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微透析高效液相色谱法研究金属酶与小分子的相互作用

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化学学报 2003年第1期61卷 95-99页

作者：郭明孔亮厉欣邹汉法中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究中心

将微透析(microdialysis)高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)联用技术应用于定量研究超氧化物歧化酶(superoxidedismutase)与组氨酸和组氨酸 -金属离子配合物的相互作用.实验结果表明:Cu2 Zn2 SOD酶不仅与组氨酸,而且还可以与组氨酸 Co(Ⅱ)和组氨酸 Ni(Ⅱ)相互作用,Cu2 Zn2 SOD酶中的部分Cu(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)被诱导和置换出来,并相应地影响了酶的活性;组氨酸 -金属离子配合物的作用比组氨酸强,酶活性降低也更明显;酶中结合的外来金属离子的量比从酶上被诱导和顶替下来的金属离子的量要少。

关键词：高效液相色谱法金属酶小分子微透析配合物超氧化物歧化酶相互作用金属离子

基于保留时间和质荷比匹配的液相色谱-质谱联用技术用于非标记肽段的差异分析

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分析化学 2008年第7期36卷 867-873页

作者：厉欣徐松云张宇邹汉法中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116023

建立了一种无需化学标记的,基于纳升级毛细管液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用技术和质谱数据处理的肽段差异分析方法。本方法采用定量差异分析与肽序列鉴定分析分别进行的策略,首先对样品进行质谱全扫描的液质全谱式分析,在全扫描质谱数... 详细信息

建立了一种无需化学标记的,基于纳升级毛细管液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用技术和质谱数据处理的肽段差异分析方法。本方法采用定量差异分析与肽序列鉴定分析分别进行的策略,首先对样品进行质谱全扫描的液质全谱式分析,在全扫描质谱数据中提取肽特征点信息,通过保留时间和质荷比参数匹配不同样品中的共有肽特征点,比较其相对峰强度有无差异。最后对样品中存在丰度差异的肽特征点进行选择性二级质谱分析和序列鉴定,从而实现复杂样品中肽段的差异比较分析。以血浆蛋白酶解混合物为实验对象,考察了本方法用于肽段相对定量分析的重现性以及浓度信号响应曲线等。结果表明:提取的肽特征点峰强度相对标准偏差的中值<22%,肽段离子强度动态范围达3个数量级,在5～1000fmol范围内对肽段定量具有良好线性关系。本方法可用于不同条件样品中具有倍数差异的内源性肽的比较分析。

关键词：无标记液相色谱-质谱联用定量蛋白质组学多肽组

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整体柱的制备方法及其应用

分析化学 2001年第12期29卷 1464-1469页

作者：平贵臣袁湘林张维冰张玉奎中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116012 中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心

整体柱具有渗透性好、制备简单、无需塞子制作等优点 ,从而避免了由塞子所引起的问题 ,已引起人们越来越多的关注。本文对整体柱的制备方法、结构表征及其应用作一评述

关键词：整体柱电色谱液相色谱评述

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生物膜色谱及其在药物活性成分分析中的应用

分析化学 2002年第2期30卷 231-236页

作者：毛希琴孔亮汪海林邹汉法中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116021 中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心

介绍了一种新兴的色谱技术──生物膜色谱技术，综述了生物膜色谱技术近十几年的发展状况、生物膜的制备与固定化的各种方法，着重介绍其用于药物与膜相互作用研究的原理及研究成果，并展望了该技术在药物活性成分筛选和活性评价领域的... 详细信息

介绍了一种新兴的色谱技术──生物膜色谱技术，综述了生物膜色谱技术近十几年的发展状况、生物膜的制备与固定化的各种方法，着重介绍其用于药物与膜相互作用研究的原理及研究成果，并展望了该技术在药物活性成分筛选和活性评价领域的应用前景。

关键词：生物膜固定化色谱药物活性成分评述

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新型毛细管等电聚焦驱动方法的建立及其应用

高等学校化学学报 2005年第4期26卷 654-656页

作者：朱贵杰杨春刘和春张丽华张维冰张玉奎中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116011

A simple method for mobilizing the focused zones of capillary isoelectric focusing(CIEF) for single-point detectors was developed, in which a linear polyacrylamide(LPA) coated capillary was connected with an uncoated capillary by an etched porous joint. The etched section allows electrical conductivity but blocks the hydrodynamic flow. The focused zones of mixed proteins was mobilized by this method successfully. Compared with the traditional gravity mobilization step, it was found that this method can mobilize the focused zones more effectively without sacrificing separation efficiency.

关键词：毛细管等电聚焦电渗流驱动蛋白质多肽

复合纤维素膜固定化胰蛋白酶反应器及其应用于蛋白质酶解

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高等学校化学学报 2000年第5期21卷 702-706页

作者：姜泓海邹汉法汪海林倪坚毅张强中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116011

合成了甲基丙烯酸缩水甘油酯－纤维素复合膜，并以此膜为基质共价键合固定化胰蛋白酶，以Ｎ－苯甲酰－Ｌ－精氨酰乙酯（ＢＡＥＥ）为底物，应用高效液相色谱系统测定了酶固定化膜柱的催化反应特性．研究结果表明：温度、ｐＨ值、离子强... 详细信息

合成了甲基丙烯酸缩水甘油酯－纤维素复合膜，并以此膜为基质共价键合固定化胰蛋白酶，以Ｎ－苯甲酰－Ｌ－精氨酰乙酯（ＢＡＥＥ）为底物，应用高效液相色谱系统测定了酶固定化膜柱的催化反应特性．研究结果表明：温度、ｐＨ值、离子强度、有机溶剂及蛋白变性剂等都对固定化酶的活力有一定的影响．在最适条件下，固定化胰蛋白酶的活力为１７８００Ｕ／ｇ干膜，蛋白载量为３．６ｍｇ／ｇ（≈０．１５ μｍｏｌ／ｇ）干膜，活性回收率达到５２％．固定化酶表现出较高的使用和储藏稳定性，在４０℃下，水解ＢＡＥＥ底物２４ｈ活力无显著变化．固定化酶膜柱在４ ℃冷藏保存１００ｄ仍保存９０％以上的水解活力．固定化酶反应器被应用于蛋白质酶解的肽谱实验．

关键词：复合纤维素膜固定化胰蛋白酶反应器蛋白质

以人血清白蛋白为固定相的分子生物色谱分析几种中药活性成分的研究

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高等学校化学学报 2000年第1期21卷 36-40页

作者：孔亮邹汉法汪海林倪坚毅张玉奎中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116011

提出用人血清白蛋白分子生物色谱分析中药活性成分的方法 ,分别比较了当归等 4种单味中药的分离结果 ,考察了提取当归的 3种溶剂及提取时间对活性物质提取量的影响 ,同时建立了当归中阿魏酸与藁本内酯的定量分析方法 .

关键词：人血清白蛋白分子生物色谱中药生物活性成分

硅胶及其衍生物作为基体的激光解吸离子化飞行时间质谱

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高等学校化学学报 2001年第10期22卷 1637-1640页

作者：张清春邹汉法郭忠陈小明姜泓海倪坚毅中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116011

制备了一种新型无机基体材料 (硅胶及其衍生物 )用于测定激光解吸离子化飞行时间质谱 ,建立了一种新的质谱分析方法 ,并用以解决传统 MALDI-TOF MS存在的基体干扰问题 .该法适合于低分子量化合物的分析 .

关键词：硅胶基体基体固载化小分子分析衍生物质谱分析激光解吸离子化飞行时间质谱

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柱亲和介质用于内毒素去除的研究

分析化学 2006年第4期34卷 455-458页

作者：唐守万孔亮欧俊杰邹汉法中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心大连116023

以琼脂糖凝胶为基质,采用不同方法活化后,键合多粘菌素B配基,制备了3种用于内毒素去除的亲和介质。亲和介质的配基键合量及对内毒素的去除率随间隔臂长度的增加而增加。考察了盐浓度、pH、温度及流速对亲和介质3去除内毒素的影响。结果... 详细信息

以琼脂糖凝胶为基质,采用不同方法活化后,键合多粘菌素B配基,制备了3种用于内毒素去除的亲和介质。亲和介质的配基键合量及对内毒素的去除率随间隔臂长度的增加而增加。考察了盐浓度、pH、温度及流速对亲和介质3去除内毒素的影响。结果表明,亲和介质3在NaC l浓度为0.05~0.5 mol/L,pH为6~10,温度为25~55℃,流速为0.20~0.80 mL/m in范围内对内毒素去除效果最佳,去除率大于90%。

关键词：琼脂糖凝胶内毒素多粘菌素B 亲和介质去除率