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日本血吸虫童虫部分差异表达蛋白的质谱分析

中国兽医科学 2007年第1期37卷 1-6页

作者：赵晓宇姚利晓孙安国傅志强刘金明蔡幼民林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海动物生物技术研究中心上海200232

应用蛋白质双向电泳技术和质谱技术对16日龄日本血吸虫童虫的可溶性蛋白进行分离、分析,得到了2 000±69个蛋白斑点,其中500±86个蛋白斑点与血吸虫雌虫和雄虫的蛋白所共有,童虫特异呈现的蛋白斑点有26±1个。对其中20个童虫特异呈现的... 详细信息

应用蛋白质双向电泳技术和质谱技术对16日龄日本血吸虫童虫的可溶性蛋白进行分离、分析,得到了2 000±69个蛋白斑点,其中500±86个蛋白斑点与血吸虫雌虫和雄虫的蛋白所共有,童虫特异呈现的蛋白斑点有26±1个。对其中20个童虫特异呈现的蛋白斑点进行质谱和生物信息学分析的结果表明,它们代表了16种蛋白;对这些蛋白进行生物学功能预测的结果表明,它们可能与寄生虫的生物合成、能量代谢、信号传导和细胞构成等相关。

关键词：日本血吸虫童虫蛋白质组质谱

微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型的建立及不同阶段虫体形态的观察

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中国兽医科学 2012年第2期42卷 111-118页

作者：张国恩米荣升周鹏黄燕秦培兰呼高伟曹薇陈兆国中国农业科学院、上海兽医研究所、农业部动物寄生虫学重点开放实验室、中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海200241

利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长状况;在培养细胞中加入1×105个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊、子孢子染色试剂盒Crypt-a-Glo... 详细信息

利用人回盲肠癌(HCT-8)细胞作为感染细胞,采用不同的接种细胞浓度和培养血清浓度进行培养,观察细胞的生长状况;在培养细胞中加入1×105个经活力检测的微小隐孢子虫卵囊,培养72h后用荧光标记的隐孢子虫卵囊、子孢子染色试剂盒Crypt-a-Glo和Sporo-Glo进行染色,观察不同发育阶段的隐孢子虫形态。结果显示,在六孔培养板中接种10×105个细胞后,24h后长成80%～100%单细胞层,可以用来接种微小隐孢子虫。培养72h后观察到了隐孢子虫各个阶段虫体的形态。结果表明,成功建立了微小隐孢子虫感染HCT-8细胞模型。

关键词：微小隐孢子虫体外感染 HCT-8细胞培养形态

日本血吸虫SjPP基因原核表达蛋白的酶活性

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中国兽医科学 2008年第7期38卷 555-558页

作者：姚利晓王欣之傅志强陶丽红林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室上海动物生物技术研究中心

分别以磷酸苏氨酸多肽（K-R-pT-I—R—R）和4-硝基苯基磷基二钠盐（pNPP）为底物，研究原核表达的日本血吸虫丝／苏氨酸蛋白磷酸酶重组蛋白rSjPP的酶活性，检测二价金属阳离子（Mn^2＋、Ni^2＋、Mg^2＋、Ca^2＋）、温度、pH值对rSjPP酶... 详细信息

分别以磷酸苏氨酸多肽（K-R-pT-I—R—R）和4-硝基苯基磷基二钠盐（pNPP）为底物，研究原核表达的日本血吸虫丝／苏氨酸蛋白磷酸酶重组蛋白rSjPP的酶活性，检测二价金属阳离子（Mn^2＋、Ni^2＋、Mg^2＋、Ca^2＋）、温度、pH值对rSjPP酶活性的影响。结果显示，rSjPP重组蛋白可以有效地水解磷酸苏氨酸多肽，具有丝／苏氨酸蛋白磷酸酶活性。rSjPP酶活性的最适温度为60℃，最适pH值为8．0。1～4mmol／L Ni^2＋对rSjPP酶活力有促进作用，但Mn^2＋、Mg^2＋、Ca^2＋等阳离子对rSjPP的酶活力影响不大。

关键词：日本血吸虫丝/苏氨酸蛋白磷酸酶酶活性影响因子

血吸虫反向疫苗学理论与技术的研究现状与展望

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第3期25卷 237-247页

作者：冯新港隋传宇苑纯秀邵东华陈进新林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所上海动物生物技术研究中心农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232 上海师范大学生物与环境学院生物系

近年发展起来的反向疫苗学,以“序列-结构-功能”思想为依据,以免疫信息学、计算机预测设计以及高通量的各种组学(包括基因组学、转录本组学、蛋白质组学等)综合集成技术为核心,可能为血吸虫疫苗候选分子的发现提供一条新途径。本文简... 详细信息

近年发展起来的反向疫苗学,以“序列-结构-功能”思想为依据,以免疫信息学、计算机预测设计以及高通量的各种组学(包括基因组学、转录本组学、蛋白质组学等)综合集成技术为核心,可能为血吸虫疫苗候选分子的发现提供一条新途径。本文简要介绍了反向疫苗学常用的理论预测和实验方法;概述了应用反向疫苗学理论与技术筛选和鉴定血吸虫候选疫苗分子(保护性抗原或表位)的进展情况;最后,讨论了通过模拟辐照致弱血吸虫疫苗或人群获得性免疫的效应机制等来发展血吸虫反向疫苗学的可能的研究方向。

关键词：血吸虫病反向疫苗学免疫信息学功能基因组学辐照致弱疫苗保护性抗原表位

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巴贝斯虫病研究进展

动物医学进展 2013年第12期34卷 173-178页

作者：吴家俊周金林中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

巴贝斯虫病是一种由寄生于红细胞内的巴贝斯虫引起的人兽共患病,主要通过硬蜱进行传播。致病机理主要是染虫红细胞裂解导致溶血性贫血,在特殊情况下会进一步导致器官衰竭甚至死亡。对该病的诊断方法主要有血涂片观察、动物接种、ELISA... 详细信息

巴贝斯虫病是一种由寄生于红细胞内的巴贝斯虫引起的人兽共患病,主要通过硬蜱进行传播。致病机理主要是染虫红细胞裂解导致溶血性贫血,在特殊情况下会进一步导致器官衰竭甚至死亡。对该病的诊断方法主要有血涂片观察、动物接种、ELISA检测及核酸诊断等。该病的主要治疗方法为克林霉素和奎宁联用,另外,阿托伐醌与阿奇霉素联用在一些病例中展现了良好的治疗效果。现阶段对该病的预防措施主要为消灭硬蜱,加强公众对蜱的防范意识,同时由于该病能通过输血途径在人群中传播,因此有必要对输血人群进行血液检测,以减少人群感染的概率。

关键词：巴贝斯虫病致病机理诊断治疗预防

早熟艾美耳球虫上海株的分离鉴定及生物学特性观察

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中国预防兽医学报 2010年第7期32卷 529-533页

作者：陈兆国米荣升于慧珠郝言明胡义彬黄燕李正锋李艳林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心上海200241

为分离和鉴定早熟艾美尔球虫(Eimeria praecox),观察其主要生物学特性,本研究采用单卵囊感染技术分离单一虫株,通过卵囊形态学、PCR技术和18SrRNA基因检测,对其进行性状观察、虫种鉴定和系统发生关系分析。在获得的5株单一虫株中,对其... 详细信息

为分离和鉴定早熟艾美尔球虫(Eimeria praecox),观察其主要生物学特性,本研究采用单卵囊感染技术分离单一虫株,通过卵囊形态学、PCR技术和18SrRNA基因检测,对其进行性状观察、虫种鉴定和系统发生关系分析。在获得的5株单一虫株中,对其中一株的卵囊形态、寄生部位、最短孢子化时间和最短潜在期进行观察。结果表明:该株球虫具有E. praecox的主要生物学特征;分离自肠道的卵囊明显小于分离自粪便的卵囊;最短潜在期为81h;经PCR鉴定为E. praecox,命名为E. praecox上海株。测序结果显示,其18SrRNA基因序列长1747bp,与GenBank登录的相关基因序列同源性为99.4%;该虫株对雏鸡呈轻度致病性。该虫株的分离和鉴定为丰富我国鸡球虫虫种资源,开展球虫病防治研究提供了依据。

关键词：早熟艾美尔球虫分离鉴定生物学性状 18S rRNA基因

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宠物蜱传疾病流行概况和防控技术研究进展

中国媒介生物学及控制杂志 2021年第3期32卷 257-264页

作者：韦娜娜张厚双周金林中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241

蜱是专性吸血的体外寄生虫,也是人和动物的致病性病毒、细菌、真菌和原虫的传播媒介,因此,相关研究具有重要的公共卫生意义。近年来,宠物数量急剧增加,导致宠物蜱传人兽共患病发病率不断增高。该文从宠物常见寄生蜱类及特征、宠物常见... 详细信息

蜱是专性吸血的体外寄生虫,也是人和动物的致病性病毒、细菌、真菌和原虫的传播媒介,因此,相关研究具有重要的公共卫生意义。近年来,宠物数量急剧增加,导致宠物蜱传人兽共患病发病率不断增高。该文从宠物常见寄生蜱类及特征、宠物常见蜱传病原体及常见蜱传疾病流行情况和防控技术研究进展等方面作一综述,以期为宠物蜱传人兽共患病的综合防控提供参考。

关键词：蜱宠物蜱传疾病防控

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孔雀石绿单克隆抗体的制备及其鉴定

中国兽医科学 2007年第4期37卷 359-362页

作者：龚朋飞王权陈永军中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室农业部动物寄生虫学重点实验室上海200232

用人工合成的无色孔雀石绿-兔血清白蛋白(LMG-RSA)作抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术筛选抗无色孔雀石绿的单抗,单抗经纯化后对其特异性和灵敏性进行了鉴定,探讨了建立孔雀石绿的免疫学检测方法。结果显示,经细胞融合和筛选... 详细信息

用人工合成的无色孔雀石绿-兔血清白蛋白(LMG-RSA)作抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术筛选抗无色孔雀石绿的单抗,单抗经纯化后对其特异性和灵敏性进行了鉴定,探讨了建立孔雀石绿的免疫学检测方法。结果显示,经细胞融合和筛选得到了1株分泌抗无色孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞5E9。经鉴定,该杂交瘤细胞的染色体数为98.82±5.6,间接ELISA检测小鼠腹水的抗体效价达1.3×105,该细胞连续培养10代以上,生物学性状稳定,间接竞争ELISA(ciELISA)结果显示,无色孔雀石绿50%抑制的质量浓度为18.5μg/L,除孔雀石绿外,与其他类似结构和相关类型的药物没有交叉反应,表明该单抗用于孔雀石绿的检测有较大的应用价值。

关键词：孔雀石绿单克隆抗体间接竞争酶联免疫吸附试验

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免疫信息学在抗原虫病疫苗研发中的应用进展

中国人兽共患病学报 2010年第5期26卷 495-498,501页

作者：陈兆国冯新港米荣升黄燕林矫矫中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室中国农业科学院动物源性食品安全研究中心上海200241

进入新世纪以来,原虫的基因组计划取得了很大的进展。其中,恶性疟原虫(Plasmodiurn falciparum)、约氏疟原虫(*** yoelii)、微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)和人隐孢子虫(***)、硕大利什曼原虫(Leishmania major)、克氏锥虫(Trypa... 详细信息

关键词：原虫病免疫信息学疫苗研发微小隐孢子虫应用基因组计划恶性疟原虫约氏疟原虫