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人呼吸道合胞病毒SH蛋白混合多肽免疫原性初步研究

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病毒学报 2024年第2期40卷 293-301页

作者：郭宏宋洋李海时雨晴胡宏俏江洁郭晋源毛乃颖曹蕾张燕传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

本研究旨在探讨人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)小疏水蛋白(Small hydrophobic protein,SH)T细胞表位肽的免疫原性和保护效果。通过设计并合成覆盖SH蛋白序列全长的10条多肽,利用HRSV感染小鼠的脾淋巴细胞进... 详细信息

本研究旨在探讨人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)小疏水蛋白(Small hydrophobic protein,SH)T细胞表位肽的免疫原性和保护效果。通过设计并合成覆盖SH蛋白序列全长的10条多肽,利用HRSV感染小鼠的脾淋巴细胞进行IFN-γ-酶联免疫斑点(Enzyme-linked immunospot assay, ELISpot)的检测,筛选出5条能显著刺激IFN-γ产生的SH蛋白T细胞表位多肽。将其与CpG和磷酸铝(AL)佐剂配制成混合多肽疫苗,两次皮下给药的方式免疫C57BL/6J小鼠,评价其免疫原性和保护效果。结果显示,与佐剂对照组相比,SH蛋白混合多肽疫苗可以诱导免疫后的小鼠产生抗原特异性IgG抗体和Th1偏向的T细胞免疫应答,降低HRSV感染后肺病毒载量,并减轻肺脏病理损伤。研究结果表明,SH蛋白混合多肽通过免疫小鼠可以引起良好的免疫原性,并保护小鼠抵抗HRSV的感染。为进一步研究基于SH蛋白的HRSV多肽疫苗提供了科学依据。

关键词：人呼吸道合胞病毒小疏水蛋白多肽细胞免疫

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2018-2022年辽宁省沈阳市季节性流感病毒流行特征及乙型流感病毒分子进化分析

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疾病监测 2024年第5期39卷 609-615页

作者：陈玲韩雪丛实栗凡杨佳璎陈叶李希妍朱闻斐王冰沈阳医学院辽宁沈阳110034 北京协和医学院中国医学科学院病原生物学研究所北京100010 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中心北京102206 沈阳市疾病预防控制中心辽宁沈阳110000

目的通过研究2018—2022年辽宁省沈阳市监测周期中流感病毒的病原学监测情况,了解该市流感病毒的流行特征,同时,对乙型流感病毒的血凝素全长基因进行扩增,分析沈阳市流感病毒流行的分子特征及谱系进化特点。方法采集2018年10月1日至2022... 详细信息

目的通过研究2018—2022年辽宁省沈阳市监测周期中流感病毒的病原学监测情况,了解该市流感病毒的流行特征,同时,对乙型流感病毒的血凝素全长基因进行扩增,分析沈阳市流感病毒流行的分子特征及谱系进化特点。方法采集2018年10月1日至2022年3月31日沈阳市哨点医院门诊ILI咽拭子标本,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法确认流感病毒核酸阳性后进行病毒分离,选取部分乙型流感毒株,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对其血凝素全长基因进行扩增测序,使用Snapgene软件对测序结果进行拼接,Clustal W比对多重序列,最后使用MEGA 7.0软件构建进化树分析氨基酸突变位点。结果2018—2022监测周期中沈阳市流感病毒检出总阳性率为5.00%,主要以A/H1N1型病毒为主(44.38%),其次是A/H3N2病毒(28.37%)和B/Victoria(27.24%),未检测到B/Yamagata系毒株。在2020—2021和2021—2022两个流行季中B/Victoria系毒株占比分别为83.33%和86.66%,为绝对优势株,且人群分布中5~14岁年龄组易感。沈阳市分离到的B/Victoria系毒株其血凝素基因均在V1A分支上。与疫苗株相比,流行株在HA蛋白的120环、150环、160环及190螺旋等关键抗原决定簇部位有多个氨基酸位点突变。结论在2018—2022年监测周期中,流感病毒流行的亚型多样性减少,但B/Victoria系遗传多样性增加,而且在多个关键抗原决定簇上发生突变,因此,需对流感的流行特征和乙型流感分子进化情况作以持续的监测,为以流感为主的呼吸道传染病防控提供科学依据。

关键词：乙型流感 B/Victoria 血凝素基因基因特征分子进化

2015—2019年广东省广州市登革热流行病学及登革病毒E基因进化特征比较

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疾病监测 2024年

作者：蒋力云苏文哲刘文辉曹毅敏狄飚张周斌广州市疾病预防控制中心

目的通过比较广东省广州市登革热输入与本地病例的流行病学特点以及登革病毒包膜蛋白（E）基因进化特征，探讨影响广州市登革热流行的因素，为登革热防控提供参考。方法通过中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统收集登革热病例... 详细信息

目的通过比较广东省广州市登革热输入与本地病例的流行病学特点以及登革病毒包膜蛋白（E）基因进化特征，探讨影响广州市登革热流行的因素，为登革热防控提供参考。方法通过中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统收集登革热病例信息，使用Excel2010和SPSS20.0软件进行数据统计和分析，采用荧光定量PCR方法检测血清标本并测定登革病毒E基因序列，运用MEGA11软件构建基因进化树。结果 2015—2019年广州市共报告登革热确诊病例4245例，输入病例534例，本地病例3711例。输入病例数高峰为6—10月，前于本地病例数高峰8—11月。输入病例主要分布于白云区、番禺区和越秀区，本地病例主要分布于荔湾区、白云区和海珠区，两者空间分布不一致。荧光定量PCR方法检测确诊病例血清标本，以血清型1型感染为主。本地病例感染毒株的序列与输入病例感染毒株、国外流行毒株以及本地既往流行毒株的序列亲缘关系相近。结论广州市登革热疫情呈上升趋势，登革病毒流行株以输入毒株为主，并存在本地既往毒株引起流行的可能。政府需要多部门合作，建立完善的监测系统，加大对特定群体的防控宣传力度，同时解决登革热输入和本地流行，才能有效控制登革热疫情。

关键词：登革热登革病毒流行病学特征 E基因基因进化树

应用气-液两相呼吸道类器官从中国临床住院患儿中分离鉴定人副流感病毒1/2/3

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病毒学报 2024年第2期40卷 274-282页

作者：余玙璠吴伟波牛培华宋敬东霍威邦胡月超刘俊彤魏岚邓瑶杨扬朱娜谭文杰中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病溯源预警和智能决策全国重点实验室北京100052 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 深圳市病原微生物与免疫重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心深圳市第三人民医院深圳518112

人副流感病毒(Human parainfluenza viruses,hPIVs)是引起人类呼吸道感染的重要病原体之一,目前我国相关临床毒株资源有限,本研究旨在获得近期流行、背景明晰的hPIVs临床分离株。应用原代人呼吸道上皮细胞分化的气-液界面呼吸道上皮类器... 详细信息

人副流感病毒(Human parainfluenza viruses,hPIVs)是引起人类呼吸道感染的重要病原体之一,目前我国相关临床毒株资源有限,本研究旨在获得近期流行、背景明晰的hPIVs临床分离株。应用原代人呼吸道上皮细胞分化的气-液界面呼吸道上皮类器官(Air-liquid interface human airway epithelial organoid,HAE),从深圳市第三人民医院2016~2017年住院患儿hPIVs阳性咽拭子标本中分离获得hPIV1/2/3,分别命名为hPIV1/C-Tan/SZ01/2016、hPIV2/C-Tan/SZ01/2017、hPIV3/C-Tan/SZ01/2017。通过逆转录荧光定量PCR (Reversetranscriptionquantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测病毒核酸扩增、免疫荧光检测病毒蛋白在HAE的表达、负染及超薄切片透射电镜观察病毒形态和细胞定位,并对传代过程中病毒的活性、遗传稳定性和基因组特征进行分析。结果表明基于HAE分离hPIVs可以高效获得hPIVs临床分离株,所获毒株具有典型的病毒形态特征。三种hPIVs在HAE中复制良好且遗传稳定,病毒滴度均可达到约107 TCID50/100μL。对分离获得的hPIV1/2/3临床分离株进行全基因组及HN基因进行序列测定,结果表明:hPIV1全长为15568bp,属于hPIV1 C亚型;hPIV2全长15694bp,属于hPIV2 A3亚型;hPIV3全长15443bp,属于hPIV3 C3亚型,提示3株临床分离株与我国普遍流行的基因型相一致。综上,本研究应用HAE从近期住院患儿临床样本中成功分离获得生物学特性和基因组背景清晰且遗传稳定的hPIV1/2/3毒株。这些临床流行毒株资源的分离鉴定,为hPIVs的感染特点和致病机制的深入研究及抗病毒药物筛选和疫苗研发奠定了基础。

关键词：人副流感病毒病毒分离鉴定人呼吸道上皮类器官

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昆明市一起聚集性发热疫情中腺病毒3型Penton base、Hexon和Fiber基因遗传进化分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第3期44卷 241-248页

作者：刘艳艳古文鹏段忠文王钰龚娇茶琦雁吴林蔚侯敏昆明市疾病预防控制中心微生物检验科昆明650228 云南省疾病预防控制中心急性传染病防制所昆明650022 昆明市呈贡区疾病预防控制中心检验科昆明650500 玉溪市疾病预防控制中心卫生监测检验科玉溪678400

目的对昆明市一起聚集性发热疫情样本进行腺病毒检测和遗传进化分析。方法采集典型发热患者咽拭子标本,使用微流体芯片技术进行30种常见呼吸道传染病病原体核酸检测。对腺病毒核酸阳性标本使用Nanopore三代高通量测序技术进行Penton bas... 详细信息

目的对昆明市一起聚集性发热疫情样本进行腺病毒检测和遗传进化分析。方法采集典型发热患者咽拭子标本,使用微流体芯片技术进行30种常见呼吸道传染病病原体核酸检测。对腺病毒核酸阳性标本使用Nanopore三代高通量测序技术进行Penton base、Hexon和Fiber三个重要基因全长序列扩增、测定和分型鉴定,构建系统进化树,开展分子变异、遗传进化等分析。结果共采集5份标本,均检出呼吸道腺病毒及流感嗜血杆菌。对腺病毒进行Nanopore三代基因测序最终均获得Penton base、Hexon和Fiber基因全长编码区核苷酸序列,5份标本之间3个基因核苷酸相似性依次为100.0%、99.9%~100.0%和100.0%,氨基酸同源性均为100.0%;与HAdV3原型株(AY599834)核苷酸相似性最高,分别为98.6%、98.7%和98.9%。系统发育分析表明,3个基因系统进化树分析结果基本一致,人腺病毒3型(HAdV3)原型株单独一支,本研究中HAdV3序列均划分在同一进化分支上,与较早年份国外及中国台湾毒株亲缘关系较远,与近年国内外毒株亲缘关系较近,与2019年日本株(LC703523)和中国广州株(MZ540961)高度同源。与原型株比较分析昆明HAdV3氨基酸突变位点,Penton base有5处变异;Hexon有10处变异;Fiber有11处变异。结论本起疫情中的腺病毒在Penton base、Hexon和Fiber基因全长序列中型别分型结果一致,为P3H3F3型,与包括原型株在内的国内外HAdV3毒株显示出非常小的遗传变异。与原型株相比发生了多处氨基酸位点突变,并且多数氨基酸位点变异发生在蛋白质的高变区或功能区,其中Hexon蛋白中M7L为昆明序列独有氨基酸突变位点。

关键词：人腺病毒3型五邻体基座蛋白六邻体蛋白纤维蛋白遗传进化

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HIV感染者的高危行为接触者追踪研究进展

中华流行病学杂志 2024年第5期45卷 755-760页

作者：刘欢金怡晨汤后林中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心流行病学室/传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206

对HIV感染者开展高危行为接触者追踪,能够促进HIV感染者的诊断发现,及时采取诊疗和干预措施,有助于减少二代传播,对控制艾滋病流行具有重要意义。随着HIV基因序列检测和分析技术的发展,将HIV分子传播网络应用于传统流行病学调查的高危... 详细信息

对HIV感染者开展高危行为接触者追踪,能够促进HIV感染者的诊断发现,及时采取诊疗和干预措施,有助于减少二代传播,对控制艾滋病流行具有重要意义。随着HIV基因序列检测和分析技术的发展,将HIV分子传播网络应用于传统流行病学调查的高危行为接触者追踪,有助于准确揭示HIV传播模式、阐明HIV传播特征和识别高传播风险人群,为精准防控提供科学依据。本文对HIV感染者的高危行为接触者追踪研究进行综述,为开展相关工作提供科学参考。

关键词：艾滋病病毒高危行为追踪流行病学调查分子传播网络

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伪狂犬病毒变异和流行特征的研究进展

中华预防医学杂志 2024年第3期58卷 364-369页

作者：王新悦梅国勇韩俊陈操王维禹齐齐哈尔大学生命科学与农林学院齐齐哈尔161006 传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

伪狂犬病毒(PRV)是一种猪疱疹病毒,可感染多种动物,其中猪是PRV的天然宿主。PRV自发现以来已在全球范围内传播,对养猪业造成重大经济损失。近年来,人感染PRV的病例屡有报道,提示PRV存在跨种属感染人的风险。随着对PRV病原特征的进一步... 详细信息

伪狂犬病毒(PRV)是一种猪疱疹病毒,可感染多种动物,其中猪是PRV的天然宿主。PRV自发现以来已在全球范围内传播,对养猪业造成重大经济损失。近年来,人感染PRV的病例屡有报道,提示PRV存在跨种属感染人的风险。随着对PRV病原特征的进一步分析和对PRV致病机制的深入了解,避免PRV变成人类传染病成为当前研究和防控工作重点。为了解PRV变异特征,本研究从PRV变异特征、流行特征方面综述了最新研究进展,以期为更好地开展相关防控工作提供依据。

关键词：伪狂犬病伪狂犬病毒变异流行特征跨种传播

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抗狂犬病病毒单克隆抗体研究进展

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第4期44卷 363-367页

作者：刘茜高洁曹晨华朱武洋中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫健委生物安全重点实验室北京102206 华北制药集团新药研究开发有限责任公司质量检验部生物活性实验室石家庄052260

狂犬病作为一种可防不可治的烈性传染病,采取有效的暴露后处置措施至关重要。当人处于狂犬病Ⅲ级暴露下,接种狂犬病免疫球蛋白(rabies immunoglobulin,RIG)是暴露后处置中的重要环节。源于人或动物血浆的RIG存在产能不足、价格偏高等问... 详细信息

狂犬病作为一种可防不可治的烈性传染病,采取有效的暴露后处置措施至关重要。当人处于狂犬病Ⅲ级暴露下,接种狂犬病免疫球蛋白(rabies immunoglobulin,RIG)是暴露后处置中的重要环节。源于人或动物血浆的RIG存在产能不足、价格偏高等问题,选择有效的抗狂犬病病毒单克隆抗体代替RIG成为一种趋势。作为WHO推荐的、替代RIG的被动免疫制剂,抗狂犬病病毒单克隆抗体具有适应性强、安全性高等优点。鉴于此,本研究拟对已上市的和正在研发的抗狂犬病病毒单克隆抗体进行综述,为该领域的后续研发提供参考和借鉴。

关键词：狂犬病抗狂犬病病毒单克隆抗体狂犬病免疫球蛋白

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Ⅲa基因缺失的人7型腺病毒载体系统的建立

病毒学报 2024年第2期40卷 365-373页

作者：王洋王永进侯文哲郭小娟郑贵森邹小辉甘肃中医药大学公共卫生学院兰州730000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京100052

为了获得既能高效扩增外源基因,又不产生复制型子代病毒的腺病毒载体,我们构建了一个Ⅲa基因缺失的单周期腺病毒载体。本研究在前期已构建的E3区携带绿色荧光蛋白GFP的人7型腺病毒载体pK-Ad7E3GFP基础上进行。首先设计引物扩增包含氨苄... 详细信息

为了获得既能高效扩增外源基因,又不产生复制型子代病毒的腺病毒载体,我们构建了一个Ⅲa基因缺失的单周期腺病毒载体。本研究在前期已构建的E3区携带绿色荧光蛋白GFP的人7型腺病毒载体pK-Ad7E3GFP基础上进行。首先设计引物扩增包含氨苄青霉素抗性基因和质粒复制起点的AMP-ORI片段,利用限制性内切酶Asc I将pK-Ad7E3GFP切割为29.1kb与7.7kb的大小片段,其中,7.7kb小片段与AMP-ORI片段组装,获得第一个中间质粒pA-Ad7E3GAscI;经重叠延伸PCR、酶切、DNA组装等方法,将pA-Ad7E3GAscI上的Ⅲa基因进行删除,获得第二个中间质粒pA-AscDⅢa;经Pme I酶切的pA-AscDⅢa与上述29.1kb大片段经DNA组装后,得到重组腺病毒质粒pK-Ad7DⅢaE3GFP。同时,构建携带Ⅲa基因的真核表达载体pTPL-Ⅲa,转染293细胞,经G418筛选构建细胞系293-Ⅲa。结果发现,经Pme I线性化的pK-Ad7DⅢaE3GFP质粒转染293-Ⅲa细胞,7d后可见荧光聚集,且逐渐增大,表明重组腺病毒Ad7DⅢaE3GFP拯救成功;提取病毒基因组进行PCR鉴定,结果与预期相符;细胞培养上清经负染后,在电镜下可见腺病毒典型的正二十面体形态,培养细胞中也可见病毒呈晶格排列;以上结果均表明Ad7DⅢaE3GFP拯救成功。本研究成功建立了Ⅲa基因缺失的单周期人7型腺病毒载体系统,为该载体的研究与应用奠定基础。

关键词： Ⅲa基因人7型腺病毒载体单周期载体 DNA组装病毒拯救

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