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单细胞转录组测序技术在帕金森病中的应用

中国组织工程研究 2025年第1期29卷 193-201页

作者：刘子瑜耿丹丹张润姣刘清李一博王宏方谢文梦王文钰郝佳欣王磊河北医科大学人体解剖与组织胚胎学教研室河北省石家庄市050017 河北医科大学神经与血管生物学教育部重点实验室河北省石家庄市050017

背景:帕金森病以中脑特别是黑质致密部为主要病理改变,导致患者运动和非运动功能受损。目前研究受制于细胞异质性,其发病机制仍需要更深入的阐明。近些年,单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)逐渐应用于神经退行性... 详细信息

背景:帕金森病以中脑特别是黑质致密部为主要病理改变,导致患者运动和非运动功能受损。目前研究受制于细胞异质性,其发病机制仍需要更深入的阐明。近些年,单细胞转录组测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)逐渐应用于神经退行性疾病中,对于理解细胞间异质性、疾病发展机制和治疗策略有重要意义。目的:综述近些年scRNA-seq技术应用于帕金森病的研究进展,为scRNA-seq在帕金森病诊断和治疗中应用提供理论基础。方法:由第一作者应用计算机系统检索中国知网、万方医学网数据库、PubMed、Web of Science数据库的相关文献,中文检索词为“单细胞RNA测序,帕金森病,细胞异质性,细胞亚型,多巴胺能神经元,胶质细胞”;英文检索词为“single-cell RNA-seq,Parkinson Disease,heterogeneity,subtypes,dopaminergic neurons,glial cells”,最终纳入71篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)scRNA-seq是一种在单细胞水平上利用RNA测序对特定细胞群体进行基因表达谱定量的高通量实验技术,从分子水平揭示细胞奥秘。与传统的测序技术相比,scRNA-seq技术通过对细胞转录组进行自动聚类分析,从而揭示各种生理和病理情况下复杂组织中细胞类型多样性和特异性基因表达的变化。(2)通过scRNA-seq阐明多巴胺能神经元发育过程以及各种细胞亚型的独特功能特性,从而更好地了解具有潜在治疗作用的分子靶点。(3)利用scRNA-seq分析,提高了研究者对帕金森病胶质细胞反应的了解,从而全面表征了不同的细胞类型群体,并鉴定出与神经变性相关的胶质细胞亚群,绘制了有价值的单细胞图谱,作为未来研究的参考数据。(4)应用scRNA-seq检测胚胎小鼠以及干细胞,将有助于改善细胞治疗的体外分化方案和质量控制,以及评估干细胞衍生的中脑多巴胺能神经元的整体细胞质量和发育阶段。

关键词：单细胞转录组测序帕金森病神经退行性疾病细胞异质性综述

丹酚酸B调控脂质代谢改善非酒精性脂肪肝实验研究

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中国药理学通报 2025年第1期41卷 107-115页

作者：张佳健郭梦茹梅金玉陈明安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032 安徽医科大学第二附属医院耳鼻喉科安徽合肥230601

目的探讨丹酚酸B(SalB)可能通过调控Lcn2改善非酒精性脂肪肝的作用。方法体内实验,8周龄♂C57BL/6J小鼠用普通维持饲料喂养,作为对照组,8周龄ApoE-/-小鼠用高脂饲料喂养,随机分为模型组和SalB组。在饲养8周后,SalB组小鼠用SalB灌胃,低... 详细信息

目的探讨丹酚酸B(SalB)可能通过调控Lcn2改善非酒精性脂肪肝的作用。方法体内实验,8周龄♂C57BL/6J小鼠用普通维持饲料喂养,作为对照组,8周龄ApoE-/-小鼠用高脂饲料喂养,随机分为模型组和SalB组。在饲养8周后,SalB组小鼠用SalB灌胃,低剂量为15 mg·kg^(-1)·d^(-1),高剂量为30 mg·kg^(-1)·d^(-1),对照组和模型组用等剂量生理盐水灌胃。肝脏转录组测序结果揭示模型组和SalB组的差异表达基因,HE染色、油红O染色观察肝组织的病理变化,试剂盒检测血清和肝组织的脂质、氧化应激和炎症指标,RT-qPCR检测Lcn2、SREBP-1C以及脂质合成相关酶的mRNA水平。体外实验,用棕榈酸(PA)诱导L02和LX-2细胞24 h建立NAFLD模型,用SalB(30μmol·L^(-1))和PA(0.2 mmol·L^(-1))共孵育检测SalB体外改善NAFLD的情况。试剂盒检测L02细胞TC、TG的含量,细胞油红O染色试剂盒检测L02细胞的脂质积累,RT-qPCR检测LX-2细胞Lcn2、SREBP-1C以及脂质合成相关酶基因的mRNA水平。结果模型组血清、肝脏的生化指标异常,肝组织脂质、炎症和氧化应激水平升高,出现大面积脂肪空泡和大量的脂质沉积,PA诱导的L02细胞也出现大量的脂质积累,在SalB干预后均有明显改善。转录组测序结果表明SalB可以调控肝脏脂质代谢和炎症。肝脏和LX-2细胞mRNA水平显示模型组Lcn2、SREBP-1C以及脂质合成相关酶基因表达明显上调,SalB干预后均能降低这些基因的表达。结论丹酚酸B可以明显改善非酒精性脂肪肝,其机制可能是通过下调Lcn2、SREBP-1C和脂质合成酶的表达。

关键词： SalB 非酒精性脂肪肝脂质代谢 Lcn2 SREBP-1C 脂质合成相关酶

子宫内膜癌雌孕激素受体的研究——应用葡聚糖活性碳饱和分析法(D.C.C)和荧光组化法

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癌症 1991年第5期10卷 385-389,T000页

作者：高雄辉胡媛芳中山医科大学病理解剖学教研室广州510089

本文用D.C.C法和荧光组化法测定31例子宫内膜腺癌和用组化法测定20例正常内膜的ER和PR,结果显示:内膜癌细胞浆含有ER和PR,Kd ER=8.065×10^(-10)M,KdqR=5.06×10^(-10)M。ER和PR与组织学分级差异有显著性(P0.05)。

关键词：子宫肿瘤内膜癌雌激素受体

大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4965-4974页

作者：王联谢娜赵珮伶陈浩李芏酉王豫萍贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州省贵阳市550003 贵州医科大学医学检验学院临床微生物学及免疫学教研室贵州省贵阳市550004

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路... 详细信息

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

关键词：大麻二酚肝星状细胞肝纤维化信号转导通路转化生长因子β1/Smad HSC-T6细胞

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微波在特殊染色和免疫组织化学染色中的应用

中华病理学杂志 1992年第2期21卷 77-78,T015页

作者：染英杰孔伟贞广州，中山医科大学病理解剖学教研室 510089

利用微波促进神经髓鞘、横纹肌纤维、酸性粘液、黑色素、曲菌、肾基底膜和含铁血黄素等特殊染色及免疫组化ABC法的HHF35、Desmin、Cytokeratin三种抗体染色。结果表明,利用微波促进染色,可大大地缩短染色时间,而染色效果与常规染色无明... 详细信息

利用微波促进神经髓鞘、横纹肌纤维、酸性粘液、黑色素、曲菌、肾基底膜和含铁血黄素等特殊染色及免疫组化ABC法的HHF35、Desmin、Cytokeratin三种抗体染色。结果表明,利用微波促进染色,可大大地缩短染色时间,而染色效果与常规染色无明显差异,免疫抗体的浓度也无需增加。这对提高病理科研工作效率,加快临床病理诊断具有实用价值。

关键词：微波免疫组织化学染剂染色法

应用抗Brdu单克隆抗体观察诱癌早期大鼠肝增生性...

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中华病理学杂志 1991年第2期20卷 95-97页

作者：谢运洁董郡福州，福建医学院病理解剖学教研室 350004 中山医科大学病理解剖学教研室

用抗5-溴脱氧尿苷(抗BrdU)单克隆抗体免疫组化方法观察用二乙基亚硝胺(DEN)、2-乙酰氨基芴(2-AAF)加2/3肝切除后诱癌早期大鼠肝增生性病变。结果显示了增生肝细胞灶的大小、数目,BrdU阳性细胞数以及增生肝细胞灶内外BrdU阳性细胞数差异... 详细信息

用抗5-溴脱氧尿苷(抗BrdU)单克隆抗体免疫组化方法观察用二乙基亚硝胺(DEN)、2-乙酰氨基芴(2-AAF)加2/3肝切除后诱癌早期大鼠肝增生性病变。结果显示了增生肝细胞灶的大小、数目,BrdU阳性细胞数以及增生肝细胞灶内外BrdU阳性细胞数差异的动态变化。我们还观察到BrdU阳性肝细胞在增生灶中多位于周边,此现象可能支持前人提出的一个增生肝细胞灶是由一个变异肝细胞分裂而来的假说。我们认为抗BrdU单克隆抗体免疫组化法是一项研究增生细胞细胞动力学的好方法,染色的切片及石蜡包埋的组织块可长久保存。

关键词：溴脱氧尿苷肝肿瘤单克隆抗体

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动脉硬化性混合性中风

中国神经精神疾病杂志 1989年第4期15卷 194-197页

作者：黄如训钟思陶中山医科大学神经病学教研室中山医科大学病理解剖学教研室

报告中风死亡的尸检18例,临床上均呈典型的中风发作,脑部有同临床表现基本符合的新鲜出血和梗塞灶,多数的病灶互不关联;提出中风患者的临床征象不能用一种性质的病灶解释时,应怀疑混合性中风,争取CT等检查以及时确诊。脑动脉硬化主要是... 详细信息

报告中风死亡的尸检18例,临床上均呈典型的中风发作,脑部有同临床表现基本符合的新鲜出血和梗塞灶,多数的病灶互不关联;提出中风患者的临床征象不能用一种性质的病灶解释时,应怀疑混合性中风,争取CT等检查以及时确诊。脑动脉硬化主要是高血压所致的小及细动脉硬化,尚有脑底动脉粥样硬化,脑部病变同高血压和动脉硬化程度密切相关,认为发病基础是动脉硬化。指出治疗上应取合理的中性方案,及早防治脑干功能衰竭。

关键词：中风动脉硬化脑出血

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人乳腺癌雌激素受体状态与肿瘤超微结构关系

中山大学学报（医学科学版） 1989年第1期13卷 6-8,2页

作者：赵国华吉重敏中山医科大学病理解剖学教研室

本文应用17-荧光雌酮亲和细胞化学法检测24例人乳腺癌雌激素受体(Estrogen receptor简ER),同时做透射电镜观察。结果,ER阳性和阴性各12例。ER阳性12例中,属超微结构分化好的肿瘤9例,而ER阴性12例中,仅3例超微结构分化较好(p=0.01)。上... 详细信息

本文应用17-荧光雌酮亲和细胞化学法检测24例人乳腺癌雌激素受体(Estrogen receptor简ER),同时做透射电镜观察。结果,ER阳性和阴性各12例。ER阳性12例中,属超微结构分化好的肿瘤9例,而ER阴性12例中,仅3例超微结构分化较好(p=0.01)。上述结果提示乳腺癌ER状态与其肿瘤的超微结构分化程度有一定相关性。已知乳腺癌病人的ER状态与内分泌治疗效果和预后密切相关,本文作者间接推测,乳腺癌超微结构的分析有助于提高内分泌治疗选择及预后判断的准确率。

关键词：乳腺癌雌激素受体超微结构

原发于眼附属器的非何杰金氏淋巴瘤(44例临床病理分析)

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眼科学报 1986年第4期2卷 225-229页

作者：冯官光易玉珍董郡庞友鉴刘金陵林汉良刘济琪郑健樑郑湖铃中山医科大学病理解剖学教研室中山医科大学中山眼科中心

44例原发于眼附属器的非何杰金氏淋巴瘤,男32例,女12例,平均发病年龄45.7岁。有完整资料的36例中,眼睑及结膜19例,眼眶17例,其中3例儿童均原发于眼睑,在这35例中,根据临床表现分为急性型的8例(22.86％),慢性型28例(77.14％)。急性型起病... 详细信息

44例原发于眼附属器的非何杰金氏淋巴瘤,男32例,女12例,平均发病年龄45.7岁。有完整资料的36例中,眼睑及结膜19例,眼眶17例,其中3例儿童均原发于眼睑,在这35例中,根据临床表现分为急性型的8例(22.86％),慢性型28例(77.14％)。急性型起病急,迅速恶化,预后极差,组织病理学分型多属高度恶性淋巴瘤。慢性型起病及发展均较缓慢,预后较佳,组织病理学分型多属低发及中度恶性淋巴瘤。44例的组织病理学分型:结节型5例(11.36％),弥漫型39例(88.64％),属B细咆系的42例(95.45％),T细胞系2例(4.55％)。随访3年的26例,结节型的5例,无一例死亡:弥漫型的21例,死亡9例。

关键词：非何杰金氏淋巴瘤眼附属器急性型慢性型病理学分型无核裂细胞弥漫型结外淋巴瘤临床病理分析