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基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtHQT2基因敲除及功能分析

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烟草科技 2024年

作者：李亦君夏琳杨小贝王中谢小东杨军宁黔冀武明珠中国烟草总公司郑州烟草研究院河南师范大学生命科学学院

羟肉桂酰辅酶A奎宁酸羟肉桂酰转移酶（hydroxycinnamoyl-CoA quinate hydroxycinnamoyl transferase， HQT）是绿原酸合成代谢通路的关键酶。从普通烟草（Nicotiana tabacum L.）中克隆到1个NtHQT的同源基因，并命名为NtHQT2。氨基酸序... 详细信息

羟肉桂酰辅酶A奎宁酸羟肉桂酰转移酶（hydroxycinnamoyl-CoA quinate hydroxycinnamoyl transferase， HQT）是绿原酸合成代谢通路的关键酶。从普通烟草（Nicotiana tabacum L.）中克隆到1个NtHQT的同源基因，并命名为NtHQT2。氨基酸序列比对和遗传进化分析结果显示，NtHQT2具有HQT蛋白保守的HTLSD和DEFEG基序，并且在进化上与烟草及其他茄科植物HQT属于同1个分支。通过qRT-PCR分析NtHQT2基因在烟草不同组织的表达模式发现，NtHQT2基因在烟草根、茎、叶、腋芽和花中均有表达，但在叶片中的表达量较高。进一步利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对NtHQT2基因进行定向敲除，获得了3种类型的T0代基因编辑植株，均能导致NtHQT2蛋白的翻译错误。通过测定T2代NtHQT2基因编辑烟株叶片中绿原酸含量，发现编辑烟株比对照K326绿原酸含量显著下降，说明NtHQT2基因正向调控绿原酸的合成。

关键词：烟草 NtHQT2基因绿原酸 CRISPR/Cas9 基因编辑

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施用多抗霉素后烟叶叶际微生态变化规律

农药学学报 2024年第1期26卷 88-100页

作者：冯瑞超汪汉成邱雪柏蔡刘体陆宁许灵杰章松柏贵州省烟草科学研究院贵阳550081 长江大学农学院湖北荆州434025 中国烟草总公司贵州省公司贵阳550000

多抗霉素常用于防控烟草叶斑类病害,为探究其施用后烟叶叶际微生态的变化规律,采用Illumina高通量测序技术分析了其施用后不同时期叶际微生物的菌群结构与多样性,利用Biolog-ECO技术解析了叶际微生物代谢功能。结果表明:多抗霉素施用前... 详细信息

多抗霉素常用于防控烟草叶斑类病害,为探究其施用后烟叶叶际微生态的变化规律,采用Illumina高通量测序技术分析了其施用后不同时期叶际微生物的菌群结构与多样性,利用Biolog-ECO技术解析了叶际微生物代谢功能。结果表明:多抗霉素施用前,健康与感病烟叶叶际真菌均主要分布于子囊菌门(64.20%、94.05%)和担子菌门(6.77%、2.40%);细菌均主要分布于变形菌门(7.16%、38.81%)和厚壁菌门(16.00%、0.78%);健康烟叶叶际真菌和细菌的多样性指数显著高于感病烟叶;健康烟叶叶际微生物代谢活性强于感病烟叶。多抗霉素施用后,感病烟叶中链格孢属、Boeremia、泛菌属、假单胞菌属的相对丰度均先降低后增加,而枝孢霉属、附球菌属、亚隔孢壳属、Symmetrospora、Stagonosporopsis、鞘氨醇单胞属等的相对丰度均先增加后降低;健康烟叶中链格孢属、附球菌属、Symmetrospora、Stagonosporopsis、鞘氨醇单胞属的相对丰度均先增加后降低,而枝孢霉属、Boeremia、泛菌属、假单胞菌属的相对丰度总体均呈下降趋势。感病烟叶叶际真菌和细菌多样性总体呈上升趋势,而健康烟叶的真菌多样性呈上升趋势、细菌多样性呈下降趋势。在代谢功能方面,多抗霉素施用后,感病与健康烟叶叶际微生物对31种碳源代谢均受到不同程度抑制,代谢活性随施药时间延长逐渐恢复。研究结果揭示了多抗霉素施用后烟叶叶际微生物菌群结构和多样性的变化规律,可为杀菌剂防控植物病害的微生态机制的研究提供参考。多抗霉素对健康烟叶菌群结构和微生物代谢的影响均高于感病烟叶,建议该药剂在生产上作为一种预防保护剂施用效果最佳。

关键词：多抗霉素烟草赤星病叶际微生物群落结构与多样性代谢功能

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烟草物流配送中心配送精细化管理体系建设

中国航务周刊 2024年第14期 66-68页

作者：张春雷中国烟草总公司青海省公司

近年来,随着交通运输网络的日益完善,以及信息化物流管理系统的广泛应用,物流行业得到了快速发展。其中,烟草作为一种特殊的商品,在物流配送管理体系方面与传统商品有着一定的区别。本文以烟草物流配送中心物流配送精细化管理体系为研... 详细信息

近年来,随着交通运输网络的日益完善,以及信息化物流管理系统的广泛应用,物流行业得到了快速发展。其中,烟草作为一种特殊的商品,在物流配送管理体系方面与传统商品有着一定的区别。本文以烟草物流配送中心物流配送精细化管理体系为研究内容,在简要论述烟草物流配送中心业务构成的基础上,指出精细化管理体系建设的意义,并围绕传统烟草物流配送中心所面临的实际问题,提出具有可行性的物流配送精细化管理体系建设思路,以期能够为烟草物流配送管理工作提供参考。

关键词：烟草物流配送中心精细化管理

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基于数字化背景下审计管理模式的创新实践

财讯 2024年第7期 177-179页

作者：孙超中国烟草总公司青海省公司

国有企业作为重要的市场主体在增加就业，刺激经济发展方面起到了不可替代的作用。由于主客观因素的影响，国有企业的审计管理制度尚不完善，普遍存在较高的审计风险，严重影响了会计信息可靠性水平。本文对审计管理模式和审计风险的概... 详细信息

国有企业作为重要的市场主体在增加就业，刺激经济发展方面起到了不可替代的作用。由于主客观因素的影响，国有企业的审计管理制度尚不完善，普遍存在较高的审计风险，严重影响了会计信息可靠性水平。本文对审计管理模式和审计风险的概念与类型进行了阐述，从多个角度提出了数字化背景下国有企业审计管理模式创新实践路径。

关键词：国有企业审计管理模式创新实践

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烟草赤星病拮抗菌的筛选及其生防机理初探

山西农业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：孙伟霖颜霞高剑欣崔传斌王平平王娜娜杨明明黄丽丽西北农林科技大学生命科学学院中国烟草总公司陕西省烟草公司西北农林科技大学植物保护学院

[目的]本研究以烟草赤星病菌为靶标菌，筛选对其拮抗效果较好的生防菌，并对其进行后续的鉴定，同时初步设计试验验证生防机理，为烟草赤星病的拮抗生防菌资源、拮抗菌剂的制备等提供新的参考。[方法]采用初筛复筛获得生防菌；绘制系统... 详细信息

[目的]本研究以烟草赤星病菌为靶标菌，筛选对其拮抗效果较好的生防菌，并对其进行后续的鉴定，同时初步设计试验验证生防机理，为烟草赤星病的拮抗生防菌资源、拮抗菌剂的制备等提供新的参考。[方法]采用初筛复筛获得生防菌；绘制系统发育树鉴定、抑菌谱系测定、菌株产酶活性测定、对赤星病病菌菌丝生长和孢子萌发的影响、诱抗定量检测、离体叶片防效等方法验证生防机理。[结果]（1）筛得2株对于赤星病菌拮抗效果较好的生防菌，经由16S rDNA鉴定发现其分别是枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）X768与贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）703；并完成了两株生防芽孢杆菌的抑菌谱系测定，证明其均具有抑菌广谱性；（2）对其生防机理探究过程中，菌株703具备产生纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶的能力，菌株X768具备产生纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的能力；两株生防芽孢杆菌均可抑制赤星病孢子的萌发和影响菌丝正常生长的形态，对于病原菌具有较强的抑制作用；（3）使用qRT-PCR法验证了生防菌对烟草防御基因通路（SA、JA、ET等通路）的影响，其中应用菌株703处理后烟草应用防御通路可能与SA通路、JA通路和泛素连接酶通路相关；而使用菌株X768处理后烟草应用防御通路可能与SA通路和泛素连接酶通路相关。[结论]筛得的具有抑制烟草赤星病作用的生防菌株B. subtilis X768与B. velezensis 703，抑菌谱较广，均可较强效果地抑制赤星病孢子的萌发和菌丝生长，并且两株生防菌均可引起烟草防御基因通路的上调，离体叶片防效效果较好。

关键词：烟草赤星病拮抗菌生物防治生防机理

基于最小数据集的植烟土壤质量评价及障碍因子诊断

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烟草科技 2024年第2期57卷 45-53页

作者：张恒张艳玲许亚东冯文强江鸿戴华鑫翟振冯长春梁太波中国烟草总公司郑州烟草研究院郑州450001 郑州大学农学院郑州市450066 四川省烟草科学研究所成都市610041

为准确评价四川烟区植烟土壤质量,采集四川省烟田土壤样品,通过构建最小数据集计算土壤质量指数,并使用障碍因子诊断模型明确主要障碍因子。结果表明:(1)根据相关分析、主成分分析和Norm值计算结果,筛选碱解氮、pH值、氯离子、酸性磷酸... 详细信息

为准确评价四川烟区植烟土壤质量,采集四川省烟田土壤样品,通过构建最小数据集计算土壤质量指数,并使用障碍因子诊断模型明确主要障碍因子。结果表明:(1)根据相关分析、主成分分析和Norm值计算结果,筛选碱解氮、pH值、氯离子、酸性磷酸酶、速效钾、容重、有效铁和脲酶8项评价指标进入最小数据集。(2)根据总数据集计算的土壤质量指数(总数据集土壤质量指数,SQI_(TDS))与根据最小数据集计算的土壤质量指数呈极显著(P省各县(市、区)的植烟土壤质量指数平均值分布在45.76~65.36之间,除喜德县和普格县外,其他植烟县(区、市)的土壤质量指数平均值均大于50.00;四川省植烟土壤质量提升的主要障碍因子为总孔隙度、容重、水溶态钙、水溶态镁和有效铁。

关键词：植烟土壤土壤质量主成分分析最小数据集障碍因子

基于大气压力补偿的卷烟吸阻检测仪器校准方法

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烟草科技 2024年第6期57卷 85-91页

作者：王瀚乐杨荣超张鹏飞史占东宁英豪于千源曾波张勍崔廷苗芊中国烟草总公司郑州烟草研究院郑州450001 河南中烟工业有限责任公司技术中心郑州市450000

为提高同一卷烟样品在不同大气压力(800~992 hPa)环境下吸阻测量结果的一致性和准确性,分析了卷烟吸阻检测仪器校准过程中大气压力对标准恒流孔(CFO)入口端和吸阻标准棒输出端气体体积流量的影响,建立了一种基于大气压力补偿的吸阻检测... 详细信息

为提高同一卷烟样品在不同大气压力(800~992 hPa)环境下吸阻测量结果的一致性和准确性,分析了卷烟吸阻检测仪器校准过程中大气压力对标准恒流孔(CFO)入口端和吸阻标准棒输出端气体体积流量的影响,建立了一种基于大气压力补偿的吸阻检测仪校准方法,并基于数据拟合确定方法中校准模型的参数;利用6支不同规格吸阻标准棒,分别采用校准模型和两点校准法对不同大气压力下获得的吸阻测量值进行对比。结果表明:①大气压力对吸阻检测仪测量结果的影响可以通过测量校准过程中大气压力P与吸阻标准棒实际压降PD进行修正补偿;②CFO入口端气体体积流量与大气压力基本满足二次函数关系;③与两点校准法相比,采用校准模型在不同大气压力下获得的吸阻测量结果更接近标准压降(平均相对误差<0.15%)且一致性更高(变异系数<0.05%)。该方法可为提高吸阻检测仪测量结果的准确度提供参考。

关键词：卷烟大气压力吸阻检测仪器校准模型标准恒流孔吸阻标准棒

烟草马铃薯Y病毒拮抗细菌ZF-10的筛选鉴定及发酵条件优化

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烟草科技 2024年第5期57卷 64-74页

作者：张诺妮谢云波李斌张宗锦杨章明闫芳芳杨鹏陈寿明安德荣西北农林科技大学植物保护学院陕西省咸阳市712100 中国烟草总公司四川省公司成都市610000 四川省烟草公司攀枝花市公司四川省攀枝花市617000

为获得对烟草马铃薯Y病毒具有抑制作用的拮抗菌,从烟草根际土壤中筛选和测定了马铃薯Y病毒高效拮抗细菌的抑菌广谱性及生物学功能,并利用单因素试验对菌株进行发酵条件优化,同时验证了菌株对烟草马铃薯Y病毒病的盆栽防效。结果表明,共... 详细信息

为获得对烟草马铃薯Y病毒具有抑制作用的拮抗菌,从烟草根际土壤中筛选和测定了马铃薯Y病毒高效拮抗细菌的抑菌广谱性及生物学功能,并利用单因素试验对菌株进行发酵条件优化,同时验证了菌株对烟草马铃薯Y病毒病的盆栽防效。结果表明,共分离纯化出216株拮抗细菌。其中,有4株细菌对PVY具有显著拮抗活性,而ZF-10的拮抗效果最佳,拮抗率为90.20%。经形态学观察、生理生化特性检测及分子生物学分析鉴定该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。ZF-10对多种病原真菌具有抑制作用,并具有产氨、产纤维素酶、产蛋白酶、溶解无机磷和产铁载体能力,但无解钾能力。ZF-10的最优发酵培养基为可溶性淀粉15.0 g/L、酵母浸粉25.0 g/L、硫酸镁7.5 g/L,最优发酵条件为培养温度32℃、接种量1%、250 mL摇瓶装液量60 mL、初始pH值7.0、发酵时间36 h。盆栽试验结果显示,ZF-10发酵液对烟草马铃薯Y病毒病的相对防效为61.85%,表现出较好的生防潜力。

关键词：烟草马铃薯Y病毒拮抗细菌贝莱斯芽孢杆菌抑菌谱发酵

基于烟支损失质量的三种加热卷烟基棒截留效果研究

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中国烟草学报 2024年

作者：王松史占东曾波朱震颜秋男范黎李栋张勍苗芊中国烟草总公司郑州烟草研究院中国科学院合肥物质科学研究院

【目的】研究加热卷烟基棒材料对烟气释放质量的影响。【方法】基于加热卷烟逐口烟支损失质量（Cigarette lose mass，CLM）测量装置，选取市售加热卷烟，截取烟丝段增加烟气连接段制作参考样品，在参考样品后增加不同长度或材料基棒制... 详细信息

【目的】研究加热卷烟基棒材料对烟气释放质量的影响。【方法】基于加热卷烟逐口烟支损失质量（Cigarette lose mass，CLM）测量装置，选取市售加热卷烟，截取烟丝段增加烟气连接段制作参考样品，在参考样品后增加不同长度或材料基棒制作测试样品，参照ISO标准抽吸模式，测量参考样品和测试样品逐口CLM的变化，以测试样品相对参考样品的CLM减少率作为截留率。【结果】（1）参考样品第1口的相对标准偏差为5.92%，第2口至第6口相对标准偏差最大值为3.39%，选取的市售加热卷烟烟丝段烟气释放质量较为稳定；（2）截留率随着基棒长度增加而增加，当基棒长度从5 mm增加到20 mm时，中空基棒、PLA基棒、醋纤基棒截留率分别增加7.49%、21.56%、17.09%；且截留率：中空基棒<醋纤基棒< PLA基棒；（3）PLA基棒为20 mm、醋纤基棒大于等于10 mm后逐口的截留率呈现递减趋势。

关键词：加热卷烟捕集量损失质量中空基棒 PLA基棒醋纤基棒