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RRM RNA结合蛋白的结构与功能

生物化学与生物物理进展 1999年第4期26卷 305-307页

作者：杜光伟周严袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白是一类含一个或数个ＲＲＭ结构域及附属结构域的ＲＮＡ结合蛋白，参与ＲＮＡ前体的剪接、ＲＮＡ的细胞定位、ＲＮＡ的稳定性等多种转录后调控过程．在ＲＲＭ基序中含有许多保守... 详细信息

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白是一类含一个或数个ＲＲＭ结构域及附属结构域的ＲＮＡ结合蛋白，参与ＲＮＡ前体的剪接、ＲＮＡ的细胞定位、ＲＮＡ的稳定性等多种转录后调控过程．在ＲＲＭ基序中含有许多保守的氨基酸以保证对ＲＮＡ的结合活性，但是这一家族的不同蛋白质却能特异地结合各种不同的ＲＮＡ分子．ＲＲＭＲＮＡ

关键词：转录后调控 RNA结合蛋白 RRM基序

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连接介导PCR及其在体内足迹研究中的应用

生物化学与生物物理进展 1997年第3期24卷 224-227页

作者：纪新军刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接... 详细信息

连接介导聚合酶链反应是以连接反应为基础的单侧PCR技术 ,首先在DNA片段的一端连接上一个公共连接子 ,而后在这个连接子与另一个DNA序列特异的引物间扩增 .Vent聚合酶的使用 ,延伸产物捕获及连接子标记选择策略的采用 ,大大提高了连接介导聚合酶链反应的敏感性 .

关键词：连接介导PCR 连接子体内足迹法聚合酶链反应

一种检测细胞微量点突变的方法——等位基因特异的PCR

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生物化学与生物物理进展 2000年第5期27卷 553-555页

作者：殷文璇刘德培李竹红梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了灵敏、方便地检测出细胞群体中含量极低的点突变 ,利用一 β珠蛋白基因簇Gγ 2 0 2C→G突变的杂合细胞株 ,优化传统的等位基因特异PCR的反应条件 ,以定量的PCR产物为模板 ,在含 5 %甲酰胺的体系中用半巢式的等位基因特异引物进行扩... 详细信息

为了灵敏、方便地检测出细胞群体中含量极低的点突变 ,利用一 β珠蛋白基因簇Gγ 2 0 2C→G突变的杂合细胞株 ,优化传统的等位基因特异PCR的反应条件 ,以定量的PCR产物为模板 ,在含 5 %甲酰胺的体系中用半巢式的等位基因特异引物进行扩增 .结果表明 ,该方法灵敏可靠 ,可快速检测到细胞群体中低于 0 0 2 5

关键词：等位基因特异PCR 细胞群体微量点突变检测

应用原位双膜法快速筛选人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子

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生物化学与生物物理进展 2002年第2期29卷 307-310页

作者：张艳丽陈松森杨克恭狄旭熊安琪张友鸿中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法 ,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上 ,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白 ,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合... 详细信息

原位双膜法是一种基于免疫原理的快速筛选高表达甲醇酵母转化子的方法 ,即首先将固体培养基上的菌落转印至醋酸纤维素薄膜上 ,再利用硝酸纤维素薄膜原位捕获穿过醋酸纤维素薄膜的菌落外泌蛋白 ,然后用免疫方法检测与硝酸纤维素薄膜结合的蛋白 .利用此法筛选到人Flt3配体 (hFL)的甲醇酵母高表达转化子 ,液体诱导表达量约 2 0mg L .ELISA结果证明 ,原位双膜法所得的菌落染色强度与该菌落液体诱导表达水平正相关 .蛋白质印迹结果显示 ,培养上清在 2 5ku处有明显杂交条带 ,而对照组杂交呈阴性 ,且表达量随诱导天数增加 .原位双膜法是一种良好的筛选方法 ,可以快捷、准确地筛选高表达酵母转化子 .

关键词：原位双膜法人Flt3配体甲醇酵母高表达转化子表达巴斯德毕赤酵母

RNA干扰与染色质沉默——生物体内精密的网络调控机制

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生物化学与生物物理进展 2004年第3期31卷 204-208页

作者：杜梅君刘德培梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

基因表达受不同层次的调控 .RNA干扰通过产生双链小RNA诱导同源mRNA序列降解 ,从而在转录后抑制特定基因的表达 .最新的研究成果显示 :RNA干扰产生的双链小RNA可通过与染色质中的重复序列DNA及组蛋白甲基化酶相互作用 ,引起组蛋白H3Lys... 详细信息

基因表达受不同层次的调控 .RNA干扰通过产生双链小RNA诱导同源mRNA序列降解 ,从而在转录后抑制特定基因的表达 .最新的研究成果显示 :RNA干扰产生的双链小RNA可通过与染色质中的重复序列DNA及组蛋白甲基化酶相互作用 ,引起组蛋白H3Lys9的甲基化 ,进一步与异染色质形成相关蛋白结合 ,导致染色质沉默 .综述了RNA干扰 ,小RNA ,组蛋白修饰 ,染色质沉默及基因表达调控之间存在着精密的网络调控机制 .

关键词：生物体网络调控机制染色质沉默异染色质 RNA干扰基因

聚氨酯/碳纳米纤维复合材料的结构和抗凝血性能

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材料研究学报 2003年第2期17卷 127-131页

作者：许海燕孔桦杨子彬中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

分别采用溶液共混和熔融共混的方法制备出聚氨酯/碳纳米纤维复合材料,研究了碳纳米纤维对聚氨酯的热行为和表面微观化学组成的影响,并观察和测定了血小板在复合材料表面的粘附以及血液中血红蛋白浓度、纤维蛋白原浓度的变化,分析了碳纳... 详细信息

分别采用溶液共混和熔融共混的方法制备出聚氨酯/碳纳米纤维复合材料,研究了碳纳米纤维对聚氨酯的热行为和表面微观化学组成的影响,并观察和测定了血小板在复合材料表面的粘附以及血液中血红蛋白浓度、纤维蛋白原浓度的变化,分析了碳纳米纤维对聚氨酯血液相容性的影响。结果表明,引入碳纳米纤维后,聚氨酯复合材料的表面氧含量有不同程度的提高,玻璃化转变温度及熔融温度都发生了改变;血小板在复合材料表面的粘附受到明显的抑制;经血泵循环4h后,在与聚氨酯复合材料表面接触的血液中,血红蛋白和纤维蛋白原浓度的变化相对减小;复合材料的血液相容性提高。

关键词：复合材料聚氨酯/碳纳米纤维共混血液相容性血小板抗凝血性能生物医学材料粘附

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多肽酰胺化酶的结构与功能

生物化学与生物物理进展 1999年第3期26卷 195-197页

作者：刘深基陈松森中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所

Ｃ端酰胺化是许多神经内分泌多肽重要的翻译后加工过程，是在酰胺化酶的催化下分两步进行的，ＰＨＭ和ＰＡＬ分别催化这两步反应．ＰＨＭ由两个结构相似的结构域组成，每个结构域均为九链β折叠组成的三明治样结构，分别由三个Ｈｉｓ或... 详细信息

Ｃ端酰胺化是许多神经内分泌多肽重要的翻译后加工过程，是在酰胺化酶的催化下分两步进行的，ＰＨＭ和ＰＡＬ分别催化这两步反应．ＰＨＭ由两个结构相似的结构域组成，每个结构域均为九链β折叠组成的三明治样结构，分别由三个Ｈｉｓ或两个Ｈｉｓ和一个Ｍｅｔ螯合一个Ｃｕ组成活性中心．在一个反应周期中，两个Ｃｕ分别独立地与抗坏血酸和分子氧发生单电子传递的氧化还原反应。

关键词：多肽酰胺化酶结构机制

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小RNA(MicroRNA)研究方法

中国生物化学与分子生物学报 2006年第10期22卷 772-779页

作者：王芳余佳张俊武中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系北京100005

小RNA（microRNA）是一类新发现的长度约为21～25个核苷酸的RNA,它在转录后水平调节靶基因表达.已有研究表明,小RNA在发育、细胞增殖、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥重要作用.针对小RNA的研究方法主要... 详细信息

小RNA（microRNA）是一类新发现的长度约为21～25个核苷酸的RNA,它在转录后水平调节靶基因表达.已有研究表明,小RNA在发育、细胞增殖、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥重要作用.针对小RNA的研究方法主要包括两大类：一是以传统实验技术方法为基础建立起来的小RNA特有的技术方法,二是已成熟应用的生物信息学技术.前者侧重于小RNA表达的检测和功能机制的阐明,后者则包括新小RNA基因及小RNA靶基因的预测.两者相辅相成,互为补充,为深入地研究这类分子的功能和分子机制提供了大量功能线索及确凿的实验证据.

关键词：小RNA 基因表达调控小RNA特有技术生物信息学技术

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基因组范围的蛋白质功能研究方法初探

生物化学与生物物理进展 2001年第5期28卷 646-649页

作者：张玲林澄涛王恒中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

基因组大规模测序的进展使人们获得了大量新基因数据 ,对这些数据进行基因组范围的规模化功能分析的新方法应运而生 .对其中的结构域融合分析法、系统进化特征法、簇分析法 ,结构分析法。

关键词：基因组蛋白质功能研究方法