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第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会

作者：刘岳龙金文杰吉荣叶建强秦爱建崔治中段玉友扬州大学牧医学院

鸡贫血病毒(CAV)的感染已广泛存在,它主要引起感染雏鸡的直接死亡和感染成鸡强烈的免疫抑制。CAV及早诊断是控制该痛的首要工作。CAV编码三个蛋白,即VPl(衣壳蛋白)、VP2、和VP3(细胞凋亡素,apoptin),VPl是CAV主要结构蛋白(50KDa)。在前... 详细信息

鸡贫血病毒(CAV)的感染已广泛存在,它主要引起感染雏鸡的直接死亡和感染成鸡强烈的免疫抑制。CAV及早诊断是控制该痛的首要工作。CAV编码三个蛋白,即VPl(衣壳蛋白)、VP2、和VP3(细胞凋亡素,apoptin),VPl是CAV主要结构蛋白(50KDa)。在前期研究中,本研究组在大肠杆茵内以融合蛋白的形式,表达了CAV的VPl的95％编码区、完整的VP2和细胞凋亡素(Apoptin或VP3),尤其VPl的高效表达(融合蛋白占宿主细菌总蛋白的25.2％),并用VPl融合蛋白强化免疫小鼠制备了抗CAV VPl蛋白的多克隆抗血清。在此基础上,本实验利用鼠源抗VPl多抗血清对CAV感染细胞建立了间接免疫荧光检测法(IFA),并以所建立的方法对CAV田间病料进行了临床检测应用。(1)间接免疫荧光(IFA)检测:由于MSBl细胞是悬浮培养细胞,因此用悬浮细胞法做IFA试验,步骤如下:将CAV CUX—l病毒感染36—48hr的MSBl细胞低速离心弃上清;加PBS悬浮后再离心,细胞沉淀重悬浮于适量PBS中,分装50弘l(约1×10‘个细胞)/每个指型管;每管加入50pl 1:100稀释的鼠源多抗血清(为第一抗体),37℃水浴30min;以上述离心法洗涤后重悬浮;向每管中加入50/Jl商品化FITC标记的羊抗鼠IgG的抗体(1 t 2000稀释,为第二抗体),置37。C水浴30min;再用PBS离心法洗涤,重悬浮于50ptlPBS液中;滴加细胞于洁净的玻片上,以盖玻片轻轻覆盖,在倒置荧光显微镜下观察结果并摄像。检测结果中病毒感染细胞为绿色荧光阳性,而同步所做的小鼠阴性血清对CAV感染的MSBl细胞的反应组则为阴性。(2)IFA在临床检测中的应用:以抗VPl的鼠源多抗血清和上述所建立的悬浮细胞IFA方法对来源于江苏扬州(YZ9903)、海安(HA9805)、山东济宁(JN0007)、吉林(JI。0010)、云南昆明(KM9801)的CAV临床病料作实验室诊断,具体如下:将田间病料(鸡肝)用PBS(1:5,v/v)匀浆化并无茵化处理后,以1:10(v/v)的比例接种MsBl细胞培养液,48hr后取感染细胞进行IFA检测。同步提取感染细胞总DNA作为模板做CAV病毒核酸VP3基因(O.35kb片段)PCR检测。(以1日龄SPF鸡组织匀浆物感染的MSBl细胞为PCR阴性对照。)5个CAV田间病料在MSBl细胞的感染物,用上述抗VPl多抗血清和所建立的悬浮细胞IFA方法检测,结果为绿色荧光阳性,再对VP3基因O.35kb片段做PCR重复验证,也都为阳性,而SPF鸡对照组则为阴性。

关键词：鸡贫血病毒(CAV) VP1蛋白多克隆血清间接免疫荧光法(IFA)

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肉鸭养殖生产中病死尸体无害化处理技术探讨

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中国动物保健 2020年第6期22卷 66-67页

作者：李义宋之波髙凤如石颖颖张兴国刘建胜山东畜牧兽医职业学院山东潍坊261061

近年来,随着畜牧业和畜禽规模化养殖迅速发展,养殖废弃物对农村环境造成的影响越来越大,除畜禽粪便污染问题成为制约畜牧业发展的影响因素外,病死动物如何有效治理问题日益受到社会关注。本文就肉鸭养殖生产中病死尸体进行高温生物降解... 详细信息

近年来,随着畜牧业和畜禽规模化养殖迅速发展,养殖废弃物对农村环境造成的影响越来越大,除畜禽粪便污染问题成为制约畜牧业发展的影响因素外,病死动物如何有效治理问题日益受到社会关注。本文就肉鸭养殖生产中病死尸体进行高温生物降解处理技术作以介绍,以期对现代规模化养殖以及清洁化生产的发展具有一定意义。

关键词：肉鸭养殖病死尸体无害化

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双链RNA介导的植物抗病毒性

双链RNA介导的植物抗病毒性

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第三次全国植物病毒和病毒防治学术研讨会

作者：赵明敏安德荣西北农林科技大学植物保护学院

源于植物病毒的基因序列已被导入到多种植物中,用于产生抗病毒的转基因植物。大量研究表明,这种抗病毒机制是一个转录后发生的RNA介导的过程,是一种病毒RNA和转基因的mRNA序列特异性降解行为。近年来的研究发现,PTGS的机制类似于动物中...

源于植物病毒的基因序列已被导入到多种植物中,用于产生抗病毒的转基因植物。大量研究表明,这种抗病毒机制是一个转录后发生的RNA介导的过程,是一种病毒RNA和转基因的mRNA序列特异性降解行为。近年来的研究发现,PTGS的机制类似于动物中的RNA干扰(RNA interfer-ence,RNAi)。这种RNAi是双链RNA介导的RNA特异性降解过程,是生物体在进化过程中发展出的一种非常古老的抵抗外来基因(病毒、转座子等)入侵的防御方式。

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银翘天甘对猪链球菌Ⅱ型病理模型的防治试验

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中国农学通报 2012年第29期28卷 44-48页

作者：蒋红王宏军周铁忠张利勃刘锴张爽辽宁医学院辽宁锦州121001 内蒙古民族大学内蒙古通辽028000

为观察银翘天甘中药制剂体内抗猪链球菌病的效果。用猪链球菌Ⅱ型对18～22g昆明鼠攻毒并开展预防和治疗实验。预防试验是用猪链球菌Ⅱ型对18～22g昆明鼠攻毒同时口服银翘天甘中药制剂0.5、1.0、2.0g/mL,1次/d,连用3天,观察7天后的动物... 详细信息

为观察银翘天甘中药制剂体内抗猪链球菌病的效果。用猪链球菌Ⅱ型对18～22g昆明鼠攻毒并开展预防和治疗实验。预防试验是用猪链球菌Ⅱ型对18～22g昆明鼠攻毒同时口服银翘天甘中药制剂0.5、1.0、2.0g/mL,1次/d,连用3天,观察7天后的动物发病率、死亡率和保护率;治疗试验是先用猪链球菌Ⅱ型攻毒并建立昆明鼠疾病模型后口服上述药物,2次/d,连用3天,观察7天后的动物死亡率、治愈率和有效率。预防试验结果表明:银翘天甘中药制剂组实验动物死亡率均极显著低于感染对照组(P实验动物发病率均极显著低于感染对照组(P昆明鼠死亡率极显著低于阴性对照组(P0.05)。由此表明,口服低剂量银翘天甘中药制剂能够在昆明鼠猪链球菌病理模型上发挥预防和治疗作用。

关键词：银翘天甘猪链球菌Ⅱ型病理模型昆明鼠

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钙激活中性蛋白酶-1在小鼠肝衰竭的表达及意义

钙激活中性蛋白酶-1在小鼠肝衰竭的表达及意义

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第四届中国医师协会感染科医师大会暨传染病诊治高峰论坛、浙江省医学会肝病、感染病学学术年会

作者：李凤竹杨宝山海阳市人民医院感染科哈尔滨医科大学附属第二临床医学院感染科

目的本研究以脂多糖/D-氨基半乳糖(Lps/D-Gal)诱导暴发性肝衰竭的动物模型,通过检测不同时点钙激活中性蛋白酶-1、Caspase-3及细胞色素C的表达,探讨钙激活中性蛋白酶-1在急性肝衰竭参与凋亡过程的机制,以及其抑制剂对肝衰竭的保护作用... 详细信息

目的本研究以脂多糖/D-氨基半乳糖(Lps/D-Gal)诱导暴发性肝衰竭的动物模型,通过检测不同时点钙激活中性蛋白酶-1、Caspase-3及细胞色素C的表达,探讨钙激活中性蛋白酶-1在急性肝衰竭参与凋亡过程的机制,以及其抑制剂对肝衰竭的保护作用。材料和方法雄性昆明种小鼠分为正常组和模型组和保护组,给予脂多糖(50ug/kg)和D-氨基半乳糖(800mg/kg)及钙激活中性蛋白酶-1抑制剂(10mg/kg)建造模型。采用HE和RT-PCR法进行检测,并采眼球血送检化验室检测血清谷丙转氨酶(ALT)总胆红素(TBIL)白蛋白(ALB)数值,观察各组生化指标的变化。结果病理学检查模型组6小时肝细胞明显水肿疏松,可见小坏死灶,凋亡细胞明显增多。8小时坏死灶明显增多,凋亡细胞减少。肝血窦内淤血,汇管区有大量的中性粒细胞浸润;血清生化指标:模型组的肝功改变明显异常,而保护组的肝功较模型组数值变化减低,二者改变情况比较有统计学意义(P学比较有显著性差异(p<0.05)。结论钙激活中性蛋白酶-1在小鼠急性肝衰竭肝组织中的表达是增加的。钙激活中性蛋白酶-1抑制剂能减少内毒素肝损伤小鼠肝细胞凋亡,下调钙激活中性蛋白酶-1、Caspase-3及细胞色素C的表达,提示其可能通过抑制肝细胞凋亡,在急性肝衰竭中起到了保护作用。

关键词：钙激活中性蛋白酶抑制剂氨基半乳糖肝衰竭模型组

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