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静脉移植物巨噬细胞浸润途径的实验研究

中南大学学报（医学版） 2005年第2期30卷 179-182页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410078

目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphi... 详细信息

目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphicsOctane进行处理,并对CD68阳性细胞进行计数。结果:在正常静脉血管,外膜中有少量CD68阳性细胞,中膜和内膜中少见;在病变的血管中,CD68免疫阳性细胞在外膜、中膜和内膜都可观察到,与正常血管相比差异有统计学意义(P<0. 05),且有从外膜向中膜和内膜迁移的趋势;中膜CD68免疫阳性细胞的分布和中膜毛细血管的生成过程密切相关。结论:外膜可能是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。

关键词：巨噬细胞浸润静脉移植物实验研究 CD68阳性细胞激光共聚焦显微镜免疫阳性细胞组织化学技术免疫荧光内皮细胞静脉血管正常血管毛细血管标记物外膜中膜内膜统计学

雷公藤甲素抑制APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马内Aβ沉积和老年斑形成

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解剖学报 2009年第3期40卷 369-373页

作者：雷德亮李明波熊鲲邓小华罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系

目的研究雷公藤甲素（T10）对APP/PS1双转基因AD模型小鼠（APP/PS1dtg）β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积与老年斑（SP）形成的影响。方法取18只4.5月龄健康雄性APP/PS1dtg,随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/（kg·d）（T10 H组）、1μg/（kg·... 详细信息

目的研究雷公藤甲素（T10）对APP/PS1双转基因AD模型小鼠（APP/PS1dtg）β-淀粉样蛋白（Aβ）沉积与老年斑（SP）形成的影响。方法取18只4.5月龄健康雄性APP/PS1dtg,随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/（kg·d）（T10 H组）、1μg/（kg·d）（T10 L组）和等容量的溶媒灌胃（PLC组）,共计45d。45d后取材,左侧半大脑切片,6E10免疫组织化学方法染色和刚果红染色结合无偏性体视学定量分析,研究T10对海马Aβ沉积和SP形成的影响;分离右侧半海马,免疫印迹法分析海马Aβ蛋白水平的变化。结果与PLC组比较,T10 H组海马6E10阳性的Aβ沉积总面积减少了35%（P〈0.001）,SP总面积减少了32%（P〈0.001）;T10 L组海马Aβ斑总面积减少了18%（P〈0.05）,SP总面积减少了21%（P〈0.05）;T10呈剂量依赖性抑制Aβ在APP/PS1dtg海马的沉积和SP的形成,减少海马内Aβ蛋白水平;免疫印迹分析也显示,T10 H组海马Aβ蛋白水平最低,PLC组Aβ蛋白水平最高,T10L组Aβ蛋白水平介于两者之间。结论T10抑制Aβ的产生和SP形成,或可用于AD的治疗。

关键词：雷公藤甲素阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白老年斑免疫组织化学无偏性体视学转基因小鼠

何首乌对Aβ1-40诱导的大鼠海马神经元内BDNF表达的影响

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中南大学学报（医学版） 2006年第2期31卷 194-199页

作者：邱光伍校琼罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:探讨Aβ1-4 0对海马CA 1区神经元脑源性神经营养因子(brain-derived neurotroph icfactor,BDNF)表达的影响,以及何首乌对其的干预作用。方法:右侧海马微量注射Aβ1-4 0,观察海马BDNF的表达变化;并使用何首乌浸膏对大鼠模型进行干... 详细信息

目的:探讨Aβ1-4 0对海马CA 1区神经元脑源性神经营养因子(brain-derived neurotroph icfactor,BDNF)表达的影响,以及何首乌对其的干预作用。方法:右侧海马微量注射Aβ1-4 0,观察海马BDNF的表达变化;并使用何首乌浸膏对大鼠模型进行干预治疗。动物存活3 0 d后,用“Y”迷宫检测各组动物学习和记忆能力;采用免疫组织化学方法和W estern-b lot检测海马CA 1区神经元BDNF的表达;应用尼氏染色法观察海马CA 1区神经元数目和形态。结果:Aβ1-4 0能够导致大鼠学会躲避电刺激所需的“尝试次数”明显增加;BDNF蛋白的表达明显下降,并可以在海马观察到Aβ1-4 0的沉积;CA 1区的神经元出现胞体肿胀、排列散乱等形态改变,且使用何首乌对动物模型干预治疗3 0 d后,大鼠的躲避电刺激所需的“尝试次数”明显下降;海马CA 1区神经元BDNF表达明显上调。结论:使用Aβ1-4 0在体内能够下调海马CA 1区神经元BDNF表达。何首乌干预治疗3 0 d,能够改善动物的学习和记忆能力,并能减少Aβ1-4 0对海马CA 1区神经元BDNF表达的抑制作用。

关键词：海马脑源性神经营养因子何首乌大鼠

proBDNF对培养的海马神经元存活的影响及其机制

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中南大学学报（医学版） 2007年第5期32卷 800-805页

作者：王慧陈旦伍校琼黄菊芳罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:初步探讨proBDNF(precursor of brain-derived neurotrophic factor)对海马神经元的可能作用及其机制。方法:采用体外培养胚鼠海马神经元,并给予proBDNF,preBDNF(propeptide of proBDNF)和抗proBDNF血清处理;30min,1h和48h后行尼氏染色,ELK-p(Ets domain protein),ErK2(extracellularsignal regulated kinase)和c-fos免疫细胞化学染色。结果:给予proBDNF处理后,可见培养细胞内ELK-p,ErK2和c-fos表达明显上调,部分细胞核深染;而用抗血清中和内源性proBDNF后,ELK-p、ErK2和c-fos均下调,且细胞出现肿胀、空泡样变化。preBDNF处理组细胞与正常对照组类似。结论:proBDNF可维持海马神经元的存活,其机制可能与激活ErK和ELK信号通路有关。

关键词： proBDNF ERK ELK 海马

猪后肢动脉生成过程中血管内皮细胞eNOS的表达

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中南大学学报（医学版） 2006年第1期31卷 63-65页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:研究猪后肢动脉生成过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其活性。方法:猪股动脉行单侧结扎术,另一侧行假手术,两周后处死动物。应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中eNOS表达,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用... 详细信息

目的:研究猪后肢动脉生成过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其活性。方法:猪股动脉行单侧结扎术,另一侧行假手术,两周后处死动物。应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中eNOS表达,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用Le ica激光共聚焦显微镜观察并拍照,图片用S ilicon G raph icsOctane进行处理。结果:在正常小动脉血管中eNOS的表达非常低,呈弱阳性;在生长的侧支血管中eNOS的表达显著上调,呈强阳性。在正常血管和生长的侧支血管中eNOS的表达都定位于内皮细胞。在生长的侧支血管中,P-eNOS表达水平非常高,免疫双重染色证实eNOS和P-eNOS的表达共同定位于内皮细胞。结论:侧支血管发育过程中,eNOS的表达被上调,并具有生物活性,高水平和具有活性的eNOS可能通过调节内皮细胞的增殖、移动及对炎症的控制,从而对侧支血管的生长发挥重要作用。

关键词：猪动脉生成一氧化氮合酶磷酸化的一氧化氮合酶

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大鼠骨髓基质干细胞向神经元样细胞的分化

中南大学学报（医学版） 2004年第1期29卷 18-20页

作者：李昌琪刘丹伍校琼卢大华罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410078

目的 :体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)向神经元样细胞的分化。方法 :用DMEM培养液冲洗骨髓 ,收集骨髓细胞接种在培养瓶中体外扩增、纯化。用诱导剂诱导BMSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化ABC法鉴定神经丝蛋白 (NF 2 0 0 )、... 详细信息

目的 :体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)向神经元样细胞的分化。方法 :用DMEM培养液冲洗骨髓 ,收集骨髓细胞接种在培养瓶中体外扩增、纯化。用诱导剂诱导BMSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化ABC法鉴定神经丝蛋白 (NF 2 0 0 )、微管相关蛋白 (MAP 2 )、神经元特异核蛋白 (NeuN)、巢蛋白 (Nestin)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、GAD和ChAT的表达。结果 :BMSCs经诱导后 ,胞体增大 ,并伸出细长突起 ,与神经元形态相似。免疫组化显示大部分细胞NF 2 0 0 ,MAP 2 ,NeuN和Nestin表达阳性 ,(3± 0 .8) %的细胞GAD表达阳性 ,(5± 0 .3) %的细胞ChAT表达阳性 ,而GFAP表达阴性。结论 :BMSCs可被诱导分化为神经元样细胞 ,部分细胞可表达GAD与ChAT。

关键词：大鼠骨髓基质干细胞神经元样细胞细胞分化免疫组化ABC法细胞培养

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降钙素基因相关肽与神经元保护作用

中南大学学报（医学版） 2004年第5期29卷 595-597页

作者：王春旭刘正清中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系湖南长沙410013

降钙素基因相关肽是一种重要的舒血管活性肽。降钙素基因相关肽在神经组织分布广泛 ,对神经元起着保护作用。这种保护作用的机制包括 :调节离子浓度 ,调节Bcl 2和c fos等基因的表达。

关键词：降钙素基因相关肽神经元保护作用血管活性肽神经组织 c-fos 神经营养因子 Bcl-2 表达离子浓度联合作用

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人静脉移植物中MCP-1的表达

中国临床解剖学杂志 2006年第4期24卷 419-421,424页

作者：伍校琼蔡维君罗学港黄菊芳中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:探讨人静脉移植物中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其与巨噬细胞浸润的关系。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中MCP-1、CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚... 详细信息

目的:探讨人静脉移植物中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达及其与巨噬细胞浸润的关系。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中MCP-1、CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphicsOctane进行处理。结果:在正常静脉血管中,MCP-1表达很弱;外膜中有少量CD68免疫阳性细胞,中膜和内膜中少见;CD31免疫阳性细胞仅在血管腔内皮细胞和外膜小血管中可见。在病变静脉血管,MCP-1在内皮细胞、平滑肌细胞中的表达呈强阳性;CD68免疫阳性细胞在外膜、中膜和内膜均可见到;CD31免疫阳性细胞不仅出现在血管腔内皮细胞和外膜小血管内皮细胞,且在中膜小血管内皮细胞也大量出现。免疫双重染色显示内皮细胞和巨噬细胞均表达MCP-1。结论:人静脉移植物MCP-1的表达上调,且和巨噬细胞的浸润关系密切,提示MCP-1对静物移植物炎症细胞的浸润及新内膜的形成有非常重要的作用。

关键词： MCP-1 CD68 CD31 静脉移植物共聚焦显微镜术

大鼠后肢侧支动脉生成过程中整合素α5β1和纤维连接蛋白的表达

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解剖学杂志 2006年第5期29卷 631-633,F0004页

作者：伍校琼李明波蔡维君罗学港中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:探讨侧支动脉生成过程中平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)移动增殖的机制。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中整合素α5β1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和层粘连蛋白(laminin,LN)的表达。并在体... 详细信息

目的:探讨侧支动脉生成过程中平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)移动增殖的机制。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中整合素α5β1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和层粘连蛋白(laminin,LN)的表达。并在体外实验中检测了不同的细胞外基质对SMC表达整合素α5β1的影响。结果:侧支血管整合素α5β1和FN的表达分别是对照侧的1.9倍和2倍;而LN的表达是对照侧的1／3。种植在FN上的SMC高表达整合素α5β1;种植在LN上的表达较低;而种植在三维Matrigel基膜成分胶里的SMC几乎不表达整合素α5β1。结论:在侧支血管发育过程中,整合素α5β1、FN和LN的表达变化,有助于侧支血管生长发育过程中SMC的迁移和增殖。

关键词：动脉生成整合素α5β1 纤维连接蛋白