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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合雷公藤甲素诱导胰腺癌细胞凋亡的机制研究

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中华消化外科杂志 2015年第4期14卷 321-328页

作者：江艳刘炜陈志宇第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所中国人民解放军西南肝胆外科医院重庆400038

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合雷公藤甲素（Triptolide）诱导胰腺癌细胞凋亡的机制.方法（1）将人胰腺癌细胞MiaPaca-2（简称MiaPaca-2细胞）分为4组：空白对照组（不加任何药物）,TRAIL^＋ Triptolide^-组（仅... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）联合雷公藤甲素（Triptolide）诱导胰腺癌细胞凋亡的机制.方法（1）将人胰腺癌细胞MiaPaca-2（简称MiaPaca-2细胞）分为4组：空白对照组（不加任何药物）,TRAIL^＋ Triptolide^-组（仅加TRAIL）,TRAIL^-Triptolide^＋组（仅加Triptolide）和TRAIL^＋Triptolide^＋组（加TRAIL和Triptolide）.采用CCK-8检测各组细胞活力.采用Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白多聚ADP核糖聚合酶（PARP）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-8（Caspase-8）的表达.加入Caspase-8特异性抑制剂Z-IETD-FMK后,采用CCK-8检测细胞活力,采用Caspase-Glo荧光检测法检测Caspase-8活性.采用Western blot检测各组细胞髓样细胞白血病-1（Mcl-1）、额外的大B细胞淋巴瘤（Bcl-xL）和B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白的表达.（2）将MiaPaca-2细胞分为8组：①TRAIL-Mcl-1 siRNA-组（不加TRAIL、不转染Mcl-1 siRNA）,TRAIL^＋ Mcl-1siRNA-组（加TRAIL、不转染Mcl-1 siRNA）,TRAIL^-Mcl-1 siRNA^＋组（不加TRAIL、转染Mcl-1 siRNA）和TRAIL^＋ Mcl-1 siRNA＋组（加TRAIL、转染Mcl-1 siRNA）.②TRAIL^-Bcl-xL siRNA-组（不加TRAIL、不转染Bcl-xL siRNA）,TRAIL^＋ Bcl-xL siRNA^-组（加TRAIL、不转染Bcl-xL siRNA）,TRAIL^-Bcl-xL siRNA^＋组（不加TRAIL、转染Bcl-xL siRNA）,TRAIL^＋ Bcl-xL siRNA^＋组（加TRAIL、转染Bcl-xL siRNA）.采用CCK-8检测各组细胞活力.采用Western blot检测各组细胞Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达.符合正态分布的计量资料以x^-±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果（1）空白对照组、TRAIL^＋ Triptolide^-组、TRAIL^-Triptolide^＋组和TRAIL^＋ Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞活力分别为100.0％±1.1％、81.2％±2.3％、78.6％±3.6％、40.1％±2.5％;PARP蛋白相对表达量分别为0.510 ±0.028、0.720±0.072、1.250±0.023、2.560±0.220;Caspase-3蛋白相对表达量分别为0.080±0.004、0.080±0.003、0.110±0.005、2.720 ±0.003;Caspase-8蛋白相对表达量分别为0.070±0.003、0.080±0.005、0.120 ±0.003、0.990±0.006,4组比较,差异均有统计学意义（F=203.607,1 457.785,332 421.900,35 437.218,P＜0.05）.TRAIL^＋ Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞活力与空白对照组、TRAIL^＋ Triptolide^-组和TRAIL^-Triptolide^＋组分别比较,差异均有统计学意义（t=34.583,355.936,36.271,P＜0.05）;TRAIL^＋ Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞中PARP蛋白相对表达量与空白对照组、TRAIL^＋ Triptolide^-组和TRAIL^-Triptolide^＋组分别比较,差异均有统计学意义（t =591.784,63.739,2 268.987,P＜0.05）;TRAIL^＋ Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞中Caspase-3蛋白相对表达量与空白对照组、TRAIL^＋ Triptolide^-组和TRAIL^-Triptolide^＋组分别比较,差异均有统计学意义（t=3 266.153,9 145.228,1 738.713,P＜0.05）;TRAIL^＋Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞中Caspase-8蛋白相对表达量与空白对照组、TRAIL^＋ Triptolide^-组和TRAIL^-Triptolide^＋组分别比较,差异均有统计学意义（=663.953,1 432.878,327.584,P＜0.05）.TRAIL^＋ Triptolide^＋组MiaPaca-2细胞加Z-IETD-FMK前,Caspase-8活性为711.0％±5.1％;加入Z-IETD-FMK后

关键词：胰腺肿瘤肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体雷公藤甲素

microRNA与原发性肝细胞癌发生机制相关性的研究进展

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世界华人消化杂志 2009年第12期17卷 1218-1223页

作者：陈文生中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆市400038

MicroRNA(miRNA)是一类长约19-22个核苷酸的内源性非编码的小分子RNA,通过对靶基因转录后水平的负性调控作用,从而降低靶基因的表达水平.近年研究发现miRNA参与调节肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡等多个生物学过程,其突变、缺失或表达水平... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类长约19-22个核苷酸的内源性非编码的小分子RNA,通过对靶基因转录后水平的负性调控作用,从而降低靶基因的表达水平.近年研究发现miRNA参与调节肿瘤细胞的增殖、分化和凋亡等多个生物学过程,其突变、缺失或表达水平的异常与人类肿瘤发生发展密切相关.本文就miRNA和人原发性肝细胞癌发生的相关性研究的最新进展作一综述.

关键词：小分子RNA 肝细胞癌肿瘤人类

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腹腔镜技术在肝脏外科的拓展应用

中华消化外科杂志 2013年第5期12卷 324-327页

作者：郑树国第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所、中国人民解放军西南肝胆外科医院重庆400038

手术微创化是当今国际外科学发展的一大趋势，腹腔镜作为微创外科的代表已涉及腹腔所有脏器手术。肝脏是腹腔内最大的实质脏器，具有复杂的解剖结构和重要的生理功能，腹腔镜肝脏手术曾被认为是难度和风险较大的手术。近年来，随着腹腔... 详细信息

手术微创化是当今国际外科学发展的一大趋势，腹腔镜作为微创外科的代表已涉及腹腔所有脏器手术。肝脏是腹腔内最大的实质脏器，具有复杂的解剖结构和重要的生理功能，腹腔镜肝脏手术曾被认为是难度和风险较大的手术。近年来，随着腹腔镜技术的进步和器械的改善，腹腔镜手术在肝脏外科的应用范围逐步拓展。该技术已从早期针对肝脏良性病变的边缘性切除和局部切除拓展应用于肝脏各类良恶性病变的大范围肝切除术、肝脏移植物切取、特殊部位肝切除术及解剖性肝段切除术等复杂手术中。我国是肝病大国，肝癌及肝胆管结石病的发病率及术后复发率均较高，部分患者需要接受再次或者多次肝切除术治疗；肝癌患者多合并不同程度肝硬化，肝胆管结石病患者也易并发肝脏萎缩、纤维化及肝门转位等病变，这些因素在一定程度上影响了腹腔镜手术在肝癌及肝胆管结石病外科治疗中的应用。本文结合笔者单位开展800余例腹腔镜肝切除术的临床体会和相关文献，重点探讨腹腔镜技术在解剖性肝段切除术，尤其是特殊部位肝段的解剖性切除术，合并肝硬化等肝脏基础疾病时的肝切除术，以及再次肝切除术等领域的应用现状和最新进展。

关键词：肝肿瘤腹腔镜检查肝切除术

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腹腔镜手术治疗区域型肝胆管结石病的疗效

中华消化外科杂志 2012年第3期11卷 256-259页

作者：田驹郑树国李建伟范毓东陈健别平王曙光第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所、中国人民解放军西南肝胆外科医院重庆400038

目的探讨腹腔镜手术治疗区域型肝胆管结石病的疗效。方法回顾性分析2007年3月至2011年3月第三军医大学西南医院行腹腔镜手术治疗81例区域型肝胆管结石病患者的临床资料。对符合2007年《肝胆管结石病诊断治疗指南》分类标准和开腹手术指... 详细信息

目的探讨腹腔镜手术治疗区域型肝胆管结石病的疗效。方法回顾性分析2007年3月至2011年3月第三军医大学西南医院行腹腔镜手术治疗81例区域型肝胆管结石病患者的临床资料。对符合2007年《肝胆管结石病诊断治疗指南》分类标准和开腹手术指征的患者，在完善术前检查后根据结石部位采用腹腔镜下肝切除术切除病变肝叶（段），最大限度清除含有结石、狭窄及扩张的病变胆管，联合使用术中纤维或电子胆道镜对剩余肝叶（段）胆管及肝外胆管进行探查和（或）取石，防止结石残留。结果81例患者中72例成功实施全腹腔镜下肝切除术，9例中转开腹。全组患者中行肝左外叶（肝Ⅱ、Ⅲ段）切除术20例，肝左叶（肝Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ段）切除术30例，肝右后叶（肝Ⅵ、Ⅶ段）切除术11例，肝右前叶部分（肝Ⅴ、Ⅷ段）切除术6例，肝右叶（肝Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ段）切除术9例，肝Ⅲ段切除术2例，肝Ⅵ段切除术3例。手术常规切除胆囊，15例患者术中实施间歇性第一肝门入肝血流阻断。57例联合实施经胆总管切开或经左（右）肝管残端行术中胆道镜探查和（或）取石。本组患者平均手术时间（328±80）min，术中平均出血量（451±288）ml，尢手术死亡；16例出现术后并发症，包括肺部感染2例、反应性胸腔积液4例、肝断面包裹性积液6例、术后腹腔感染及脓肿2例、标本取出切口感染2例，其中9例采用药物治疗、6例行胸腔或腹腔穿刺引流、1例行切口清创，均治愈。本组患者平均住院时间（134-6）d。腹腔镜手术术中结石清除率为96％（69／72），3例残留结石患者术后均经T管窦道胆道镜成功取出结石。69例患者随访时间7～55个月，7例患者仍有不同程度的胆管炎症状，2例患者出现胆总管结石复发，其余患者术后无结石复发。结论腹腔镜手术治疗区域型肝胆管结石病安全、可行。术前和术中对结石及病变肝段进行准确定位，正确规划肝实质离断平面，进行解剖性肝切除可以获得较好的疗效。

关键词：胆石症腹腔镜检查肝切除术

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世界华人消化杂志 2007年第8期15卷 849-854页

作者：杨仕明汤旭东陈婷熊震陈陵蔡永国房殿春中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆市400038

肝素酶(Hpa)是裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的唯一酶类,能破坏细胞外基质及基底膜,参与肿瘤血管生成,与肿瘤的侵袭转移密切相关．目前的研究表明,Hpa在大多数中晚期肿瘤中都有表达,尤其在转移性肿瘤中强表达,而Hpa表达的下调可以抑制肿瘤... 详细信息

肝素酶(Hpa)是裂解硫酸乙酰肝素蛋白多糖的唯一酶类,能破坏细胞外基质及基底膜,参与肿瘤血管生成,与肿瘤的侵袭转移密切相关．目前的研究表明,Hpa在大多数中晚期肿瘤中都有表达,尤其在转移性肿瘤中强表达,而Hpa表达的下调可以抑制肿瘤细胞的转移,提示Hpa可以作为一种广谱的肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤的免疫治疗．Hpa疫苗的开发可望为中晚期肿瘤的治疗开辟新的途径．本文详细综述了Hpa的结构与功能、对肿瘤转移的促进作用及其机制、以及其作为肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤免疫治疗的可能性．

关键词：肝素酶肿瘤免疫治疗硫酸乙酰肝素蛋白多糖肿瘤转移相关抗原

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胆道蛔虫病术后黄疸确诊胆管黏液性囊腺癌

中华消化外科杂志 2012年第5期11卷 483-484页

作者：徐土斌何宇第三军医大学全军肝胆外科研究所、中国人民解放军西南医院肝胆外科医院重庆400038 新疆阿勒泰解放军第十六医院普通外科

1临床资料患者男，31岁。因胆道蛔虫病术后2个月余，皮肤、巩膜黄染伴畏寒、高热20余天于2011年11月28日收治入第三军医大学西南医院。患者于2009年因家族性结肠腺瘤样息肉病伴灶性癌变于外院行腹腔镜辅助全结肠切除＋Dixon术。2011年8... 详细信息

1临床资料患者男，31岁。因胆道蛔虫病术后2个月余，皮肤、巩膜黄染伴畏寒、高热20余天于2011年11月28日收治入第三军医大学西南医院。患者于2009年因家族性结肠腺瘤样息肉病伴灶性癌变于外院行腹腔镜辅助全结肠切除＋Dixon术。2011年8月25日因腹痛、黄疸于外院就诊，诊断为重症胆管炎、胆道蛔虫病、胆源性肝脓肿、胆囊结石，

关键词：胆道蛔虫病重症胆管炎术后黄疸黏液性囊腺癌第三军医大学西南医院全结肠切除确诊 Dixon术

肝素酶：一种新的广谱的肿瘤转移相关抗原在中晚期肿瘤免疫治疗中...

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胃黏膜癌变过程中hTERT和相关基因表达的变化及其临床意义

中华医学会第七次全国消化病学术会议

作者：杨仕明房殿春汤旭东陈婷熊震陈陵蔡永国中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所

肿瘤细胞要发生转移,就必须同时破坏构成细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的两种主要成分：结构蛋白和蛋白多糖。在过去的10多年中,研究兴趣大多集中在以结构蛋白为底物的基质金属蛋白酶 (MMPs)上,但后来发现 MMPs 至少有17种,所有... 详细信息

肿瘤细胞要发生转移,就必须同时破坏构成细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的两种主要成分：结构蛋白和蛋白多糖。在过去的10多年中,研究兴趣大多集中在以结构蛋白为底物的基质金属蛋白酶 (MMPs)上,但后来发现 MMPs 至少有17种,所有 MMPs 合起来几乎能够降解所有的细胞外基质的结构蛋白成分,对其中一个酶的抑制会有代偿的途径进行弥补,这样以结构蛋白为底物的蛋白酶的抑制剂就很难在抗肿瘤转移中发挥很好的作用,而近年来发现的肝素酶(heparanase,Hpa)是唯一能裂解 ECM 内蛋白多糖主要成分硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycans,HSPG)的内源性糖苷内切酶,研究表明

关键词：肝素酶肿瘤转移免疫治疗

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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胃肠病学和肝病学杂志 2006年第5期15卷 443-447页

作者：陈陵陈婷蔡永国汤旭东李晶晶房殿春罗元辉余松涛杨仕明中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆400038

目的探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)、c-myc、bcl-2、NF-κB蛋白在正常胃黏膜(normalmucosa,NM)、肠化(intestinalmeta-plasia,IM)、异型增生(dysplasia,DYS)、早期胃癌(earlygastriccancer,EGC)和进展期胃癌(advancedgastriccancer,AGC)中的表达水平、相互联系及其临床意义。方法经手术或胃镜病理证实的不同病变胃黏膜组织132例为研究对象(其中NM20例、IM30例、DYS15例、EGC24例、AGC43例),采用免疫组化SP法分别检测其hTERT、c-myc、bcl-2、NF-κB的表达水平,并对各指标阳性表达率、相关性及临床病理联系进行比较分析。结果在胃黏膜癌变过程中,除bcl-2外,hTERT、c-myc、NF-κB的表达随着胃黏膜病变程度的加重而逐渐增加,各组间比较差异显著;进一步分析表明hTERT与c-myc在IM、DYS、AGC等3组中具有显著的相关性(P0·05);临床病理分析表明,hTERT在低分化及未分化中的表达显著高于高、中等程度分化(P病变程度的加重,其阳性表达率逐渐增高,提示hTERT可能在胃黏膜癌变过程中具有重要意义,是胃黏膜癌变的早期事件;c-myc过表达可能是激活hTERT过表达的重要调节因素;hTERT不仅可以作为胃黏膜癌变的早期诊断指标,而且有可能成为胃癌或其他肿瘤基因治疗或免疫治疗的良好靶位。

关键词：人端粒酶逆转录酶胃癌 c-myc

Ezrin调控肝癌细胞侵袭性伪足的形成促进肝细胞癌侵袭转移

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陆军军医大学学报 2022年第4期44卷 346-355页

作者：郑博文王保林路遥黄登张航刘嘉龙郑树国陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军肝胆外科研究所重庆400038 中国人民解放军西藏军区总医院肝胆科拉萨850032

目的探讨Ezrin在肝癌细胞侵袭性伪足形成过程中的作用。方法利用GEPIA数据库分析肝癌组织中Ezrin mRNA与伪足标志物Cortactin mRNA的表达相关性。将收集的105例肝细胞癌患者的组织标本制作成组织芯片,采用免疫组化检测Ezrin蛋白和伪足... 详细信息

目的探讨Ezrin在肝癌细胞侵袭性伪足形成过程中的作用。方法利用GEPIA数据库分析肝癌组织中Ezrin mRNA与伪足标志物Cortactin mRNA的表达相关性。将收集的105例肝细胞癌患者的组织标本制作成组织芯片,采用免疫组化检测Ezrin蛋白和伪足标志物Cortactin蛋白在肝癌组织中的表达,并分析二者的表达相关性。分析Ezrin的表达水平与肝癌患者临床病理特征及预后的关系。敲低和上调肝癌细胞中Ezrin的表达,采用Transwell实验观察Ezrin蛋白的表达变化对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响,采用Western blot和细胞免疫荧光技术检测Ezrin蛋白表达变化对肝癌细胞侵袭性伪足形成能力的影响。结果生物信息学分析结果提示肝癌组织中Ezrin mRNA与伪足标志物Cortactin mRNA的表达呈正相关(r=0.420,P<0.01)。肝癌组织芯片免疫组化结果显示Ezrin蛋白与伪足标志物Cortactin蛋白的表达水平呈正相关(r=0.491,P<0.001)。患者临床资料结果显示,Ezrin蛋白的高表达与肝癌患者的血管侵犯率(P=0.016)及肿瘤相关死亡率(P=0.018)相关,且Ezrin蛋白高表达患者的术后5年生存率及术后5年无瘤生存率均较低(P<0.05)。细胞实验结果显示,上调Ezrin蛋白的表达可促进肝癌细胞的侵袭和迁移(P<0.05),且其高表达可促进肝癌细胞侵袭性伪足的形成(P<0.05);敲低Ezrin蛋白表达可抑制肝癌细胞侵袭性伪足的形成,并降低肝癌细胞的侵袭和迁移能力。结论Ezrin可通过调控肝癌细胞侵袭性伪足的形成增强肝癌细胞的侵袭、迁移能力,进而促进肝癌进展。

关键词： Ezrin Cortactin 肝细胞癌侵袭性伪足侵袭转移