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DENV2海南分离株NS1全序列测定和生物信息学分析

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生物技术 2009年第3期19卷 1-3页

作者：周俊梅方丹云梁瑜尹悦江丽芳中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080

目的:对登革病毒2型海南分离株NS1全序列进行测定和生物信息学分析,了解其系统进化和分子流行病学特征。方法:采用RT-PCR法扩增D2-Hainan全长NS1基因,将其克隆入载体pPIcZαB,测序,采用相关软件进行生物信息学分析。结果:获得D2-Hainan... 详细信息

目的:对登革病毒2型海南分离株NS1全序列进行测定和生物信息学分析,了解其系统进化和分子流行病学特征。方法:采用RT-PCR法扩增D2-Hainan全长NS1基因,将其克隆入载体pPIcZαB,测序,采用相关软件进行生物信息学分析。结果:获得D2-Hainan株NS1全长基因1056bp,其序列与登革病毒2型NGC株的同源性为95%。系统进化树分析显示该毒株与登革病毒2型China04株的亲缘关系最近。初步分析了NS1蛋白的氨基酸序列特征和二级结构。结论:登革病毒流行株存在地域性和复杂性,对D2-Hainan株NS1基因及其编码蛋白信息特征的了解,有助于进一步研究其基因特征与病毒毒力的关系。

关键词：登革病毒 NS1基因生物信息学

弓形虫不同分离株致密颗粒蛋白基因的序列分析及其在大肠埃希菌中的表达

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第2期23卷 100-105页

作者：郑斌郑焕钦何蔼李卓雅曹爱莲张瑞琳詹希美中山大学中山医学院寄生虫学教研室广州510080

目的分析弓形虫不同分离株致密颗粒蛋白7(densegranuleprotein,GRA7)基因的异同及在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白。方法从弓形虫不同分离株(RH株、ZS2株和GT株)的基因组中特异地扩增出GRA7基因,将目的基因定向克隆至原核表达载体pGEX-4... 详细信息

目的分析弓形虫不同分离株致密颗粒蛋白7(densegranuleprotein,GRA7)基因的异同及在大肠埃希菌中表达致密颗粒蛋白。方法从弓形虫不同分离株(RH株、ZS2株和GT株)的基因组中特异地扩增出GRA7基因,将目的基因定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠埃希菌JM109并测序。利用互联网上的在线工具CLUSTALW进行序列分析。异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)体外诱导pGEX-4T-1/GRA7重组质粒菌的表达,对表达的目的蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别以抗抗谷胱甘肽巯基转移酶(GST)抗体、人抗弓形虫阳性血清为一抗进行Westernblotting分析。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,ELISA法检测抗弓形虫阴性、阳性血清。结果弓形虫不同分离株GRA7的基因序列相同;pGEX-4T-1/GRA7重组质粒在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,Westernblotting分析表明该蛋白为GST融合蛋白,且能被人抗弓形虫阳性血清所识别;ELISA结果表明该蛋白能与人抗弓形虫阳性血清、兔抗弓形虫阳性血清特异结合,而与抗弓形虫阴性血清无反应。结论弓形虫不同分离株GRA7基因具有高度保守性;GRA7基因在大肠埃希菌中以GST融合蛋白的形式得到表达,且该重组蛋白具有一定免疫反应性。

关键词：大肠埃希菌弓形虫分离株十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白基因 blotting Western GST融合蛋白分析及 GRA7基因谷胱甘肽巯基转移酶 ELISA法检测致密颗粒蛋白 protein 阳性血清原核表达载体重组质粒重组蛋白

FIX基因全外显子测序技术在血友病B基因携带者检测及产前基因诊断中的应用

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中华血液学杂志 2013年第3期34卷 195-199页

作者：肖潇陈娟蒋玮莹中山大学中山医学院医学遗传学教研室广州510080

目的探索应用FIX基因全外显子测序技术进行血友病B（HB）基因携带者检测和产前基因诊断。方法在取得5个无血缘关系的汉族HB家系成员知情同意后，采集相关家系成员标本。3个产前诊断标本中，2例为胎儿脐血标本，1例为羊水标本。从标本中... 详细信息

目的探索应用FIX基因全外显子测序技术进行血友病B（HB）基因携带者检测和产前基因诊断。方法在取得5个无血缘关系的汉族HB家系成员知情同意后，采集相关家系成员标本。3个产前诊断标本中，2例为胎儿脐血标本，1例为羊水标本。从标本中提取基因组DNA，通过PCR扩增FⅨ基因所有外显子及其侧翼序列，将产物进行全外显子直接测序。结果5个家系的HB患者以及FIX基因携带者共检出5种突变：C．484C〉T（P．R162X）、C．1022G〉A（P．R341Q）、c．1135C〉T（P．R379X）、c．799C〉T（P．H267Y）和c．1232G〉T（P．$411I）。在产前诊断中，发现1例c．484C〉T（P．R162X）突变，另2例未检出FIX基因突变的胎儿出生后血浆FIX促凝活性分别为52．7％和76．2％。结论首次报道中国汉族HB家系FⅨ基因c．1022G〉A（P．R341Q）、C．1135C〉T（P．R379X）、c．799C〉T（P．H267Y）和C．1232G〉T（P．$41¨）突变；在严格的质量控制下，FⅨ基因全外显子直接测序是一种快速准确的诊断HB基因携带者及产前基因诊断的方法。

关键词：血友病B 外显子产前诊断序列分析 DNA突变分析

血管新生抑制因子在糖尿病微血管并发症中的研究及应用前景

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中山大学学报(医学科学版) 2017年第2期38卷 169-176页

作者：高国全中山大学中山医学院生化教研室中山大学中山医学院心血管研究群体

糖尿病微血管并发症累及全身各个器官,导致糖尿病患者寿命下降和生活质量降低。血管新生是糖尿病微血管并发症的基本病理特征,而血管新生抑制因子在血管新生平衡调控和糖尿病微血管并发症发生发展中起了重要作用。本文就血管新生抑制因... 详细信息

糖尿病微血管并发症累及全身各个器官,导致糖尿病患者寿命下降和生活质量降低。血管新生是糖尿病微血管并发症的基本病理特征,而血管新生抑制因子在血管新生平衡调控和糖尿病微血管并发症发生发展中起了重要作用。本文就血管新生抑制因子与糖尿病微血管并发症的研究进展及治疗前景作一综述,包括血管新生抑制因子与糖尿病各种微血管并发症(糖尿病视网膜病变、糖尿病足、糖尿病勃起功能障碍和糖尿病肾病等)等的关系,最后概述了糖尿病微血管并发症的临床治疗现状与内源性新生血管抑制因子在其中的应用前景。

关键词：血管新生抑制因子糖尿病视网膜病变糖尿病足糖尿病勃起功能障碍糖尿病肾病

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用中华按蚊胸悬骨内突生长线测定日龄

昆虫学报 1983年第2期26卷 188-192页

作者：潘实清何桂铭李树桃中山医学院寄生虫学教研室

本文报道应用胸悬骨内突生长线测定中华按蚊的日龄,对 Schlein的方法进行了改进和简化。实验室饲养的中华按蚊,从0—11天的标本,内突生长线的数目与日龄相符。野外采集的中华按蚊,第1-4次吸血的雌蚊,按内突生长线数目计算平均日龄,分别... 详细信息

本文报道应用胸悬骨内突生长线测定中华按蚊的日龄,对 Schlein的方法进行了改进和简化。实验室饲养的中华按蚊,从0—11天的标本,内突生长线的数目与日龄相符。野外采集的中华按蚊,第1-4次吸血的雌蚊,按内突生长线数目计算平均日龄,分别为1.4天、4.7天、7.4天和10.2天,这与生理龄期间接推算出的日龄是相符的。对中华按蚊内突生长线的形成进行了讨论,对内突生长线测定日龄应用于生态学研究进行了初步的评价。

关键词：内突野外采集中华按蚊按蚊属生长线日龄

灵芝孢子防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及其生后幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少

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解剖学报 2007年第1期38卷 27-33页

作者：程进军曾园山张惠君陈穗君张伟熊轶钟志强中山大学中山医学院解剖学教研室广州510080 中山大学中山医学院组织胚胎学教研室神经科学研究室广州510080

目的探讨灵芝孢子对妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少的干预作用。方法40只SD妊娠大鼠分为正常对照组、N硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)+蒸馏水组、L-NAME+精氨酸组、L-NAME+灵芝孢子组。采用免疫组织化学、Wes... 详细信息

目的探讨灵芝孢子对妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少的干预作用。方法40只SD妊娠大鼠分为正常对照组、N硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)+蒸馏水组、L-NAME+精氨酸组、L-NAME+灵芝孢子组。采用免疫组织化学、Western blotting、RT-PCR、流式细胞计数和电镜等技术对海马组织进行检测。结果应用L-NAME后,E21海马低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达增加,直到P30时仍有表达。E21海马微血管密度增高,P30海马毛细血管结构异常。E21海马细胞的增殖下降,P30海马神经元减少。应用灵芝孢子后,E21海马HIF-1α和VEGF低水平表达,在P30时则未见表达。E21海马微血管密度达到正常水平,P30海马毛细血管结构正常。E21海马细胞增殖上升,P30海马神经元恢复性增多。结论灵芝孢子能防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少。

关键词：灵芝孢子妊娠高血压低氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子细胞增殖海马免疫印迹大鼠

ClC-3反义寡核苷酸对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响

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中国药理学通报 2004年第3期20卷 314-317页

作者：钱艳关永源王冠蕾杨晓茹贺华丘钦英中山大学中山医学院分子医学研究中心广州510080 中山大学中山医学院药理学教研室广州510080

目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷... 详细信息

目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的ClC 3蛋白的表达 ;②ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖。结论　ClC

关键词： ClC-3 T淋巴细胞反义寡核苷酸增殖

倒位PCR技术在血友病A基因诊断中的应用及改进

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中华血液学杂志 2009年第5期30卷 318-320页

作者：陈淑芬蒋玮莹中山大学中山医学院医学遗传学教研室广州510080

目的对倒位PCR（I-PCR）技术进行改进并应用于血友病A凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因倒位突变的检测，探讨其产前诊断价值。方法选取了8个无血缘关系的血友病A家系，应用已改进的I-PCR技术直接检测FⅧ基因第22内含子倒位。对2名孕妇分别于妊娠22... 详细信息

目的对倒位PCR（I-PCR）技术进行改进并应用于血友病A凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因倒位突变的检测，探讨其产前诊断价值。方法选取了8个无血缘关系的血友病A家系，应用已改进的I-PCR技术直接检测FⅧ基因第22内含子倒位。对2名孕妇分别于妊娠22及26周抽取胎儿脐静脉血，在检测脐血血浆FⅧ活性的同时应用I-PCR技术进行产前FⅧ基因突变检测。结果8个家系中检出4个家系为FⅧ基因倒位；根据FⅧ活性及基因突变检测结果，2名胎儿均诊断为正常胎儿，1名已出生，经随访与产前诊断结果相符合。结论应用I-PCR技术可以快速有效地进行血友病AFⅧ基因倒位突变的检测并可作为产前诊断的辅助手段。

关键词：倒位聚合酶链反应血友病A 基因倒位产前诊断

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Endophilin的研究进展

中国药理学通报 2013年第4期29卷 449-451页

作者：刘芸关永源中山大学中山医学院药理学教研室广东广州510080

早期关于Endophilin的研究主要集中于突触囊泡内吞方面,随着研究的进一步深入,人们才渐渐发现Endophilin其他方面的功能,如信号传导、线粒体代谢、维持细胞稳态等等。该文就Endophilin目前的研究情况做一综述。

关键词： Endophilin 内吞 SH3domain N-BAR domain PRD 平滑肌细胞