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平颏海蛇毒磷脂酶A2基因的多样性

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第3期33卷 345-350页

作者：杨文利卫剑文钟肖芬赵贵军彭立胜吴文言徐安龙广州510275 中山大学生命科学学院生物化系!海洋生物功能基因组开放实验室

通过对平颏海蛇毒腺cDNA文库的随机测序和PCR筛选 ,分离到 3种未曾报道的磷脂酶A2 (PLA2 )cD NA ,分别命名为PLA2 8,PLA2 9,PLA2 384。这些cDNA均含有完整的读码框 (长度分别为 45 6bp、438bp和438bp) ,编码含 2 7个氨基酸残基的信... 详细信息

通过对平颏海蛇毒腺cDNA文库的随机测序和PCR筛选 ,分离到 3种未曾报道的磷脂酶A2 (PLA2 )cD NA ,分别命名为PLA2 8,PLA2 9,PLA2 384。这些cDNA均含有完整的读码框 (长度分别为 45 6bp、438bp和438bp) ,编码含 2 7个氨基酸残基的信号肽和长度分别为 12 5、119和 119个氨基酸的成熟多肽。运用计算机软件推算PLA2 8、PLA2 9和PLA2 384的等电点分别约为 4.8、7.8和 8.4。氨基酸序列分析和二级结构预测表明 ,3种PLA2 均属I类磷脂酶A2 家族 ,其中PLA2 8与来自澳大利亚虎蛇Notechisscutatusscutatus的PLA2 有 81%的同源性 ;而PLA2 9和PLA2 384则与来自海蛇Enhydrinaschistosa的肌毒PLA2 有 90 %的同源性 ,这不仅预示着他们在功能上可能存在某些相似性 ,也反映出平颏海蛇PLA2 的结构多样性。这组海蛇PLA2 同功酶基因的成功克隆为进一步揭示PLA2 的结构与功能关系及可能的分子机制提供了新的信息

关键词：平颏海蛇磷脂酶A2 序列分析 I类多样性

平颏海蛇CRVP基因全长cDNA片段的克隆和序列分析

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中山大学学报（自然科学版） 2001年第4期40卷 5-8页

作者：卫剑文钟肖芬彭立胜吴文言徐安龙中山大学生命科学学院//国家高新技术海洋生物功能基因组开放实验室广东广州510275

通过对平颏海蛇毒腺ｃＤＮＡ文库的随机恻序和ＰＣＲ筛选，克隆得到两种分别长为１３０９和１３０７ｂｐ的编码半胱氨酸丰富毒蛋白（ｃｙｓｔｅｉｎｅ－ｒｉｃｈｖｅｎｏｍｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＶＰ）的全长ｃＤＮＡ序列．这两种... 详细信息

通过对平颏海蛇毒腺ｃＤＮＡ文库的随机恻序和ＰＣＲ筛选，克隆得到两种分别长为１３０９和１３０７ｂｐ的编码半胱氨酸丰富毒蛋白（ｃｙｓｔｅｉｎｅ－ｒｉｃｈｖｅｎｏｍｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＶＰ）的全长ｃＤＮＡ序列．这两种ｃｒｖｐ基因同源性为９７％，分别编码２３８和１９９个氢基酸残基，其中包括一段相同的由１９个氨基酸残基组成的信号肽．氨基酸序列分析表明，这两种ＣＲＶＰ蛋白与蜥蜴ｈｅｌｏｔｈｅｒｍｉｎｅ毒素蛋白以及台湾饭铲情ＣＲＶＰ毒蛋白高度同源，而且具有半胱氨酸丰富分泌蛋白（ｃｙｓｔｅｉｎｅ－ｒｉｃｈ　ｓｅｃｒｅｔｏｒｙｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＩＳＰ）家族的典型结构特征．

关键词：平颏海蛇半胱氨酸丰富毒蛋白全长cDNA序列基因克隆序列分析序列结构

平颏海蛇3种短链神经毒素的基因克隆与功能比较

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第4期33卷 457-462页

作者：钟肖芬彭立胜吴文言卫剑文杨红杨彦臻徐安龙广州510275 中山大学生命科学学院生物化学系!海洋生物功能基因组开放实验室

通过构建平颏海蛇毒腺cDNA文库得到 3个编码短链神经毒素的cDNA ,sn12、sn36和sn16 0 ,它们编码6 0个氨基酸的成熟肽 ,氨基酸序列比较表明三者之间只存在第 46位氨基酸残基的差异 ,分别为Pro4 6、His4 6和Arg4 6。在大肠杆菌中重组表达... 详细信息

通过构建平颏海蛇毒腺cDNA文库得到 3个编码短链神经毒素的cDNA ,sn12、sn36和sn16 0 ,它们编码6 0个氨基酸的成熟肽 ,氨基酸序列比较表明三者之间只存在第 46位氨基酸残基的差异 ,分别为Pro4 6、His4 6和Arg4 6。在大肠杆菌中重组表达以上 3种同源序列 ,重组神经毒素SN12、SN36和SN16 0对昆明小鼠 (i.p .)的半致死剂量 (LD50 )分别是 0 .0 95 6mg/kg、0 .346 7mg/kg和 0 .2 192mg/kg ;在对昆明小鼠 (i.p .)的醋酸扭体反应镇痛实验中 ,SN12和SN16 0表现出相似的效果 ,而SN36则存在明显的差异。平颏海蛇短链神经毒素SN12、SN36和SN16 0之间只存在第 46位氨基酸残基的差异 ,在生物活性上却显示出明显的区别 ,因而推测第 46位氨基酸与短链神经毒素对烟碱型乙酰胆碱受体结合功能相关

关键词：平颏海蛇短链神经毒素融合表达生物活性

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海葵溶细胞素的研究进展

海洋科学 2005年第4期29卷 56-62页

作者：刘伟王娟姜孝玉杨文利徐安龙中山大学生命科学学院国家高技术计划海洋生物功能基因组开放实验室

海葵(Anthopleura)属于腔肠动物门(Soelenterala)、珊瑚纲(Anthozoa),它的触手及身体富含多肽类毒素和蛋白毒素,在受到机械或化学刺激时,便会释放毒素用于抵御敌害及捕捉食物。根据海葵毒素的生理作用将其分为3类:海葵神经毒素(Sea Anem... 详细信息

海葵(Anthopleura)属于腔肠动物门(Soelenterala)、珊瑚纲(Anthozoa),它的触手及身体富含多肽类毒素和蛋白毒素,在受到机械或化学刺激时,便会释放毒素用于抵御敌害及捕捉食物。根据海葵毒素的生理作用将其分为3类:海葵神经毒素(Sea Anemone Neurotoxin,SAN)、海葵溶细胞素(Sea Anemone Cytolysin,SAC)和海葵钾离子通道抑制剂(Sea Anemone Potassiml Charmel inhibitor)。海葵溶细咆素是其中一类重要的毒素,具有多种生物学活性,如:溶血性、细咆毒性、心脏刺激活性、使膜去极化、阻断钾离子通道等。

关键词：海葵研究进展细胞钾离子通道腔肠动物门生物学活性肽类毒素化学刺激神经毒素生理作用抑制剂溶血性去极化珊瑚蛋白触手心脏

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海洋肽类活性物质的研究概况

海洋科学 2001年第11期25卷 25-31页

作者：陈慧萍吴文言徐安龙中山大学生命科学学院海洋生物功能基因组开放实验室广州510275

现代海洋生物活性物质的研究始于60年代 ,迄今为止已经发现具有重要生理及药理活性的化合物达2000多种。近10多年来 ,我国的海洋药物研究与开发也取得很大的进展。据初步统计 ,我国近海已发现具有药用价值的海洋生物达700多种。许多具... 详细信息

现代海洋生物活性物质的研究始于60年代 ,迄今为止已经发现具有重要生理及药理活性的化合物达2000多种。近10多年来 ,我国的海洋药物研究与开发也取得很大的进展。据初步统计 ,我国近海已发现具有药用价值的海洋生物达700多种。许多具有免疫、抗炎、抗肿瘤、抗病毒以及作用于心血管系统和神经系统的活性物质先后被分离提纯 ,并且对其中结构特殊、作用强烈的物质进行了人工合成或结构改造 ,以求开发可供临床应用的新药。从海洋生物中得到的生物活性物质种类繁多,包括有多肽类、萜类、生物碱类、大环聚酯类、聚醚类等化合物。其中…

关键词：海洋生物生物活性物质肽类活性物质肽类毒素药理作用

文昌鱼AmphiSmad 1／5／8和AmphiSmad4的克隆和表达

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中国科学（C辑） 2009年第12期39卷 1146-1154页

作者：余雪松李建伟刘辉李晓丹陈尚武张红卫徐安龙中山大学生命科学学院国家高技术海洋生物功能基因组开放实验室广东药用功能基因研究重点实验室广东广州510275 山东大学生命科学学院发育生物学研究所山东济南250100

Smad蛋白是转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员细胞内信号传导蛋白.本研究在青岛文昌鱼中克隆到了两个Smad基因,分别命名为AmphiSmad1/5/8和AmphiSmad4.它们编码的氨基酸序列具有典型的Smad家族蛋白的结构特征,都包含保守的MH1和MH2结构... 详细信息

Smad蛋白是转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员细胞内信号传导蛋白.本研究在青岛文昌鱼中克隆到了两个Smad基因,分别命名为AmphiSmad1/5/8和AmphiSmad4.它们编码的氨基酸序列具有典型的Smad家族蛋白的结构特征,都包含保守的MH1和MH2结构域.进化分析表明,AmphiSmad1/5/8属于R-Smad亚家族的Smad1,Smad5和Smad8亚群,而AmphiSmad4属于Co-Smad亚家族.在文昌鱼的早期胚胎发育中,这两个基因都在脊索、肌节和消化道壁表达,呈腹部化表达模式,推测可能参与文昌鱼背腹轴的形成和分化.另外,在正常文昌鱼成体中这两个基因也在所检测的组织中广泛表达,尤其在脊索和性腺中高表达,提示它们可能在器官的形成中发挥重要作用.

关键词：文昌鱼 Smad AmphiSmad1/5/8 AmphiSmad 4 表达模式器官形成背腹轴形成

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海葵神经毒素基因的克隆和序列分析

中国生物化学与分子生物学报 2001年第5期17卷 617-620页

作者：刘文华王义良卫剑文彭文烈吴文言徐安龙中山大学生命科学学院海洋生物功能基因组国家开放实验室广州510275

根据已发现的海葵神经毒素蛋白的两端保守氨基酸序列 ,设计简并引物 .用RT PCR方法 ,从侧花海葵 (Anthopleurasp .)触手总RNA中分离出多个神经毒素新基因 .它们分别编码 3个长度都是 4 7个氨基酸的毒素蛋白 ,它们的氨基酸序列与海葵神... 详细信息

根据已发现的海葵神经毒素蛋白的两端保守氨基酸序列 ,设计简并引物 .用RT PCR方法 ,从侧花海葵 (Anthopleurasp .)触手总RNA中分离出多个神经毒素新基因 .它们分别编码 3个长度都是 4 7个氨基酸的毒素蛋白 ,它们的氨基酸序列与海葵神经毒素C(Ap C)最为相似 .新基因的发现为进一步研究其生物活性及应用打下了基础 .

关键词：海葵触手 RT-PCR 神经毒素基因克隆序列分析

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美国能源部资助的微生物基因组研究概况

微生物学报 2001年第6期41卷 757-761页

作者：艾云灿中山大学生命科学院科技部海洋生物功能基因组学研究开放实验室广州510275

自 1 995年 1 2月完成第一个微生物 (流感嗜血杆菌 )全基因组测序以来[1] ,微生物基因组学策略和技术提高很快 ,促进了其他生命形式 (包括人类 )的基因组学发展 ,开创了生物基因组计划新时代[2 ] 。短短几年内 ,互联网数据库中各种生物... 详细信息

自 1 995年 1 2月完成第一个微生物 (流感嗜血杆菌 )全基因组测序以来[1] ,微生物基因组学策略和技术提高很快 ,促进了其他生命形式 (包括人类 )的基因组学发展 ,开创了生物基因组计划新时代[2 ] 。短短几年内 ,互联网数据库中各种生物基因组数据迅速增长。 1 998年 2月 2 0日美国Science杂志评选的当年世界十大科技进展 ,将微生物基因组图谱的构建列为其中第六项 ,同年 3月 2 7日Science杂志编者指出 :生物基因组革命可以同工业革命和计算机革命所带来的变化相比 ,是“第三次技术革命”[3 ] 。微生物全基因组测序 ,不仅是人…

关键词：微生物基因组计划项目遴选项目管理美国

玫瑰红绿海葵触手cDNA表达文库的构建和初步分析

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生物工程学报 2002年第6期18卷 749-753页

作者：刘文华王义良陈慧萍姜孝玉涂洪斌卫剑文彭文烈徐安龙中山大学生命科学学院生物化学系国家863计划海洋生物功能基因组开放实验室广州510275

A cDNA expression library of the tentacles of Sagartia rosea was constructed. The cDNA was cloned into eukaryotical expression plasmid pcDNA3. SMART TM protocol was used for cDNA library construction and bioinformatics analysis was carried out. 71 novel EST clones were obtained from 130 sequences in the library, of which there were 21 full-length clones, including cytolysin genes, flourescent protein, ubiquinol-cytochrome C reductase gene, elongation factor, ferritin gene riboflavin kinase gene, ribosomal protein. This provides a base for further investigating their biological activity and application.

关键词：玫瑰红绿海葵触手 cDNA表态文库构建