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柱花草SgSPX1基因的克隆与表达分析

热带作物学报 2012年第10期33卷 1794-1799页

作者：孙丽莉田江陈志坚刘攀道廖红刘国道海南大学农学院海南海口570228 中国热带农业科学院品种资源研究所海南儋州571737 华南农业大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室根系生物学研究中心广东广州510642

磷是植物生长和发育所必需的大量元素,参与重要的代谢活动,有效磷含量低已经成为酸性土壤上限制作物生长的重要因素之一。以磷高效的柱花草基因型TPRC2001-1为材料,通过同源克隆的方法,首次克隆到柱花草编码只含有SPX结构域蛋白的基因,S... 详细信息

磷是植物生长和发育所必需的大量元素,参与重要的代谢活动,有效磷含量低已经成为酸性土壤上限制作物生长的重要因素之一。以磷高效的柱花草基因型TPRC2001-1为材料,通过同源克隆的方法,首次克隆到柱花草编码只含有SPX结构域蛋白的基因,SgSPX1。该基因cDNA全长1 324 bp,编码292个氨基酸残基,蛋白分子量为33 ku。定量PCR分析结果表明,低磷胁迫显著促进SgSPX1在柱花草根部的表达,表明该基因的表达受到低磷胁迫的调控,该研究的结果为进一步解析柱花草适应低磷胁迫的信号网络提供候选基因。

关键词：柱花草 SPX结构域同源克隆磷 SgSPX1

香蕉MuMADS1基因表达产物的亚细胞定位

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生命科学研究 2009年第5期13卷 418-421页

作者：周雪莉王园刘菊华金志强迟光红徐碧玉中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室中国海南海口571101 海南大学农学院中国海南海口571101

MuMADS1是从香蕉果实cDNA文库中筛选分离到的一个MADS-box基因.通过生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白可能作为转录因子定位于细胞核中,而且芯片分析表明:该基因在果实成熟早期表达上调,是乙烯的上游调控因子,可能与花的发育、果实... 详细信息

MuMADS1是从香蕉果实cDNA文库中筛选分离到的一个MADS-box基因.通过生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白可能作为转录因子定位于细胞核中,而且芯片分析表明:该基因在果实成熟早期表达上调,是乙烯的上游调控因子,可能与花的发育、果实发育及成熟相关.为进一步深入研究该基因功能,构建了以绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)为报告基因的融合植物表达载体pCAMBIA1304-MuMADS1.利用基因枪转化法将重组载体转入洋葱表皮细胞瞬时表达,荧光显微镜检测结果表明,该基因表达产物定位于细胞核中,符合转录因子特性.

关键词：香蕉 MuMADS1表达载体基因枪转化:亚细胞定位

灰树花海藻糖合酶基因在转基因甘蔗中的表达和对转基因植株抗旱性的改良

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灰树花海藻糖合酶基因在转基因甘蔗中的表达和对转基因植株抗旱性...

木薯MeSBE2基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体构建及验证

第二届热带亚热带植物资源的遗传多样性与基因发掘利用研讨会

作者：张树珍杨本鹏冯翠莲陈如凯罗敬萍蔡文伟刘飞虎中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室云南大学生命科学学院

海藻糖是由葡萄糖组成的非还原性双糖,在逆境条件下它作为一种特殊的保护剂能够有效的稳定有机体的生物学的结构,从而能增强生物体耐受逆境胁迫的能力。本实验把灰树花(Grifola frondosa)的海藻糖合酶(Trehalose synthase,TSase)基因在... 详细信息

海藻糖是由葡萄糖组成的非还原性双糖,在逆境条件下它作为一种特殊的保护剂能够有效的稳定有机体的生物学的结构,从而能增强生物体耐受逆境胁迫的能力。本实验把灰树花(Grifola frondosa)的海藻糖合酶(Trehalose synthase,TSase)基因在串联的双拷贝CaMV35S-35S启动子的驱动下,通过农杆菌(A grobacterium tumefaciens)EHA105介导转入甘蔗(Saccharum Officinarum L．)。通过 HPLC-ESDL检测证实转基因甘蔗中能积累高水平的海藻糖,转基因植物中海藻糖的含量高达 8．805-12．863mg/g FW,而非转基因甘蔗中检测不到海藻糖的积累。据报道,转TPS或TPP的转基因植物常表现出严重的生长受阻和根部形态的变化。本实验获得的转基因甘蔗植物既没有发生表型的变化,其生长也不受影响。转基因植株在温室和田间自然干旱的情况下生长比对照好,而且产量和含糖量都比对照有所提高。对T2代转基因植物进行的一系列抗旱的生理生化指标如叶片束缚水/自由水、丙二醛含量、质膜透性、叶绿素含量、SOD和POD活性等测定的结果,也证明其耐旱性得到了提高。实验结果表明转灰树花海藻糖合酶基因的转基因甘蔗植物能积累高水平的海藻糖,进而提高其耐旱性。

关键词：海藻糖合酶基因灰树花甘蔗耐旱性

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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分子植物育种 2023年第13期21卷 4287-4294页

作者：车延年陆小花王亚杰甄兴厚孙雅慧李瑞梅刘姣郭建春耿梦婷姚远海南大学生命科学学院海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海口571101 华中农业大学植物科学技术学院武汉430070

木薯淀粉由直链淀粉和支链淀粉组成,淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE)是调控木薯支链淀粉合成的关键酶。木薯淀粉分支酶2(MeSBE2)由两个同源基因MeSBE2.1和MeSBE2.2编码,主要负责木薯支链淀粉的合成。该研究构建了MeSBE2.1和MeS... 详细信息

木薯淀粉由直链淀粉和支链淀粉组成,淀粉分支酶(starch branching enzyme,SBE)是调控木薯支链淀粉合成的关键酶。木薯淀粉分支酶2(MeSBE2)由两个同源基因MeSBE2.1和MeSBE2.2编码,主要负责木薯支链淀粉的合成。该研究构建了MeSBE2.1和MeSBE2.2的双基因编辑载体并验证载体的编辑效果。利用在线软件CRISPR-P v2.0在保守区域设计同时靶标MeSBE2.1和MeSBE2.2的sg RNA,构建重组pCAMBIAP1301-Cas9-MeSBE2-g RNA质粒。将基因编辑载体转化农杆菌LBA4404后侵染‘华南8号’木薯脆性胚性愈伤组织。通过PCR扩增MeSBE2.1和MeSBE2.2的靶点区段,并将扩增片段进行Sanger测序和Hi-TOM分析基因编辑效果。结果发现MeSBE2.1和MeSBE2.2靶标位点被成功编辑,同时没有发生脱靶现象。本研究成功构建了MeSBE2.1和MeSBE2.2双基因编辑载体并验证了载体的有效性,有助于进一步获得MeSBE2基因的双突变体,获得高直链淀粉木薯。

关键词：木薯基因编辑载体构建淀粉

椰子基因组DNA的提取及RAPD反应体系的优化

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江西农业学报 2008年第10期20卷 7-9页

作者：李和帅李辉亮范海阔黄丽云唐龙祥中国热带农业科学院椰子研究所海南文昌571339 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101

以椰子叶片为实验材料,探索了椰子基因组DNA的提取方法,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化,建立了椰子的优化反应体系和程序。试验最终建立的椰子RAPD反应总体积为20μL,各有关成分的最佳浓度分别为Mg2+2.5 mmol/L,Taq DNA0.75 U,dNTP... 详细信息

以椰子叶片为实验材料,探索了椰子基因组DNA的提取方法,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化,建立了椰子的优化反应体系和程序。试验最终建立的椰子RAPD反应总体积为20μL,各有关成分的最佳浓度分别为Mg2+2.5 mmol/L,Taq DNA0.75 U,dNTP 0.2 mmol/L,Primer 1μmol/μL,模板DNA2.5 ng/μL。PCR循环程序为:94℃预变性1.5min;94℃变性20 s,36℃退火20 s,72℃延伸45 s,35个循环;最后72℃延伸3 min。

关键词：椰子 DNA提取 RAPD 优化

几丁质酶及基因参与水杨酸诱导香蕉枯萎病抗性

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广东农业科学 2015年第7期42卷 64-70,F0002页

作者：侯晓婉徐碧玉胡伟颜彦金志强海南大学农学院海南海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院海口实验站海南海口570102

由尖孢镰刀菌古巴专化型真菌引起的香蕉枯萎病已成为最具毁灭性的香蕉病害,严重威胁香蕉产业的健康可持续发展。因此对香蕉枯萎病病程相关基因的研究显得尤为重要。比较了Foc4侵染下,香蕉6个病菌应答相关基因的表达;分析了Foc4处理和SA+... 详细信息

由尖孢镰刀菌古巴专化型真菌引起的香蕉枯萎病已成为最具毁灭性的香蕉病害,严重威胁香蕉产业的健康可持续发展。因此对香蕉枯萎病病程相关基因的研究显得尤为重要。比较了Foc4侵染下,香蕉6个病菌应答相关基因的表达;分析了Foc4处理和SA+Foc4处理的易感病巴西蕉幼苗外部形态特征、几丁质酶活性及几丁质酶基因表达的变化。结果发现Ma-14-3-3c、Ma-14-3-3d、Ma-14-3-3e、Ma-14-3-3f、Ma-Cel和MaChi 6个基因都能在转录水平响应Foc4的胁迫;与Foc4处理相比较,SA+Foc4处理的香蕉幼苗枯萎病抗性增强,根系几丁质酶活性和几丁质酶基因表达水平提高。表明几丁质酶等6个基因参与了香蕉枯萎病的生物逆境胁迫应答,同时外源水杨酸处理能够通过诱导香蕉几丁质酶的活性及几丁质酶基因的表达增强香蕉对枯萎病的抗性。

关键词：香蕉尖孢镰刀菌古巴专化型真菌水杨酸几丁质酶

巴西橡胶树转录中介体HbMed25基因克隆与表达分析

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广西植物 2021年第9期41卷 1548-1560页

作者：张世鑫吴绍华杨署光晁金泉李招娣田维敏中国热带农业科学院橡胶研究所/农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海口571100 重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学实验室重庆400016

转录中介体(mediator,Med)中的Med25基因在植物的组织发育、器官发生、胁迫响应以及调控茉莉酸(JA)信号途径等方面起重要调控作用。该文在巴西橡胶树基因组序列中找到了橡胶树Med25基因的序列,通过RT-qPCR和RACE技术克隆HbMed25基因的... 详细信息

转录中介体(mediator,Med)中的Med25基因在植物的组织发育、器官发生、胁迫响应以及调控茉莉酸(JA)信号途径等方面起重要调控作用。该文在巴西橡胶树基因组序列中找到了橡胶树Med25基因的序列,通过RT-qPCR和RACE技术克隆HbMed25基因的全长序列并进行生物信息学预测分析结果显示,HbMed25基因包含2655 bp的开放阅读框,编码884个氨基酸,蛋白分子量为95 kD,理论等电点为8.68,疏水性蛋白,亚细胞定位最可能为细胞核。Real-time PCR分析结果显示,HbMed25基因在树皮中表达量最高,在植物激素JA处理的形成层和胶乳材料中HbMed25基因在处理早期(1 h和2~4 h)上调表达,受割胶处理HbMed25基因在处理早期上调表达且对高产的橡胶树品系(CATAS 8-79和CATAS 7-33-97)的割胶处理响应更明显。综上结果认为,HbMed25基因极大可能参与了JA信号途径的调控,对阐明JA诱导橡胶树次生乳管分化的分子调控机制具有促进作用。

关键词：巴西橡胶树 HbMed25 表达分析茉莉酸信号途径乳管分化橡胶合成

华南热区农业气候资源时空数据库构建与集成分析

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热带农业科学 2019年第6期39卷 103-110页

作者：胡杰戴声佩李茂芬中国热带农业科学院科技信息研究所/海南省热带作物信息技术应用研究重点实验室

基于气象站点观测数据,利用地理信息系统技术和面向对象的语言,构建了华南热区农业气候资源时空数据库,并集成分析了相关气候要素的时空变化情况,可为区域可持续发展、生态环境保护、农业种植生产、农业区划规划,以及社会经济发展等提... 详细信息

基于气象站点观测数据,利用地理信息系统技术和面向对象的语言,构建了华南热区农业气候资源时空数据库,并集成分析了相关气候要素的时空变化情况,可为区域可持续发展、生态环境保护、农业种植生产、农业区划规划,以及社会经济发展等提供数据基础和科学支撑,但时空数据库在时间延续性、空间精准性、数据扩展性、成果应用性等方面仍需要进一步的研究。

关键词：农业气候资源时空数据库华南

外源调节物质对柑橘果实高温胁迫的抗氧化效应

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热带作物学报 2018年第8期39卷 1548-1552页

作者：万继锋李娟杨为海曾辉张汉周陈杰忠中国热带农业科学院南亚热带作物研究所/农业部热带果树生物学重点实验室广东湛江524091 华南农业大学园艺学院广东广州510642 仲恺农业工程学院园艺园林学院广东广州510225

以抗坏血酸(AsA)、氯化钙(CaCl2)和水杨酸(SA)3种外源调节物质叶面喷施盆栽暗柳橙果实后,置于环境调控生长室中进行38℃高温处理,探讨3种不同性质外源调节物质对柑橘果实高温胁迫的抗氧化效应。结果表明:在高温胁迫下,施用外源AsA、CaCl... 详细信息

以抗坏血酸(AsA)、氯化钙(CaCl2)和水杨酸(SA)3种外源调节物质叶面喷施盆栽暗柳橙果实后,置于环境调控生长室中进行38℃高温处理,探讨3种不同性质外源调节物质对柑橘果实高温胁迫的抗氧化效应。结果表明:在高温胁迫下,施用外源AsA、CaCl2和SA均可显著降低果皮组织的超氧阴离子自由基(O2?-)和丙二醇(MDA)含量,提高果皮组织的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性及AsA和谷胱甘肽(GSH)含量。这说明3种外源调节物质均能减轻膜脂过氧化程度,提高保护酶活性,对柑橘果实高温胁迫具有缓解效应。

关键词：柑橘抗坏血酸氯化钙水杨酸高温胁迫抗氧化