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Tamdy病毒糖蛋白基因的重组表达及抗体制备

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病毒学报 2023年第1期39卷 13-20页

作者：刘利平沈姝刘希佳张敏王岚何明宇孙素荣张渝疆丁军涛新疆大学、生命科学与技术学院、新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046 中国科学院、武汉病毒研究所、病毒学国家重点实验室武汉430071 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心乌鲁木齐830002

原核表达Tamdy病毒(Tamdy virus,TAMV)糖蛋白Gn和Gc,分别制备兔抗融合蛋白Gn和Gc多克隆抗体。利用RT-PCR扩增Gn和Gc基因片段,分别构建原核表达质粒pET-28a-Gn和pET-32a-Gc,并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达,镍柱亲和层析纯化融合蛋白Gn... 详细信息

原核表达Tamdy病毒(Tamdy virus,TAMV)糖蛋白Gn和Gc,分别制备兔抗融合蛋白Gn和Gc多克隆抗体。利用RT-PCR扩增Gn和Gc基因片段,分别构建原核表达质粒pET-28a-Gn和pET-32a-Gc,并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达,镍柱亲和层析纯化融合蛋白Gn和Gc之后,以皮下注射方式分别免疫新西兰兔,制备兔抗融合蛋白Gn和Gc多克隆抗体。经Western Blotting和间接免疫荧光(IFA)鉴定多克隆抗体抗原识别能力,ELISA法测定抗体效价。结果显示,pET-28a-Gn、pET-32a-Gc原核表达质粒构建正确,融合蛋白Gn和Gc大小分别约为45 kD、74 kD,制备的兔抗融合蛋白Gn和Gc多克隆抗体能够分别识别原核表达的融合蛋白Gn和Gc和真核表达产物,效价分别为1∶409 600、1∶204 800。制备的多克隆抗体效价高,能够特异性识别原核系统和真核系统表达的TAMV糖蛋白,为TAMV的流行学分析提供基础。

关键词： Tamdy病毒糖蛋白原核表达真核表达蛋白纯化多克隆抗体

带锈涂装水性植酸富锌涂层的制备及其耐蚀性能

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中国表面工程 2022年第6期35卷 183-196页

作者：金义杰詹胜鹏贾丹章武林杨田马利欣段海涛武汉材料保护研究所特种表面保护材料及应用技术国家重点实验室武汉430030

带锈涂装涂料在海洋船舶和电力设备领域有着迫切应用需求,而溶剂型带锈涂料难满足绿色环保的要求,水性带锈耐蚀涂料的开发迫在眉睫。通过片状锌粉和植酸的协同作用成功研制一种应用于带锈钢基材表面的环保型水性植酸富锌涂层,采用附着... 详细信息

带锈涂装涂料在海洋船舶和电力设备领域有着迫切应用需求,而溶剂型带锈涂料难满足绿色环保的要求,水性带锈耐蚀涂料的开发迫在眉睫。通过片状锌粉和植酸的协同作用成功研制一种应用于带锈钢基材表面的环保型水性植酸富锌涂层,采用附着力拉开法、中性盐雾试验、电化学测试检测附着力与耐蚀性能,利用傅里叶红外光谱仪(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、X射线光电子能谱(XPS)对腐蚀后涂层表面锈层进行分析,并讨论涂层的防锈转锈机理。结果显示:环氧乳液和固化剂配比为4:1,片状锌粉含量为40%,以植酸为转锈剂时,该涂层对带锈钢基材表现出突出的附着力(11.8MPa)及优异的耐蚀性能。该涂层优势在于:片状锌粉致密堆积延长了腐蚀粒子入侵通道,为基材提供物理屏蔽效果;片状锌粉和钢基材形成若干微电池区,为基材提供牺牲阳极的阴极保护作用;植酸与铁锈形成稳固的植酸铁螯合物,转化锈层进一步保护基材。

关键词：水性涂料带锈涂装片状锌粉植酸转锈剂

高浓度酶快速胶内酶解技术用于磷酸化蛋白质组学分析

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分析化学 2015年第10期43卷 1452-1458页

作者：刘芳洁叶明亮潘彦博邹汉法中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室中国科学院研究生院

聚丙烯酰胺凝胶电泳是一项高效的蛋白质分离技术,通过与质谱技术联用,可以鉴定成千上万的蛋白质点。但是,复杂繁琐的操作流程限制了它在蛋白质组学研究方面的广泛应用。本研究表明,高浓度的胰蛋白酶并不会影响胶内酶解后磷酸化肽段的富... 详细信息

聚丙烯酰胺凝胶电泳是一项高效的蛋白质分离技术,通过与质谱技术联用,可以鉴定成千上万的蛋白质点。但是,复杂繁琐的操作流程限制了它在蛋白质组学研究方面的广泛应用。本研究表明,高浓度的胰蛋白酶并不会影响胶内酶解后磷酸化肽段的富集,反而可以实现快速高效的蛋白酶解,据此建立了一种快捷、高效的蛋白质酶解方法。首先,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,对50μg复杂蛋白样品进行分离,分成5个组分;然后,选择高浓度胰蛋白酶酶解30 min;最后,运用固定钛离子亲和色谱小柱离心法富集磷酸化肽段。经液相色谱-串联质谱分析,成功鉴定到约2000个磷酸化位点,而传统方法则只鉴定到不足1500个位点。实验表明,在高浓度胰蛋白酶的促进作用下,胶内酶解过程在0.5 h内即可以完成,并且得到比对照组更高的磷酸化位点的鉴定量和更低的酶解漏切率,而传统方法需要16 h。这也证实了本方法不仅可以加速酶解反应,同时还能提高蛋白酶解效率。

关键词：高浓度酶胶内酶解磷酸化蛋白质组学

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中国激光 2024年第11期 9-10+2页

作者：陈卫标李学春冷雨欣邵宇川吉亮亮王俊中国科学院上海光学精密机械研究所中国光学工程学会中国光学学会环境光学委员会强场激光物理国家重点实验室超强激光科学与技术全国重点实验室(中国科学院)主任 Chinese Optics Letters 高功率激光元件技术与工程部

2024年是中国科学院上海光学精密机械研究所建所60周年，值此之际，我们联合《中国激光》策划出版“中国科学院上海光学精密机械研究所建所60周年”纪念专辑，旨在全面介绍我所在光学及激光领域中的最新研究成果。中国科学院上海光学精...

2024年是中国科学院上海光学精密机械研究所建所60周年，值此之际，我们联合《中国激光》策划出版“中国科学院上海光学精密机械研究所建所60周年”纪念专辑，旨在全面介绍我所在光学及激光领域中的最新研究成果。中国科学院上海光学精密机械研究所始建于1964年。在毛泽东主席“死光，要组织一批人专门去研究它。要有一小批人吃了饭不做别的事，专门研究它”的指示下，来自北京、长春两地的科技人员，以及上海长江光学仪器厂和竞明仪器厂的技术人员，共同组建了中国规模最大的激光科学技术专业研究所，时为中国科学院光学精密机械研究所上海分所。1970年更名为中国科学院上海光学精密机械研究所，简称上海光机所。上海光机所为推动我国激光科学与技术的发展作出了重要贡献，已成功培养了多位杰出专家，其中9位专家当选为中国科学院、中国工程院院士，1位专家当选中国科学院外籍院士。六十年来，上海光机所作为国家战略科技力量主力军，始终心系“国家事”，肩扛“国家责”，围绕国家重大需求，在超强激光科学与聚变新体系、空天激光信息网络技术与系统，及自主可控光学核

关键词：

X射线对我国两种典型土壤中微生物活性及群落结构的影响

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微生物学报 2016年第1期56卷 101-109页

作者：俎千惠房焕周虎张建伟彭新华林先贵冯有智中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室江苏南京210008 中国科学院大学研究生院北京100049

【目的】X射线断层扫描技术(X-ray micro-Computed Tomography,micro-CT)能够原位、无损伤的解析土壤物理结构,有望与土壤微生物研究结合,以有助于更好的了解土壤生态系统。由于土壤的高度异质性,X射线扫描和土壤微生物分析应为同一样品... 详细信息

【目的】X射线断层扫描技术(X-ray micro-Computed Tomography,micro-CT)能够原位、无损伤的解析土壤物理结构,有望与土壤微生物研究结合,以有助于更好的了解土壤生态系统。由于土壤的高度异质性,X射线扫描和土壤微生物分析应为同一样品,但是关于X射线扫描后的土壤样品是否兼容土壤微生物分析却鲜有报道,即X射线扫描是否影响土壤微生物的活性及群落尚未明确。【方法】本研究采集我国华北地区潮土和亚热带红壤,利用平板计数、微量热技术和高通量测序技术研究了X射线扫描对可培养微生物数量、土壤微生物的代谢热和群落结构的影响。【结果】X射线辐射显著降低了2种土壤中活体细菌的数量,同时微生物的代谢活性也发生改变;在分子水平上,基于细菌16S r RNA基因的高通量数据显示2种土壤的细菌多样性指数发生了变化,而其群落结构均无改变。【结论】X射线断层扫描技术并不兼容土壤微生物功能的研究;但可兼容基于分子生物学的微生物群落结构分析。

关键词： X射线断层扫描土壤微生物微量热高通量测序

高频三电平低调制比区窄脉冲抑制混合调制策略

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电机与控制学报 2021年第12期25卷 116-126页

作者：李文善温旭辉张剑王又珑中国科学院大学电子电气与通信工程学院北京100049 中国科学院电工研究所北京100190 齐鲁中科电工先进电磁驱动技术研究院济南250100 中国科学院电力电子和电气驱动重点实验室北京100190

针对高频三电平变流器运行于低调制比区存在窄脉冲问题,提出开关序列空间平面限制区的概念,并设计一种混合调制策略。建立了基本矢量作用时间和功率器件开关时间的差值函数,在空间矢量平面内分析了该差值函数的图像。以此为依据分析了... 详细信息

针对高频三电平变流器运行于低调制比区存在窄脉冲问题,提出开关序列空间平面限制区的概念,并设计一种混合调制策略。建立了基本矢量作用时间和功率器件开关时间的差值函数,在空间矢量平面内分析了该差值函数的图像。以此为依据分析了三电平虚拟空间矢量调制产生窄脉冲的区域,提出差值函数值小于零的区域为基本电压矢量序列的限制区,在限制区内无法实现传统虚拟空间矢量所需的基本电压矢量序列。通过限制区面积大小评估调制策略与开关频率的关系,给出不同调制策略下最高开关频率的选定方法。并给出低调制比区新型扇区划分方法,设计混合调制策略。利用三电平基本矢量的冗余性,在不同的区域设计电压矢量序列,进而实现窄脉冲的抑制。仿真及实验结果均验证了其有效性。

关键词：三电平虚拟空间矢量调制混合调制低调制比区窄脉冲基本电压矢量序列

Ka波段带状注相对论扩展互作用速调管放大器的分析与设计

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物理学报 2015年第10期64卷 385-393页

作者：刘振帮赵欲聪黄华金晓雷禄容 f中国工程物理研究院应用电子学研究所、高功率微波技术重点实验室绵阳621900

带状注相对论扩展互作用速调管放大器是一种高功率、高频率的微波毫米波放大型器件,具有广阔的应用前景.本文分析了扩展互作用结构多间隙谐振腔的渡越时间效应,推导了2π模场情况下谐振腔的能量交换系数和电子负载电导,且通过计算表明... 详细信息

带状注相对论扩展互作用速调管放大器是一种高功率、高频率的微波毫米波放大型器件,具有广阔的应用前景.本文分析了扩展互作用结构多间隙谐振腔的渡越时间效应,推导了2π模场情况下谐振腔的能量交换系数和电子负载电导,且通过计算表明工作在2π模式三间隙腔的电子负载电导是单间隙腔的9倍左右,多间隙结构有利于提高器件效率.利用三维粒子仿真软件,对工作在Ka波段的带状注相对论扩展互作用速调管放大器进行了模拟研究,采用宽高比为30:1的带状电子束以降低空间电荷效应,在电子束电压为500 kV,束流为1 k A,轴向引导磁感应强度为0.8 T的情况下,器件输出微波功率为190 MW,频率为40 GHz,器件效率为38%,器件增益为69 d B.

关键词： Ka波段带状电子束扩展互作用速调管束波互作用

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紫外焦平面探测器读出电路抗辐照加固设计

半导体光电 2018年第4期39卷 502-505,510页

作者：马丁乔辉刘福浩张燕李向阳中国科学院上海技术物理研究所传感技术国家重点实验室上海200083 中国科学院上海技术物理研究所红外成像材料与器件重点实验室上海200083 中国科学院大学研究生院北京215123

分析了MOS器件的辐照特性及辐照失效机理。基于Global Foundries 0.35μm CMOS工艺,设计了一款320×256抗辐照加固紫外焦平面读出电路。该电路数字部分MOS管采用环形栅和双环保护进行加固,并在读出电路表面交替生长了SiO2-Si3N4复合钝... 详细信息

分析了MOS器件的辐照特性及辐照失效机理。基于Global Foundries 0.35μm CMOS工艺,设计了一款320×256抗辐照加固紫外焦平面读出电路。该电路数字部分MOS管采用环形栅和双环保护进行加固,并在读出电路表面交替生长了SiO2-Si3N4复合钝化层。对加固后的读出电路进行了γ辐照试验,并使用示波器实时监测读出电路的输出状态。对比加固前后的读出电路实时辐照状态表明,加固后的读出电路抗辐照性能得到了明显提高,其抗电离辐照总剂量由35krad(Si)提升至50krad(Si)。

关键词：紫外焦平面读出电路抗辐照电离辐照

生物催化不对称还原制备(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇研究进展

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应用与环境生物学报 2020年第4期26卷 820-826页

作者：刘艳裴小琼崔璨丁照云吴中柳中国科学院成都生物研究所中国科学院环境与应用微生物重点实验室环境微生物四川省重点实验室成都610041 中国科学院大学北京100049

(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇是合成药物阿瑞匹坦的关键中间体.以羰基还原酶生物催化前手性酮3,5-二(三氟甲基)苯乙酮的方法制备该中间体具有立体选择性优异、反应条件温和、对环境友好等优点,近年来受到广泛关注,目前已报道的高... 详细信息

(R)-1-[3,5-二(三氟甲基)苯基]乙醇是合成药物阿瑞匹坦的关键中间体.以羰基还原酶生物催化前手性酮3,5-二(三氟甲基)苯乙酮的方法制备该中间体具有立体选择性优异、反应条件温和、对环境友好等优点,近年来受到广泛关注,目前已报道的高立体选择性酶源(产物ee>99%)有10余种.其中原始菌株生物催化体系能够转化底物的浓度普遍低于200 mmol/L,而利用重组Escherichia coli全细胞或者粗酶液则可催化1 mol/L以上的底物.通过添加离子液体、深共熔溶剂等辅溶剂,羰基还原酶与葡萄糖脱氢酶融合表达以及酶固定化技术等方法优化反应体系可以有效提高底物转化效率.有些羰基还原酶,如LXCAR、KR01、Ch KRED20等,能够催化异丙醇脱氢实现辅酶自循环,其催化体系具有明显优势.未来利用蛋白质工程技术对野生型的潜力酶进行人工进化,可以进一步提高利于工业应用的酶学性能,同时稳定的生产工艺、规模放大、后处理等方面也需要深入开展研究.(图2表3参52)

关键词：羰基还原酶酮还原酶阿瑞匹坦反-Prelog规则手性醇定向进化