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深圳汉族人群42个常染色体短串联重复序列基因座的遗传多态性

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中山大学学报（医学科学版） 2024年第5期45卷 739-744页

作者：钟艳平伍立桃李桢周丹全湛柔梁爽邓志辉张胤鸣深圳市血液中心输血医学研究所广东深圳518040

【目的】调查深圳汉族人群42个常染色体短串联重复序列(STR)基因座(含41个非CODIS系统STR基因座)等位基因的遗传多态性,研究其在法医鉴定中的应用价值。【方法】采用AGCU21+1和阅微MR23荧光扩增试剂盒对深圳汉族人群435个无关个体STR基... 详细信息

【目的】调查深圳汉族人群42个常染色体短串联重复序列(STR)基因座(含41个非CODIS系统STR基因座)等位基因的遗传多态性,研究其在法医鉴定中的应用价值。【方法】采用AGCU21+1和阅微MR23荧光扩增试剂盒对深圳汉族人群435个无关个体STR基因座进行序列多态性分析。通过Modified-Powerstates和arlequin v3.5软件统计等位基因频率、法医遗传学参数并进行Hardy-Weinberg平衡检验。【结果】深圳汉族人群435个无关个体共检出418个等位基因,均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05/42),频率分布在0.0011~0.5529之间。D1S1656和D21S1270基因座多态性最高,均检出16个等位基因;D4S2408基因座检出的等位基因最少;个体识别能力(DP)为0.7988(D1S1627)~0.9686(D7S3048),多态性信息含量(PIC)为0.5680(D1S1627)~0.8598(D7S3048),杂合度(H)为0.6276(D1S1627)~0.8782(D20S470)。【结论】42个常染色体STR基因座的等位基因在深圳地区汉族群体遗传多态性较好,具有较高的个体识别能力,在个体识别和亲权鉴定尤其是单亲或出现基因突变的情况下具有较高的应用价值;所得的数据亦为STR群体遗传学提供基础数据。

关键词：法医遗传学遗传多态性常染色体短串联重复序列深圳汉族

HLA-B位点等位基因丢失一个家系的遗传学分析

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中华医学遗传学杂志 2024年第1期41卷 47-51页

作者：何柳媚全湛柔钟艳平邹红岩深圳市血液中心输血医学研究所深圳518020

目的探讨1个家系的HLA-B基因的碱基缺失情况。方法选取2022年4月就诊于广西柳州市人民医院的1例急性髓系白血病女性患者、丈夫和女儿作为研究对象,应用PCR-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)及PCR-直接测序法(PCR-SBT)对该家系进行人类... 详细信息

目的探讨1个家系的HLA-B基因的碱基缺失情况。方法选取2022年4月就诊于广西柳州市人民医院的1例急性髓系白血病女性患者、丈夫和女儿作为研究对象,应用PCR-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)及PCR-直接测序法(PCR-SBT)对该家系进行人类白细胞抗原(HLA)常规检测。应用二代测序技术(NGS)对HLA-B基因序列进行确认。结果患者及其女儿HLA-B位点的PCR-SBT和PCR-SSOP结果不一致,PCR-SSOP结果分别为HLA-B*35:01,40:02和HLA-B*35:01,40:01,PCR-SBT结果则均提示与最接近的HLA-B*35:01在第4外显子处有错配。NGS结果显示患者及其女儿HLA-B*35:01第5内含子处有1段9 bp的碱基序列缺失。患者丈夫结果为HLA-B*40:01,58:01,无异常。结论该家系HLA-B基因第5内含子处的变异位于SBT检测的引物结合区,影响了PCR-SBT分型结果的准确性。

关键词： HLA-B基因碱基缺失 PCR-序列特异性寡核苷酸探针 PCR-直接测序法二代测序

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放射损伤的中医药防治及机制

中国科学基金 2024年第3期38卷 419-425页

作者：廖泽彬邵帅柏志杰胡昌坤高月军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所北京100088

核爆炸、核恐怖袭击以及核电站泄露事故等产生的电离辐射严重威胁公众安全,自日本核废水排海以来,再次引发全球对放射损伤及其防治方案的关注。放射损伤涉及多器官、多组织、多系统,现有药物作用单一、毒副作用大,无法全面有效应对。在... 详细信息

核爆炸、核恐怖袭击以及核电站泄露事故等产生的电离辐射严重威胁公众安全,自日本核废水排海以来,再次引发全球对放射损伤及其防治方案的关注。放射损伤涉及多器官、多组织、多系统,现有药物作用单一、毒副作用大,无法全面有效应对。在整体观指导下的中医药防治方案具有多成分、多途径、多靶点的特色。“早期清热解毒,中期活血化瘀,晚期养血补血”的中医治疗策略可为放射损伤提供全链条的有效应对策略。因此,本文针对外照射导致放射损伤的血虚证、胃肠病、肺病、生殖病的细胞生物学过程,以及介导放射性核素促排的机制,结合其发生发展的中医病机,总结了现代科学对中医药防治放射损伤的解读。同时,以经典抗辐射中药方剂四物汤和刺白胶囊为例,剖析中医药抗辐射的科学内涵,为放射损伤的中医药防治研究提供新视角。

关键词：放射损伤治疗策略中医药防治四物汤刺白胶囊

延胡索乙素通过ULK1/FUNDC1通路抑制线粒体自噬减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1286-1294页

作者：辛高杰刘子馨陈原原张会雨郭帆彭涵李磊韩笑刘建勋付建华中国中医科学院西苑医院基础医学研究所北京100091 国家中医心血管病临床医学研究中心北京100091

该研究探讨了延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)通过UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1)/FUN14结构域蛋白1(FUN14 domain containing 1,FUNDC1)通路抑制线粒体自噬减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的具体机制。该研究以H9c2心肌细胞为研究对象,构建心肌细胞H/R损伤模型。首先采用细胞活力检测试剂盒检测细胞活性、微量法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量评估THP对H9c2心肌细胞H/R损伤的保护作用。然后采用化学荧光法检测细胞内活性氧、线粒体内活性氧、线粒体膜电位、自噬小体情况,并用萤光素法检测细胞内三磷酸腺苷(adenosine 5′-triphosphate,ATP)含量评估THP对线粒体的保护作用。进一步用免疫印记检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)膜型(LC3-Ⅱ)和包浆型(LC3-Ⅰ)的比值,活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)表达水平、ULK1表达水平及其在Ser555位点的磷酸化程度,FUNDC1表达水平及其在Ser17位点的磷酸化程度探索其具体机制。结果显示,THP有效减轻H9c2细胞H/R后线粒体损伤,THP通过降低细胞内和线粒体内活性氧水平、升高线粒体膜电位保护线粒体,进而增加细胞ATP生成、升高细胞活性、降低细胞LDH漏出,减轻H9c2细胞H/R损伤;进一步研究发现THP能够降低自噬小体生成,降低LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,降低凋亡相关蛋白cleaved caspase-3表达,表明THP通过抑制自噬减轻细胞凋亡;深入研究发现THP通过降低ULK1在Ser555位点和FUNDC1在Ser17位点的磷酸化程度,抑制线粒体自噬ULK1/FUNDC1通路激活,抑制线粒体自噬发生。ULK1激动剂BL-918的应用逆向验证了THP降低ULK1和FUNDC1磷酸化的作用。综上所述,THP通过ULK1/FUNDC1通路抑制线粒体自噬减轻H9c2心肌细胞H/R损伤。

关键词：延胡索乙素线粒体自噬 H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤 ULK1/FUNDC1通路

人参皂苷Re通过Nrf2/HO-1/PGC-1α通路调控线粒体生物发生减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的研究

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中国中药杂志 2024年第4期49卷 1064-1072页

作者：辛高杰陈原原刘子馨胥淑娟张会雨郭帆彭涵李磊韩笑刘建勋付建华中国中医科学院西苑医院基础医学研究所北京100091 国家中医心血管病临床医学研究中心北京100091

该文探讨了人参皂苷Re通过核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/血红素氧合酶-1(heme oxidase-1,HO-1)/过氧化物增殖体激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)调控线粒体生物发生减轻H9c2细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的机制。将H9c2细胞缺氧培养4 h再复氧培养2 h构建心肌细胞H/R损伤模型。Re预给药干预后,首先检测细胞活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、细胞内活性氧(Cyto-ROS)和线粒体内活性氧(Mito-ROS)水平,评估Re通过抗氧化应激对H9c2细胞H/R损伤的保护作用。其次通过荧光探针检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨ_(m))、线粒体膜通透性开放孔(membrane permeability open pore,mPTP)变化情况,通过免疫荧光检测TOM20表达水平,研究Re对线粒体的保护作用。进一步用免疫印迹检测caspase-3、cleaved caspase-3、Cyto C、Nrf2、HO-1、PGC-1α蛋白表达水平,探讨Re抗氧化应激保护线粒体减轻H/R损伤的具体机制。结果显示,与模型组相比,Re有效减轻H9c2细胞H/R损伤氧化应激反应,Re可显著升高细胞中SOD活性,降低MDA含量,降低Cyto-ROS和Mito-ROS水平;Re对线粒体有较好保护作用,升高ΔΨ_(m),降低mPTP开放,升高TOM20表达;进一步研究表明Re促进Nrf2、HO-1、PGC-1α蛋白表达,降低凋亡相关调节因子caspase-3向cleaved caspase-3活化、Cyto C蛋白表达。综上所述,人参皂苷Re减轻H9c2细胞H/R损伤的具体机制与通过Nrf2/HO-1/PGC-1α通路促进线粒体生物发生,进而升高线粒体数量、改善线粒体功能,增强细胞抗氧化应激能力,减轻细胞凋亡有关。

关键词：人参皂苷Re 线粒体生物发生 Nrf2/HO-1/PGC-1α 缺氧/复氧损伤氧化应激

双参宁心胶囊调控线粒体分裂、融合减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 87-94页

作者：辛高杰陈原原刘子馨尤越曹策王奥奥孟红旭韩笑刘建勋李磊付建华中国中医科学院西苑医院基础医学研究所北京100091 国家中医心血管病临床医学研究中心北京100091

目的:探讨双参宁心胶囊减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制是否与调控线粒体分裂、融合有关。方法:该研究以SD大鼠为研究对象,结扎冠状动脉左前降支,构建大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,实验分为假手术组、模型组、双参宁心组(90 mg·kg^(-... 详细信息

目的:探讨双参宁心胶囊减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制是否与调控线粒体分裂、融合有关。方法:该研究以SD大鼠为研究对象,结扎冠状动脉左前降支,构建大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,实验分为假手术组、模型组、双参宁心组(90 mg·kg^(-1))、曲美他嗪组(5.4 mg·kg^(-1))。微量法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,化学荧光法检测线粒体膜电位(△Ψm)变化、线粒体膜通透性开放孔(mPTP)开放程度,萤光素酶法检测细胞内腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体分裂相关因子线粒体动力相关蛋白1(DRP1)、线粒体裂变蛋白1(FIS1),视神经萎缩症蛋白1(OPA1)、线粒体外膜融合蛋白1(MFN1)、MFN2的mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清SOD活性降低,MDA含量升高,△Ψm、mPTP开放水平、ATP含量均降低,线粒体分裂因子DRP1、FIS1蛋白表达升高,融合相关因子OPA1、MFN1的mRNA转录和蛋白表达均降低;与模型组比较,双参宁心胶囊可显著升高大鼠血清SOD活性,降低MDA含量,升高细胞内ATP水平及△Ψm,降低mPTP开放水平,下调线粒体分裂因子DRP1、FIS1蛋白表达,升高融合相关因子OPA1、MFN1的mRNA转录和蛋白表达水平。结论:双参宁心胶囊减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与调控线粒体分裂、融合有关,其具体机制可能为抑制线粒体分裂因子DRP1、FIS1表达从而抑制线粒体分裂,升高融合相关因子OPA1、MFN1表达,进而保护线粒体功能结构减轻心肌缺血再灌注损伤。

关键词：双参宁心胶囊线粒体分裂线粒体融合心肌缺血再灌注损伤

山东省2012-2022年胃癌发病死亡趋势分析及2023-2030年预测

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中华肿瘤杂志 2024年第9期46卷 871-877页

作者：姜帆付振涛鹿子龙楚洁徐晓慧郭晓雷马吉祥山东省疾病预防控制中心慢性非传染性疾病防制所济南250014 山东省预防医学科学院山东大学预防医学研究院济南250014

目的分析2012—2022年山东省胃癌发病率和死亡率变化趋势并预测2023—2030年发展趋势。方法2012—2022年山东省胃癌发病和死亡资料来源于山东省肿瘤登记处,计算不同年度、性别、城乡的胃癌发病率、年龄别发病率、死亡率和年龄别死亡率,... 详细信息

目的分析2012—2022年山东省胃癌发病率和死亡率变化趋势并预测2023—2030年发展趋势。方法2012—2022年山东省胃癌发病和死亡资料来源于山东省肿瘤登记处,计算不同年度、性别、城乡的胃癌发病率、年龄别发病率、死亡率和年龄别死亡率,采用2000年中国标准人口年龄构成进行标化。使用Joinpoint软件计算发病率和死亡率的平均年度变化百分比(AAPC),贝叶斯年龄-时期-队列模型预测2023—2030年胃癌发病和死亡趋势。结果2012—2022年,山东省胃癌标化发病率和标化死亡率均呈下降趋势,标化发病率从2012年的27.47/10万降至2022年的16.06/10万(AAPC=-5.10%,P<0.001),标化死亡率从17.69/10万降至11.09/10万(AAPC=-5.52%,P<0.001)。不同性别和城乡地区人群的标化发病率和标化死亡率均呈下降趋势,男性发病和死亡水平始终高于女性,城乡差异逐渐缩小,2022年城乡胃癌标化发病率(城市16.09/10万,农村16.03/10万)和标化死亡率(城市11.10/10万,农村11.08/10万)水平已接近一致。年龄-时期-队列模型预测结果显示,2023—2030年山东省胃癌标化发病率将进一步下降(AAPC=-0.51%,P=0.001),但变化趋于平缓,其中,男性(AAPC=-1.46%,P=0.010)和农村地区(AAPC=-1.21%,P<0.001)发病率预计仍有少量下降空间,女性和城市地区发病率趋势无统计学意义。死亡率趋势与发病率一致。结论山东省胃癌发病率和死亡率呈下降趋势,预计到2030年将进一步下降,但趋势趋于平缓,应面向胃癌高危人群和高危因素尽早降低疾病负担。

关键词：胃肿瘤发病率死亡率预测

市售婴幼儿配方奶粉和婴幼儿米粉中梭状芽胞杆菌的分离和综合鉴定分析

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中国食品卫生杂志 2024年第4期36卷 433-439页

作者：陆峥刘玉竹张鹏航张诣陈倩张晓媛北京市疾病预防控制中心营养与食品卫生所北京市预防医学研究中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013

目的对57件市售婴幼儿配方奶粉、50件婴幼儿米粉进行梭状芽胞菌分离鉴定分析及毒素基因检测,获得梭状芽胞杆菌的污染水平数据,并评估各鉴定方法。方法通过分离菌株的生长特性、革兰染色、普通显微镜下形态特征等表型特征,应用微生物飞... 详细信息

目的对57件市售婴幼儿配方奶粉、50件婴幼儿米粉进行梭状芽胞菌分离鉴定分析及毒素基因检测,获得梭状芽胞杆菌的污染水平数据,并评估各鉴定方法。方法通过分离菌株的生长特性、革兰染色、普通显微镜下形态特征等表型特征,应用微生物飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、16S rRNA基因测序技术、全基因组测序技术对分离菌株进行综合鉴定,通过PCR对分离的梭状芽胞杆菌进行肉毒毒素基因检测,对肉毒毒素基因PCR阳性片段进行测序和比对分析。结果57份市售婴儿配方奶粉中有26份样品中检出38株梭状芽胞杆菌,其中9份样品中同时检出超过两种细菌。50份市售婴幼儿米粉中有5份样品检出5株梭状芽胞杆菌。奶粉中分离的一株楔形梭菌E型肉毒梭菌毒素基因PCR扩增阳性,扩增片段测序比对结果显示这段序列并不是E型肉毒梭菌毒素基因,全基因组测序结果也证实。43株梭状芽胞杆菌均未检出肉毒梭菌的毒素基因。结论梭状芽胞杆菌鉴定需要多种方法的综合分析。市售婴幼儿配方奶粉、婴幼儿米粉中存在梭状芽胞杆菌的污染,应加强婴幼儿配方食品中重要梭状芽胞杆菌的监测,为风险评估提供数据支持。

关键词：梭状芽胞杆菌婴幼儿配方奶粉婴幼儿米粉肉毒毒素基因食源性致病菌

人参皂苷Rg调控SIRT3介导ATP5A1去乙酰化减轻HL-1心肌细胞缺氧/复氧损伤的研究

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中国中药杂志 2024年

作者：陈原原辛高杰刘子馨张会雨郭帆胥淑娟王苑崔晓珊郭浩付建华中国中医科学院西苑医院基础医学研究所国家中医心血管病临床医学研究中心

探讨人参皂苷Rg1通过沉默信息调节因子3（silent information regulator 3， SIRT3）抑制ATP合成酶α-亚基（ATP synthase subunit alpha， ATP5A1）乙酰化减轻HL-1细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation， H/R）损伤的机制。该研究以HL-1细胞为研究对象，通过缺氧6 h、复氧2 h构建H/R损伤模型。首先采用细胞活力检测试剂盒筛选人参皂苷Rg1的最佳有效浓度，然后通过微量法检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase， LDH）漏出量，评估人参皂苷Rg1对HL-1心肌细胞H/R损伤的保护作用。进一步采用蛋白印迹法检测心肌细胞中SIRT3表达量和线粒体蛋白乙酰化水平；荧光素酶法测定三磷酸腺苷（adenosine triphosphate， ATP）含量，免疫共沉淀检测ATP5A1乙酰化水平；Seahorse XFp测定细胞耗氧率（oxygen consumption rate， OCR）和流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果显示，与对照组比较，模型组LDH漏出量显著增加，SIRT3表达量降低，线粒体蛋白乙酰化水平和ATP5A1乙酰化水平显著升高，OCR降低，ATP含量减少，细胞凋亡率升高；与模型组比较，人参皂苷Rg1组LDH漏出量显著减少，SIRT3表达量升高，线粒体蛋白乙酰化水平和ATP5A1乙酰化水平显著降低，OCR升高，ATP含量增加，细胞凋亡率减少；与人参皂苷Rg1组比较，人参皂苷Rg1+si SIRT3组LDH漏出量显著增加，SIRT3表达量降低，线粒体蛋白乙酰化水平和ATP5A1乙酰化水平显著升高，OCR降低，ATP含量减少，细胞凋亡率升高。综上所述，人参皂苷Rg1可以通过SIRT3抑制ATP5A1乙酰化改善线粒体呼吸功能减轻HL-1细胞H/R损伤。

关键词：人参皂苷Rg ATP5A1乙酰化缺氧/复氧损伤线粒体呼吸功能