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链球菌溶血素O真核表达载体构建及重组蛋白的表达纯化

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中国兽医科学 2025年

作者：向祝徐莹刘意赵格高玉斌刘俊辉张喜悦王君玮中国动物卫生与流行病学中心农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方) 中国海洋大学食品科学与工程学院

为了获得接近于天然的抗原蛋白，根据GenBank公布的链球菌溶血素O(streptolysinO，SLO)基因序列合成SLO基因并克隆于真核载体pPICZαA，构建pPICZαA-SLO重组质粒。经酶切和测序鉴定后，将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中，通... 详细信息

为了获得接近于天然的抗原蛋白，根据GenBank公布的链球菌溶血素O(streptolysinO，SLO)基因序列合成SLO基因并克隆于真核载体pPICZαA，构建pPICZαA-SLO重组质粒。经酶切和测序鉴定后，将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中，通过PCR鉴定和基因测序构建正确的毕赤酵母表达菌株，并用Ni-NTA亲和层析技术纯化后，对重组蛋白进行鉴定。结果显示，成功构建毕赤酵母表达菌株PichiaspGS115(pPICZαA-SLO)，经SDS-PAGE、Western-blot鉴定，检测到相对分子质量为65 kDa的目的蛋白，表明SLO在毕赤酵母中成功表达并纯化，为SLO蛋白的工业化生产奠定了基础。

关键词：链球菌溶血素O 真核表达蛋白表达纯化

酶解鱿鱼皮制备ACE抑制肽的工艺优化及产物特性研究

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食品工业科技 2025年

作者：张喆马凌云尚凡凡刘益辉谢庆超赵勇上海海洋大学食品学院农业农村部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海) 上海海洋大学食品质量安全检测实验室

为了使鱿鱼加工副产物鱿鱼皮获得高值化利用，本文通过酶解秘鲁鱿鱼皮（Dosidicus gigas skin）制备血管紧张素转换酶（Angiotensin-converting Enzyme，ACE）抑制肽，以ACE抑制率和水解度作为考察指标，通过单因素实验和响应面优化法... 详细信息

为了使鱿鱼加工副产物鱿鱼皮获得高值化利用，本文通过酶解秘鲁鱿鱼皮（Dosidicus gigas skin）制备血管紧张素转换酶（Angiotensin-converting Enzyme，ACE）抑制肽，以ACE抑制率和水解度作为考察指标，通过单因素实验和响应面优化法优化酶解工艺条件，测定了酶解多肽的ACE半抑制浓度、分子量分布和DPPH自由基清除率。结果显示，中性蛋白酶为酶解最适蛋白酶，最佳酶解条件为：酶解温度45 ℃，酶解时间2.6 h，底物添加量2.0%，蛋白酶添加量7200 U/g，酶解pH 8.0。在此条件下，鱿鱼皮酶解产物的ACE抑制率为88.22%±1.28%，与预测值接近。鱿鱼皮多肽ACE抑制率IC50为2.839 mg/mL；分子量分布主要在3 kDa以下，占比99.17%，测定DPPH自由基清除率IC50为6.183 mg/mL。本研究结果为鱿鱼皮制备生物活性肽实现鱿鱼加工副产物高值化利用提供了理论依据。

关键词： ACE抑制肽生物活性肽鱿鱼皮响应面优化分子量分布

四种红鳍东方鲀养殖系统的微生物群落多样性研究

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中国海洋大学学报(自然科学版) 2025年第02期 30-44页

作者：郑昕元田相利王润泽泮淼军王龙斌张海恩李卫东海水养殖教育部重点实验室(中国海洋大学) 唐山海都水产食品有限公司

为了查明红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)池塘养殖系统微生物群落特征，本研究采用16S rRNA高通量测序技术，设置了红鳍东方鲀单养系统、红鳍东方鲀-美洲帘蛤(Mercenaria mercenaria)二元混养系统、红鳍东方鲀-日本对虾(Penaeus japonicu... 详细信息

为了查明红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)池塘养殖系统微生物群落特征，本研究采用16S rRNA高通量测序技术，设置了红鳍东方鲀单养系统、红鳍东方鲀-美洲帘蛤(Mercenaria mercenaria)二元混养系统、红鳍东方鲀-日本对虾(Penaeus japonicus)-美洲帘蛤三元混养系统和红鳍东方鲀-日本对虾传统混养系统四种红鳍东方鲀养殖系统，对这四种养殖系统的红鳍东方鲀肠道微生物、水体微生物和沉积物微生物群落结构和多样性进行了比较研究。研究表明，弯曲杆菌门(Campilobacterota)、变形菌门(Proteobacteria)、螺旋菌门(Spirochaetota)和厚壁菌门(Firmicutes)是红鳍东方鲀肠道微生物群落中优势菌门，其中弯曲杆菌门是其特有的优势菌门。变形菌门、脱硫杆菌门(Desulfobacterota)、拟杆菌门(Bacteroidota)、厚壁菌门和绿弯菌门(Chloroflexi)为沉积物微生物群落中优势菌门；变形菌门、蓝细菌门(Cyanobacteria)、拟杆菌门和放线菌门(Actinobacteriota)为水体微生物群落中优势菌门。不同养殖系统的红鳍东方鲀肠道微生物α多样性未见显著差异，但不同系统的红鳍东方鲀肠道、沉积物和水体的微生物群落结构存在显著差异。红鳍东方鲀肠道微生物与环境微生物相似性较低，表明肠道微生物组成受环境微生物的影响较小。冗余分析表明，环境微生物群落结构和多样性受沉积物和水体环境因子的影响，其中盐度、氨氮、亚硝氮、硝氮和总氮与水体菌群群落结构显著相关，而亚硝氮、硝氮和总氮则与沉积物菌群群落结构显著相关。研究结果表明，不同混养模式显著影响红鳍东方鲀肠道及环境的微生物群落结构，养殖模式不同导致的环境理化因子变化可能是导致环境微生物群落结构差异的重要原因。

关键词：微生物多样性细菌群落结构鱼虾贝混养环境因子红鳍东方鲀

青藏高原湖泊沉积物细菌群落的盐度梯度分布格局及驱动因素

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湖泊科学 2025年第1期37卷 238-252,I0025,I0026页

作者：陈幸婷杜晨亮王建军沈吉南京大学地理与海洋科学学院南京210023 中国科学院南京地理与湖泊研究所湖泊与流域水安全重点实验室南京211135

盐度是影响湖泊细菌群落最重要的环境因子之一,揭示盐度对细菌群落变化的影响对于深入理解水生生态系统细菌群落具有重要意义。本研究以青藏高原西南部的22个湖泊为对象,探讨33个沉积物样本的细菌丰富度、均匀度和群落组成,分析其随盐... 详细信息

盐度是影响湖泊细菌群落最重要的环境因子之一,揭示盐度对细菌群落变化的影响对于深入理解水生生态系统细菌群落具有重要意义。本研究以青藏高原西南部的22个湖泊为对象,探讨33个沉积物样本的细菌丰富度、均匀度和群落组成,分析其随盐度梯度的变化规律,阐明其潜在的环境驱动因素。结果表明,变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和放线菌门(Actinobacteria)是青藏高原湖泊沉积物中的优势细菌门类,相对丰度分别为46.54%、12.41%和7.23%,总和达到整个细菌门类的66.18%。对于细菌α多样性,物种丰富度和均匀度均随盐度增加呈显著下降趋势;对于细菌β多样性,基于非度量多维排列分析,根据盐度可以将细菌群落分布分为3个显著的独立簇,分别对应淡水、咸水和高盐环境。Mantel检验结果表明,相较于地理距离,湖泊沉积物细菌群落Bray-Curtis不相似性随盐度的变化更为显著。方差分解分析和随机森林分析结果表明,细菌物种丰富度、均匀度和群落组成变化的最佳预测因子为盐度和磷酸盐等化学因素,整体贡献率分别为72.98%、59.82%和60.83%,其中盐度是丰富度、均匀度和群落组成变化的主要驱动因素,其相对贡献率分别为45.47%、79.18%和79.50%。基于结构方程模型进一步分析表明,湖泊沉积物细菌丰富度、均匀度和群落组成变化均受到盐度直接或间接的影响。本研究结果充分探讨了盐度对细菌群落变化的影响,揭示了青藏高原湖泊沉积物细菌组成及其环境驱动因素,可为理解湖泊生态系统细菌群落对环境变化的响应提供科学支撑。

关键词：湖泊细菌群落物种丰富度物种均匀度群落组成环境驱动因素青藏高原

凡纳滨对虾热处理过程中虾青素酯与肌原纤维蛋白的结合作用

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广东海洋大学学报 2025年

作者：谭永曌张迪吉宏武刘书成广东海洋大学食品科技学院/广东省水产品加工与安全重点实验室/广东省海洋食品工程技术研究中心/水产品深加工广东普通高等学校重点实验室

【目的】探讨凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）热处理过程中虾青素酯（astaxanthin ester,AE）与肌原纤维蛋白（myofibrillar protein,MP）之间的结合作用，为虾仁红色品质稳定提供依据。【方法】从新鲜凡纳滨对虾中提取虾青素酯与... 详细信息

【目的】探讨凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）热处理过程中虾青素酯（astaxanthin ester,AE）与肌原纤维蛋白（myofibrillar protein,MP）之间的结合作用，为虾仁红色品质稳定提供依据。【方法】从新鲜凡纳滨对虾中提取虾青素酯与肌原纤维蛋白，采用分子自组装技术制备不同AE质量浓度的AE-MP复合物，观察复合物样品并测定其粒径和电位，对AE-MP分别进行60、80、100℃热处理，采用透射电镜与多种光谱技术研究AE-MP热处理前后的分散性、光谱特性、表面疏水性等指标。【结果】制备的AE-MP分散性良好，粒径在140～365 nm之间，电位在-2～-4 mV之间，电位与虾青素酯浓度呈负相关；AE-MP经热处理后结合更紧密，紫外吸收强度与热处理温度和虾青素酯浓度呈正相关，且最大吸收峰发生红移；虾青素酯可使肌原纤维蛋白发生荧光淬灭，AE-MP荧光强度与热处理温度和虾青素酯浓度呈负相关，且肌原纤维蛋白最大吸收峰发生蓝移；AE-MP表面疏水性与热处理温度呈正相关，与虾青素酯浓度呈负相关，表明虾青素酯与肌原纤维蛋白疏水区域发生了结合；红外光谱结果表明，经过热处理，虾青素酯通过氢键与疏水相互作用与肌原纤维蛋白发生结合，肌原纤维蛋白二级结构发生变化。虾青素酯与肌原纤维蛋白发生结合的最佳温度为100℃，虾青素酯最佳质量浓度为0.10 mg/mL。【结论】热处理可增强AEMP复合物的结合作用和稳定性，其稳定程度与热处理温度和虾青素酯质量浓度有关，两者之间的结合力主要为疏水相互作用、静电相互作用和氢键。

关键词：虾青素酯肌原纤维蛋白凡纳滨对虾热处理结合光谱分析

基于“潜力-连通度-韧性”的粤港澳大湾区城市群生态风险适应能力评估与提升策略

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生态学报 2025年

作者：王欣妍王辰星张英男严岩中国科学院生态环境研究中心城市与区域生态国家重点实验室中国科学院大学国家食品安全风险评估中心

全球气候变化、城市人口的增加和活动强度的加剧、以及城市系统的脆弱性使得城市化区域生态风险防控变得越来越重要，加强主动适应性管理以提高风险适应能力是城市化区域应对生态风险的核心。然而，适应性应用的研究尚未形成涵盖风险应... 详细信息

全球气候变化、城市人口的增加和活动强度的加剧、以及城市系统的脆弱性使得城市化区域生态风险防控变得越来越重要，加强主动适应性管理以提高风险适应能力是城市化区域应对生态风险的核心。然而，适应性应用的研究尚未形成涵盖风险应对全过程的系统体系。从适应性视角提出了基于“潜力-连通度-韧性”的三维城市化区域生态风险分析框架，采用主成分分析评估粤港澳大湾区全过程、多尺度的生态风险适应能力，基于适应性循环表征城市发展阶段特征。结果表明，大湾区城市群的生态风险适应能力总体处于中等水平，空间格局表现出由周围山区向中心和东南城市建成区降低的趋势，大湾区中部和东南部地区适应能力低值区占比达到7.70%，主要涉及适应性循环中重组阶段的城市，包括澳门特别行政区、佛山市、东莞市、中山市、深圳市和广州市，面临较强的极端高温、内涝、景观破碎化等风险，建议该区域可作为重点防控区，优先加强风险防范和保护措施。实证研究显示，建立的三维评估框架能够更好的反映生态系统的结构、功能和动态变化对城市化区域生态风险适应能力的影响，为加强城市化区域生态风险全过程管理提供参考。

关键词：城市化区域生态风险风险评估适应性管理全过程管理粤港澳大湾区

双齿围沙蚕酶解产物对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

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大连海洋大学学报 2025年

作者：李丽娟朱国萍曹文红陈忠琴谭明堂广东海洋大学食品科技学院国家贝类加工技术研发分中心(湛江)广东省水产品加工与安全重点实验室广东省海洋食品工程技术研究中心广东省海洋生物制品工程实验室大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心

为探究双齿围沙蚕（Perinereisaibuhitensis）对免疫抑制小鼠的免疫调节作用，本研究以双齿围沙蚕酶解产物为研究对象，环磷酰胺诱导建立免疫抑制小鼠模型，测定空白组、模型组、样品组（8kDa沙蚕酶解产物）的小鼠体重、免疫脏器指数、... 详细信息

为探究双齿围沙蚕（Perinereisaibuhitensis）对免疫抑制小鼠的免疫调节作用，本研究以双齿围沙蚕酶解产物为研究对象，环磷酰胺诱导建立免疫抑制小鼠模型，测定空白组、模型组、样品组（8kDa沙蚕酶解产物）的小鼠体重、免疫脏器指数、脾脏T淋巴细胞亚群、总白细胞数量及免疫球蛋白质量浓度的变化。结果表明：沙蚕酶解产物三种超滤组分均能提高小鼠免疫脏器指数，增加脾脏T细胞CD3e+的数量，提高免疫球蛋白的质量浓度，均具有一定的免疫功效。其中＜5kDa酶解产物高剂量组免疫功效最佳，可显著性提高小鼠体重指数、免疫脏器指数及白细胞的总数（P<0.05），极显著性增加脾脏T细胞CD3e+的数量和CD4+/CD8a+ 的比值（P<0.01），增强浆细胞对免疫球蛋白的分泌效果。研究表明，双齿围沙蚕可改善免疫抑制剂导致的免疫功能损伤，增强免疫抑制小鼠免疫调节作用，具有开发成免疫调节剂的潜力。

关键词：双齿围沙蚕酶解产物免疫调节

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氨基甲酸酯类农药半抗原的设计与改造

食品工业科技 2019年第18期40卷 41-46,53页

作者：李霞霞崔南曹立民隋建新林洪孙逊中国海洋大学食品安全与质量实验室

本研究设计了一种针对氨基甲酸酯类农药半抗原的通用改造,制备了涕灭威和异丙威两种人工半抗原。通过分子模拟手段和制备鼠源多克隆抗体对半抗原改造效果进行评价。结果表明,最终涕灭威抗体效价为5.84×10^5,对涕灭威的IC50为0.225μg/... 详细信息

本研究设计了一种针对氨基甲酸酯类农药半抗原的通用改造,制备了涕灭威和异丙威两种人工半抗原。通过分子模拟手段和制备鼠源多克隆抗体对半抗原改造效果进行评价。结果表明,最终涕灭威抗体效价为5.84×10^5,对涕灭威的IC50为0.225μg/mL,对涕灭威半抗原的交叉反应率为107.14%;异丙威抗体效价为4.1×10^5,对异丙威的IC50为0.4μg/mL,对异丙威半抗原的交叉反应率为105.26%。经该通用改造后的半抗原可以代替目标药物用于免疫分析方法的建立。

关键词：氨基甲酸酯类半抗原通用改造涕灭威异丙威

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青岛地区常见鱼类过敏原的鉴定及其交叉反应研究

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水产学报 2011年第10期35卷 1532-1539页

作者：吴玟静李振兴金科郑礼娜王邦平林洪中国海洋大学食品安全实验室

选择青岛地区喜食的阿拉斯加狭鳕、蓝点马鲛、大黄鱼、真鲷、鲑、大菱鲆、鲤等7种鱼为研究对象,利用鱼类过敏患者血清,通过SDS-PAGE及免疫印迹方法对每种鱼的过敏原蛋白进行鉴定。利用兔抗鲅鱼小清蛋白多克隆抗体,通过间接ELISA和抑制性... 详细信息

选择青岛地区喜食的阿拉斯加狭鳕、蓝点马鲛、大黄鱼、真鲷、鲑、大菱鲆、鲤等7种鱼为研究对象,利用鱼类过敏患者血清,通过SDS-PAGE及免疫印迹方法对每种鱼的过敏原蛋白进行鉴定。利用兔抗鲅鱼小清蛋白多克隆抗体,通过间接ELISA和抑制性ELISA等对7种鱼的小清蛋白之间的交叉反应进行探讨。结果表明,青岛地区居民鱼类过敏原主要为48～57、33～41、28及17 ku的蛋白,和传统公认的小清蛋白为主要过敏原的共识不同。而针对小清蛋白的交叉反应研究也表明,不同鱼类蛋白之间存在强烈的交叉反应。因此,虽然鱼类过敏原可能不同,但如果对以上7种鱼中的一种鱼过敏,最好不要食用其他任何一种鱼。

关键词：鱼过敏原鉴定交叉反应