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)具有免疫调节功能,被用于治疗多种系统免疫疾病包括系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)。本课题组前期研究发现系统回输BMMSCs凋亡囊泡(Apoptosis Extracellular Vesicles,ApoEV)可以治疗MRL/lpr狼疮小鼠骨质疏松症状。然而ApoEVs对于免疫系统的作用尚不清楚。本研究探讨了BMMSCs来源的ApoEVs对狼疮小鼠免疫相关症状的治疗作用,并探究了可能的调节机制。方法:将6只雌性8周龄Fas缺陷的MRL/lpr狼疮小鼠随机分为2组:给药组和生理盐水组,另取3只雌性8周龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组。体外培养C57BL/6J小鼠BMMSCs,星型孢菌素(Staurosporine,STS)处理诱导其凋亡,提取ApoEVs。给药组狼疮小鼠尾静脉注射ApoEVs,生理盐水组及正常对照组小鼠尾静脉注射生理盐水,每周1次,连续注射12次。于小鼠21周龄时处死取材,采用流式细胞术对小鼠外周血、脾脏、淋巴结、胸腺等器官的T细胞、B细胞、浆细胞比例进行分析;使用HE染色对小鼠淋巴结及肾脏组织结构变化情况进行评估。结果:***/lpr狼疮小鼠呈腹股沟淋巴结明显肿大,HE染色切片可见淋巴滤泡明显增生,高内皮细胞微静脉扩张,局部充血等免疫系统异常症状。ApoEVs治疗后淋巴结大小及重量均有所下降,淋巴结组织炎症状态缓解,免疫系统异常症状显著减轻(图2, A-D)。3. MRL/lpr狼疮小鼠肾脏组织可见大量红细胞渗出,给药后明显改善(图1, A-B)。4.流式细胞术结果显示,MRL/lpr狼疮小鼠脾脏、淋巴结及胸腺等免疫器官中均出现大量异常B220+T细胞积累,系统注射ApoEVs后淋巴结中B220+T细胞比例下降,P细胞和浆细胞比例,并改善淋巴结组织内部浆细胞浸润的情况,P细胞,以及抑制淋巴结和外周血中浆细胞来发挥作用的。

关键词：间充质干细胞凋亡囊泡红斑狼疮小鼠免疫调节 T细胞

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人源性Jagged1 RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

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广东医学 2012年第7期33卷 903-907页

作者：张同韩刘海潮梁玉洁梁立中廖贵清吴纪楠黄洪章广东省中山市人民医院口腔医疗中心广东中山528403 中山大学光华口腔医学院附属口腔医院口腔颌面外科广州510055

目的构建人源性Jagged1 RNAi慢病毒载体,并观察其对舌癌细胞中Jagged1的敲减作用。方法 GenBank检索人Jagged1信息,设计Jagged1靶点。BLAST比对同源性,合成双链DNAoligo。线性化的RNA干扰载体质粒pAJ-U6-shRNA-CMV-eGFP/PuroR,双酶切,与合成的双链DNAoligo连接,转化感受态细胞,选择阳性克隆进行鉴定。慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,包装,纯化,并转染Tca8113以及Cal27细胞,测定转染效率。PCR及Western Blot检测Jagged1基因及蛋白表达变化。结果成功构建靶向Jagged1 RNAi载体质粒,并成功进行慢病毒包装。该系统可有效地感染Tca8113及Cal27细胞。细胞内Jagged1基因及蛋白表达均有明显下调。结论成功构建Jagged1 RNAi慢病毒载体,为下一步研究Jagged1在人舌鳞癌的中的作用机制奠定基础。

关键词： Notch信号 Jagged1 舌癌 RNA干扰慢病毒

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钙环境调控间充质干细胞来源凋亡外囊泡的免疫调节效应

钙环境调控间充质干细胞来源凋亡外囊泡的免疫调节效应

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2020年中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第十次全...

作者：项蕾施松涛寇晓星中山大学光华口腔医学院-华南颅颌干细胞转化研究中心

目的:凋亡往往被看作是一种生理性死亡方式,但其在不同微环境中所引起的免疫反应尚有争议。凋亡外囊泡(Apoptotic extracellular vesicles, ApoEVs)是细胞在凋亡过程中分泌的一类直径范围在200 nm-1000 nm的膜性小泡。目前,ApoEVs对于...

目的:凋亡往往被看作是一种生理性死亡方式,但其在不同微环境中所引起的免疫反应尚有争议。凋亡外囊泡(Apoptotic extracellular vesicles, ApoEVs)是细胞在凋亡过程中分泌的一类直径范围在200 nm-1000 nm的膜性小泡。目前,ApoEVs对于免疫系统的作用尚未有报道,尤其在不同环境中凋亡小体的免疫调节效应是否有所不同更值得进一步研究。本研究旨在选取对免疫反应有重要影响的钙环境,探索其调控间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)来源ApoEVs对免疫系统效应的影响,并在葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium, DSS)诱导的小鼠实验性结肠炎模型中进行验证。

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光动力标记凋亡外囊泡实现功能性追踪

光动力标记凋亡外囊泡实现功能性追踪

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2020年中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第十次全...

作者：严旭彤施松涛寇晓星中山大学光华口腔医学院-华南颅颌干细胞转化研究中心

目的:间充质干细胞(MSCs)具有强大的组织再生和免疫调控功能,MSCs移植后出现凋亡并产生凋亡外囊泡(ApoEVs),对于MSCs移植疗效及组织内稳态可能具有重要调控作用。追踪观测ApoEVs是研究其功能和机制的重要手段,而当前的标记手段以传统膜...

目的:间充质干细胞(MSCs)具有强大的组织再生和免疫调控功能,MSCs移植后出现凋亡并产生凋亡外囊泡(ApoEVs),对于MSCs移植疗效及组织内稳态可能具有重要调控作用。追踪观测ApoEVs是研究其功能和机制的重要手段,而当前的标记手段以传统膜标记技术为主,存在影响ApoEVs膜稳定性、沾染粘连率大等缺点,干扰体内追踪结果。本研究旨在利用光动力手段实现ApoEVs的"无创"功能性标记,为ApoEVs的作用和机制研究提供可靠的观测手段。

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基于多元线性回归方法的间充质干细胞“生命”质量评价分析

基于多元线性回归方法的间充质干细胞“生命”质量评价分析

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2020年中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会第十次全...

作者：吴迪施松涛寇晓星中山大学光华口腔医学院-华南颅颌干细胞转化研究中心

目的:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)具有强大的转化应用潜能,当前全球至少有6377项MSCs的临床研究正在开展,MSCs应用的产业化进程也在加速进行。细胞具有"生命"的特殊性,然而干细胞领域仍缺乏统一及可监测的行业标准,如...

目的:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)具有强大的转化应用潜能,当前全球至少有6377项MSCs的临床研究正在开展,MSCs应用的产业化进程也在加速进行。细胞具有"生命"的特殊性,然而干细胞领域仍缺乏统一及可监测的行业标准,如何高效、准确地筛选出符合临床应用条件的细胞,是MSCs应用领域面临的挑战。本研究旨在结合计算物理学,探索建立评价MSCs"生命"状态的指标组合,从而给予临床应用MSCs的质量参考标准。

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