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草鱼实验性镉中毒的骨骼病理学研究

中山大学学报（自然科学版） 2003年第5期42卷 63-66页

作者：冯健王勇刘永坚田丽霞梁桂英中山大学水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275

200尾(10 8±1 2)g的草鱼分为4组,每组50条。实验各组水中镉含量分别为:1 10LC50组80μg·L-1,1 50LC50组16μg·L-1,1 100LC50组8μg·L-1,对照组为<1μg·L-1,实验期120d。研究内容为草鱼镉中毒的骨骼病理学变化。结果表明:①草鱼镉... 详细信息

200尾(10 8±1 2)g的草鱼分为4组,每组50条。实验各组水中镉含量分别为:1 10LC50组80μg·L-1,1 50LC50组16μg·L-1,1 100LC50组8μg·L-1,对照组为实验期120d。研究内容为草鱼镉中毒的骨骼病理学变化。结果表明:①草鱼镉中毒的24hLC50为800μg L;②各组草鱼的死亡率分别是64%,24%,20%,4%;③实验各组草鱼脊椎骨镉含量(湿质量)较对照组极显著升高(P实验各组草鱼血浆中碱性磷酸酶较对照组明显地升高、血清中钙、磷、镁含量较对照组显著减少(P<0 05);⑤骨骼病理学变化主要为:1 10LC50组、1 50LC50组、1 100LC50组草鱼75%、36%、36%出现脊椎弯曲、鳃丝塌陷且骨化不全。透射电镜下,增生的成骨细胞胞体短而粗,细胞质丰富,其中有清楚的细胞器。

关键词：草鱼镉中毒骨骼病理学

斜带石斑鱼雌鱼卵巢发育与血清性类固醇激素的生殖周期变化

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中山大学学报（自然科学版） 2003年第6期42卷 56-59,63页

作者：赵会宏刘晓春刘付永忠王云新林浩然中山大学水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州510275 广东省大亚湾水产试验中心广东惠州516081

斜带石斑鱼Epinepheluscoioides卵母细胞发育可分为6个时相,以卵母细胞在卵巢中组成的差异可以把卵巢发育划分为相应6个时期。测定了成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量的生殖周期变化,在生殖季节成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量最高。生... 详细信息

斜带石斑鱼Epinepheluscoioides卵母细胞发育可分为6个时相,以卵母细胞在卵巢中组成的差异可以把卵巢发育划分为相应6个时期。测定了成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量的生殖周期变化,在生殖季节成熟雌鱼血清中雌二醇和睾酮含量最高。生殖季节成熟雌鱼的平均性腺成熟系数GSI显著高于其它月份,并且血清性类固醇激素水平的季节变化与性腺成熟系数的变化基本一致,都是在生殖季节达到最高峰。

关键词：斜带石斑鱼雌鱼卵巢发育血清性类固醇激素生殖周期变化雌二醇睾酮人工繁育

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斜带石斑鱼消化系统胚后发育的组织学研究

水产学报 2003年第1期27卷 7-12页

作者：吴金英林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州　510275

利用形态学和连续组织切片技术,对出膜后1～60d的斜带石斑鱼各期仔鱼、稚鱼和幼鱼的消化系统进行了光镜观察,描述了其消化器官发育过程和组织学结构特征。研究表明,实验水温为22.0～27.8℃时,孵化后第4天,上下颌形成,卵黄囊被吸收,消化... 详细信息

利用形态学和连续组织切片技术,对出膜后1～60d的斜带石斑鱼各期仔鱼、稚鱼和幼鱼的消化系统进行了光镜观察,描述了其消化器官发育过程和组织学结构特征。研究表明,实验水温为22.0～27.8℃时,孵化后第4天,上下颌形成,卵黄囊被吸收,消化系统明显分化成食道、胃、肠、直肠以及肝脏、胆囊和胰脏等,鱼体由内源性营养转向外源性摄食营养,表明其消化系统的形态变化与食性的变化相适应。此后随着鱼体的生长,其消化系统从功能和结构上逐步完善成熟。胰脏在出膜后第4天出现,是和肝脏相互分开的一个独立的器官,但是发育到第35-60天,位于肠道后部的胰脏组织内出现许多大空泡。

关键词：组织学消化系统胚后发育斜带石斑鱼

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盐度变化对黑鲷生长激素及其受体的影响

热带海洋学报 2003年第6期22卷 9-14页

作者：邓利张为民林浩然中山大学水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

将海水鱼类黑鲷Sparusmacrocephalus从盐度为26.6的海水直接转入淡水,考察渗透压的急剧降低对黑鲷的生长激素(growthhormone,GH)及其受体(growthhormonereceptor,GHR)等生理指标的影响。研究发现:(1)黑鲷从海水直接转入淡水后48h有33%... 详细信息

将海水鱼类黑鲷Sparusmacrocephalus从盐度为26.6的海水直接转入淡水,考察渗透压的急剧降低对黑鲷的生长激素(growthhormone,GH)及其受体(growthhormonereceptor,GHR)等生理指标的影响。研究发现:(1)黑鲷从海水直接转入淡水后48h有33%的鱼死亡,对照组无死亡现象;(2)黑鲷在转入淡水48h内其血清生长激素(GH)含量、肝脏及鳃中GHR及GHRmRNA含量与对照组均无显著差异;(3)黑鲷在转入淡水48h后其肾脏中GHR含量较对照组显著升高(p<0.05),肾脏中GHRmRNA含量在24h及48h显著高于对照组(p<0.05)。结果表明,从GH含量看,黑鲷从海水环境到淡水低渗环境与鲑鳟鱼类从淡水到海水环境的适应性调节机制有差异,而黑鲷肾脏中GHR的含量变化可能参与黑鲷对外界环境渗透压的这种急剧降低的适应性调节。

关键词：盐度生长激素生长激素受体黑鲷Sparus macrocephalus

赤点石斑鱼两种芳香化酶cDNA的克隆及其表达的组织特异性

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动物学报 2004年第5期50卷 791-799页

作者：李广丽刘晓春张勇贝锦新林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

以赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara)脑垂体中提取的RNA为模板 ,根据芳香化酶的保守序列设计引物 ,利用GeneRacerTM 技术 ,克隆出两种芳香化酶即脑芳香化酶 (P4 5 0aromB)和性腺芳香化酶 (P4 5 0aromA)的cDNA ,其全长分别为 190 1bp (编码... 详细信息

以赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara)脑垂体中提取的RNA为模板 ,根据芳香化酶的保守序列设计引物 ,利用GeneRacerTM 技术 ,克隆出两种芳香化酶即脑芳香化酶 (P4 5 0aromB)和性腺芳香化酶 (P4 5 0aromA)的cDNA ,其全长分别为 190 1bp (编码 5 0 9aa)和 1833bp (编码 5 18aa)。序列分析结果表明 ,赤点石斑鱼两种芳香化酶cDNA序列的同源性为 5 1 6 % ,氨基酸序列之间同源性为 6 2 5 % ,与斜带石斑鱼两种芳香化酶氨基酸同源性分别为 94 7%和 97 9%。对 8个科的 10种鱼进行了分子系统进化树分析 ,结果与根据传统的形态学和生化特征分类进化地位基本一致。以特异性引物扩增雌、雄赤点石斑鱼各种组织 (垂体、嗅球、端脑、下丘脑、中脑、后脑、延脑、心脏、肾脏、肝脏、脾脏、性腺、鳃、胃、肠、皮肤、脂肪、肌肉、头肾、胸腺、鳔 ) ,以β actin作内标比较各组织芳香化酶基因表达量的差异 ,结果表明 ,赤点石斑鱼脑芳香化酶 (P4 5 0aromB)有广泛的组织分布 ,脑和垂体的表达量很高 ,各组织表达量有明显的雌、雄差异 ;而性腺芳香化酶 (P4 5 0aromA)表达主要集中于垂体和性腺 ,且不论雌雄 ,其性腺表达量均高于脑垂体 ,和P4 5 0aromB的表达模式明显不同 ,表现为在脑部 ,P4 5 0aromB表达量高于P4 5 0aromA ,而在性腺 ,

关键词：芳香化酶 P450 性腺脑垂体表达量克隆 DNA 赤点石斑鱼组织特异性头肾

重组斜带石斑鱼生长激素及其抗血清在放射免疫测定中的应用

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动物学报 2003年第5期49卷 663-669页

作者：冉雪琴李文笙林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

将斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)生长激素成熟多肽cDNA序列克隆到质粒pRSET ,与 6x组氨酸等原核编码序列融合获得重组质粒pRGH6 ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得高效表达 ,表达量占细菌总蛋白的4 3%。免疫印迹证明表达产物为含斜带... 详细信息

将斜带石斑鱼 (Epinepheluscoioides)生长激素成熟多肽cDNA序列克隆到质粒pRSET ,与 6x组氨酸等原核编码序列融合获得重组质粒pRGH6 ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得高效表达 ,表达量占细菌总蛋白的4 3%。免疫印迹证明表达产物为含斜带石斑鱼生长激素的融合蛋白 ,Ni2 +亲合层析柱纯化融合蛋白 ,以此为抗原免疫家兔制备特异性的抗血清。以纯化的重组生长激素和特异性的抗血清建立斜带石斑鱼生长激素的放射免疫测定法 ,该方法的灵敏度、特异性和重复性均达到测定血液生长激素的水平。研究了多巴胺的受体激动剂阿扑吗啡对静态孵育斜带石斑鱼脑垂体碎片释放生长激素的影响 ,结果表明。

关键词：斜带石斑鱼生长激素阿扑吗啡脑垂体碎片放射免疫测定法

LHRH-A缓释剂对雌性赤点石斑鱼卵巢发育、性类固醇激素分泌及脑垂体GTH细胞超微结构的影响

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Zoological Research 2005年第4期26卷 422-428页

作者：舒琥刘晓春林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

取75尾网箱养殖的2～3龄雌性赤点石斑鱼,分为3组(高、低剂量组和对照组),各25尾。高剂量组埋植促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)缓释剂,剂量为300μg/kg体重,低剂量组为100μg/kg体重,对照组埋植不含LHRHA的药丸。分别在实验开始和埋... 详细信息

取75尾网箱养殖的2～3龄雌性赤点石斑鱼,分为3组(高、低剂量组和对照组),各25尾。高剂量组埋植促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)缓释剂,剂量为300μg/kg体重,低剂量组为100μg/kg体重,对照组埋植不含LHRHA的药丸。分别在实验开始和埋植药丸后0、10、20、30、40天抽血,用放射免疫测定血清类固醇激素(E2、T);解剖鱼体测定相关指标,计算性腺成熟系数;取性腺和肝脏组织常规组织学切片并透射电镜观察。埋植后第10—30天,两种剂量处理组的排卵率均高于对照组,高剂量组显著高于低剂量组。在第10天性腺成熟系数高剂量组为1.055%,卵母细胞已有部分迅速发育到Ⅳ期末(核偏位);低剂量组相对缓慢。第20天性腺成熟系数高剂量组达1.858%,低剂量组为0.987%;处理组卵母细胞基本发育成熟。埋植后第10天,两处理组血清E2和T水平显著升高;第20天显著下降;此后E2保持在较低的水平,T显著低于对照组水平。超微结构的观察证实脑垂体GTH细胞在LHRHA缓释剂诱导性腺发育成熟和排卵过程中处于活跃的合成与分泌状态。LHRHA缓释剂能有效诱导赤点石斑鱼卵巢发育成熟和排卵,而性类固醇激素(E2、T)只与卵黄生成有关,与排卵无关。

关键词：赤占石斑鱼:LHRH—A 缓释卵巢发育排卵性类固醇激素

芳香化酶抑制剂letrozole对赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)性逆转的作用

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生理学报 2005年第4期57卷 473-479页

作者：李广丽刘晓春林浩然中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室

在繁殖季节,采用腹部埋植方式,用非类固醇型芳香化酶抑制剂(aromataseinhibitor,AI)letrozole以5mg/kg体重的剂量处理2龄雌性赤点石斑鱼(每4周埋植1次,共埋植2次),检查埋植后性腺组织结构、血清性类固醇激素以及脑和性腺芳香化酶活性的... 详细信息

在繁殖季节,采用腹部埋植方式,用非类固醇型芳香化酶抑制剂(aromataseinhibitor,AI)letrozole以5mg/kg体重的剂量处理2龄雌性赤点石斑鱼(每4周埋植1次,共埋植2次),检查埋植后性腺组织结构、血清性类固醇激素以及脑和性腺芳香化酶活性的变化。结果显示:一次埋植AI即可有效诱导雌性赤点石斑鱼发生不同程度的性逆转;性腺成熟指数明显下降;性腺中卵细胞退化,精原细胞增殖,出现大量精母细胞和精子细胞;性逆转雄鱼的精巢在组织结构上与正常雄鱼精巢没有明显差异,部分鱼成为功能性雄鱼。第一次埋植AI后4周轻微挤压腹部有14.3%的鱼可排精,精子活力与正常雄鱼相同。第二次埋植后明显提高性逆转效果,排精率在第6、8周分别达到35.3%和48.4%。此外,埋植AI后性腺芳香化酶活性显著降低,但脑部芳香化酶活性的变化不明显;血清11-酮基睾酮(11-ketotestosterone,11-KT)浓度显著增加,雌二醇(estradiol-17β,E2)水平显著降低,而睾酮(testosterone,T)含量无明显变化。这些结果表明,AI主要通过抑制内源性E2的产生并提高11-KT水平,从而诱导赤点石斑鱼由雌性转变为雄性。

关键词：赤点石斑鱼(Epinephelus akaara) 芳香化酶抑制剂性逆转

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草鱼肠道中小肽与血液循环中肽的关系

水产学报 2004年第5期28卷 505-509页

作者：冯健刘栋辉刘永坚田丽霞梁桂英中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室广东广州　510275

为了研究草鱼肠道完整吸收小肽与肠道中小肽的关系,用6.25%酶解酪蛋白、酸解酪蛋白、酪蛋白溶液和生理盐水进行草鱼肠道灌注试验（1mL·100g-1体重）。20min后尾静脉采血制备血浆,高效液相色谱分析结果表明:灌注酶解酪蛋白溶液的草鱼血... 详细信息

为了研究草鱼肠道完整吸收小肽与肠道中小肽的关系,用6.25%酶解酪蛋白、酸解酪蛋白、酪蛋白溶液和生理盐水进行草鱼肠道灌注试验（1mL·100g-1体重）。20min后尾静脉采血制备血浆,高效液相色谱分析结果表明:灌注酶解酪蛋白溶液的草鱼血液循环中总肽量和某些肽量显著（P0.05）。草鱼血浆中肽量的增加与肠道提供的肽种类和数量有关。实验结果表明,草鱼肠道能够完整地吸收某些小肽进入血液循环。

关键词：草鱼小肽高效液相色谱吸收