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发酵类中药的特点、微生物组成及真菌毒素污染概况

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中国中药杂志 2024年

作者：张会茹郭梦月吕建欣朱婉暄王闯康馨心骆骄阳杨美华中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室

发酵类中药具有悠久的药用历史，包括淡豆豉、胆南星、半夏曲、红曲、建曲等。发酵技术在最早的中药专著《神农本草经》中便有记载，微生物是发酵过程中必不可少的关键组成部分。然而，由发酵过程不规范导致的发酵类中药中产毒真菌和真... 详细信息

发酵类中药具有悠久的药用历史，包括淡豆豉、胆南星、半夏曲、红曲、建曲等。发酵技术在最早的中药专著《神农本草经》中便有记载，微生物是发酵过程中必不可少的关键组成部分。然而，由发酵过程不规范导致的发酵类中药中产毒真菌和真菌毒素污染问题严重影响药材质量，对消费者生命健康安全造成威胁。该文对发酵类中药的特点、微生物组成及真菌毒素污染概况进行系统阐述，为其质量安全控制提供理论依据。

关键词：发酵类中药发酵技术微生物真菌毒素质量控制

磁性纳米材料的制备、修饰及其在真菌毒素检测和脱除中的应用研究进展

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食品科学 2024年

作者：吕建欣郭梦月张会茹孔丹丹骆骄阳杨美华北京协和医学院中国医学科学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室

真菌毒素是产毒真菌天然产生的有毒小分子化合物。真菌毒素污染的产品一旦被人体摄入，极有可能产生致癌、致畸、致突变等不良影响。据报道，真菌毒素在食品与中药材中均有检出，开发有效方法对其进行快速检测以及进行绿色脱毒成为研究... 详细信息

真菌毒素是产毒真菌天然产生的有毒小分子化合物。真菌毒素污染的产品一旦被人体摄入，极有可能产生致癌、致畸、致突变等不良影响。据报道，真菌毒素在食品与中药材中均有检出，开发有效方法对其进行快速检测以及进行绿色脱毒成为研究重点。磁性纳米颗粒具有高比表面积、高表面能和高磁响应等特性，其作为磁性吸附剂载体在真菌毒素检测和脱除中有着巨大的应用潜力。本文总结了常见磁性纳米材料的制备和功能化修饰方法及其在真菌毒素检测和脱除中的应用，并展望了其在真菌毒素控制中的未来发展趋势。

关键词：真菌毒素磁性纳米材料合成方法检测脱除

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不同叶面肥和底肥对山药产量和质量的影响

世界中医药 2024年第1期19卷 7-13页

作者：李莹孔维军李先恩贺超周立东中国医学科学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193

目的:比较不同种类或配方的肥料对山药产量和质量的影响。方法:通过设计田间实验获取不同叶面肥和底肥处理的山药样品。随机抽样获得山药单株重量、直径和长度的数据,将所有山药称重得到产量数据。采用烘干法、蒽酮-硫酸法、凯氏定氮法... 详细信息

目的:比较不同种类或配方的肥料对山药产量和质量的影响。方法:通过设计田间实验获取不同叶面肥和底肥处理的山药样品。随机抽样获得山药单株重量、直径和长度的数据,将所有山药称重得到产量数据。采用烘干法、蒽酮-硫酸法、凯氏定氮法分别测定样品中水分、多糖和蛋白质的含量,通过自动氨基酸分析仪测定氨基酸的含量,使用高效液相色谱法同时分析尿囊素、尿嘧啶和腺苷的含量。结果:叶面肥处理的山药产量较高,而底肥处理的山药的氨基酸、蛋白质和尿囊素含量较高。结论:叶面肥YY3、YY4和YY6处理可显著提高山药的产量,但在提高山药营养成分的含量方面效果不佳。底肥也可以提高山药的产量,虽然增产作用弱于叶面肥,但能同时显著提高氨基酸、蛋白质、尿囊素等营养成分的含量。

关键词：山药叶面肥底肥产量质量含量测定

丹酚酸B-葛根素联用对氧糖剥夺/复氧损伤的SH-SY5Y神经细胞焦亡的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 54-63页

作者：涂舒欣王艳贺晓丽中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的:基于细胞焦亡探讨丹酚酸B和葛根素合用对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤的SH-SY5Y神经细胞的保护作用及机制。方法:利用SH-SY5Y细胞构建OGD/R损伤模型,设立正常对照组(control)、模型组(OGD/R)、10μmol·L^(-1)丹酚酸B组(salvianolic acid B,Sal B)、100μmol·L^(-1)葛根素组(puerarin,Pue)、10μmol·L^(-1)丹酚酸B和100μmol·L^(-1)葛根素合用组(SP)及10μmol·L^(-1)NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制剂MCC950组。除正常组外,其余各组细胞在氧糖剥夺6 h后迅速复糖复氧12 h进行OGD/R造模。采噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,光学显微镜下观测细胞形态,分光光度计法检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)释放率,Hoechst/PI染色检测细胞膜损伤情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、凋亡斑点样蛋白(ASC)和白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达水平,免疫荧光检测NLRP3和caspase-1蛋白表达的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IL-1β、ASC、NLRP3、caspase-1和活化半胱氨酸蛋白酶1(cleaved caspase-1)蛋白表达的变化。结果:与正常组比较,模型组SHSY5Y细胞存活率显著降低(P<0.01),细胞形态受损,培养上清中LDH渗漏率显著提高(P<0.01),细胞膜破损,细胞中NLRP3、caspase-1、GSDMD、ASC和IL-1β的mRNA表达水平显著提高(P<0.01),IL-1β、ASC、NLRP3、caspase-1和cleaved caspase-1蛋白的表达水平显著提高(P<0.01)。与模型组相比,丹酚酸B、葛根素与丹酚酸B和葛根素合用均能显著提高OGD/R损伤后SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.01);与单用组相比,合用组具有更好的效果(P<0.01)。与模型组相比,丹酚酸B和葛根素合用及MCC950均能改善细胞形态,降低细胞上清液LDH的渗漏(P<0.05),减轻细胞膜损伤水平,降低SH-SY5Y细胞NLRP3、caspase-1、GSDMD、ASC和IL-1β的mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),降低IL-1β、ASC、NLRP3、caspase-1和cleaved caspase-1蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:结果表明,丹酚酸B和葛根素合用能减轻OGD/R对SH-SY5Y细胞造成的损伤,这可能与其能够抑制细胞焦亡相关。

关键词：缺血性脑卒中氧糖剥夺/复氧模型丹酚酸B 葛根素细胞焦亡

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“新冠三方”的体外抗氧化作用比较

中国现代应用药学 2024年第7期41卷 887-894页

作者：李西蒙康媛高源刘壮壮李文静徐瑱璐张小雨蔡润兰齐云中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的平行比较“新冠三方”(清肺排毒汤、化湿败毒方和宣肺败毒方,以下简称“三方”)的体外抗氧化作用。方法在非细胞体系中,采用FRAP法考察三方的总抗氧化能力;通过DPPH法考察三方对DPPH自由基的清除作用;采用NBT还原法考察三方对超氧... 详细信息

目的平行比较“新冠三方”(清肺排毒汤、化湿败毒方和宣肺败毒方,以下简称“三方”)的体外抗氧化作用。方法在非细胞体系中,采用FRAP法考察三方的总抗氧化能力;通过DPPH法考察三方对DPPH自由基的清除作用;采用NBT还原法考察三方对超氧阴离子的清除作用;通过基于终产物丙二醛的荧光测定法考察三方对羟自由基的清除作用;用FeSO4体外诱导大鼠肝匀浆MDA法考察三方对抗脂质过氧化的作用。依据以上5个抗氧化指标,平行比较三方提取物在非细胞体系的抗氧化能力。进一步地,在脂多糖活化的RAW264.7细胞模型上,分别使用L-012探针和MitoSOX线粒体超氧化物红色荧光探针检测胞质与线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成情况;通过光泽精探针检测胞质NADPH氧化酶活性,以平行比较三方提取物在细胞体系的抗氧化能力。结果在非细胞体系中,三方均能剂量依赖地清除DPPH自由基、超氧阴离子和羟自由基,并且能有效对抗脂质过氧化的发生。在等提取物浓度下,三方对DPPH自由基与超氧阴离子的清除作用相当,总抗氧化能力相当,而化湿败毒方在清除羟自由基和对抗脂质过氧化方面表现更优。在细胞体系中,三方均能通过抑制NADPH氧化酶的活性来减少脂多糖刺激RAW264.7细胞质ROS的生成;不仅如此,三方对线粒体ROS的生成也有抑制作用,其中清肺排毒汤的作用最佳。结论三方在非细胞体系和细胞体系均展现了多重体外抗氧化作用,且在不同指标上的作用强度各有优劣。考虑到抗氧化应激对COVID-19治疗的重要意义,上述结果提示三方的抗氧化能力是它们发挥治疗COVID-19作用的药效学基础之一。

关键词：清肺排毒汤化湿败毒方宣肺败毒方氧化应激新型冠状病毒感染

胶体金免疫层析法快速检测中药材中除草剂扑草净残留

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药物分析杂志 2024年第1期44卷 174-184页

作者：柯童炜骆骄阳秦家安王玉丹罗雅雯何春娇秦旭华杨美华成都中医药大学药学院成都611137 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193

目的:基于自制的扑草净抗原和单克隆抗体,建立了一种适用于快速检测中药材、饮片中三嗪类除草剂扑草净残留的免疫层析方法。方法:确定了抗体偶联量为7μg,稀释液配制条件为含1%OVA,0.1%Tween-80的0.1 mol·L^(-1) PBS优化条件,并采用T... 详细信息

目的:基于自制的扑草净抗原和单克隆抗体,建立了一种适用于快速检测中药材、饮片中三嗪类除草剂扑草净残留的免疫层析方法。方法:确定了抗体偶联量为7μg,稀释液配制条件为含1%OVA,0.1%Tween-80的0.1 mol·L^(-1) PBS优化条件,并采用T线划线浓度为0.05 mg·mL^(-1),C线划线浓度为0.5 mg·mL^(-1)的湿法试纸条,提升胶体金免疫层析试纸条的灵敏度,降低不同用药部位中药的基质效应,并进行大批量中药材检测。结果:试纸条检测灵敏度可达到1 ng·mL^(-1),实际样品检出限可达到0.1 mg·kg^(-1),所建立的方法适用于陈皮、蒲公英、三七、金银花等中药材中40种不同部位扑草净残留检测。对10批西洋参、5批山药、12批三七、5批黄芪、3批沙参、4批牛膝、14批菊花、9批生姜、6批菟丝子进行了实际样品快速检测,均未检出扑草净残留。结论:本方法检测方法快速准确,前处理简便,操作简单,推广性强,可作为现场快速筛查扑草净残留的有效手段,以保证中药材的质量和安全性。同时,该研究为开发多种中药材的农残快速检测具有一定的参考意义。

关键词：扑草净胶体金试纸条中药材除草剂快速检测适用性基质效应

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沉香属植物内生真菌多样性及功能研究进展

中草药 2024年第4期55卷 1397-1406页

作者：黄颖孟慧何欣杨云中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室/国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

沉香Aquilariae Lignum Resinatum是沉香属植物含树脂的木材,广泛应用于传统医学、香料、宗教等领域。沉香的形成与沉香属植物应对伤害防御诱导反应有关,其中内生真菌在沉香形成过程中发挥着重要的作用。综述了沉香属植物内生真菌的多样... 详细信息

沉香Aquilariae Lignum Resinatum是沉香属植物含树脂的木材,广泛应用于传统医学、香料、宗教等领域。沉香的形成与沉香属植物应对伤害防御诱导反应有关,其中内生真菌在沉香形成过程中发挥着重要的作用。综述了沉香属植物内生真菌的多样性,概括了内生真菌在促进沉香属植物次生代谢物积累、提高抗生物胁迫能力等功能,并提出沉香内生真菌研究与开发存在的问题和对策,为沉香增产技术开发提供参考。

关键词：沉香内生真菌多样性诱导结香抗生物胁迫

细胞色素P450在植物倍半萜类化合物生物合成中的作用研究进展

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药学学报 2024年第2期59卷 313-321页

作者：高世玺戎梅彭俊祥徐艳红魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

倍半萜类化合物是基本骨架含15个碳原子的天然萜类化合物,主要存在于植物挥发油中,具有重要的生理作用和药用价值。细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一类超基因家族编码的单加氧酶,是植物中最大的基因家族之一,参与萜类、生物碱... 详细信息

倍半萜类化合物是基本骨架含15个碳原子的天然萜类化合物,主要存在于植物挥发油中,具有重要的生理作用和药用价值。细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一类超基因家族编码的单加氧酶,是植物中最大的基因家族之一,参与萜类、生物碱等多种次生代谢产物的合成与代谢。在萜类生物合成过程中,CYP450酶通过引入羟基、羧基、羰基等官能团参与萜类化合物的后修饰阶段,为丰富萜类化合物多样性起到了重要作用。参与倍半萜合成的CYP450酶及底物催化特异性机制已有一些研究,本文简要介绍了植物倍半萜类化合物的生物合成途径、P450酶的结构和分类,对参与倍半萜生物合成的CYP450酶进行了总结,以期为更深入探究CYP450酶在合成倍半萜类化合物中的作用提供参考。

关键词：倍半萜细胞色素P450 生物合成调控次生代谢产物药用植物

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蜜环菌DNA分子序列杂合特性及其本质

菌物学报 2024年第10期 117-132页

作者：李寿建刘幽言许欣蕾刘柳李兵郭顺星中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所

蜜环菌是蜜环菌属真菌的统称，由于其既是严重的林木病害病原真菌，又具有重要的食药用价值，因此一直受到广泛重视。蜜环菌属物种形态分类困难，20世纪70年代开始，蜜环菌一直采用基于交配验证的生物种鉴定方法。但随着分子序列在物种... 详细信息

蜜环菌是蜜环菌属真菌的统称，由于其既是严重的林木病害病原真菌，又具有重要的食药用价值，因此一直受到广泛重视。蜜环菌属物种形态分类困难，20世纪70年代开始，蜜环菌一直采用基于交配验证的生物种鉴定方法。但随着分子序列在物种鉴定中广泛应用且优势逐渐显现，开始有学者进行蜜环菌的分子鉴定，并初步发现蜜环菌分子序列存在杂合，而DNA分子序列杂合会影响蜜环菌物种鉴定的准确性。为揭示蜜环菌DNA分子序列杂合现状及其本质，本研究随机选取了猪苓和天麻共生蜜环菌各20株，以及野外子实体分离获得的蜜环菌40株进行了ITS、IGS、tef-1α、β-tubulin和LSU 5个DNA片段的序列扩增、测序和分析，揭示了蜜环菌的高比例序列杂合特性，在测序的400条序列中有高达74.25%的序列存在杂合，包括超过50%的存在杂合位点的序列和近20%的移码双峰序列。同时对不同分子片段和不同类型的蜜环菌中的序列杂合情况进行了统计，发现不同分子序列、不同类型蜜环菌的序列杂合占比均超过了65%，甚至有些序列杂合占比高达80%–90%。通过对不同菌株的共37株单倍体菌株分子序列测序分析，揭示了蜜环菌分子序列的杂合特性主要因其两套单倍体基因组之间的序列差异造成，同时存在少量菌株IGS序列移码双峰是由于IGS序列多拷贝之间的序列差异造成。本研究系统揭示了蜜环菌DNA分子序列存在高度杂合，并揭示了其造成序列杂合的本质，为深入开展蜜环菌的分子鉴定、分子系统学研究和遗传育种提供了指导。

关键词：单倍体菌株猪苓天麻共生

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