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双氢睾酮对小鼠毛囊外根鞘体外培养再生的影响

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中国皮肤性病学杂志 2024年第3期38卷 253-259页

作者：张程周航震张金佩李捷李树伟塔里木大学生命科学与技术学院塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室新疆阿拉尔843300

目的筛选小鼠触须毛囊外根鞘(ORS)在体外培养再生的最适双氢睾酮(DHT)浓度,通过检测Dermo-1、CD11b探索其对毛囊外根鞘再生的影响。方法利用冰冻切片技术HE染色观察毛囊外根鞘在不同DHT浓度培养条件下的再生程度,利用免疫荧光技术鉴定De... 详细信息

目的筛选小鼠触须毛囊外根鞘(ORS)在体外培养再生的最适双氢睾酮(DHT)浓度,通过检测Dermo-1、CD11b探索其对毛囊外根鞘再生的影响。方法利用冰冻切片技术HE染色观察毛囊外根鞘在不同DHT浓度培养条件下的再生程度,利用免疫荧光技术鉴定Dermo-1、CD11b在最适DHT浓度条件下在毛囊外根鞘中的表达情况。结果浓度为10^(-5) mol/L、10^(-6) mol/L的DHT对毛囊外根鞘体外再生起抑制作用,但10^(-9) mol/L的DHT促进其体外再生。并且Dermo-1、CD11b在毛囊外根鞘再生过程中均有表达。结论毛囊外根鞘在体外培养第5天时再生的结构最完整,10^(-9) mol/L的DHT与体内浓度最为接近,毛囊干细胞对创伤修复和组织结构再生都发挥着重要作用。

关键词：双氢睾酮小鼠毛囊外根鞘 Dermo-1 CD11b

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细胞膜包裹的纳米颗粒在疾病治疗中的应用

生物工程学报 2024年第5期40卷 1323-1337页

作者：李冬雪徐靖淋康琳赵宝华王景林辛文文河北师范大学生命科学学院河北省动物生理生化与分子生物学重点实验室河北石家庄050024 军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全全国重点实验室北京100071

纳米技术因为其巨大的发展潜力,在医学应用中受到广泛关注,然而纳米颗粒容易触发宿主免疫清除系统,导致其无法达到预期治疗效果甚至产生毒副作用。近年来,使用细胞膜包裹纳米颗粒被证明可以有效地使纳米颗粒逃过免疫系统的清除。使用细... 详细信息

纳米技术因为其巨大的发展潜力,在医学应用中受到广泛关注,然而纳米颗粒容易触发宿主免疫清除系统,导致其无法达到预期治疗效果甚至产生毒副作用。近年来,使用细胞膜包裹纳米颗粒被证明可以有效地使纳米颗粒逃过免疫系统的清除。使用细胞膜包裹纳米颗粒,既能使纳米颗粒获得天然细胞膜的理化特征,还能使其具有膜来源细胞的锚定蛋白、抗原等生物学特征,从而实现免疫逃逸、长循环、药物靶向释放和调节免疫等独特能力,极大地增加了其在生物医学应用中的灵活性和可能性。本文综述了细胞膜包裹的纳米颗粒在疾病治疗中的应用现状,分析了这一新平台潜在的巨大应用价值,并描绘了这一新平台未来在疾病治疗中的前景。

关键词：细胞膜包裹纳米颗粒治疗肿瘤毒素

基于杆状病毒-昆虫细胞表达系统的猪脑心肌炎病毒样颗粒的表达及鉴定

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畜牧兽医学报 2024年

作者：王运航景伟穆素雨孙世琪郭慧琛白满元中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室榆林学院生命科学学院

脑心肌炎（Encephalomyocarditis）是由脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus，EMCV）引起的以猪的脑炎、心肌炎为主要特征的病毒性人畜共患病，可感染多种哺乳动物，目前国内尚无有效疫苗。本研究旨在开发一款安全有效的疫苗以防... 详细信息

脑心肌炎（Encephalomyocarditis）是由脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus，EMCV）引起的以猪的脑炎、心肌炎为主要特征的病毒性人畜共患病，可感染多种哺乳动物，目前国内尚无有效疫苗。本研究旨在开发一款安全有效的疫苗以防控该病。采用P1、3CD共表达的构建策略，利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得EMCV病毒样颗粒（virus-like particals，VLPs）并将其免疫小鼠，初步评价其在小鼠体内的免疫应答效果。结果显示，免疫组小鼠特异性抗体滴度达到1:192以上，中和抗体滴度达到1:64以上，且与ISA206佐剂混合使用可诱导机体产生更高的抗体水平。IL-4、IFN-γ、IL-5、TNF-α细胞因子水平均可达到20 pg·mL-1，且明显高于PBS组。综上，本研究获得的EMCV病毒样颗粒疫苗可以诱导机体产生良好的细胞免疫和体液免疫应答，还能诱导炎症细胞因子的产生，有助于激发机体的免疫反应，增强疫苗的保护效果，为EMCV的防控提供了理论依据和技术储备。

关键词：杆状病毒-昆虫细胞表达系统脑心肌炎病毒病毒样颗粒

单一内标定量核磁法测定肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量

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中国药科大学学报 2024年

作者：郭吉茹秦春君胡静曹欣徐永学刘建凯尹健江南大学无锡医学院江南大学生命科学与健康工程学院北京民海生物科技有限公司结合疫苗新技术研究北京市重点实验室江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室

肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标，研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺(hexamethylphosphoramide， HMPA)的定量1H ... 详细信息

肺炎糖疫苗在预防由肺炎链球菌引起的肺炎和脑膜炎等疾病中发挥关键作用。荚膜多糖、C-多糖和磷含量是疫苗研发和生产中多糖抗原质量控制的重要指标，研究发展了基于单一内标物六甲基磷酰三胺(hexamethylphosphoramide， HMPA)的定量1H NMR和31P NMR法，实现6A，6B，18C，19A，19F及23F型肺炎链球菌多糖抗原中荚膜多糖、C-多糖和磷含量的同步测定。利用内参物比较法，探究了多糖溶解性质对定量核磁测定的影响，发现定量1H NMR的测定结果受到多糖水溶液黏度和浓度的影响。发现高黏度多糖在3～15 mg/mL，低黏度多糖在5-25 mg/mL是最适检测液浓度范围。该“一内标三定量”NMR法具有良好的精密度、特异性和准确度，为肺炎链球菌疫苗的质量控制提供了一种有价值的新策略。

关键词：肺炎链球菌荚膜多糖定量 H NMR 定量 P NMR C-多糖磷

生物制剂工艺特异性残留宿主蛋白ELISA检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2024年第2期37卷 221-226页

作者：田易晓王新月窦向雅韩翠翠高珂邵东燕段苏杨白岳丘赵雯黄庆生西北工业大学生命学院空间生物科学与生物技术重点实验室陕西西安710072

目的建立基因重组生物制剂中工艺特异性大肠埃希菌残留蛋白双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证。方法以大肠埃希菌表达胰高血糖素样肽(glucagon-like peptide,GLP)的生产与纯化工艺为特定工艺模型,采用同一工艺用于空载大肠埃希菌(... 详细信息

目的建立基因重组生物制剂中工艺特异性大肠埃希菌残留蛋白双抗体夹心ELISA检测方法,并进行验证。方法以大肠埃希菌表达胰高血糖素样肽(glucagon-like peptide,GLP)的生产与纯化工艺为特定工艺模型,采用同一工艺用于空载大肠埃希菌(不表达重组蛋白的正常大肠埃希菌)残留蛋白的截取。将获得的残留蛋白作为免疫原分别免疫1只雌性新西兰白兔和6只雌性昆明小鼠,以兔免疫血清纯化IgG抗体为包被抗体,鼠免疫血清为第二夹心抗体,抗鼠IgG-HRP为酶标二抗,建立工艺特异性大肠埃希菌残留蛋白双抗体夹心ELISA方法。对建立的方法进行特异性、准确性、精密性验证,并确定方法的检测限。同时采用建立的方法和市售大肠埃希菌宿主蛋白残留检测试剂盒对纯化的GLP制剂进行残留蛋白定量测定。结果对已知浓度的工艺特异性残留蛋白进行系列梯度稀释后,建立的ELISA方法检测的灵敏度可达338 pg/mL;该方法检测CHO和酵母细胞裂解蛋白无交叉反应,检测低、中、高3个浓度样品的回收率均在80%~120%范围内,检测低、中、高浓度空载大肠埃希菌截留液标准品的试验内和试验间CV均<15%。针对GLP制剂中的残留蛋白,与建立的方法检出的GLP制剂中残留蛋白总量相比,约有62%的残留蛋白未被市售非工艺特异性ELISA试剂盒检出,这些残留蛋白应为本工艺特异的残留蛋白。结论建立的双抗体夹心ELISA法检测工艺特异性大肠埃希菌残留蛋白灵敏度高,特异性强,准确性和精密性良好,可满足残留蛋白在生物制剂中低于0.01%~0.1%标准的检测要求。

关键词：工艺特异性大肠埃希菌宿主蛋白酶联免疫吸附测定

tRNA来源的非编码小RNA的生成调控及功能研究前沿进展

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中国细胞生物学学报 2024年第2期46卷 201-213页

作者：杨依婷李韵郭艾莲吕欣宜汪鑫曹政疏泽张云芳同济大学生命科学与技术学院上海200092

转运RNA衍生小RNA(tRNA-derived small RNAs, tsRNAs)是一类来源于tRNAs的新型非编码小RNA,广泛存在于动物、植物的组织细胞以及体液中,在胚胎发育、细胞命运决定、机体免疫调控、获得性遗传以及包括癌症在内的多种人类疾病的发生发展... 详细信息

转运RNA衍生小RNA(tRNA-derived small RNAs, tsRNAs)是一类来源于tRNAs的新型非编码小RNA,广泛存在于动物、植物的组织细胞以及体液中,在胚胎发育、细胞命运决定、机体免疫调控、获得性遗传以及包括癌症在内的多种人类疾病的发生发展中发挥着不可或缺的作用。然而,由于tsRNAs含有从其tRNAs前体继承而来的多种RNA修饰,这些RNA修饰一方面增加了tsRNAs信息编码的深度,丰富了tsRNAs在细胞内功能和作用机制的多样性,另一方面也增加了其功能研究的复杂性。近年来, tsRNAs的作用机制成为该领域的研究焦点和关键点。该文系统性地综述了tsRNAs的最新研究进展,包括其生成途径、检测方法、作用机制以及生物学功能的多样性,并探讨了tsRNAs作为生物标志物在临床疾病诊断中的应用前景。

关键词： tRNA tsRNA RNA修饰翻译调控生物标志物

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鱼类病原真菌水霉及其防控研究进展

微生物学通报 2024年

作者：程万肖丕清王素钦王伯华寻晴罗玉双湖南科技大学生命科学与健康学院湖南文理学院水生动物重要疫病分子免疫技术湖南省重点实验室大湖水殖股份有限公司

由病原真菌水霉(Saprolegnia spp.)引起的鱼病在全球范围内广泛发生流行，因水霉病防治特效药孔雀石绿的禁用和水霉对寄主无种属特异性且能产生生物膜抵抗药物的作用，增加了其防治难度，严重影响淡水养殖业的健康发展。本文对水霉的繁... 详细信息

由病原真菌水霉(Saprolegnia spp.)引起的鱼病在全球范围内广泛发生流行，因水霉病防治特效药孔雀石绿的禁用和水霉对寄主无种属特异性且能产生生物膜抵抗药物的作用，增加了其防治难度，严重影响淡水养殖业的健康发展。本文对水霉的繁殖方式、分类鉴定方法和防治方法等进行综述，并以水产其他相关致病菌的耐药性产生机制为参考，提出了改进水霉鉴定方法、丰富菌种库水霉种类、阐明其生物膜耐药机理、建立其感染疾病模型、研发高效的复方中草药剂和优化其抗菌活性产物的提取工艺，及开展活性物质的有效性和安全性评估等综合防治策略，为开发水霉病防治特效药提供思路。

关键词：水霉分类鉴定耐药机制防治方法

绿水野生型品系及无藻品系对聚苯乙烯纳米颗粒胁迫差异化响应的转录组分析

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水生生物学报 2024年第8期48卷 1333-1347页

作者：杨凯宁符乐一李桂丽卜莉萍潘红春安徽师范大学生命科学学院分子酶学与重大疾病机理研究安徽省重点实验室重要生物资源保护与利用研究安徽省重点实验室芜湖241000

为探究中国绿水(Hydra sinensis)体内有或无共生藻是否影响水宿主对聚苯乙烯纳米颗粒(Polystyrene nanoparticles,PS NPs)的耐受性,研究首先对绿水野生型品系(体内有共生藻)及绿水无藻品系(体内无共生藻)分别进行PSNPs(粒径20nm)48h急... 详细信息

为探究中国绿水(Hydra sinensis)体内有或无共生藻是否影响水宿主对聚苯乙烯纳米颗粒(Polystyrene nanoparticles,PS NPs)的耐受性,研究首先对绿水野生型品系(体内有共生藻)及绿水无藻品系(体内无共生藻)分别进行PSNPs(粒径20nm)48h急性毒理实验,结果显示野生型品系48h半致死浓度(3.36×10^(2)mg/L)明显高于无藻品系(1.39×10^(2)mg/L),这表明与无藻品系相比,野生型品系对PSNPs具有较强的耐受性。随后采用含75mg/LPSNPs的培养液对绿水野生型品系及无藻品系处理48h后分别进行转录组分析(对照组PS NPs浓度为0mg/L),在野生型品系的PS NPs处理组与对照组间共筛选到1532个差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs),其中763个DEGs表达上调,769个DEGs表达下调;而无藻品系的PS NPs处理组与对照组间共筛选到1079个DEGs,其中476个DEGs表达上调,603个DEGs表达下调。基于PSNPs胁迫下无藻品系的DEGs显著富集的病态指征相关的14个KEGG(Kyoto Encyclopedia ofGenes and Genomes)代谢通路中,有9个通路包含的DEGs全部表达上调;而基于PS NPs胁迫下野生型品系的DEGs显著富集的病态指征相关的21个KEGG代谢通路中,只有1个通路包含的DEGs全部表达上调。由此可见,PSNPs胁迫下无藻品系病态指征的激活水平显著高于野生型品系,此现象从分子水平证明了野生型品系对PSNPs肋胁迫的耐受性强于无藻品系。此外,从PSNPs胁迫下无藻品系显著富集的免疫应答相关KEGG代谢通路中的21个DEGs全部表达上调,而从PSNPs胁迫下野生型品系显著富集的免疫应答相关KEGG代谢通路中的27个DEGs仅约一半表达上调,说明PSNPs胁迫下野生型品系免疫应答的激活水平明显低于无藻品系,这反映了野生型品系对PSNPs的免疫应答敏感性低于无藻品系。总之,绿水两个品系在对PSNPs的免疫应答敏感性上的差异应是两个品系对PSNPs胁迫耐受性差异的分子基础;而相对于绿水无藻品系而言,野生型品系对PSNPs具有较低的免疫应答敏感性可能与水-单细胞藻共生体系中水宿主为维持与共生藻的共生关系而进行的免疫水平调整(即水宿主为“容留”共生藻而“调低”了对外来异物的免疫水平)的机制相关。研究为探讨纳米级塑料颗粒的生物毒性及分子机理提供了基础数据。

关键词：聚苯乙烯纳米颗粒急性毒理实验转录组免疫应答病态指征中国绿水

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以生殖健康为导向的辅助生殖技术发展

四川大学学报（医学版） 2024年第3期55卷 501-506页

作者：胡沛然潘洁雪刘欣梅黄荷凤复旦大学附属妇产科医院生殖与发育研究院上海200030 上海市生殖与发育重点实验室上海200030 中国医学科学院胚胎源性疾病研究创新单元2019RU056 上海200030 浙江大学医学院附属妇产科医院生殖遗传教育部重点实验室杭州310030

辅助生殖技术(assisted reproductive technologies, ARTs)作为生殖医学的核心内容之一,涵盖了从配子成熟、合子形成到胚胎发育等多个关键生命早期发育过程。随着全球生育力下降趋势的加剧,不孕症患者倾向于选择ARTs以实现生育愿望。同... 详细信息

辅助生殖技术(assisted reproductive technologies, ARTs)作为生殖医学的核心内容之一,涵盖了从配子成熟、合子形成到胚胎发育等多个关键生命早期发育过程。随着全球生育力下降趋势的加剧,不孕症患者倾向于选择ARTs以实现生育愿望。同时,人们也越来越关注ARTs可能带来的不利影响。本文旨在讨论目前临床上常用的几种辅助生殖技术[如体外受精(in vitro fertilization, IVF)、卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)、双相卵细胞体外成熟(biphasic in vitro maturation, biphasic IVM)、胚胎冷冻及冷冻胚胎复苏移植(frozen embryo transfer, FET)、胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing, PGT)、非侵入性胚胎遗传学检测(non-invasive PGT, niPGT)等]及其前沿发展,重新审视各项技术在以生殖健康为目标的辅助生殖过程中的地位,并进一步讨论辅助生殖技术对子代健康的影响。在保障患者和子代健康的导向下,发展和完善辅助生殖技术,提高技术的高效性和安全性,造福人类生殖健康。

关键词：辅助生殖技术生殖健康体外受精单精子注射胚胎植入前遗传学检测综述