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小檗碱抑制乳腺癌细胞增殖的网络药理学分析及体外细胞验证

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：张慧慧金乐刘苏陈洪晓陈昭琳唐丽琴安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)药学部

目的：基于网络药理学和体外细胞实验探究小檗碱对乳腺癌细胞的作用机制。方法：首先，以小檗碱与乳腺癌作为研究对象，通过VEEN图筛选两者交集靶点，利用R语言进行GO功能和KEGG富集分析，利用Autodock Vina和 Pymol软件进行分子对接及... 详细信息

目的：基于网络药理学和体外细胞实验探究小檗碱对乳腺癌细胞的作用机制。方法：首先，以小檗碱与乳腺癌作为研究对象，通过VEEN图筛选两者交集靶点，利用R语言进行GO功能和KEGG富集分析，利用Autodock Vina和 Pymol软件进行分子对接及可视化。然后，小檗碱处理乳腺癌MCF-7细胞24h后，进行体外细胞实验验证。采用CCK-8法检测细胞活力，EDU和平板克隆检测细胞增殖克隆能力，An-nexinV-FITC/PI双染法和Westernblot检测细胞凋亡。利用激光共聚焦和CETSA验证小檗碱和AKT1蛋白的结合作用。结果：网络药理学结果表明，小檗碱与核心靶点AKT1、AKT2、MAPK3等均有较好的结合。小檗碱（20、40、80μmol/L）能明显抑制MCF-7细胞的增殖克隆能力并且呈浓度依赖性（P实验结果显示，小檗碱和AKT1具有结合作用，且两者结合之后稳定性增强。结论：小檗碱通过与AKT1蛋白靶向结合，抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：网络药理学小檗碱乳腺癌 AKT1

脑机接口联合不同疗法治疗脑卒中患者肢体功能障碍：效果与机制分析

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中国组织工程研究 2025年

作者：王雪淞汪月徐岩曾雯慧卢文明唐兴坤陈文杰叶俊松赣南医科大学第一附属医院干细胞临床转化分中心赣南医科大学康复学院赣州市干细胞与再生医学重点实验室赣南医科大学护理学院江西省干细胞与再生医学重点实验室心脑血管疾病防治教育部重点实验室

背景：近年来，脑机接口技术在脑卒中患者的肢体功能障碍康复方面取得了可喜的成果。随着研究的不断深入以及临床上的广泛使用，脑机接口联合其他康复疗法改善患者的肢体功能障碍成为研究热点。目的：分析和总结脑机接口联合不同疗法对... 详细信息

背景：近年来，脑机接口技术在脑卒中患者的肢体功能障碍康复方面取得了可喜的成果。随着研究的不断深入以及临床上的广泛使用，脑机接口联合其他康复疗法改善患者的肢体功能障碍成为研究热点。目的：分析和总结脑机接口联合不同疗法对脑卒中患者肢体功能障碍的有效性，探讨不同联合策略在临床上的应用价值。方法：以“脑机接口，BCI，脑卒中，中风”为中文检索词，以“Brain-computer interface,BCI,Brain-computer interaction,Brain-machine interface,BMI,Stroke”为英文检索词，在中国知网、万方、维普数据库及PubMed、Embase、Web of Science等中英文数据库进行文献检索，检索时限为各数据库建库起至2024年9月。最终共检索到3 054篇文献，经过筛选后纳入75篇文献进行归纳总结。结果与结论：目前，临床上除可以单独使用脑机接口技术治疗脑卒中患者肢体功能障碍外，还可以通过联合其他治疗方式获得更好的疗效，如联合中医疗法、康复疗法或物理因子治疗等。然而综合已有的研究发现，脑机接口联合经颅直流电疗法治疗患者上肢及下肢功能障碍的有效性存在争议。当前，研究人员逐渐认识到联合治疗的可行性，但由于治疗机制探索不足，无规范化规则以及样本量过小等因素，导致目前该策略还不具有普遍适用性。因此未来研究应集中于探究脑机接口与其他疗法结合后发挥增益效果的机制，并且规范临床试验的标准，以推动临床上的广泛应用。

关键词：脑机接口脑卒中功能障碍联合治疗神经可塑性康复工程运动想象视觉稳态唤起电位

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厌氧氨氧化细菌的混合营养代谢机制研究进展

中国环境科学 2025年

作者：张慕琦王乙橙晏鹏陈猷鹏重庆大学三峡库区生态环境教育部重点实验室

厌氧氨氧化细菌(AnAOB)生长缓慢且对环境变化敏感，限制了厌氧氨氧化(Anammox)工艺的工程应用.最新研究表明，AnAOB并非严格化能自养微生物.本文总结了具有混合营养代谢潜力的AnAOB菌株及其混合营养代谢途径研究进展，并展望了未来研究... 详细信息

厌氧氨氧化细菌(AnAOB)生长缓慢且对环境变化敏感，限制了厌氧氨氧化(Anammox)工艺的工程应用.最新研究表明，AnAOB并非严格化能自养微生物.本文总结了具有混合营养代谢潜力的AnAOB菌株及其混合营养代谢途径研究进展，并展望了未来研究方向和工程意义.研究表明， AnAOB的混合营养代谢受C/N比、有机物浓度和种类等因素影响，但对不同菌株代谢速率与适应性的全面分析尚不足.先进的同位素标记和单细胞技术能够帮助深入揭示AnAOB吸收和代谢小分子有机物的途径.组学预测结果表明，AnAOB通过还原性乙酰辅酶A途径固定无机碳，并具备氧化小分子有机物的多种途径，但具体机制仍存争议.

关键词：厌氧氨氧化细菌(AnAOB) 混合营养代谢无机碳固定异化硝酸盐还原为铵(DNRA) 小分子有机物

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五味子甲素改善氧化应激引起的内皮功能障碍

中国药理学通报 2025年第1期41卷 122-130页

作者：侯惠民张文文赵卫萍赵鑫朴贤美寒地心血管疾病国家重点实验室哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地心血管药物研究教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的探究五味子甲素(schizandrin A,SchA)对氧化应激引起内皮功能障碍的拮抗作用及其作用机制。方法选用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)作为研究对象,采用MTT实验检测SchA对HUVECs活力的影响;通过流... 详细信息

目的探究五味子甲素(schizandrin A,SchA)对氧化应激引起内皮功能障碍的拮抗作用及其作用机制。方法选用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)作为研究对象,采用MTT实验检测SchA对HUVECs活力的影响;通过流式细胞技术检测细胞中ROS的含量;试剂盒检测HUVECs中MDA、CAT的含量以及细胞上清液中NO、ET-1的含量;Western blot实验检测细胞中SOD1、p-eNOS/eNOS蛋白以及Nrf2/Keap1/HO-1通路蛋白的表达情况;免疫荧光实验检测细胞Nrf2的入核情况。结果SchA通过激活Nrf2/Keap1/HO-1信号通路逆转LPS或缺氧诱导的HUVECs内ROS和MDA含量的升高及SOD1和CAT含量的下降;SchA逆转LPS诱导的HUVECs中p-eNOS和eNOS蛋白表达的降低及逆转细胞培养液中NO含量的下降和ET-1含量的升高;Nrf2抑制剂ML385逆转SchA对氧化应激及内皮功能障碍的拮抗作用。结论SchA拮抗LPS及缺氧诱导的氧化应激,SchA通过上调Nrf2/Keap1/HO-1信号通路改善氧化应激引起的内皮功能障碍。

关键词： SchA 氧化应激内皮功能障碍 Nrf2/Keap1/HO-1信号通路 HUVECs LPS

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颠茄AbWRKY1基因的克隆与功能研究

农业生物技术学报 2025年

作者：潘航穆德会杨嘉谭艾娟马炳南许国菊杨立航强玮贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室

颠茄(Atropa belladonna)是《中国药典》收录的托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)商业药源植物，WRKY转录因子可能调控TAs的生物合成。本研究对颠茄中WRKY转录因子基因家族进行了组织表达、系统进化和诱导表达分析，筛选出正调控TA... 详细信息

颠茄(Atropa belladonna)是《中国药典》收录的托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)商业药源植物，WRKY转录因子可能调控TAs的生物合成。本研究对颠茄中WRKY转录因子基因家族进行了组织表达、系统进化和诱导表达分析，筛选出正调控TAs生物合成的基因AbWRKY1，并鉴定了其功能。AbWRKY1具有和TAs合成途径基因相同的组织和诱导表达特征，特异性地在颠茄不定根中表达，并且受到钙通道抑制剂维拉帕米(verapamil)的诱导。AbWRKY1和其他物种具有次生代谢调控功能的WRKY聚在同一簇。AbWRKY1蛋白包含326个氨基酸，定位于细胞核。酵母单杂交显示，AbWRKY1能够和莨菪碱6β-羟化酶(hyoscyamine 6β-hydroxylase, H6H)基因启动子上W-box富集区发生相互作用。在颠茄中通过病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)技术抑制AbWRKY1表达使东莨菪碱和莨菪碱含量分别降低了44.91%和79.33%。超表达AbWRKY1显著提高了颠茄发根中东莨菪碱、山莨菪碱和莨菪碱3种药用TAs的含量，同时上调了4个TAs合成途径基因腐胺N-甲基转移酶(putrescine Nmethyltransferase, PMT)、托品酮还原酶Ⅰ(tropinone reductaseⅠ, TRⅠ)、莨菪碱脱氢酶(hyoscyamine dehydrogenase, HDH)和H6H的表达量。本研究为阐明TAs生物合成的转录调控和颠茄分子育种提供了理论基础。

关键词： WRKY转录因子颠茄托品烷生物碱(TAs) 病毒诱导的基因沉默(VIGS) 超表达

SUN2调控稳定表达绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白的OAR-L1细胞的恶性转化能力的研究

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中国兽医科学 2025年

作者：鲍安玉杜晓悦陈思旭段续接张培刘淑英内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古自治区基础兽医学重点实验室

为了探究SAD1/UN84结构域蛋白-2(SAD1/UNC84 domain protein-2，SUN2)在绵羊肺腺瘤病(ovine pulmonary adenocarcnoma，OPA)肿瘤细胞恶性转化中的功能，本试验利用实验室保存的JSRV env慢病毒感染绵羊肺成纤维细胞(OAR-L1)，建立OAR-L1-Env稳转株。通过qPCR和Western-blot检测JSRV Env和SUN2的表达情况，使用CCK-8、划分愈合试验和软琼脂糖集落形成试验检测细胞的恶性转化能力。此外，分别构建SUN2过表达和干扰质粒，并转染OAR-L1-Env稳转株，利用qPCR和Western-blot检测其SUN2的表达情况，通过CCK-8和划分愈合试验检测细胞的增殖和迁移能力。结果显示，OAR-L1-Env稳转株成功建立，且SUN2表达量显著下调(P细胞的增殖和迁移能力(P细胞的增殖和迁移能力(P细胞恶性转化，提示其可能对OPA肿瘤生成有抑制作用。本研究为进一步探究SUN2在OPA中的细胞增殖等生物学作用的研究提供了一定的参考资料。

关键词：稳转株囊膜蛋白 SUN2 增殖迁移

牛C-反应蛋白夹心ELISA定量检测方法的建立与应用

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中国兽医科学 2025年

作者：靳家鑫杨蕊张泽时文健张广智丁家波鑫婷中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室福建农林大学动物科学学院

制备针对牛C-反应蛋白（CRP）的单克隆抗体，建立牛CRP双抗体夹心ELISA定量检测方法，为牛细胞因子检测以及感染的快速诊断提供有力工具。利用原核表达系统和293F真核表达系统表达牛CRP蛋白，采用亲和层析纯化重组蛋白，免疫小鼠后利用... 详细信息

制备针对牛C-反应蛋白（CRP）的单克隆抗体，建立牛CRP双抗体夹心ELISA定量检测方法，为牛细胞因子检测以及感染的快速诊断提供有力工具。利用原核表达系统和293F真核表达系统表达牛CRP蛋白，采用亲和层析纯化重组蛋白，免疫小鼠后利用淋巴细胞杂交瘤技术制备并筛选针对牛CRP的单抗，以棋盘法筛选抗体对并建立夹心ELISA方法，以临床样品验证该方法的可行性。SDS-PAGE结果显示成功纯化到CRP蛋白，经3轮亚克隆成功获得5株针对牛CRP的单抗细胞株，其中3H4和 2G4-HRP抗体对的检测效果最佳。临床样品检测显示结核菌感染早期的牛血清中CRP质量浓度显著高于健康牛，结果说明制备的牛CRP单抗对可以识别天然牛CRP。检测结核排菌期和非排菌期的牛血浆样品，发现排菌期的结核病牛CRP质量浓度显著高于非排菌期的结核病牛。结果表明，建立的牛CRP夹心ELISA检测方法可用于牛结核病的诊断，为分析牛免疫感染状态及牛感染性疾病的诊断奠定了基础。

关键词： C-反应蛋白单克隆抗体 ELISA 牛结核病

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着丝粒与动粒的功能、结构和动态组装

中国科学技术大学学报 2023年第9期53卷 1-8,66页

作者：窦震刘冉臧建业姚雪彪刘行中国科学技术大学无膜细胞器与细胞动力学教育部重点实验室生命科学学院安徽合肥230026 中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心安徽省细胞动力学和化学生物学重点实验室安徽合肥230027

确保真核生物物种的遗传信息在亲代与子代之间忠实地传递是细胞有丝分裂的一项基本任务。着丝粒是一个特殊的染色体区域,对于在有丝分裂过程中介导姐妹染色单体的排列和分离至关重要。着丝粒身份确定是由含有着丝粒蛋白A(CENP-A)的核小... 详细信息

确保真核生物物种的遗传信息在亲代与子代之间忠实地传递是细胞有丝分裂的一项基本任务。着丝粒是一个特殊的染色体区域,对于在有丝分裂过程中介导姐妹染色单体的排列和分离至关重要。着丝粒身份确定是由含有着丝粒蛋白A(CENP-A)的核小体这种表观遗传机制决定的。CENP-A核小体为有丝分裂期内层动粒和外层动粒组装的关联提供了基础。本文回顾了着丝粒身份确定、内层动粒功能和组装以及外层动粒功能和组装。特别是,我们关注了组成型着丝粒关联网络(CCAN)结构活性关系的最新进展。CCAN结构信息为我们对着丝粒和动粒功能以及动态组装的理解提供了新的启示。

关键词：有丝分裂着丝粒动粒组成型着丝粒关联网络(CCAN) CDK1

内质网与线粒体接触复合物ERMES在真菌中的结构组成和功能

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中国科学：生命科学 2022年第1期52卷 67-75页

作者：魏雯帆郑碧玉符传孩中国科学技术大学生命科学与医学部合肥230027 中国科学技术大学无膜细胞器与细胞动力学教育部重点实验室合肥230027 中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心合肥230027

真核生物细胞中,双层膜细胞器线粒体会进行持续的分裂与融合,从而改变自身形态来满足细胞在不同生长条件下的能量代谢需求.除此之外,线粒体的动态与功能还依赖于与其他细胞器的互作及一些代谢产物在互作过程中的双向交流.与线粒体互作... 详细信息

真核生物细胞中,双层膜细胞器线粒体会进行持续的分裂与融合,从而改变自身形态来满足细胞在不同生长条件下的能量代谢需求.除此之外,线粒体的动态与功能还依赖于与其他细胞器的互作及一些代谢产物在互作过程中的双向交流.与线粒体互作的细胞器包括脂滴、过氧化物酶体、液泡和内质网等.在真菌细胞中,线粒体与内质网的互作由存在二者之间的内质网-线粒体接触复合物(ER and mitochondria encounter structure,ERMES)介导.ERMES复合物对于维持线粒体的形态和功能至关重要,其破坏会影响线粒体的动态、钙离子信号、磷脂组分的转运、真菌耐药性和致病真菌的毒力等.本文着重对ERMES复合物在真菌细胞中的组装、功能及其组装调控机制进行系统的总结和讨论.

关键词：线粒体内质网接触位点细胞器互作 ERMES 真菌

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