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非洲猪瘟病毒D1133L蛋白增加宿主波形蛋白磷酸化而促进病毒在猪巨噬细胞中的复制

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微生物学报 2024年第3期64卷 720-732页

作者：陈玲玲张婷郝雨杨金柯史喜绢张大俊杨行赵登率闫文倩别鑫恬陈国辉郑海学乐涛张克山重庆师范大学生命科学学院重庆401331 中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起家猪和野猪的一种高死亡率的传染性疾病。ASFV具有庞大的基因组,其中非结构蛋白pD1133L被预测为其编码的6个解旋酶之一。本实验室应用免疫... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起家猪和野猪的一种高死亡率的传染性疾病。ASFV具有庞大的基因组,其中非结构蛋白pD1133L被预测为其编码的6个解旋酶之一。本实验室应用免疫沉淀-质谱联用(immunoprecipitation-mass spectrometry,IP-MASS)技术筛选与pD1133L互作的宿主细胞蛋白,发现细胞波形蛋白(vimentin,VIM)为pD1133L互作的宿主蛋白之一,但尚不清楚宿主蛋白VIM对ASFV复制的影响。【目的】探究ASFV与VIM的相互调控作用,揭示VIM促进ASFV复制的机制。【方法】通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)试验验证pD1133L与VIM存在互作关系;外源过表达VIM蛋白以及设计并合成VIM的si RNA探究VIM对ASFV复制的影响;利用Western blotting以及荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)方法检测ASFV对VIM蛋白水平以及转录水平的影响;通过Western blotting、间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)探究巨噬细胞感染ASFV后VIM磷酸化水平变化以及亚细胞定位变化情况;CCK-8试剂盒检测VIM磷酸化抑制剂KN-93处理的最佳浓度,并利用Western blotting以及IFA检测KN-93对VIM磷酸化、亚细胞定位以及对ASFV复制影响。【结果】VIM过表达促进ASFV复制,敲低VIM的表达则抑制ASFV复制;ASFV感染抑制VIM蛋白水平以及转录水平表达,且呈时间依赖性;ASFV感染后VIM发生磷酸化修饰且发生亚细胞定位改变,从而促进ASFV复制。【结论】证实了ASFV与宿主蛋白VIM之间的相互调控作用;初步确定ASFV感染后VIM受到ASFV pD1133L调控,亚细胞定位发生重排向核周聚集从而促进ASFV复制的机制。

关键词：非洲猪瘟病毒 D1133L蛋白波形蛋白蛋白互作磷酸化

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玉米种质资源抗两种镰孢穗腐病的大规模鉴定

植物遗传资源学报 2024年

作者：韩宇琛韦翊君张震王天宇番兴明苏爱国吴建宇陈甲法河南农业大学生命科学学院中国农业科学院作物科学研究所云南省农业科学院粮食作物研究所北京市农林科学院玉米研究中心

玉米穗腐病是一种主要由拟轮枝镰孢和禾谷镰孢引起的真菌性病害，严重威胁国家粮食安全。随着气候和耕作制度的变化，穗腐病已成为玉米生产上发生最普遍、危害最重的病害之一，大规模的抗病种质资源鉴定有利于解决因优良抗病种质资源缺... 详细信息

玉米穗腐病是一种主要由拟轮枝镰孢和禾谷镰孢引起的真菌性病害，严重威胁国家粮食安全。随着气候和耕作制度的变化，穗腐病已成为玉米生产上发生最普遍、危害最重的病害之一，大规模的抗病种质资源鉴定有利于解决因优良抗病种质资源缺乏而导致的抗病品种培育困难的问题。本研究在建立了玉米穗腐病高通量抗性鉴定平台的基础上，采用滚动式抗源鉴定策略，在初级鉴定阶段采用单环境、单重复的策略对大量种质进行初步筛选，随后对初级鉴定中的高抗种质进行多重复、多环境、多年份的次级鉴定，逐步淘汰感病种质。2018-2020年间对10524份玉米种质资源进行了抗镰孢穗腐病的初级鉴定，共筛选到191份高抗种质，进一步对高抗种质进行滚动式次级鉴定，最终筛选出59份具有稳定抗性的种质，其中FD001、FD003、FD004等24份种质在5年的鉴定中均表现为抗病。从59份抗病种质的杂种优势类群看，抗病种质可分为5个类群：温热互导群、国内Reid群、NSS群、SS群及黄改群，基本涵盖国内最主要的杂种优势类群，其中来自于温热互导群的抗病材料有24份，占抗病材料总数的41%。本研究抗病种质资源的发掘为玉米抗穗腐病育种提供了重要资源。

关键词：玉米穗腐病抗性鉴定遗传多样性

赤羽病病毒N蛋白原核表达及单克隆抗体的制备

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生物工程学报 2024年第5期40卷 1548-1558页

作者：林永玉石正旺罗俊聪朱昱茜席韬周静张帆石鑫泰王川田宏甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所、兰州大学动物医学与生物安全学院、动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000

为制备赤羽病病毒(akabane virus,AKAV) N蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),本研究利用原核表达系统表达了AKAV N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞,采用间接酶联免疫吸附方法(enz... 详细信息

为制备赤羽病病毒(akabane virus,AKAV) N蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),本研究利用原核表达系统表达了AKAV N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞,采用间接酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛选获得阳性杂交瘤细胞。经3次亚克隆筛选得到两株特异性针对AKAV N蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为2C9与5E9。通过ELISA、免疫印迹(Western blotting)、间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)对其进行鉴定。结果显示,成功筛选到特异性针对AKAV N蛋白的单克隆抗体。IFA发现其与AKAV N蛋白具有良好的反应性,亚型鉴定试剂盒鉴定2C9 mAb重链为IgG2b型,轻链为κ链;5E9 mAb重链为IgG1型,轻链为κ链;ELISA检测效价均为1:4 096 000。本研究成功制备了两株特异性针对AKAV N蛋白的单克隆抗体,为赤羽病诊断方法的开发、疾病的防控以及AKAV N蛋白功能的研究奠定了基础。

关键词：赤羽病病毒 N蛋白原核表达单克隆抗体

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17个杂交组合花生籽仁镉含量的遗传分析

分子植物育种 2024年

作者：樊美玉高薇薇梁风建李进杨军军王欢姜春姣山东省花生研究所中国农业科学院生物技术研究所费县农业技术推广中心

为了解花生镉含量积累性状的遗传机制，本研究采用植物数量性状主基因＋多基因混合遗传模型方法分析了17个杂交组合F2群体花生籽仁镉含量遗传规律。本研究中镉含量的变异系数范围在4.2%～24.6%之间，除C2001、C2002、C2005、C2009、C201... 详细信息

为了解花生镉含量积累性状的遗传机制，本研究采用植物数量性状主基因＋多基因混合遗传模型方法分析了17个杂交组合F2群体花生籽仁镉含量遗传规律。本研究中镉含量的变异系数范围在4.2%～24.6%之间，除C2001、C2002、C2005、C2009、C2014、C2016等，其他组合的镉含量性状符合正态分布。大部分组合中该性状受2对主基因控制，少数组合中由1对主基因控制，未检测到多基因。C2001、C2018等2个组合存在主基因间互作。10个组合主基因遗传率均在90%以上；C2020、C2009的主基因遗传率只有3.78%和14.39%，C2003主基因遗传率为52.52%，受环境影响较大。主基因遗传率高且遗传规律相对简单的组合，可望用于后续定位镉含量相关基因。本研究为进一步探讨花生低镉分子机制创造了条件。

关键词：镉含量花生遗传模型主基因+多基因

“稻-稻-油”生产模式下短生育期冬油菜品种选育与推广现状分析

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中国农业科学 2024年第5期57卷 846-854页

作者：李荣德何平罗莉霞史梦雅侯乾马振国郭瑞星成洪涛全国农业技术推广服务中心中国农业科学院油料作物研究所/农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室

近年来，我国食用植物油自给率不到31%，进口依赖度高。油菜是唯一的冬季油料作物，适宜种植区域广泛，是我国重要的食用植物油来源。扩种油菜是保障国家食用油安全的重要举措。充分利用南方双季稻区冬闲田，推广“稻-稻-油”三熟制生... 详细信息

近年来，我国食用植物油自给率不到31%，进口依赖度高。油菜是唯一的冬季油料作物，适宜种植区域广泛，是我国重要的食用植物油来源。扩种油菜是保障国家食用油安全的重要举措。充分利用南方双季稻区冬闲田，推广“稻-稻-油”三熟制生产模式是扩种油菜的重要途径。适宜“稻-稻-油”生产模式的区域主要分布在我国湖南、江西、广西和湖北等省的双季稻区，约有187万hm2的潜力面积。根据温光资源条件，3个适宜区域即温光资源宽松区、温光资源紧平衡区和温光资源约束区均要求油菜品种生育期在180 d左右，10月中下旬播种，4月中下旬收获，才能适宜南方双季稻接茬。从2013年到2022年国家油菜品种试验情况来看，共有75个油菜新品种参加早熟组试验，平均生育期为169.3—185.3 d，平均单产1 635.90—2 228.55 kg·hm-2，其中，有22个品种增产显著。截至2023年5月底，登记生育期在190 d以内，适宜在“稻-稻-油”模式区域种植的短生育期冬油菜品种共有72个，均为甘蓝型双低油菜品种，以杂交品种为主。在品种推广应用上，经相关省份调查，阳光131、丰油730、沣油320、沣油847、赣油杂906、圣光127、湘油420、景油69、沣油112、华油杂652、赣油杂1009等11个品种在“稻-稻-油”生产区有较大的推广应用面积，在2022年的推广面积均为135 hm2以上。现有品种的生育期能够基本满足温光资源宽松区的要求，但在温光资源紧平衡区和约束区生育期仍然偏长。聚焦油菜扩种增产增效，未来还需要强化政策资金保障，组织开展短生育期冬油菜品种培育联合攻关，提高温光资源宽松区品种的产量，缩短温光资源紧平衡区和约束区品种的生育期。同时，还需加强短生育期油菜品种良种良法配套技术的研究与推广，做好早稻、晚稻和油菜品种的搭配，从完善农业社会化服务、扩展油菜种植农业保险、增加油菜种植资金补贴等方面入手，保障农民收益，提高农民“稻-稻-油”模式生产积极性。

关键词： “稻-稻-油”生产模式短生育期冬油菜选育推广

农业新质生产力形成的理论逻辑、中国实践与着力重点

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西北农林科技大学学报(社会科学版) 2024年

作者：林青宁李京栋毛世平中国农业科学院农业经济与发展研究所北京市科学技术研究院高质量发展研究中心

新质生产力有别于传统生产力,涉及领域新、技术含量高,是以创新为先导,具有高科技、高效能、高质量特征的先进生产力质态。农业新质生产力内涵除具有新质生产力的共性,还具备农业领域高度公共性、高度科技化、高度数字化和高度产业化的... 详细信息

新质生产力有别于传统生产力,涉及领域新、技术含量高,是以创新为先导,具有高科技、高效能、高质量特征的先进生产力质态。农业新质生产力内涵除具有新质生产力的共性,还具备农业领域高度公共性、高度科技化、高度数字化和高度产业化的特性,其形成有特定的历史逻辑与现实逻辑。加快形成农业新质生产力要处理好发展与底线、新旧动能转换以及新质生产力和新型生产关系这三对关系。在战略层面,要坚持习近平新时代中国特色社会主义思想,做好顶层设计,抓住有为政府和有效市场两个主体,用好新型举国体制、国家战略科技力量和系统化农业科技合作机制三个力量,守正创新,聚焦智慧农业、生物育种、绿色发展等关键领域。在实践层面,要积极建立农业科技优先投入机制,强化农业基础研究长效机制,明确农业科技创新主体使命定位,强化涉农企业技术创新主体地位,提高农业产业链韧性。

关键词：新质生产力农业新质生产力生产关系农业科技科技创新

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中国小麦抗条锈病基因育种利用现状与策略

中国农业科学 2024年第1期57卷 34-51页

作者：刘志勇张怀志白斌李俊黄林徐智斌陈永兴刘旭曹廷杰李淼淼陆平吴秋红董玲丽韩玉林殷贵鸿胡卫国王西成赵虹闫素红杨兆生畅志坚王涛杨武云刘登才李洪杰杜久元中国科学院遗传与发育生物学研究所/植物细胞与染色体工程国家重点实验室/种子创新研究院中国科学院大学现代农业科学学院海南崖州湾种子实验室甘肃省农业科学院小麦研究所四川省农业科学院作物研究所四川农业大学小麦研究所中国科学院成都生物研究所中国农业科学院棉花研究所河南省农业科学院小麦研究所周口市农业科学院河南农业大学农学院山西农业大学农学院/作物科学研究所中国农业科学院作物科学研究所

小麦条锈病是中国重要的流行性真菌病害，严重威胁国家粮食安全。通过持续应用抗病品种和植保措施，小麦条锈病在中国得到了较好的控制。然而，随着全球气候变化、栽培制度的变革、育种方法技术的改进、产量水平的提高及条锈菌群体结构... 详细信息

小麦条锈病是中国重要的流行性真菌病害，严重威胁国家粮食安全。通过持续应用抗病品种和植保措施，小麦条锈病在中国得到了较好的控制。然而，随着全球气候变化、栽培制度的变革、育种方法技术的改进、产量水平的提高及条锈菌群体结构和毒性频率的不断变异，有必要对新时期小麦抗条锈病基因育种利用现状进行科学评估，以期为广谱持久多抗小麦品种的培育提供依据。本文通过对近年来中国西南、西北和黄淮主产区小麦品种（系）的条锈病抗性进行系统的抗病鉴定、遗传分析和抗条锈病基因分子标记的定位和检测，总结了中国小麦育种中主要抗条锈病基因的利用情况，对中国小麦抗条锈病基因发掘与种质创新、小麦育种中利用的主要抗条锈病基因、新时期抗条锈病基因利用的策略、小麦育种中抗条锈病基因选择和鉴定等进行了论述，并对新时期小麦抗条锈病育种发展方向进行了展望。

关键词：小麦条锈菌兴衰循环持久抗性基因聚合种质创新

非洲马瘟病毒和西尼罗病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

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畜牧兽医学报 2024年

作者：钱佳豪刘丹周师众张博源高建帅蒋卉范学政张广智丁家波王春凤沈青春中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方) 吉林农业大学动物医学院

本研究旨在建立一种可同时检测非洲马瘟病毒（African horse sickness virus， AHSV）和西尼罗病毒（West Nile virus， WNV）的双重荧光定量RT-PCR检测方法。根据AHSV VP7基因序列和WNV Poly Protein基因的高度保守区域设计特异性引物... 详细信息

本研究旨在建立一种可同时检测非洲马瘟病毒（African horse sickness virus， AHSV）和西尼罗病毒（West Nile virus， WNV）的双重荧光定量RT-PCR检测方法。根据AHSV VP7基因序列和WNV Poly Protein基因的高度保守区域设计特异性引物和探针，优化反应条件及体系，绘制标准曲线，对其特异性、敏感性和重复性进行测定，并采用该方法对临床样品进行检测验证。结果显示：该方法能够同时检测AHSV和WNV，且特异性良好，与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马传染性贫血病毒、马腺疫链球菌、马流感病毒等马病核酸均无交叉反应；敏感性高，AHSV和WNV最低检测限均为10 copies·μL-1；组内变异系数在0.04%～0.93%，组间变异系数在0.17%～4.83%，重复性良好；使用该方法对30份马全血样品进行检测，结果均为阴性。本试验建立的检测方法对马属动物检疫、非洲马瘟和西尼罗热的监测与防控具有重要意义。

关键词：双重荧光定量RT-PCR 非洲马瘟病毒西尼罗病毒

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乳中嗜冷菌检测和分析方法的研究进展

食品科学 2024年第13期45卷 356-364页

作者：吴杰郑楠王加启孟璐中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室农业农村部奶产品质量安全风险评估实验室(北京)北京100193

乳是适宜微生物生长的优良培养基,易被来自环境的微生物污染。在生乳低温贮存过程中,嗜冷菌是最主要的微生物,并且嗜冷菌在低温环境中会产生耐热的蛋白酶和脂肪酶,热处理过后仍保持活性,在液态乳贮藏过程中分解蛋白质和脂肪,影响乳的品... 详细信息

乳是适宜微生物生长的优良培养基,易被来自环境的微生物污染。在生乳低温贮存过程中,嗜冷菌是最主要的微生物,并且嗜冷菌在低温环境中会产生耐热的蛋白酶和脂肪酶,热处理过后仍保持活性,在液态乳贮藏过程中分解蛋白质和脂肪,影响乳的品质。目前我国行业标准规定的乳中嗜冷菌计数方法需要将试样在6.5℃条件下培养10 d,耗时过长,在实际生产中应用价值较低。因此,开发针对嗜冷菌及其耐热酶的检测技术对保障乳及乳制品品质十分必要。本文综述了国内外针对乳中嗜冷菌鉴定与分析开发的多种方法,涉及的技术包括聚合酶链式反应、测序技术、荧光原位杂交、环介导等温扩增等,为开发可用于检测乳中嗜冷菌的技术提供参考。

关键词：生乳嗜冷菌耐热酶检测方法

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