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移植物厚度对角膜内皮失代偿行简易后弹力层角膜内皮移植效果的影响

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中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1199-1207页

作者：巴颜红高明宏陈颖欣中国人民解放军北部战区总医院辽宁省沈阳市110000

背景:研究表明较薄移植物视力恢复更快、排斥风险更低,国内缺乏对内皮移植术后不同植片厚度的临床疗效分析,因此,确定最佳移植物厚度对于提高手术疗效至关重要。目的:评价简易后弹力层剥离内皮角膜移植术后不同植片厚度对视力恢复及其... 详细信息

背景:研究表明较薄移植物视力恢复更快、排斥风险更低,国内缺乏对内皮移植术后不同植片厚度的临床疗效分析,因此,确定最佳移植物厚度对于提高手术疗效至关重要。目的:评价简易后弹力层剥离内皮角膜移植术后不同植片厚度对视力恢复及其他预后指标的影响。方法:选取2013年1月至2023年2月在北部战区总医院接受简易后弹力层剥离内皮角膜移植手术治疗的角膜内皮失代偿患者共72例(72眼),其中薄植片组(0.05);③两组患者继发性青光眼、植片免疫排斥、植片移位等术后并发症发生率比较差异无显著性意义(P>0.05);④两组术后1年植片生存率比较差异无显著性意义(93.8%,92.3%,P>0.05);⑤结论:简易后弹力层剥离内皮角膜移植术是一种安全有效的角膜内皮移植手术方式,其术后疗效与传统后弹力层剥离内皮角膜移植术相似,而且植片植入方式更为简便。较薄植片能够更早提供最佳矫正视力,更早完成角膜重塑,因此在治疗角膜内皮失代偿疾病时,优先选择薄移植物来提高恢复时间。

关键词：后弹力层撕除角膜内皮移植术角膜内皮失代偿继发性青光眼植片移位原发移植失败植片排斥角膜内皮细胞数角膜移植

纤维连接蛋白对人神经干细胞诱导分化为少突胶质前体细胞的影响

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6661-6666页

作者：汪兆艳王倩刘卫鹏杨辉栾佐屈素清中国人民解放军总医院第六医学中心儿科北京市100048

背景:少突胶质前体细胞是治疗脑白质损伤性疾病的种子细胞,建立高效稳定扩增的体外诱导分化方法是实现临床转化研究的重要前提。目的:探讨纤维连接蛋白对人神经干细胞来源少突胶质前体细胞增殖、迁移和分化等生物学特性的影响。方法:将... 详细信息

背景:少突胶质前体细胞是治疗脑白质损伤性疾病的种子细胞,建立高效稳定扩增的体外诱导分化方法是实现临床转化研究的重要前提。目的:探讨纤维连接蛋白对人神经干细胞来源少突胶质前体细胞增殖、迁移和分化等生物学特性的影响。方法:将悬浮培养的人神经干细胞用Accutase消化成单细胞,通过流式细胞术检测特异性标志物Nestin、Sox2、Vimentin、CD133、Musashi的表达。然后将人神经干细胞单细胞重悬于少突胶质前体细胞培养基,接种于不同质量浓度纤维连接蛋白(0,1,2.5,5,10μg/mL)包被的6孔板中,培养7 d后Accutase消化进行传代,锥虫蓝染色计数细胞,选择扩增能力最强的纤维连接蛋白包被与未用纤维连接蛋白包被的少突胶质前体细胞进行下一步实验,Transwell小室检测细胞迁移能力,流式细胞术检测Olig2、Sox10、PDGFR-α的表达。将少突胶质前体细胞向少突胶质细胞诱导分化3周,免疫荧光染色检测分化细胞Galc的表达。结果与结论:①人神经干细胞呈悬浮球状生长,流式细胞术检测结果显示,人神经干细胞高表达Nestin、Sox2、Vimentin、CD133和Musashi;②由人神经干细胞诱导的少突胶质前体细胞的胞体为圆形或椭圆形,折光性强,有双极或三级突起结构;与0μg/mL纤维连接蛋白包被组比较,2.5,5,10μg/mL纤维连接蛋白包被组少突胶质前体细胞的扩增能力显著增强(P0.05);④Transwell小室检测结果显示,与0μg/mL纤维连接蛋白包被组比较,10μg/mL纤维连接蛋白包被组少突胶质前体细胞的迁移能力增加(P0.05)。结果表明,纤维连接蛋白质量浓度为10μg/mL时对少突胶质前体细胞的增殖和迁移作用最强,但不影响少突胶质前体细胞特异性标志物Olig2、Sox10和PDGFR-α的表达及其向少突胶质细胞的分化。

关键词：纤维连接蛋白神经干细胞少突胶质前体细胞少突胶质细胞细胞增殖细胞分化工程化干细胞工程化细胞

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截断逆挽方调控AMPK改善HepG2细胞线粒体损伤的机制

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北京中医药大学学报 2025年

作者：马瑞旻王瀚婧张文馨马重阳张秋云杜宇琼首都医科大学中国人民解放军总医院京中医疗区

目的探究截断逆挽方含药血清对D-氨基半乳糖（D-GalN）诱导的HepG2细胞线粒体功能的保护作用及对单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）介导的线粒体质量控制（MQC）的调控作用。方法将20只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组和截断逆挽方含... 详细信息

目的探究截断逆挽方含药血清对D-氨基半乳糖（D-GalN）诱导的HepG2细胞线粒体功能的保护作用及对单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMPK）介导的线粒体质量控制（MQC）的调控作用。方法将20只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组和截断逆挽方含药血清组，每组10只。截断逆挽方含药血清组给予截断逆挽方（21.7 g/kg）灌胃；空白对照组给予生理盐水灌胃。取血制备截断逆挽方含药血清及空白对照血清。综合评估细胞活力、线粒体损伤指标以及MQC通路蛋白表达水平确定截断逆挽方的最优体积分数。将HepG2细胞分为对照组、D-GalN组、二甲基亚砜（DMSO）组、AMPK抑制剂组、截断逆挽方含药血清组、截断逆挽方含药血清加AMPK抑制剂组，分别给予对应的药物干预。使用CCK-8法检测细胞活力，荧光探针JC-1检测线粒体膜电位，荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧（ROS）水平，WST-8法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性，TBA法检测丙二醛（MDA）含量等线粒体损伤指标，蛋白免疫印迹法检测p-AMPK、AMPK、过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α（PGC-1α）、核呼吸因子1（NRF1）、线粒体转录因子A（TFAM）、线粒体融合蛋白2（MFN2）、动力蛋白相关蛋白1（DRP1）等MQC通路蛋白表达水平。结果与对照组比较，D-GalN、DMSO、AMPK抑制剂组的细胞活力和SOD活性下降（P< 0.01），线粒体膜电位异质性、ROS、MDA含量上升（P< 0.01），p-AMPK、MFN2、PGC-1α、NRF1、TFAM蛋白表达水平降低（P< 0.01），DRP1蛋白表达水平降低（P< 0.01）；与DMSO组比较，截断逆挽方含药血清干预后，细胞活力和SOD活性上升（P< 0.01），线粒体膜电位异质性、ROS、MDA含量下降（P< 0.01），p-AMPK、MFN2、PGC-1α、NRF1、TFAM蛋白表达水平升高（P< 0.01），DRP1蛋白表达水平降低（P< 0.01）；与截断逆挽方含药血清组比较，截断逆挽方含药血清加AMPK抑制剂组的细胞活力下降（P< 0.01），线粒体膜电位异质性、细胞内ROS水平上升（P< 0.01），MDA含量上升（P< 0.05），SOD活性下降（P< 0.05），p-AMPK、PGC-1α、NRF1、TFAM蛋白表达水平降低（P< 0.01），MFN2蛋白表达水平降低（P< 0.05），DRP1蛋白表达水平升高（P< 0.01）。结论截断逆挽方含药血清可能通过调控AMPK介导的MQC恢复线粒体功能改善D-GalN诱导HepG2细胞线粒体损伤。

关键词：截断逆挽方肝细胞损伤线粒体质量控制单磷酸腺苷激活的蛋白激酶慢加急性肝衰竭

创伤骨科远程手术机器人系统远程治疗Tile C1.3型骨盆环损伤一例

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中国修复重建外科杂志 2025年

作者：贺杰曹文豪陈志广刘浩宇刘光平齐红哲郭浩祁麟李嘉琦陈华唐佩福中国人民解放军总医院第四医学中心骨科医学部中国人民解放军医学院中国人民解放军总医院第九医学中心骨科武警北京市总队医院外二科国家骨科与运动康复临床医学研究中心

为解决骨盆骨折微创治疗复位、固定、可视化及技术推广的难题，中国人民解放军总医院第四医学中心骨科医学部团队搭建了“五位一体”创伤骨科远程手术机器人系统，主要包括UCRT骨盆解锁复位系统、全透视多功能手术牵引床、HoloSight知... 详细信息

为解决骨盆骨折微创治疗复位、固定、可视化及技术推广的难题，中国人民解放军总医院第四医学中心骨科医学部团队搭建了“五位一体”创伤骨科远程手术机器人系统，主要包括UCRT骨盆解锁复位系统、全透视多功能手术牵引床、HoloSight知见创伤手术机器人、105°大开口三维透视C臂X线机、混合智能远程操作系统（图1）。现回顾分析2024年8月中国人民解放军总医院第四医学中心骨科医学部采用创伤骨科远程手术机器人系统进行复位与固定治疗的1例双侧Tile C1.3型骨盆环损伤患者临床资料。

关键词：骨盆人工智能骨折远程交互

院外转诊急性A型主动脉夹层手术延迟的危险因素分析

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临床心血管病杂志 2025年第01期 49-54页

作者：谢亚张惠芬颜涛王显悦张本蔡治祥中国人民解放军南部战区总医院

目的:探讨院外转诊急性A型主动脉夹层(ATAAD)患者手术延迟的危险因素，并探讨解决手术延迟的方法。方法:回顾性分析2019年4月—2023年5月外院转诊的378例ATAAD患者的临床资料。根据发病至手术时间是否大于12 h,将患者分为延迟组(110例)... 详细信息

目的:探讨院外转诊急性A型主动脉夹层(ATAAD)患者手术延迟的危险因素，并探讨解决手术延迟的方法。方法:回顾性分析2019年4月—2023年5月外院转诊的378例ATAAD患者的临床资料。根据发病至手术时间是否大于12 h,将患者分为延迟组(110例)和及时组(268例)。比较两组患者病史资料、发病及就诊信息，采用logistic回归分析筛选手术延迟的独立危险因素，并采用受试者工作特征曲线(ROC)对危险因素的预测效能进行判断。结果:及时组和延时组患者年龄、发病症状、发病地点、发病时间、发病至三甲医院时间、转诊单车程时间、转诊模式相比较均差异有统计学意义(均P医院时间>6 h(OR=8.65,95%CI:3.80～19.69,P2 h(OR=11.65,95%CI:4.64～29.23,P60岁(OR=4.88,95%CI:2.01～11.83,P60岁、发病地点为农村、发病至三甲医院时间>6 h、转诊单车程时间>2 h、常规逐级转诊是手术延迟的独立危险因素。

关键词： A型主动脉夹层,急性手术延迟危险因素转诊模式

旋转细胞培养系统对老年人表皮干细胞增殖和干性维持的影响

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2698-2705页

作者：张敏董溪溪黄萌王朝祥张鲁岳曹均凯解放军医学院北京市100853 中国人民解放军总医院第一医学中心北京市100853 中国人民解放军总医院第五医学中心北京市100071

背景:由于人口老龄化和老年疾病的增加,对老年人表皮干细胞的研究和利用变得越来越重要。但由于老年人表皮干细胞的增殖和干性能力较弱,限制了其在生物医学和临床研究的应用。目的:探讨旋转细胞培养系统培养的老年人表皮干细胞的增殖和... 详细信息

背景:由于人口老龄化和老年疾病的增加,对老年人表皮干细胞的研究和利用变得越来越重要。但由于老年人表皮干细胞的增殖和干性能力较弱,限制了其在生物医学和临床研究的应用。目的:探讨旋转细胞培养系统培养的老年人表皮干细胞的增殖和干性维持能力。方法:采用传统平面培养方法获取儿童(7-12岁)和老年人(60岁以上)表皮干细胞,经细胞形态学和细胞免疫荧光鉴定后,通过流式细胞术、CCK-8、细胞克隆形成实验分析儿童和老年人表皮干细胞增殖能力的差异;采用旋转细胞培养系统和3D TableTrix®微载体培养儿童和老年人表皮干细胞,通过活/死染色、细胞倍增效率、细胞倍增时间以及实时定量聚合酶链反应检测细胞增殖情况以及干性标志物的表达。结果与结论:①在平面培养条件下,儿童组表皮干细胞较老年组具有更强的增殖能力;②与平面培养相比,经旋转细胞培养系统动态培养的老年人表皮干细胞的细胞倍增效率更高(P<0.01),细胞倍增时间更短(P<0.01);③旋转细胞培养系统动态培养促使老年人表皮干细胞自组装形成基于微载体支架的三维细胞球,具有和儿童组表皮干细胞相似的增殖情况;④动态培养后的老年人表皮干细胞在干性标记物基因(ITGA6和ITGB1)、基底细胞标记物基因(K5)和分化标记物基因(K10和K1)表达上可达到和儿童组相近的表达水平。结果表明:旋转细胞培养系统动态培养不仅可以提高老年人表皮干细胞的培养效率,促进细胞增殖和自组装成三维细胞球,而且可维持老年人表皮干细胞一定的干性,未发生完全终末分化。

关键词：人表皮干细胞老年人旋转细胞培养系统微载体三维动态培养干性增殖

基于噬菌体展示的阿达木单抗特异性结合肽筛选及其在药物检测中的应用

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药学学报 2025年

作者：张雨欣陈雨张凤刘耀阳樊芳陈啸飞中国人民解放军海军军医大学药学院海军军医大学附属长征医院

本文建立了一种筛选阿达木单抗（adalimumab， ADM）特异性结合肽的噬菌体展示方法，为ADM的临床研究提供特异性识别元件，并基于该多肽成功建立用于临床检测ADM的间接酶联免疫吸附分析方法（indirect enzyme-linked immunosorbent... 详细信息

本文建立了一种筛选阿达木单抗（adalimumab， ADM）特异性结合肽的噬菌体展示方法，为ADM的临床研究提供特异性识别元件，并基于该多肽成功建立用于临床检测ADM的间接酶联免疫吸附分析方法（indirect enzyme-linked immunosorbent assay， i-ELISA）。以ADM为靶分子，利用M13噬菌体线性十二肽库展示技术，进行五轮多肽淘选。通过对每一轮洗脱液的滴度进行测定发现，回收率从7.28×10-6提高到1.55×10-3，表明洗脱液中与ADM结合的多肽在不断富集，且富集效果较好; 对第五轮筛选扩增液进行测序，结果发现有5条多肽序列出现频次较高，被认为是潜在能够与ADM特异性结合的多肽，并进行固相合成; 分别通过表面等离子体共振技术（surface plasmon resonance， SPR）和ELISA实验验证并鉴定了5条多肽序列与ADM的特异性结合能力，结果表明第一条多肽序列（Pep1）和第二条多肽序列（Pep2）与ADM呈现特异性结合，亲和力常数 (KD) 分别为7.91×10-5和1.67×10-5mol·L-1，而其中Pep1与ADM同型抗体人免疫球蛋白G （immunoglobulin G， IgG）的亲和力常数为1.35×10-4mol·L-1，比与ADM的亲和力常数低1个数量级，由此可判定Pep1为ADM的特异性结合肽。基于Pep1成功建立了抗体药物ADM间接ELISA分析方法。随着ADM浓度的不断增加OD450值呈规律性变化，该方法可用于临床ADM血药浓度的监测。本研究获得能够与ADM特异性结合的多肽，该多肽序列可作为ADM的特异性识别元件，不仅实现ADM的血药浓度监测，也可为ADM体内外精确定性定量提供了有效工具，同时为其他单克隆抗体药物识别元件的发现提供了新的策略和思路。

关键词：阿达木单抗多肽噬菌体展示酶联免疫吸附分析血药浓度监测

经皮椎间孔镜手术治疗腰椎间盘突出症的发展、麻醉与穿刺导航技术研究进展

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颈腰痛杂志 2025年 1002-1006页

作者：沈兴利贺奇志周黎明陈力赵林汤壮朱文博李星宇中国人民解放军63680部队医院疼痛科

在外科手术微创化趋势的背景下,以脊柱微创手术为代表的经皮椎间孔镜椎间盘切除术(PETD)用于治疗腰椎间盘突出症已有20年余,期间其在理论技术、应用范围及临床疗效等方面均有长足的进步与发展。局部麻醉是PETD最常用的麻醉方式,而硬膜... 详细信息

在外科手术微创化趋势的背景下,以脊柱微创手术为代表的经皮椎间孔镜椎间盘切除术(PETD)用于治疗腰椎间盘突出症已有20年余,期间其在理论技术、应用范围及临床疗效等方面均有长足的进步与发展。局部麻醉是PETD最常用的麻醉方式,而硬膜外麻醉和全身麻醉在不同方面也展现出独特优势。PETD术中穿刺与工作通道的建立通常在X线透视下分步盲穿进行,为提高穿刺准确性及降低辐射暴露,目前不少学者探索了超声导航、超声容积导航、电磁导航及虚拟现实、增强现实和混合现实等众多穿刺导航技术。笔者就PETD治疗腰椎间盘突出症的发展、麻醉与穿刺导航技术研究进展做一综述,以期助益于临床诊疗工作。

关键词：腰椎间盘突出症经皮椎间孔镜椎间盘切除术麻醉穿刺导航数字感知技术

基于LASSO-Logistic回归构建脑出血术后脑积水的风险预测模型

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中华神经外科疾病研究杂志 2025年第1期19卷 13-19页

作者：郝广志孙琳琳张冰莹霍达董玉书中国人民解放军北部战区总医院神经外科辽宁沈阳110016

目的基于LASSO-logistic回归筛选自发性脑出血(SICH)术后脑积水发生的危险因素,同时构建临床预测模型和验证。方法选取2023年8月至2024年3月北部战区总医院收治的724例SICH患者,根据7∶3比例随机分为训练集(n=507)和验证集(n=217)。在... 详细信息

目的基于LASSO-logistic回归筛选自发性脑出血(SICH)术后脑积水发生的危险因素,同时构建临床预测模型和验证。方法选取2023年8月至2024年3月北部战区总医院收治的724例SICH患者,根据7∶3比例随机分为训练集(n=507)和验证集(n=217)。在训练集中采用Lasso回归结合单因素Logistic回归的方法共同进行危险因素筛选,最后通过多因素Logistic回归确定危险因素并进行模型构建。使用列线图对模型进行可视化处理,通过受试者工作特征(ROC)曲线下面积、校准图分别评估模型的区分度和校准度,通过决策曲线分析(DCA)评估模型临床使用价值。结果SICH后脑积水的发生与年龄、糖尿病、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、出血范围、脑脊液葡萄糖定量和脑脊液蛋白含量相关(P0.05)。模型的ROC曲线下面积为0.873(95%CI:0.829-0.918)。校准图显示模型具有良好的校准度。DCA分析表明在临床应用方面,预测模型在阈值概率介于0.02和0.85之间具有良好的净收益。结论高龄、糖尿病、GCS评分低、出血破入脑室、脑脊液葡萄糖含量降低和脑脊液蛋白含量增高为影响ICH术后脑积水发生的独立危险因素。以此构建的预测模型具有良好的区分度及校准度,为临床医生提供可靠的诊治依据。

关键词：自发性脑出血脑积水预测模型 Lasso回归诺莫图