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4株不同基因型新城疫病毒毒力测定及与商品疫苗株抗原性比较

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动物医学进展 2024年第2期45卷 16-21页

作者：黄青红华俊谢丽基谢芝勋曾婷婷李孟罗思思李丹谢志勤广西大学动物科学技术学院广西南宁530001 广西壮族自治区兽医研究所农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001

为了探究不同基因型和不同来源4株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)及现有商品疫苗株的抗原性差异,测定4株新城疫病毒的鸡胚最小致死量的平均死亡时间(mean death time,MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(intracerebral pathogen... 详细信息

为了探究不同基因型和不同来源4株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)及现有商品疫苗株的抗原性差异,测定4株新城疫病毒的鸡胚最小致死量的平均死亡时间(mean death time,MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(intracerebral pathogenicity index,ICPI),分别制备油乳苗,再与商品疫苗NDV La Sota株、A-Ⅶ株分别接种SPF鸡,收集单因子血清进行HI交叉试验和细胞交叉中和试验。结果显示,基因Ⅵ型NDV B27为中等毒力毒株,基因Ⅶ型NDV B9、基因Ⅸ型NDV B14、基因Ⅻ型NDV GX01为强毒株;HI交叉试验结果显示,基因Ⅵ型NDV B27和基因Ⅸ型NDV B14抗原同源性为0.64,抗原性差异微小,其他毒株之间的抗原同源性为0.69~0.99,抗原差异不大;细胞交叉中和试验结果显示,基因Ⅵ型NDV B27和基因Ⅸ型NDV B14抗原同源性为0.42,基因Ⅵ型NDV B27和基因Ⅱ型疫苗株La Sota抗原同源性为0.47,抗原差异较大,其余毒株及疫苗株La Sota之间抗原差异微小。试验结果可为后续筛选NDV疫苗候选株提供参考。

关键词：新城疫病毒基因型抗原性致病指数

纳米氧化石墨烯作为临床药物载体在肿瘤治疗中的研究

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中国药理学通报 2024年第8期40卷 1413-1418页

作者：钟春莲方昌建周桂羽朱慧玲郑镗庄婉晶刘剑卢余盛闽江学院材料与化学工程学院福建省智能药物闽台港澳科技合作基地闽江学院福州海洋研究院海洋药物研发中心福建福州350108 厦门大学生命科学学院分子病毒学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361102 福建中医药大学药学院结构药理学与中药化学生物学研究所福建福州350122

免疫治疗的出现开创了癌症治疗的新时代,但其临床疗效有限,其中一个主要原因是肿瘤局部药物浓度过低,不能有效激活机体的免疫反应。纳米材料因其独特的载药优势,逐渐应用于临床肿瘤治疗。纳米氧化石墨烯(nanographene oxide,NGO)是一种... 详细信息

免疫治疗的出现开创了癌症治疗的新时代,但其临床疗效有限,其中一个主要原因是肿瘤局部药物浓度过低,不能有效激活机体的免疫反应。纳米材料因其独特的载药优势,逐渐应用于临床肿瘤治疗。纳米氧化石墨烯(nanographene oxide,NGO)是一种新型二维纳米材料,具有巨大的载药界面,化学稳定性、生物相容性及高效的光热转换效率等。此外,功能化修饰可实现药物的靶向输送,减少药物的毒副作用,提高药物在肿瘤部位的富集浓度。该文概述了NGO在肿瘤药物装载、靶向输送及肿瘤光热治疗等方面的应用与挑战,有望为今后纳米氧化石墨烯应用于临床肿瘤治疗提供理论基础。

关键词：癌症治疗纳米氧化石墨烯药物装载靶向输送光热治疗联合治疗

柴金解郁安神片调控ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的机制研究

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中国中药杂志 2024年第9期49卷 2489-2500页

作者：刘检刘林唐林赵洪庆杨蕙李薇孟盼王宇红湖南中医药大学第一附属医院医学创新实验中心湖南长沙410007 抑郁类疾病中医药防治湖南省重点实验室湖南长沙410208 中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208 湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208

探讨柴金解郁安神片调控前扣带皮层(ACC)-腹侧海马(vHPC)谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的分子机制。首先运用化学遗传将谷氨酸能腺相关病毒(AAV)定位注射至大鼠ACC脑区,并通过慢性温和不可预知性应激(CUMS... 详细信息

探讨柴金解郁安神片调控前扣带皮层(ACC)-腹侧海马(vHPC)谷氨酸能神经环路异常改善抑郁症大鼠腹侧海马神经元突触重塑的分子机制。首先运用化学遗传将谷氨酸能腺相关病毒(AAV)定位注射至大鼠ACC脑区,并通过慢性温和不可预知性应激(CUMS)联合孤笼饲养复制大鼠抑郁模型,实验设正常组、模型组、AAV空载组、AAV病毒组、AAV病毒+糖皮质激素受体(GR)阻断剂组、AAV病毒+趋化因子受体1(CX3CR1)阻断剂组、AAV病毒+柴金解郁安神片组,采用水迷宫(Morris water maze)、旷场(open-field)和强迫游泳(forced-swimming)实验联合动物行为分析系统评估大鼠抑郁样行为;苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠ACC及vHPC脑区神经元形态结构变化;免疫荧光及核磷酸蛋白(c-Fos)检测大鼠ACC-vHPC谷氨酸能神经环路激活情况;高尔基染色和透射电镜检测大鼠vHPC神经元树突、树突棘及突触亚微结构变化;免疫荧光、Western blot分别检测大鼠vHPC谷氨酸能神经元细胞内突触重塑相关蛋白谷氨酸受体2A(GRIN2A)、谷氨酸受体2B(GRIN2B)、Ca^(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、丝裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶2(MK2)、丝切蛋白(cofilin)表达水平。结果表明,谷氨酸能AAV病毒激活后模型组大鼠抑郁样行为表型、ACC及vHPC神经元形态结构、突触超微结构损伤更加加重,而GR、CX3CR1阻断剂均能不同程度逆转其异常改变,提示ACC脑区内胶质细胞GR/CX3CR1双信号介导的ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常激活可能与抑郁的发生发展密切相关。有趣的是,柴金解郁安神片也能显著抑制AAV病毒诱导的ACC-vHPC神经环路激活及Glu含量异常升高,同时有效逆转模型组大鼠进一步加重的抑郁样行为和vHPC谷氨酸能神经元突触重塑,并揭示其改善腹侧海马神经元突触损伤的分子机制可能与调控突触重塑相关信号NR/CaMKⅡ、MK2/cofilin有关。综上,该文证实了柴金解郁安神片能有效调控ACC-vHPC谷氨酸能神经环路异常进而改善抑郁症大鼠腹侧海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制可能与调节突触相关NR/CaMKⅡ、MK2/cofilin信号通路有关,这可能是其发挥抗抑郁作用的重要机制。

关键词：柴金解郁安神片抑郁症 ACC-vHPC神经环路突触重塑 NR/CaMKⅡ MK2/cofilin

广西地区美国牛蛙源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定、耐药性及组织病理

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水产学报 2024年第5期48卷 118-130页

作者：肖双燕韦冬冬刘明珠黄静余庆蒙兰丽李鹏飞广西科学院广西海洋科学院广西水产生物技术与现代生态养殖重点实验室广西壮族自治区渔业重大疫病防控与高效健康养殖产业技术工程研究中心广西海洋科学院北部湾海洋产业研究院中国-东盟现代渔业产业技术转移示范中心田东县水产技术推广站

为了探明2022年5月在广西南宁某养殖基地引起美国牛蛙暴发疾病的原因，本实验从患病美国牛蛙的肝脏、脾脏、肾脏和肠道中分离出优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S r RNA基因序列测定及系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的... 详细信息

为了探明2022年5月在广西南宁某养殖基地引起美国牛蛙暴发疾病的原因，本实验从患病美国牛蛙的肝脏、脾脏、肾脏和肠道中分离出优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S r RNA基因序列测定及系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机理，对该菌株进行了人工感染实验、组织病理学观察、毒力基因检测、药物敏感性实验以及耐药基因检测。结果显示，在患病濒死美国牛蛙的肝脏、脾脏、肾脏以及肠道均分离到单一的优势菌株，从肠道分离得到的一株优势菌被命名为NFCF-02，并经鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。该菌株携带viaB、ompX、ureE、ureD、ureG和ureF等6种毒力基因，对美国牛蛙的半数致死浓度为3.12×10～6 CFU/mL，发病临床症状包括肝脏变黄、花肝、肝脏坏死；肾脏充血发红、胃表面有血丝以及肠道呈红色和充血。组织病理学观察发现，其肝细胞变性坏死，肝索排列紊乱；肾小管上皮细胞肿胀坏死、严重区域肾小管崩解、坏死；脾脏中央静脉扩张淤血，含铁血黄素、色素细胞增多；肠黏膜脱落，肠上皮细胞坏死脱落，杯状细胞坏死。药敏实验结果显示，分离菌株NFCF-02对新霉素、多黏菌素B、头孢拉定、多西环素等4种抗菌药物敏感，对林可霉素等14种抗菌药物已产生耐药性，携带gyrA、Sul1等7种耐药基因。研究表明，弗氏柠檬酸杆菌对美国牛蛙具有高致病性，可引起美国牛蛙肝脏和肠道等多器官组织的病理损伤，最终引发机体的损伤甚至死亡。本研究首次从组织病理学分析和毒力因子携带情况的角度确定了弗氏柠檬酸杆菌对美国牛蛙的致病力，为养殖美国牛蛙中弗氏柠檬酸杆菌病的诊断和药物防控提供了参考依据。

关键词：美国牛蛙弗氏柠檬酸杆菌分离鉴定组织病理分析毒力因子耐药性

鸡圆圈病毒3型可视化LAMP检测方法的建立及应用

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河南农业科学 2024年第4期53卷 128-136页

作者：张民秀谢芝勋张艳芳谢志勤谢丽基李孟罗思思曾婷婷王粲广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室/农业农村部中国(广西)—东盟跨境动物疫病防控重点实验室广西南宁530001

建立鸡圆圈病毒3型(GyV3)可视化环介导等温扩增(LAMP)检测方法,为临床上快速检测鸡GyV3提供一种诊断方法。参考GyV3的VP3基因序列,设计1套LAMP特异性引物,分别通过温度优化、引物浓度优化和反应时间的优化,确定鸡GyV3可视化LAMP诊断方... 详细信息

建立鸡圆圈病毒3型(GyV3)可视化环介导等温扩增(LAMP)检测方法,为临床上快速检测鸡GyV3提供一种诊断方法。参考GyV3的VP3基因序列,设计1套LAMP特异性引物,分别通过温度优化、引物浓度优化和反应时间的优化,确定鸡GyV3可视化LAMP诊断方法的扩增温度、引物浓度和反应时间,通过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测,验证鸡GyV3可视化LAMP诊断方法的特异性、敏感性、稳定性和可靠性。结果显示,鸡GyV3 LAMP检测方法的反应体系:总体积为20.0μL,包括DNA模板1.0μL,2×Master Mix 10.0μL,内引物GyV3-FIP和GyV3-BIP混合液(工作浓度16.0μmol/L)2.0μL,外引物GyV3-F3和GyV3-B3混合液(工作浓度2.0μmol/L)2.0μL,环引物GyV3-LF和GyV3-LB混合液(工作浓度8.0μmol/L)2.0μL,ddH_(2)O 3μL;鸡GyV3 LAMP检测方法的扩增程序:66℃反应20 min,80℃灭活5 min。鸡GyV3可视化LAMP检测方法能特异性检测GyV3,最低检测浓度为10^(1)拷贝/μL,组内和组间变异系数小于5%;与常规PCR方法检测临床样品的结果比较,两者结果符合率达100%。建立的鸡GyV3可视化LAMP检测方法能特异性检测GyV3,具有特异性好、敏感性高及污染小等优点,且检测结果可通过肉眼观察进行判断,适用于GyV3的临床快速筛查。

关键词：鸡圆圈病毒3型(GyV3) 可视化LAMP 特异性引物诊断方法敏感性

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基于核酸适体的高通量模型筛选抗大口黑鲈虹彩病毒药物

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广东海洋大学学报 2024年第3期44卷 9-16页

作者：张帅帅刘明珠黄静师德强陈嘉柯珂竺利波韦云依牟容丽陆兰天杨辉余庆李鹏飞广西大学资源环境与材料学院广西南宁530000 广西科学院广西海洋科学院广西水产生物技术与现代生态养殖重点实验室广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖产业技术工程研究中心广西南宁530007 南宁学院食品与质量工程学院广西南宁530200 中国-东盟现代渔业产业技术转移示范中心北部湾海洋产业研究院广西南宁530007

【目的】利用可特异性识别大口黑鲈(Micropterus salmoides)虹彩病毒(Largemouth bass virus,LMBV)的核酸适体LBVA1建立药物高通量筛选技术(Aptamer LBVA1-based high-throughput screening,LBVA1-AHTS),以快速筛选有效抗LMBV药物。【方法】用探针FAM-LBVA1检测感染不同浓度[感染复数(MOI)分别为0、0.05、0.10、0.20]LMBV 48 h,以及感染LMBV 0、6、12、24和48 h的胖头鱥(Pimephales promelas)肌肉细胞(Fathead minnow cells,FHM)荧光值,并用激光共聚焦及荧光定量PCR(RT-qPCR)验证LMBV感染情况;将利巴韦林、阿昔洛韦、加巴喷丁、茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯等9种药物分别以安全工作浓度与LMBV混匀,加入FHM细胞共孵育,运用探针FAM-LBVA1及RT-qPCR技术检测各组LMBV感染情况,比较两种方法检测的药物抗LMBV感染效果,筛选出有效抗LMBV药物。【结果】探针FAM-LBVA1检测及RT-qPCR技术验证结果均表明,在感染复数(MOI)为0.20、感染时间为48 h时,对LMBV感染的检测效果最佳。9种药物抗LMBV效果筛选结果表明,LBVA1-AHTS技术与RT-qPCR技术两种筛药方法筛选出利巴韦林、加巴喷丁、金刚烷胺、卡马西平、茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯7种药物的抗病毒效果一致,其中茶多酚、表没食子儿茶素没食子酸酯和表儿茶素没食子酸酯3种药物具有抗LMBV的效果,其余4种药物无明显抗病毒效果,两种方法一致率近80%。【结论】建立的LBVA1-AHTS模型可快速、准确、高效筛选出抗LMBV病毒药物,为快速筛选抗病毒药物提供理论和技术基础。

关键词：大口黑鲈虹彩病毒核酸适体高通量筛选抗病毒药物

肉桂醇提物对大口黑鲈虹彩病毒的体外抗病毒作用

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广东海洋大学学报 2024年第3期44卷 17-24页

作者：廖文钰竺利波刘明珠余庆玉洁莹陈嘉韦云依黄吉利黄琳李鹏飞广西科学院广西海洋科学院/广西水产生物技术与现代生态养殖重点实验室/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖产业技术工程研究中心广西南宁530007 北部湾大学海洋学院广西钦州535011 南宁学院食品与质量工程学院广西南宁530200 北部湾海洋产业研究院/中国-东盟现代渔业产业技术转移示范中心广西南宁530007

【目的】探究肉桂醇提物在大口黑鲈(Micropterus salmoides)虹彩病毒(LMBV)感染中的抗病毒效果及作用机制,为开发抗LMBV药物提供参考。【方法】采用CCK-8试剂盒检测、结晶紫染色观察、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测、病毒滴度[半数组织... 详细信息

【目的】探究肉桂醇提物在大口黑鲈(Micropterus salmoides)虹彩病毒(LMBV)感染中的抗病毒效果及作用机制,为开发抗LMBV药物提供参考。【方法】采用CCK-8试剂盒检测、结晶紫染色观察、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测、病毒滴度[半数组织培养感染剂量(TCID50)]测定等方法确定肉桂醇提物在胖头鱥肌肉细胞系(FHM)上的安全工作浓度,评估肉桂醇提物在细胞水平对LMBV的抗病毒效果,分析其抗LMBV机制。【结果】肉桂醇提物在≤12.5μg/mL的质量浓度范围内对FHM细胞无明显毒性。FHM细胞与LMBV以及质量浓度分别为12.5、6.25、3.125μg/mL肉桂醇提物共孵育后,细胞病变明显减少,结晶紫染色后可见活细胞数明显升高,MCP、ICP46基因的表达量显著降低(P抗病毒效果有剂量依赖性。12.5μg/mL肉桂醇提物与LMBV共孵育后接入FHM细胞,细胞中MCP、ICP46基因的相对表达量以及TCID_(50)极显著下降(P药物候选者。

关键词：大口黑鲈虹彩病毒肉桂抗病毒作用渔用药物

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HIV潜伏感染细胞模型的研究进展及应用

中国免疫学杂志 2024年

作者：马润红桑锋杨瑶瑶李杰刘真邓博文徐梦丽袁硕阳张清燕李强河南中医药大学第一附属医院河南中医药大学药学院河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室

获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome， AIDS）在进行了抗逆转录病毒疗法时仍无法彻底根治，其原因是HIV-1可在体内反复建立感染并形成稳定的潜伏储存库。HIV潜伏储存库具有隐匿性、半衰期长等特性，在HIV感染... 详细信息

获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome， AIDS）在进行了抗逆转录病毒疗法时仍无法彻底根治，其原因是HIV-1可在体内反复建立感染并形成稳定的潜伏储存库。HIV潜伏储存库具有隐匿性、半衰期长等特性，在HIV感染人体后形成并在体内长期存在，是当前AIDS研究中的难点和热点。其中，HIV-1潜伏感染细胞模型的建立与应用是研究HIV潜伏储存库的良好工具。本文旨在梳理和总结近年来CD4+ T细胞潜伏感染细胞模型、巨噬细胞潜伏感染细胞模型、树突状细胞潜伏感染细胞模型、造血祖细胞潜伏感染细胞模型和星形胶质细胞潜伏感染细胞模型等及其应用研究进展，为探究HIV潜伏储存库的清除机制及研究艾滋病功能性治愈药物提供有效的工具参考和理论依据。

关键词：潜伏储存库细胞模型潜伏机制药物研发

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蔓荆的化学成分研究

中草药 2007年第5期38卷 656-659页

作者：顾琼张雪梅江志勇陈纪军周俊中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室中国科学院西南基地抗病毒天然药物联合实验室云南昆明650204

目的研究蔓荆Vitextrifolia果实的化学成分。方法蔓荆干燥果实用95%乙醇提取,采用硅胶、Sephadex LH-20、Rp-8、Rp-18柱色谱进行分离纯化,通过波谱分析(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定其结构。结果从蔓荆中分离得到15个化合物,其中6个二萜、... 详细信息

目的研究蔓荆Vitextrifolia果实的化学成分。方法蔓荆干燥果实用95%乙醇提取,采用硅胶、Sephadex LH-20、Rp-8、Rp-18柱色谱进行分离纯化,通过波谱分析(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定其结构。结果从蔓荆中分离得到15个化合物,其中6个二萜、2个倍半萜、1个环烯醚萜苷、1个芳香酸、1个蒽酯、1个黄酮、1个木质素和2个甾体,分别鉴定为:vitexilactone(Ⅰ)、previtexilactone(Ⅱ)、abietatriene-3β-ol(Ⅲ)、vitexlactamA(Ⅳ)、vitedoinB(Ⅴ)、vitetrifolinD(Ⅵ)、spathulenol(Ⅶ)、ent-4α,10β-dihydroxyaromadendrane(Ⅷ)、agnuside(Ⅸ)、大黄素甲醚(Ⅹ)、紫花牡荆素(Ⅺ)、对羟基苯甲酸(ⅩⅡ)、paulownin(ⅩⅢ)、过氧麦角甾醇(ⅩⅣ)、β-谷甾醇(ⅩⅤ)。结论除化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅸ、Ⅺ、ⅩⅡ、ⅩⅣ外,其他8个化合物均为首次从该植物中分离得到。

关键词：蔓荆二萜木质素倍半萜环烯醚萜苷