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γ射线照射人肝细胞对BMP信号通路相关基因表达的影响

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辐射防护 2016年第4期36卷 211-217页

作者：尹晶晶李建国秦秀军李钢黄立群袁慧闻建华中国辐射防护研究院药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室太原030006

利用实时荧光定量PCR技术对人肝细胞株受不同剂量(0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、4.0 Gy)^(60)Coγ射线照后不同时间点(6、12、24 h)的骨形成蛋白(BMP)信号通路相关基因表达的剂量和时间效应关系进行研究。结果显示,不同剂量照后不同时间点,... 详细信息

利用实时荧光定量PCR技术对人肝细胞株受不同剂量(0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、4.0 Gy)^(60)Coγ射线照后不同时间点(6、12、24 h)的骨形成蛋白(BMP)信号通路相关基因表达的剂量和时间效应关系进行研究。结果显示,不同剂量照后不同时间点,BMP信号通路相关基因骨形成蛋白2(BMP2)、骨形成蛋白7(BMP7)、骨形成蛋白受体1A(BMPR1A)、骨形成蛋白受体1B(BMPR1B)、骨形成蛋白受体2(BMPR2)的溶解曲线均为单峰,均为特异性扩增产物。在不同照射剂量点BMP2的表达水平与照后时间呈正相关;BMP7在0.1、0.2、0.5 Gy的表达水平与照后时间呈负相关,在照后12和24 h的表达水平与照射剂量呈正相关;BMPR1A在0.1、0.2、1.0 Gy的表达水平与照后时间呈正相关;BMPR1B在0.2、0.5、1.0 Gy的表达水平与照后时间呈正相关,在4.0 Gy的表达水平与照后时间呈负相关;BMPR2在照后12 h的表达水平与照射剂量呈负相关。

关键词：人肝细胞株 1射线 BMP信号通路基因表达

富氢水对γ射线照射Beagle犬淋巴细胞基因表达谱的影响

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第二军医大学学报 2016年第12期37卷 1475-1480页

作者：秦秀军尹晶晶孙鸽刘梦雅李炜宾李建国中国辐射防护研究院放射医学与环境医学研究所药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室太原030006

目的利用基因芯片技术研究富氢水对γ射线照射后Beagle犬外周血淋巴细胞基因表达的影响。方法将雄性Beagle犬随机分为对照组、单纯照射组和富氢水组(n=5),采用基因芯片技术对2.0Gy 60 Coγ射线照射后6h各组Beagle犬外周血淋巴细胞的差... 详细信息

目的利用基因芯片技术研究富氢水对γ射线照射后Beagle犬外周血淋巴细胞基因表达的影响。方法将雄性Beagle犬随机分为对照组、单纯照射组和富氢水组(n=5),采用基因芯片技术对2.0Gy 60 Coγ射线照射后6h各组Beagle犬外周血淋巴细胞的差异表达基因进行筛选,利用GO(gene ontology)和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)数据库对差异表达基因进行生物信息学分析,并应用实时荧光定量PCR技术对基因芯片结果进行验证。结果单纯照射组筛选出差异表达2倍以上的基因4 730条,富氢水组筛选出差异表达2倍以上的基因4 493条,单纯照射组与富氢水组共同差异表达2倍以上的基因有1 606条;单纯照射组的差异表达基因对应的生物学过程、细胞组分及分子功能分别有10、9、3个功能簇,富氢水组差异表达基因对应的生物学过程、细胞组分及分子功能分别有15、3、4个功能簇。单纯照射组差异表达基因涉及19条生物学通路,富氢水组差异表达基因涉及24条生物学通路,单纯照射组与富氢水组的差异表达基因有5条共同生物学通路。选择2条差异表达基因进行mRNA水平的验证,PCR扩增结果与芯片结果具有良好的一致性。结论富氢水对γ射线照射后Beagle犬外周血淋巴细胞基因表达的影响,可能涉及多种生物学过程、细胞组分、分子功能的改变及多条信号通路的激活。

关键词：富氢水 γ射线狗淋巴细胞基因表达

亚低温对急性辐射损伤小鼠的保护作用及其机制研究

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中华放射医学与防护杂志 2015年第5期35卷 339-343页

作者：李曙芳黄立群原雅艺孙鸽刘红艳王永丽岳娟闻建华张伟安全中国辐射防护研究院药物毒理与放射损伤药物山西重点实验室太原030006

目的探讨亚低温对急性辐射损伤小鼠的辐射防护作用及其机制.方法 105只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组,即单纯照射组、亚低温干预组和健康对照组,每组35只.单纯照射组和亚低温干预组小鼠均接受6 Gy60Coγ射线单次全身照射,亚低... 详细信息

目的探讨亚低温对急性辐射损伤小鼠的辐射防护作用及其机制.方法 105只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为3组,即单纯照射组、亚低温干预组和健康对照组,每组35只.单纯照射组和亚低温干预组小鼠均接受6 Gy60Coγ射线单次全身照射,亚低温干预组在照后即刻进行亚低温干预并维持6h,观察照后1、3、7、14、21和28 d小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞计数,骨髓病理组织学变化,照后6和24 h,检测小鼠血清中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）和超氧化物歧化酶（SOD）活力,采用流式细胞术检测骨髓细胞周期.结果与单纯照射组比较,亚低温干预组小鼠外周血白细胞数和骨髓有核细胞数在照后早期较高（t=-2.63、-3.41,P＜0.05）,且提前1周恢复;同时,小鼠骨髓细胞衰减较晚,恢复较早.受照后6h与其他组相比,亚低温干预组小鼠血清MDA含量较低（=3.83,P＜0.05）,SOD活力较高（t=-6.57,P＜0.05）,骨髓S期细胞比例较高（t=-4.67,P＜0.05）,G2期细胞较低（t=3.04,P＜0.05）;受照后24 h与其他组相比,亚低温干预组小鼠血清GSH-px活力较高（t=-3.13,P＜0.05）,骨髓S期细胞比例较单纯照射组降低（=7.19,P＜0.05）.结论照后亚低温干预对急性辐射损伤有较好的保护作用,机制与亚低温可增强机体抗氧化力、抑制骨髓细胞周期进程有关.

关键词：亚低温急性辐射损伤保护作用

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电离辐射致认知功能损伤大鼠模型的研究

中国比较医学杂志 2019年第2期29卷 72-77页

作者：刘梦雅袁慧高洁王永丽尹晶晶王新钢刘欢李建国秦秀军中国辐射防护研究院药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室太原030006

目的对大鼠头部进行不同剂量照射,选取合适剂量建立电离辐射致认知功能损伤动物模型,为研究电离辐射致认知功能损伤发生机制、辐射防护剂研制等提供研究基础。方法将SPF级雄性大鼠20只随机分为对照组(C组)、10 Gy照射组(10 Gy IR组)、20... 详细信息

目的对大鼠头部进行不同剂量照射,选取合适剂量建立电离辐射致认知功能损伤动物模型,为研究电离辐射致认知功能损伤发生机制、辐射防护剂研制等提供研究基础。方法将SPF级雄性大鼠20只随机分为对照组(C组)、10 Gy照射组(10 Gy IR组)、20 Gy照射组(20 Gy IR组)和30 Gy照射组(30 Gy IR组),每组各5只,C组不作处理,其余3组分别利用10 Gy、20 Gy和30 Gy电子线对不同组别SD大鼠头部进行单次照射,照射后30 d计算动物死亡率,利用Morris水迷宫对大鼠空间记忆能力进行检测,利用化学比色法检测大鼠脑皮质匀浆液中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA),酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno Sorbent assay,ELISA)检测8羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)含量,对经HE染色的大脑病理切片进行检测观察。结果 30 Gy IR组动物出现背毛不整齐,流涎等症状,头颈部发生严重的脱毛现象。照后30 d时,C组未见动物死亡,10 Gy IR组和20 Gy IR组动物死亡率为20%,30 Gy IR组动物死亡率为40%。Morris水迷宫定位航行实验结果显示30 Gy IR组在1～5 d的训练期中,潜伏期时间均高于其余三组且差异具有统计学意义(P实验显示30 Gy IR组较其余各组原平台象限停留时间显著缩短(P实验结果提示对头部进行30 Gy单次照射可以成功建立大鼠认知功能障碍动物模型。

关键词：电离辐射认知功能损伤实验动物模型

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链状酰胺类化合物B07的遗传毒性试验研究

中国新药杂志 2018年第3期27卷 295-299页

作者：李曙芳秦秀军许文黎尹晶晶岳娟王新钢李建国安全中国辐射防护研究院太原030006 药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室太原030006 中核放射毒理与放射性药物安全性评价重点实验室太原030006

目的:探讨链状酰胺类化合物B07是否存在遗传毒性。方法:通过Ames试验、中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验和大鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究B07的遗传毒性。结果:Ames试验中,B07在每皿5 000μg的浓度时,诱发TA102(±S9)菌株... 详细信息

目的:探讨链状酰胺类化合物B07是否存在遗传毒性。方法:通过Ames试验、中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验和大鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究B07的遗传毒性。结果:Ames试验中,B07在每皿5 000μg的浓度时,诱发TA102(±S9)菌株产生的回变菌落数高于空白对照组(P<0.01);在每皿0.5~500μg内,未见TA102回复突变率增高;在每皿0.5~5 000μg内,未见TA97,TA98,TA100和TA1535回复突变率增高。染色体畸变试验中,B07浓度在75~600μg·m L-1,未见诱发CHL细胞染色体畸变率增高。微核试验中,B07浓度在1.6~6.4 mg·kg-1无致大鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成作用。结论:高浓度B07可能有致突变作用。

关键词：链状化合物B07 遗传毒性 Ames试验染色体畸变试验微核试验

NBED对铀的促排效果及HK-2细胞损伤的保护作用

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中国药理学通报 2022年第6期38卷 880-887页

作者：周文华高洁尹晶晶黄立群李曙芳李建国山西中医药大学山西晋中030619 中国辐射防护研究院药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室中核放射毒理与放射性药物临床前评价重点实验室山西太原030000

目的研究NBED对铀的促排效果和HK-2细胞损伤的保护作用。方法ICR小鼠分为空白对照组、铀染毒组(0.03 mg)、DTPA-CaNa_(3)(300 mg·kg^(-1))和NBED(300、150、75 mg·kg^(-1))处理组,尾静脉注射醋酸铀酰后立即口服不同剂量促排剂,给药24 ... 详细信息

目的研究NBED对铀的促排效果和HK-2细胞损伤的保护作用。方法ICR小鼠分为空白对照组、铀染毒组(0.03 mg)、DTPA-CaNa_(3)(300 mg·kg^(-1))和NBED(300、150、75 mg·kg^(-1))处理组,尾静脉注射醋酸铀酰后立即口服不同剂量促排剂,给药24 h后ICP-MS法测定肾、骨、肝、脾、肌肉中铀含量。HK-2细胞分为空白对照组、铀模型组(80μmol·L^(-1))、DTPA-CaNa_(3)(80μmol·L^(-1))和NBED(80、40、20μmol·L^(-1))处理组与铀共同作用48 h,CCK-8法检测细胞存活率,光镜下观察细胞形态,ICP-MS法检测细胞铀内吞外排比例,生化法检测SOD、GSH、LDH,流式细胞术检测ROS、细胞凋亡和周期变化。结果300 mg·kg^(-1)NBED比铀染毒组减少肾、骨内44.3%、18.8%铀含量;NBED比模型组减少了11%~42%的铀进入细胞,增加了18%~48%的铀排放量,明显提高HK-2细胞存活率、SOD、GSH水平,降低ROS和LDH表达水平以及凋亡率和S期的阻滞。DTPA-CaNa_(3)虽能明显降低小鼠肾铀含量和细胞铀内吞量,但效果明显低于NBED,且对铀致HK-2细胞急性损伤无保护作用。结论NBED是有效的铀促排剂,且优于FDA批准用药DTPA-CaNa_(3),并能降低ROS、LDH生成,增加SOD、GSH含量,降低S期的阻滞和凋亡,从而对铀致HK-2细胞的损伤产生保护作用。

关键词： HK-2细胞促排剂醋酸铀酰氧化损伤凋亡周期

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基于RNA-Seq技术的亚低温防护大鼠放射性肺损伤的转录组学分析

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中南大学学报（医学版） 2021年第4期46卷 345-350页

作者：王远飞王新钢许文黎王永丽黄立群岳娟安全李曙芳中国辐射防护研究院药物安全性评价中心药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室中国核工业集团有限公司放射毒理与放射性药物临床前评价重点实验室太原030006

目的:分析放射性肺损伤大鼠的差异表达基因,从转录组水平揭示亚低温对大鼠放射性肺损伤的防护机制。方法:选取10只6~8周龄雄性SD大鼠并随机分为模型组与亚低温治疗组。建立放射性肺损伤大鼠模型,并对亚低温治疗组进行亚低温干预治疗,分... 详细信息

目的:分析放射性肺损伤大鼠的差异表达基因,从转录组水平揭示亚低温对大鼠放射性肺损伤的防护机制。方法:选取10只6~8周龄雄性SD大鼠并随机分为模型组与亚低温治疗组。建立放射性肺损伤大鼠模型,并对亚低温治疗组进行亚低温干预治疗,分别提取2组大鼠左侧肺组织RNA,用BGISEQ-500平台进行测序。采用edgeR差异分析软件分析2组基因表达的差异,对有统计学意义的差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析,然后采用实时反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription PCR,real-time RT-PCR)对其中5个关键差异表达基因进行验证。结果:亚低温治疗组与模型组之间有2790个差异表达基因[错误发现率1],其中2257个基因上调,533个基因下调。5个关键基因real-time RT-PCR验证结果与转录组测序(RNA sequence,RNA-Seq)分析趋势一致。GO功能富集分析结果表明差异表达基因与细胞结合、代谢过程及细胞膜结构等有关;KEGG通路富集分析结果表明这些基因参与细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAMs)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、紧密连接(tight junction)及核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)等重要生物学通路。结论:获得了亚低温防护大鼠放射性肺损伤相关差异表达基因及其显著富集通路,为亚低温技术防护放射性肺损伤提供了实验依据。

关键词：亚低温紧密连接通路 RNA测序放射性肺损伤

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重度骨髓型急性放射病小鼠模型的建立

毒理学杂志 2015年第6期29卷 450-453页

作者：李曙芳黄立群王永丽岳娟李幼忱闻建华安全中国辐射防护研究院放射医学所放射毒理室药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室山西太原030006

目的探讨重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型的建立方法,为重度骨髓型急性放射病实验研究提供依据。方法通过6Gy60Coγ射线单次全身照射小鼠,观察照射后小鼠表现、外周血白细胞计数、骨髓病理组织学、骨髓有核细胞数及骨髓微核率变化趋... 详细信息

目的探讨重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型的建立方法,为重度骨髓型急性放射病实验研究提供依据。方法通过6Gy60Coγ射线单次全身照射小鼠,观察照射后小鼠表现、外周血白细胞计数、骨髓病理组织学、骨髓有核细胞数及骨髓微核率变化趋势来鉴定重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型的建立情况。结果小鼠照后7 d内活动量有所减少,未发生死亡;体重照后第3天降到最低值,之后逐步上升;照后第3天白细胞降至最低值,为基础水平的14.3%,照后第28天恢复到照前的98%;骨髓病理组织片显示照后第3天骨髓组织被脂肪填充,照后第28天仍以脂肪填充为主;骨髓有核细胞数照后迅速降低,照后第3天达最低值,照后第28天仍未恢复;小鼠骨髓微核率在照后迅速攀升,照后14 d后与0Gy照射组无统计学差异。结论 6Gy60Coγ射线单次全身照射小鼠可建立重度骨髓型急性放射病小鼠动物模型。

关键词：重度骨髓型急性放射病 γ射线小鼠模型

富H2水对电离辐射所致认知功能损伤的保护作用

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中华放射医学与防护杂志 2018年第6期38卷 414-418,465页

作者：刘梦雅宋建波高洁袁慧王永丽王新钢岳娟秦秀军李建国闻建华中国辐射防护研究院药物毒理与放射损伤药物山西省重点实验室太原030006 山西大医院放疗科太原030032

目的探讨富H2水对电离辐射所致大鼠认知功能损伤的保护作用。方法将20只SD大鼠利用随机数表法分为对照组（C）、富H2水组（HRW）、单纯照射组（IR）和富H2水干预组（HRW＋IR）4个组，每组5只。通过Morris水迷宫对各组大鼠空间记忆能... 详细信息

目的探讨富H2水对电离辐射所致大鼠认知功能损伤的保护作用。方法将20只SD大鼠利用随机数表法分为对照组（C）、富H2水组（HRW）、单纯照射组（IR）和富H2水干预组（HRW＋IR）4个组，每组5只。通过Morris水迷宫对各组大鼠空间记忆能力进行检测；对超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）等氧化应激指标的变化进行检测；通过实时荧光定量PCR反应对凋亡相关基因表达情况进行研究。结果大鼠逃避潜伏期4组间差异有统计学意义（F=6.003，P〈0.05），4组间的平台象限游泳距离差异具有统计学意义（F=3.850，P〈0.05）。其中，与IR组相比，HRW＋IR组第3、4和5天的逃避潜伏期明显缩短（P〈0.05），原平台象限游泳距离显著延长（P〈0.05）。4组间的GSH、8-OHdG、MDA差异均具有统计学意义（F=6.450、5.033、4.113，P〈0.05），与IR组相比，脑组织中GSH浓度显著升高（P〈0.05），而MDA和8-OHdG浓度显著降低（P〈0.05）。PCR结果显示，与IR组相比，HRW＋IR组caspase-3、caspase-9基因表达水平均显著下降（t=2.956、3.087，P〈0.05），bcl-2基因表达水平显著升高（t=-3.640，P〈0.05），bax基因表达水平显著降低（t=5.246，P〈0.05）。结论富H2水可能通过中和氧羟自由基，减少电离辐射的氧化损伤作用，从而影响细胞凋亡过程进而对大脑产生保护作用。

关键词：富H2水电离辐射认知功能损伤辐射防护