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三氧化二砷在肝癌综合治疗中的应用

中国中西医结合杂志 2003年第12期23卷 931-932页

作者：李江涛区庆嘉吴一冲周修静黄东全高维实中山大学孙逸仙纪念医院普外科

近年来，三氧化二砷（As_2O_3）因其在难治性和耐药性急性早幼粒细胞性白血病（APL）的治疗中疗效显著而引起注意，As_2O_3在治疗实体瘤包括肝癌的基础研究也逐渐增多，我们的研究表明其在体外可明显抑制肝癌细胞增殖。但临床用于肝癌... 详细信息

近年来，三氧化二砷（As_2O_3）因其在难治性和耐药性急性早幼粒细胞性白血病（APL）的治疗中疗效显著而引起注意，As_2O_3在治疗实体瘤包括肝癌的基础研究也逐渐增多，我们的研究表明其在体外可明显抑制肝癌细胞增殖。但临床用于肝癌治疗的报道极少，疗效及不良反应有待总结。经医院药事委员会同意，试将其用其于肝癌的化疗中。

关键词：三氧化二砷肝癌综合治疗不良反应复发

IL-8通过激活PKC/ERK信号通路促进肾癌细胞上皮细胞-间质细胞转化

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生物化学与生物物理进展 2012年第10期39卷 981-986页

作者：毕良宽林天歆许可慰韩金利黄海张彩霞董文刘皓黄健中山大学孙逸仙纪念医院泌尿外科广州510120

上皮细胞-间质细胞转化(EMT)在肿瘤转移方面起着非常重要的作用.肾癌发生EMT的具体分子机制尚不清楚.IL-8是一个重要的炎症趋化因子,研究表明肾癌细胞可以分泌IL-8,但IL-8是否参与肾癌细胞EMT的调节目前尚无报道.我们研究发现,IL-8可以... 详细信息

上皮细胞-间质细胞转化(EMT)在肿瘤转移方面起着非常重要的作用.肾癌发生EMT的具体分子机制尚不清楚.IL-8是一个重要的炎症趋化因子,研究表明肾癌细胞可以分泌IL-8,但IL-8是否参与肾癌细胞EMT的调节目前尚无报道.我们研究发现,IL-8可以促进肾癌细胞形态发生间质化改变,IL-8刺激后E-钙黏蛋白表达水平下降,N-钙黏蛋白表达上调.另外,IL-8可以促进肾癌细胞侵袭,但对肾癌细胞增殖的影响并不明显.进一步研究显示,IL-8通过激活蛋白激酶C(PKC)引起细胞外调节性激酶(ERK)磷酸化.因此,我们认为IL-8可能通过PKC/ERK信号通路促进肾癌细胞发生EMT,这可能是肾癌转移的重要机制之一.

关键词：肾癌 IL-8 上皮细胞-间质细胞转化蛋白激酶C 细胞外信号调节性激酶(ERK)

活体染料注射法识别乳腺癌患者前哨淋巴结失败及假阴性原因分析

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中华肿瘤杂志 2002年第3期24卷 297-299页

作者：苏逢锡巴明臣周晓东吴仙容李燕陈积圣李君中山大学孙逸仙纪念医院普外科广州510120

目的　探讨活体染料注射法识别乳腺癌患者前哨淋巴结失败及假阴性的原因。方法84例早期乳腺癌患者采用活体染料亚甲蓝作为前哨淋巴结活检示踪剂。术中切除前哨淋巴结行常规冰冻切片检查 ,无肿瘤转移者进一步做免疫组化检测。术后分离出... 详细信息

目的　探讨活体染料注射法识别乳腺癌患者前哨淋巴结失败及假阴性的原因。方法84例早期乳腺癌患者采用活体染料亚甲蓝作为前哨淋巴结活检示踪剂。术中切除前哨淋巴结行常规冰冻切片检查 ,无肿瘤转移者进一步做免疫组化检测。术后分离出全部乳腺及腋窝淋巴结送病理检查。结果　 11例患者术中未检出前哨淋巴结 ,失败率 13.1%。 73例检出前哨淋巴结的患者中 ,32例前哨淋巴结受肿瘤累及 ,病理证实这些患者均有腋窝淋巴结转移 ;2例患者前哨淋巴结未受肿瘤累及 ,但病理证实腋窝淋巴结有肿瘤转移 ;另 39例前哨淋巴结未受肿瘤累及 ,病理证实这些患者亦无腋窝淋巴结转移。前哨淋巴结预测腋窝淋巴结状态的敏感性为 90 .4% ,特异性 10 0 % ,假阴性率2 .7%。结论　活体染料注射法识别前哨淋巴结失败主要与外科医师的技术熟练程度及方法欠妥有关 ,而假阴性的出现多为原发肿瘤过大及前哨淋巴结位置变异所致。

关键词：活体染料注射法识别乳腺癌假阴性原因分析淋巴转移活组织检测

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乌司他丁对心肺复苏后大鼠肠屏障的保护作用

中华急诊医学杂志 2015年第11期24卷 1234-1238页

作者：常瑞明常建星江志鹏温立强余凯杨涛蒋龙元中山大学孙逸仙纪念医院急诊科广州510120 中山大学孙逸仙纪念医院普外科广州510120

目的探讨乌司他丁对心肺复苏后大鼠受损的肠屏障是否有保护作用及其可能机制.方法 21只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为3组：对照组（sham组=7）、心肺复苏组（CPR组=7）和乌司他丁组（ulinastatin,UTI组=7）,戊巴比妥钠（45～ 60 mg... 详细信息

目的探讨乌司他丁对心肺复苏后大鼠受损的肠屏障是否有保护作用及其可能机制.方法 21只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为3组：对照组（sham组=7）、心肺复苏组（CPR组=7）和乌司他丁组（ulinastatin,UTI组=7）,戊巴比妥钠（45～ 60 mg/kg）.腹腔注射麻醉,sham组大鼠麻醉后只行动静脉插管,不经历心搏骤停复苏;CPR组大鼠插管后用致颤法导致心搏呼吸骤停,8 min后行心肺复苏,开始实验前2h经尾静脉注射与UTI组等量的无菌生理盐水,而UTI组大鼠注射UTI（100 000 U/kg）,余程序同CPR组.在复苏成功后48 h大鼠心脏取血测定TNF-α和IL-1β的质量浓度,留取回肠标本行肠黏膜电镜观察、肠黏膜TUNEL染色及western blot监测caspase-3的蛋白水平.结果 CPR组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的质量浓度明显升高（与sham组比较,P＜0.01;与UTI组比较,P＜0.05）;UTI组较sham组高,但明显低于CPR组（P＜0.05）.电镜下观察到CPR组肠黏膜上皮细胞间紧密连接明显开放增宽,UTI组开放增宽不明显,sham组成正常形态;sham组未见明显肠黏膜上皮细胞凋亡,CPR组凋亡明显,UTI组黏膜上皮细胞凋亡较CPR组明显减轻;UTI组caspase-3表达较sham组高,但较CPR组低（均P＜0.05）.结论乌司他丁可以减少心肺复苏后大鼠血液中促炎介质的释放,降低肠黏膜caspase-3的表达,减轻肠上皮细胞的凋亡,对心肺复苏后大鼠受损的肠屏障有保护作用.

关键词：乌司他丁心肺复苏肿瘤坏死因子-α 白介素-1β 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶细胞凋亡肠屏障保护

饥饿诱导对纤维环细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响

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中华实验外科杂志 2011年第6期28卷 983-985页

作者：朱伟荣叶伟徐康娄振凯任晋可陈晋宸李春海中山大学孙逸仙纪念医院脊柱外科广州510120 中山大学孙逸仙纪念医院普外科实验室广州510120 中山大学

目的观察饥饿诱导对椎间盘纤维环细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响。方法用EBSS（Earle’sbalancedsalt）液饥饿诱导处于对数生长期的纤维环细胞，0、1、2、3h后用单丹磺酰戊二胺（MDC）荧光染色法检测自噬体形成、逆转录－聚合酶... 详细信息

目的观察饥饿诱导对椎间盘纤维环细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响。方法用EBSS（Earle’sbalancedsalt）液饥饿诱导处于对数生长期的纤维环细胞，0、1、2、3h后用单丹磺酰戊二胺（MDC）荧光染色法检测自噬体形成、逆转录－聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot方法分别检测纤维环细胞微管相关蛋白1轻链3（MAPLC3）和Beclin－1mRNA和蛋白的表达。结果随饥饿时间的延长，MDC阳性细胞数及自噬泡数量增多；1h后LC3－II及Beclin－1mRNA表达开始增加，且随时间增加有增加趋势（LC3—II：0．21±0．02、0．45±0．12、0．60±0．05、0．74±0．03，P〈0．05；Beclin-1：0．20±0．06、0．37±0．11、0．52±0．07、0．69±0．07，P〈0．05）；1h后蛋白LC3－II／LC3－I比值增加，Beclin．1蛋白表达亦增加，且随时间增加有增加趋势（LC3－II／LC3－I：0．12±0．05、0．32±0．09、0．63±0．07、0．92±0．04，P〈0．01；Beclin－1：0．61±0．10、0．83±0．11、1．09±0．05、1．35±0．10，P〈0．05）。结论饥饿可诱导椎间盘纤维环细胞自噬的发生，这可能与椎间盘退变的发生、发展有关。

关键词：椎间盘退变纤维环细胞自噬

TNF-α诱导滑膜MSCsMSCs与BMSCs凋亡的比较研究

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中国修复重建外科杂志 2016年第4期30卷 473-478页

作者：欧阳毅王鹏宋斌侯景义陈仲邓海权沈慧勇吴燕峰李卫平杨睿中山大学孙逸仙纪念医院骨外科广州510120 中山大学孙逸仙纪念医院生物治疗中心

目的通过比较TNF-α诱导滑膜MSCs（synovium-derived MSCs,SMSCs）与BMSCs凋亡,探讨SMSCs的抗凋亡能力。方法取患者自愿捐赠的滑膜组织及骨髓,分别采用组织贴壁法和密度梯度离心法分离培养SMSCs和BMSCs并传代,取第3-5代细胞行细胞免疫... 详细信息

目的通过比较TNF-α诱导滑膜MSCs（synovium-derived MSCs,SMSCs）与BMSCs凋亡,探讨SMSCs的抗凋亡能力。方法取患者自愿捐赠的滑膜组织及骨髓,分别采用组织贴壁法和密度梯度离心法分离培养SMSCs和BMSCs并传代,取第3-5代细胞行细胞免疫表型及三系分化鉴定后进行实验。实验分为4组,其中SMSCs、BMSCs凋亡诱导组（SMSCs、BMSCs实验组）用20 ng/m L TNF-α和10μg/m L放线菌酮对细胞进行凋亡诱导,其对应对照组以正常培养基培养。倒置相差显微镜下观察凋亡诱导细胞形态变化;培养24 h取各组细胞,采用细胞计数试剂盒8及流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率,Western blot法检测细胞半胱氨酶天冬氨酶蛋白酶降解产物8、3（Cleaved Caspase-8、3）的表达。结果经细胞表型及三系分化鉴定培养获得的细胞均符合MSCs鉴定标准。倒置相差显微镜观察示,随凋亡诱导培养时间延长,两实验组细胞形态及生长均较对应的对照组差。培养24 h,两对照组细胞存活率均为100%,未见细胞凋亡;SMSCs、BMSCs实验组细胞存活率分别降至60.13%±8.63%及46.55%±10.54%,均显著低于对照组（P〈0.05）,SMSCs实验组细胞存活率显著高于BMSCs实验组（t=3.152,P=0.006）。SMSCs和BMSCs对照组细胞凋亡率分别为1.12%±0.24%和1.35%±0.31%,两实验组分别增高至36.54%±8.63%及53.77%±11.52%,均显著高于对照组（P〈0.05）,且SMSCs实验组细胞凋亡率显著低于BMSCs实验组（t=3.785,P=0.001）。两对照组细胞Cleaved Caspase-8、3蛋白几乎不表达,且SMSCs实验组和BMSCs组细胞Cleaved Caspase-8、3蛋白明显高表达;其中BMSCs实验组明显高于SMSCs实验组（t=13.870,P=0.000;t=7.309,P=0.000）。结论经TNF-α诱导培养,SMSCs凋亡明显少于BMSCs,具有更强的抗凋亡能力。

关键词：滑膜MSCs BMSCs TNF-α 细胞凋亡

不同浓度丁酸钠诱导未成熟树突状细胞分化的免疫学功能比较

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中国药学杂志 2011年第24期46卷 1874-1878页

作者：刘璐李琳闵军王捷曾育杰伍衡陈双褚忠华中山大学孙逸仙纪念医院胃肠外科广州510120 中山大学孙逸仙纪念医院妇产科广州510120 中山大学孙逸仙纪念医院肝胆外科广州510120

目的探讨不同浓度丁酸钠诱导对于体外培养的树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫刺激活性的影响。方法通过重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人重组白细胞介素4(IL-4)体外诱导的人单个核细胞来源的DC,按照0.5、0.75、1、1.25... 详细信息

目的探讨不同浓度丁酸钠诱导对于体外培养的树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫刺激活性的影响。方法通过重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人重组白细胞介素4(IL-4)体外诱导的人单个核细胞来源的DC,按照0.5、0.75、1、1.25、1.5 mmol.L-15种浓度丁酸钠体外诱导分化,并分别以流式细胞仪,FITC-dxtran内吞检测、MLR、ELISA法检测DC的凋亡率、表面标志、内吞能力、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-10、IL-12、INF-γ分泌的变化。结果 1.25、1.5 mmol.L-1丁酸钠有较高的细胞毒性。0.5、0.75、1 mmol.L-1丁酸钠均可抑制DC表面成熟表型的表达。其中以1.0 mmol.L-1丁酸钠诱导下DC不成熟表型表达效果最稳定。虽然不同浓度丁酸钠诱导下的DC内吞能力无显著差异(P>0.05),但1.0 mmol.L-1丁酸钠与0.5、0.75 mmol.L-1丁酸钠相比较其IL-10分泌量(3.29±0.21)最大,抑制淋巴细胞增殖能力(1.53±1.04)最强(P<0.05)。结论 1.0 mmol.L-1丁酸钠是诱导DC稳定不成熟状态的最佳浓度。

关键词：树突状细胞丁酸钠免疫耐受

胰岛β细胞铁过载模型的建立及铁过载对胰岛β细胞损伤的研究

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中国病理生理杂志 2019年第12期35卷 2150-2155页

作者：张丽娜侯乐乐刘祖霖李平甘黄思琪孟哲欧辉江转南梁立阳中山大学孙逸仙纪念医院儿科

目的:通过枸橼酸铁铵(FAC)与大鼠胰岛素瘤细胞株INS-1共培养,构建铁过载INS-1细胞模型,并观察铁过载对胰岛细胞铁沉积、存活、胰岛素分泌、氧化应激以及线粒体损伤的影响。方法:体外培养INS-1细胞,不添加FAC作为对照组,加入不同浓度(5... 详细信息

目的:通过枸橼酸铁铵(FAC)与大鼠胰岛素瘤细胞株INS-1共培养,构建铁过载INS-1细胞模型,并观察铁过载对胰岛细胞铁沉积、存活、胰岛素分泌、氧化应激以及线粒体损伤的影响。方法:体外培养INS-1细胞,不添加FAC作为对照组,加入不同浓度(5、10、20、40、80、160和320μmol/L)的FAC干预INS-1细胞,分别培养24 h、48 h和72 h,建立铁过载INS-1细胞模型,测定细胞内的不稳定铁池(LIP),CCK8法分析细胞活力的改变,筛选出后续实验组所用FAC浓度,ELISA法检测胰岛素分泌功能,活性氧簇(ROS)探针染色流式细胞术检测ROS的生成,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,透射电子显微观察线粒体的变化。结果:加入不同浓度FAC处理后,铁过载组INS-1细胞内的LIP水平明显高于对照组(P实验的铁过载组。胰岛素分泌随FAC浓度的增加出现先升高后降低,160和320μmol/L组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。INS-1细胞内ROS的水平较对照组均显著增加(P<0.05)。线粒体膜电位随着铁浓度的增加而降低(P<0.05)。铁过载后INS-1细胞的线粒体肿胀,内嵴扩张,失去正常结构,随着FAC浓度增加,线粒体结构破坏更加明显。结论:与FAC共培养48 h可成功建立INS-1细胞铁过载模型。铁过载可显著破坏线粒体结构和功能,增加细胞内ROS的水平。胰岛β细胞的存活对铁敏感,即使低剂量的铁也损伤胰岛β细胞,但只有细胞数量减少到一定程度,才会减少胰岛素的分泌。

关键词：铁过载胰岛β细胞氧化应激

儿童血液病合并侵袭性真菌病164例临床分析

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中国实验血液学杂志 2019年第5期27卷 1672-1677页

作者：廖雄宇邱坤银吴若豪郭淑仪王健黄科徐宏贵黎阳方建培周敦华中山大学孙逸仙纪念医院儿科

目的:探讨儿童侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)的临床特点和防治方法。方法:回顾性分析本中心2012年1月至2015年1月符合IFD诊断标准的164例临床资料,了解其发病率、临床特征、相关因素,治疗方法和预后。结果:在本院收治的1 ... 详细信息

目的:探讨儿童侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)的临床特点和防治方法。方法:回顾性分析本中心2012年1月至2015年1月符合IFD诊断标准的164例临床资料,了解其发病率、临床特征、相关因素,治疗方法和预后。结果:在本院收治的1 289例血液病患儿中164例发生IFD,发病率为12.7%;感染部位主要为单纯肺部、血液和胃肠道,发生率分别为84.2%、5.5%和3%;共检出真菌35例,其中白色假丝酵母菌、曲霉菌和光滑假丝酵母菌检出率较高,分别为51.5%、20%和14.3%;164例患儿完全缓解36例,部分缓解97例,疾病稳定10例,进展11例,死亡10例,总有效率达81.1%。单因素分析表明,粒细胞缺乏、粒细胞恢复、长期使用糖皮质激素和免疫抑制剂及不同的诊断级别是影响患儿抗真菌疗效的显著因素;多因素分析结果则进一步表明,粒细胞恢复和诊断级别为影响IFD患儿疗效的独立预后因素。164例患儿抗真菌治疗,在开始的12周内的总体活存率为81.7%,其中伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B和卡泊芬净治疗的患儿12周生存率分别为81.4%、80%、69.4%和97.1%,Log-rank检验显示差异具有显著性意义。除卡泊芬净外,其余3种药物均出现不同程度的毒副作用,经对症治疗后患儿均可耐受。结论:本院血液病患儿IFD的发生率为12.7%,肺部为最常见感染部位,且以念珠菌居多。促进粒细胞恢复和尽早的分层诊断有助于IFD的治疗。对于经济条件较好的患儿,卡泊芬净是一种高效、低毒和预后好的抗真菌药物,值得临床推荐使用。

关键词：儿童血液病侵袭性真菌病