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论应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向的前景 Ⅰ .多基因转化的基因来源与技术平台

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中山大学学报（自然科学版） 2004年第6期43卷 11-16页

作者：李宝健朱华晨中山大学生物工程研究中心∥基因工程教育部重点实验室∥植物基因工程国家专业实验室∥生物防治国家重点实验室广东广州510275

随着后基因组时代的到来,人类将克隆到越来越多的、生物学意义明确的有用基因应用于基因工程对生物体的遗传改良中。但生物体的绝大多数性状和生理功能都是依靠多基因的协调表达而实现的。因此,多基因转化策略必将成为今后基因工程在基... 详细信息

随着后基因组时代的到来,人类将克隆到越来越多的、生物学意义明确的有用基因应用于基因工程对生物体的遗传改良中。但生物体的绝大多数性状和生理功能都是依靠多基因的协调表达而实现的。因此,多基因转化策略必将成为今后基因工程在基础理论与实际应用研究中的主流方向。结合中山大学生物工程研究中心∥基因工程教育部重点实验室10多年来研究工作的实践体会,对发展多基因转化策略的意义和由来、多基因转化可用的基因资源和技术思路,进行了详细的论述。

关键词：多基因转化策略基因工程后基因组遗传改良

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鲟鱼育种及新品种选育研究进展

中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2025年第1期64卷 93-105页

作者：王巍宋海亮朱华董颖东天胡红霞北京市农林科学院水产科学研究所暨北京市渔业生物技术重点实验室北京100068 农业农村部“鲟鱼遗传育种”重点实验室浙江杭州311799 国家数字种业创新中心北京100097

鲟鱼是鲟形目鱼类的统称。它们不仅具有重要的进化地位,而且具有重要的经济价值。鲟鱼新品种选育研究在近几十年取得了显著进展。本文综述了鲟鱼新品种选育的主要方法,包括杂交育种、雌核发育、性逆转诱导、基因编辑、家系选育、基因组... 详细信息

鲟鱼是鲟形目鱼类的统称。它们不仅具有重要的进化地位,而且具有重要的经济价值。鲟鱼新品种选育研究在近几十年取得了显著进展。本文综述了鲟鱼新品种选育的主要方法,包括杂交育种、雌核发育、性逆转诱导、基因编辑、家系选育、基因组选择和细胞水平育种,讨论了各技术的应用现状,在育种上相关研究和取得的重要突破,并结合我们育种实践积累的经验,展望鲟鱼育种和种业的未来发展,为未来的鲟鱼育种研究提供理论基础和实践指导。

关键词：鲟鱼育种新品种

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卵形鲳鲹促性腺激素β亚基的克隆鉴定及其受雌二醇的调控

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中山大学学报（自然科学版）（中英文） 2025年第1期64卷 172-181页

作者：黄春艳陈华谱郭煜文王岩杨浩李广丽广东省名特优鱼类生殖调控与繁育工程技术研究中心/广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室/广东省海水养殖生物育种工程实验室/广东海洋大学水产学院广东湛江524088

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆... 详细信息

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)fshβ和lhβ基因的开放阅读框(ORF,open reading frame)序列,fshβORF长度为363 bp,lhβORF长度为447 bp。通过荧光定量PCR技术(qPCR,quantitative realtime PCR)检测,发现fshβ和lhβ基因在卵形鲳鲹的下丘脑-垂体-性腺轴(HPG,hypothalamus-pituitary-gonadal axis)显著表达,在垂体中的表达水平最高,其次是下丘脑和性腺。此外,通过体外实验评估17β-雌二醇(E2,17β-estradiol)对卵形鲳鲹垂体组织中fshβ和lhβ基因表达的影响。结果显示,10μmol/L E2处理6 h后,GtHβ亚基基因的表达被极显著抑制。最后,使用雌激素受体(ER,estrogen receptor)拮抗剂体外孵育卵形鲳鲹垂体组织,发现广谱性拮抗剂Fulvestrant、ERβ拮抗剂Cyclofenil和ERα拮抗剂MPP(MPP dihydrochloride)均能够消除E2对GtHβ亚基基因表达的抑制作用。综上所述,研究结果表明E2对卵形鲳鲹GtH的分泌具有负反馈调节作用,为卵形鲳鲹生殖调控机制提供了有价值的见解。

关键词：卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus) 促性腺激素(GtH) 雌激素受体(ER) 17β-雌二醇(E2)

论应用多基因转化策略综合改良生物体遗传性研究方向的前景 Ⅱ.多基因转化策略中的规律、前景和问题

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中山大学学报（自然科学版） 2005年第4期44卷 79-83页

作者：李宝健朱华晨中山大学生物工程研究中心//基因工程教育部重点实验室//植物基因工程国家专业实验室//生物防治国家重点实验室转基因植物研究室广东广州510275

随着后基因组时代的到来,人类将克隆到越来越多的、生物学意义明确的有用基因应用于基因工程对生物体的遗传改良中。但生物体的绝大多数性状和生理功能都是依靠多基因的协调表达而实现的。因此,多基因转化策略必将成为今后基因工程在基础理论与实际应用研究中的主流方向。综述了近年来中山大学生物工程研究中心//基因工程教育部重点实验室在多基因改良农作物方面的研究工作和进展,分析了多基因转化中的基本规律和存在的问题,最后对多基因转化策略在未来的应用前景作出了简要的展望。

关键词：多基因转化策略基因工程后基因组遗传改良

粗糙脉孢霉arg-13 cDNA能互补酿酒酵母arg11突变株

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中山大学学报（自然科学版） 2001年第6期40卷 55-58页

作者：刘秋云罗樨蒋一帆何康泽李宝健中山大学基因工程教育部重点实验室∥生物工程研究中心广东广州510275

以粗糙脉孢霉Neurosporacrassaarg_13基因作为探针筛选λgt10cDNA文库 ,获得全长arg_13cDNA并能表型拯救arg_13突变株 .进行了arg_13cDNA测序 .为了进一步证实arg_13的功能 .构建了GAL1诱导表达的arg_13cDNA的载体 .该载体能表型互补酿... 详细信息

以粗糙脉孢霉Neurosporacrassaarg_13基因作为探针筛选λgt10cDNA文库 ,获得全长arg_13cDNA并能表型拯救arg_13突变株 .进行了arg_13cDNA测序 .为了进一步证实arg_13的功能 .构建了GAL1诱导表达的arg_13cDNA的载体 .该载体能表型互补酿酒酵母Saccharomycescerevisiaearg11突变株 .证实arg_13编码线粒体内膜鸟氨酸转运酶 .

关键词： arg-13 arg11 线粒体内膜鸟氨酸转运酶表型互补粗糙脉孢霉酿酒酵母 cDNA文库

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MicroRNA与细胞信号通路的相互作用

生物化学与生物物理进展 2013年第7期40卷 593-602页

作者：李斌郭燕华徐辉周惠屈良鹄中山大学基因工程教育部重点实验室有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州510275

MicroRNA(miRNA),广泛存在于多种生物中,在基因表达调控的转录后水平上发挥着重要的调节作用.细胞信号通路转导外界刺激进而引发一系列生理和病理效应,决定着细胞的功能和命运.而miRNA和细胞信号通路间的相互作用对于二者的功能发挥起... 详细信息

MicroRNA(miRNA),广泛存在于多种生物中,在基因表达调控的转录后水平上发挥着重要的调节作用.细胞信号通路转导外界刺激进而引发一系列生理和病理效应,决定着细胞的功能和命运.而miRNA和细胞信号通路间的相互作用对于二者的功能发挥起着关键作用,本文将从信号通路对miRNA的调控和miRNA对信号通路的调节两方面综述二者的相互作用,揭示整合miRNA的细胞信号通路及其生物学意义.

关键词： miRNA 细胞信号通路调控

粟酒裂殖酵母snR41 snoRNA的鉴定及其结构进化的意义

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中山大学学报（自然科学版） 2001年第3期40卷 60-62页

作者：岳强周惠屈良鹄中山大学基因工程教育部重点实验室广东广州510275

采用计算机分析和分子生物学实验的方法 ,在粟酒裂殖酵母Schizosaccharomycespombe中发现和鉴定了一种新的反义snoRNA ,命名为snR41.与酿酒酵母SaccharomycescerevisiaesnR41同源分子比较 ,粟酒裂殖酵母snR41只具有一个指导rRNA核糖甲... 详细信息

采用计算机分析和分子生物学实验的方法 ,在粟酒裂殖酵母Schizosaccharomycespombe中发现和鉴定了一种新的反义snoRNA ,命名为snR41.与酿酒酵母SaccharomycescerevisiaesnR41同源分子比较 ,粟酒裂殖酵母snR41只具有一个指导rRNA核糖甲基化的反义序列 .这一发现进一步揭示了反义snoRNA同源分子在一级结构上的多样性 ,为研究反义snoRNA结构及进化提供了新的线索 .

关键词：粟酒型殖酵母 snR41 进化基因 RNA

大麦β-1,3-葡聚糖酶基因(GIII)启动子在转基因水稻中的诱导表达

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植物生理与分子生物学学报 2005年第2期31卷 143-148页

作者：李云锋朱蕊谢龙旭徐培林中山大学基因工程教育部重点实验室

将大麦β-1,3-葡聚糖酶同功酶基因(GIII)启动子(PGIII)与其报告基因gus(β-葡聚糖酸醛苷酶基因)耦联,构建植物表达载体,通过农杆菌介导法转化水稻。PCR、DNA印迹法结果显示,构建的pGIII-gus表达载体已整合到水稻基因组DNA中。GUS组织化... 详细信息

将大麦β-1,3-葡聚糖酶同功酶基因(GIII)启动子(PGIII)与其报告基因gus(β-葡聚糖酸醛苷酶基因)耦联,构建植物表达载体,通过农杆菌介导法转化水稻。PCR、DNA印迹法结果显示,构建的pGIII-gus表达载体已整合到水稻基因组DNA中。GUS组织化学染色、RNA印迹法及荧光法结果显示,该启动子驱动的gus在水稻叶片中为低水平表达;而用水扬酸(SA)与稻瘟菌来源的激发子处理,可诱导gus的高水平表达。T1代种子的GUS组织化学染色结果也表明,SA与激发子可以诱导高水平的PGIII活性。这些结果表明PGIII是一种强诱导型启动子,并可能是一种病原菌诱导型的启动子。

关键词：水稻启动子转基因诱导表达 GUS活性

高通量低成本检测牛MSTN基因突变的DAVID技术构建

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农业生物技术学报 2025年第1期 208-219页

作者：裴栋超海超赵春生张立果吴迪王德政张鑫怡杨磊李光鹏内蒙古大学省部共建草原家畜生殖调控与繁育国家重点实验室

肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)是骨骼肌生长发育的负调控因子，MSTN基因突变可促进动物肌肉发育。目前Sanger测序是检测MSTN基因突变的经典方法，但此方法存在检测通量低、可视化程度低和检测费用高等缺点。本研究利用二代测序技术... 详细信息

肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)是骨骼肌生长发育的负调控因子，MSTN基因突变可促进动物肌肉发育。目前Sanger测序是检测MSTN基因突变的经典方法，但此方法存在检测通量低、可视化程度低和检测费用高等缺点。本研究利用二代测序技术，通过设计的特异性Barcode序列，能够一次性检测96头牛(Bos taurus)的MSTN基因突变情况。此外，根据测序Fastq结果文件中的Barcode序列，利用异步线程和并发算法，编写了相关的数据分析DAVID(detect and visualize insertion-deletion)软件。利用DAVID软件将96个混合样本的测序数据逐一拆分，并与扩增子序列(amplicon sequence)比对，最终获得MSTN基因突变的图形和统计信息。利用DAVID技术对96头蒙古牛进行检测，结果发现1头牛的MSTN基因11 bp杂合缺失，剩余95头均为野生型，并且通过Sanger测序对11 bp杂合缺失进行了验证。综上，本研究构建了一个检测牛MSTN基因突变的高通量技术体系，为肉牛遗传改良和育种提供技术支撑。

关键词：肌肉生长抑制素(MSTN) 蒙古牛基因突变基因型检测