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人细胞骨架调节蛋白基因NELIN cDNA的克隆及特征分析(英文)

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生物化学与生物物理学报 2001年第1期33卷 19-24页

作者：赵勇魏英杰曹慧青丁金凤中国医学科学院!中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院心血管病分子医学中心北京100037

为寻找和研究心血管系统有关的重要功能基因及表达模式 ,构建了正常成人心脏和主动脉cDNA文库 ,并在大规模表达序列标签 (ESTs)测定和筛选新的cDNAs全长的基础上 ,筛选出一个新的基因 (GenBank登记号AF1142 6 4)。该基因的cDNA全长为 2 ... 详细信息

为寻找和研究心血管系统有关的重要功能基因及表达模式 ,构建了正常成人心脏和主动脉cDNA文库 ,并在大规模表达序列标签 (ESTs)测定和筛选新的cDNAs全长的基础上 ,筛选出一个新的基因 (GenBank登记号AF1142 6 4)。该基因的cDNA全长为 2 736bp ,含有一个 1344bp的开放读码框 ,由于其推测的氨基酸序列与鼠源微管连接蛋白 (nexilin)具有很高同源性 ,所以暂将其命名为NELIN(nexilin likeprotein)。Northern印迹和RT PCR结果表明 ,该基因在心脏、骨骼肌、动脉和静脉中表达 ,且该表达有一定的时空特异性。查询GeneMap’99,该基因定位在染色体 1p31 1p32。结构域分析表明 ,NELIN很可能参与调节粘着斑和张力纤维形成 ,并参与粘着斑的信号转导

关键词：基因克隆细胞骨架调节蛋白基因粘着斑信号转导肌组织特异

蛋白质的入核运送和它在基因表达中的调节作用

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生物化学与生物物理进展 1999年第4期26卷 341-346页

作者：陈曦中国协和医科大学中国医学科学院心血管病研究所阜外心血管病医院北京100037

蛋白质进入细胞核是由蛋白质分子内部的核定位信号（ｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌ，ＮＬＳ）引导的．ＮＬＳ蛋白首先与ＮＬＳ受体结合，然后在多种胞浆因子及核孔复合物蛋白的作用下穿过核孔、... 详细信息

蛋白质进入细胞核是由蛋白质分子内部的核定位信号（ｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌ，ＮＬＳ）引导的．ＮＬＳ蛋白首先与ＮＬＳ受体结合，然后在多种胞浆因子及核孔复合物蛋白的作用下穿过核孔、转位入核．蛋白质上存在ＮＬＳ并不一定总能够引导蛋白质入核．当ＮＬＳ被修饰或遮掩时，它们便不能被核转运装置所识别．因而，ＮＬＳ的遮掩被解除之前，蛋白质一直被扣留在胞浆中．以调节转录因子的入核运送来控制转录因子的活性是基因表达调节的一个新概念，

关键词：蛋白质入核运送核定位信号基因表达调节

筛选转基因动物的新方法——PCR及其产物测序法

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生物化学与生物物理进展 1997年第6期24卷 552-554页

作者：何泉李鹏姜立群陈兰英中国医学科学院阜外心血管病医院中国协和医科大学心血管病研究所北京100037

用特异性引物对肌球蛋白轻链 2启动子 (myosinlightchain 2 ,MLC2 ) 糜酶融合基因的转基因新生鼠鼠尾DNA进行PCR筛选 ,低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性样品PCR所扩出的DNA条带 ,纯化后用同一对引物中的一个进行单引物PCR测序 ,与所转外... 详细信息

用特异性引物对肌球蛋白轻链 2启动子 (myosinlightchain 2 ,MLC2 ) 糜酶融合基因的转基因新生鼠鼠尾DNA进行PCR筛选 ,低熔点琼脂糖凝胶电泳回收阳性样品PCR所扩出的DNA条带 ,纯化后用同一对引物中的一个进行单引物PCR测序 ,与所转外源基因序列比较 ,进一步确定整合有外源基因的阳性鼠 .PCR及PCR产物测序法检测转基因动物具有操作方便。

关键词：基因工程转基因动物筛选聚合酶链反应测序法

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溶血磷脂酸受体及其信号转导

生物化学与生物物理进展 2000年第1期27卷 48-52页

作者：马睿中国协和医科大学阜外心血管病医院中国医学科学院心血管病研究所北京100037

溶血磷脂酸(lysophosphatidicacid,LPA)是一种类生长因子的脂类信号分子.在血栓形成过程中被激活的血小板可以产生LPA.自从证明LPA有胞外信号功能以后,许多新的生物活性又被不断发现.LPA最主要的作用是诱导各类细胞增殖.人们已经找到几... 详细信息

溶血磷脂酸(lysophosphatidicacid,LPA)是一种类生长因子的脂类信号分子.在血栓形成过程中被激活的血小板可以产生LPA.自从证明LPA有胞外信号功能以后,许多新的生物活性又被不断发现.LPA最主要的作用是诱导各类细胞增殖.人们已经找到几种LPA受体cDNA克隆.LPA主要通过G蛋白偶联受体影响靶细胞功能,其信号转导系统包括已知的几条信号通路:激活Gq从而激活磷脂酶C;激活Gi从而抑制腺苷酸环化酶并激活MAPK级联通路;激活G12/13从而激活Rho级联通路等.

关键词：溶血磷脂酸受体cDNA克隆信号转导血栓

低氧诱导因子-1的转录活性调控及其信号传导

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生物化学与生物物理进展 2002年第6期29卷 863-867页

作者：张鹏华陈兰英中国协和医科大学中国医学科学院阜外心血管病医院心血管病研究所北京100037

低氧诱导因子 1(hypoxia induciblefactor 1,HIF 1)是氧平衡调控相关的转录因子 .依赖HIF 1的基因表达调控系统广泛影响葡萄糖代谢、细胞增殖、凋亡和血管发生 ,与机体低氧适应、胚胎发育、各种缺血性疾病及肿瘤相关 .HIF 1自身活性调... 详细信息

低氧诱导因子 1(hypoxia induciblefactor 1,HIF 1)是氧平衡调控相关的转录因子 .依赖HIF 1的基因表达调控系统广泛影响葡萄糖代谢、细胞增殖、凋亡和血管发生 ,与机体低氧适应、胚胎发育、各种缺血性疾病及肿瘤相关 .HIF 1自身活性调节是低氧应答基因表达调控的中心环节 .调控主要发生在源于Ras的两条信号途径 :Ras/Raf/MEK介导的HIF 1反式激活功能调控 ,PI(3)K/Akt依赖的HIF 1alpha蛋白稳定性调控 .这两个信号传导途径分别独立又协调地调控着HIF

关键词：低氧诱导因子-1 转录活性调控信号传导

Gene transfer and expression in rat anastomotic artery in vivo using adenoviral vector

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Chinese Medical Journal 2001年第6期114卷 90-93,110-111页

作者：黄志雄郭加强郭少先中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院心血管病研究所北京100037

Objective　To observe the efficiency and time course of gene expression and the safety of adenoviral vector mediated gene transfer in ***　After soaking soluble stents in a high concentration of glucose solution containing Adv5-CMV (cytomegalovirus) (control group) or Adv5-CMV/LacZ (treatment group) for 30 minutes, the stents were inserted into the lumina of cut rat carotid arteries and end-to-end anastomoses of the cut carotid were performed with standard microvascular surgical techniques. On days 2, 7, 14, 28, 60 and 90 after gene transfer, anastomotic arteries of the two groups were observed. On days 7 and 14, the ascending aortas, hearts, brains, livers, lungs, spleens and kidneys of the treatment group were observed. All samples were analyzed for the presence of β-galactosidase activity and histochemical ***　β-galactosidase activity was not detected in the carotid arteries of the control group and organs not directly exposed to adenoviral vector of the treatment group. The amount of β-galactosidase activity (×10-3?U/g tissue) in the treatment group on the 2nd, 7th, 14th, 28th, 60th and 90th day after gene transfer was 3.87, 11.38, 9.8, 6.43, 3.18 and 2.43, respectively. Microscopic examination of sections from vessels of the control group and from the aortas, hearts, brains, livers, lungs, spleens or kidneys of the treatment group revealed no X-gal staining. Microscopic examination of carotid arteries of the treatment group revealed blue-staining in all anastomotic arteries and in all layers of the arterial wall observed on days 7 and 14 after gene ***　Adenoviral vector can effectively infect blood vessels in vivo. After adenoviral vector mediated direct gene transfer into anastomotic rat carotid arteries, recombinant gene expression began on day 2, peaked between days 7 and 14, prominently declined after day 28, and persisted at low levels more than three months. A recombinant gene could be delivered to a specific site by di

关键词： genetic vectors · gene transfer · braces · gene expression

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反相离子对色谱法测定人血浆中芬太尼浓度

中国药学杂志 1998年第5期33卷 301-303页

作者：张燕婉张毅胡小琴中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院麻醉研究室

目的：建立测定人血浆中芬太尼（Ｆｅｎ）浓度的ＨＰＬＣ测定法，为临床Ｆｅｎ的药动学研究提供科学的分析技术。方法：Ｆｅｎ测定以μＢｏｎｄａｐａｋＣ１８为固定相，水（含０．００５ｍｏｌ·Ｌ－１辛烷磺酸钠和０．０１ｍｏｌ... 详细信息

目的：建立测定人血浆中芬太尼（Ｆｅｎ）浓度的ＨＰＬＣ测定法，为临床Ｆｅｎ的药动学研究提供科学的分析技术。方法：Ｆｅｎ测定以μＢｏｎｄａｐａｋＣ１８为固定相，水（含０．００５ｍｏｌ·Ｌ－１辛烷磺酸钠和０．０１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸）乙腈（６９∶３１）为流动相，以阿芬太尼为内标物，紫外检测波长为２２０ｎｍ。结果：验证实验表明，Ｆｅｎ与内标物分离良好，血浆中Ｆｅｎ的平均回收率为９９．９７％，日内、日间的ＲＳＤ值均小于８％。血药浓度在１０ｎｇ·ｍｌ－１～２００ｎｇ·ｍｌ－１范围内与峰面积呈线性关系，ｒ＝０．９９９６。本方法最低检测浓度为５ｎｇ·ｍｌ－１。结论：本方法具有较高的准确度，方法灵敏，专一性好，适用于临床Ｆｅｎ血药浓度的测定。

关键词：芬太尼高效液相色谱血浆浓度

超声驻波分离体外循环余血的血液流变学及成分分析

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北京生物医学工程 2001年第2期20卷 140-142页

作者：李景文龙村郑红中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院体外循环科 100037

目的 :从血液流变学和血细胞成分两方面来评价超声驻波血细胞分离机的安全性。方法 :10例心脏瓣膜替换术患者 ,采其体外循环结束后的机器余血 ,分别用超声驻波血细胞分离机和离心式洗血球机洗涤分离。测定血液流变学参数、血细胞比容及... 详细信息

目的 :从血液流变学和血细胞成分两方面来评价超声驻波血细胞分离机的安全性。方法 :10例心脏瓣膜替换术患者 ,采其体外循环结束后的机器余血 ,分别用超声驻波血细胞分离机和离心式洗血球机洗涤分离。测定血液流变学参数、血细胞比容及电解质成分的变化。结果 :经两种处理的血液与原血相比 ,变形性降低、高粘度、高血细胞比容 ,血液成分也有改变 ,两组的游离血红蛋白及电解质浓度有差别。结论 :超声驻波血细胞分离法与离心分离法相似 ,安全、可靠。

关键词：超声驻波血细胞分离血液流变学体外循环成分分析

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膜片钳技术在心肌细胞药理效应研究中的应用

中国药学杂志 2002年第6期37卷 406-409页

作者：黄兵陈雷卫生部老年病研究所北京医院麻醉科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学心血管病研究所阜外心血管病医院麻醉体外循环研究室北京100037

目的　介绍和阐述目前国内外利用膜片钳技术及其它相关方法在心肌细胞药理学研究的现状和发展趋势 ,探讨膜片钳技术在心肌细胞药理学及生理学等领域的应用前景。方法　以国内外有影响力和代表性的期刊上所发表的文献为基础 ,对膜片钳技... 详细信息

目的　介绍和阐述目前国内外利用膜片钳技术及其它相关方法在心肌细胞药理学研究的现状和发展趋势 ,探讨膜片钳技术在心肌细胞药理学及生理学等领域的应用前景。方法　以国内外有影响力和代表性的期刊上所发表的文献为基础 ,对膜片钳技术应用于心肌细胞药理效应研究的状况进行分类、分析、归纳和综述。结果与结论　膜片钳技术的理论和方法学在近 10年的快速发展以及与其它技术的结合 ,拓宽了心肌细胞药理研究的领域。在此基础上进行以人心肌细胞为重点研究对象的药理学和生理学等研究将是今后的热点和趋势 ,具有现实性。

关键词：膜片钳技术心肌细胞药理效应