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抑瘤基因NGX6启动子的克隆与功能鉴定

生物化学与生物物理进展 2010年第10期37卷 1082-1089页

作者：刘敏姬王晓艳沈守荣李楠张德才彭娅郭勤李桂源中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明.采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性.应用PromoterInspector program,... 详细信息

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明.采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性.应用PromoterInspector program,FistEF,CpGplot和MatInspector Professional软件分析发现,NGX6基因转录调控区为一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区.凝胶迁移阻滞实验确定NGX6基因启动子区域具有Sp1特异性结合位点,Sp1特异性阻断剂光神霉素(mithramycin A)能明显抑制NGX6启动子的活性和NGX6基因的表达;封闭内源性Sp1能下调NGX6基因mRNA表达水平.

关键词： NGX6 转录调控启动子 Spl

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抑瘤基因NGX6对人结肠癌细胞凋亡的影响

生物化学与生物物理进展 2008年第10期35卷 1154-1160页

作者：连平郭勤彭娅肖志明刘芬王晓艳沈守荣李桂源中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078

NGX6基因是中南大学肿瘤研究所分子遗传室在对鼻咽癌研究中筛选克隆出的一个新基因.以稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞为实验组,转染空白质粒的HT-29细胞以及HT-29细胞为对照组,利用PI/Annexin-V双染流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡... 详细信息

NGX6基因是中南大学肿瘤研究所分子遗传室在对鼻咽癌研究中筛选克隆出的一个新基因.以稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞为实验组,转染空白质粒的HT-29细胞以及HT-29细胞为对照组,利用PI/Annexin-V双染流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡情况,通过EMSA分析体外培养的结肠癌细胞及种植瘤细胞内核转录因子-κB(NF-κB)的激活情况.研究结果表明:在裸鼠结肠癌种植瘤中,转染了NGX6基因的与未转染及空白载体组比较,结肠癌细胞凋亡率明显增高;EMSA(electrophoretic mobility shift assay)分析体外培养的结肠癌细胞及种植瘤细胞内核转录因子-κB(NF-κB)的激活情况,发现转染了NGX6基因的细胞NF-κB的激活均明显受到抑制.此研究说明,NGX6基因具有诱导结肠癌细胞凋亡的能力,其可能的机制是抑制了结肠癌细胞NF-κB的激活.

关键词：结肠癌 NGX6基因裸鼠凋亡

NGX6基因对人结肠癌细胞HT-29细胞周期的影响

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生物化学与生物物理进展 2006年第1期33卷 45-50页

作者：王晓艳沈守荣刘芬李晓玲范松青中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078

NGX6基因是新克隆的候选抑瘤基因,研究表明NGX6重表达可抑制结肠癌细胞的增殖.为进一步研究NGX6对细胞周期的影响,采用流式细胞仪检测NGX6重表达对结肠癌细胞HT-29细胞周期的影响,发现NGX6重表达可增加HT-29细胞在G0/G1期的分布比例,减... 详细信息

NGX6基因是新克隆的候选抑瘤基因,研究表明NGX6重表达可抑制结肠癌细胞的增殖.为进一步研究NGX6对细胞周期的影响,采用流式细胞仪检测NGX6重表达对结肠癌细胞HT-29细胞周期的影响,发现NGX6重表达可增加HT-29细胞在G0/G1期的分布比例,减少了S,G2,M期细胞数.利用蛋白质印迹和流式细胞术分析NGX6转染前后HT-29细胞周期素(cyclins)和细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制物(cyclin-dependentkinaseinhibitor,CKI)的表达变化,发现NGX6可下调HT-29细胞中cyclinE、cyclinD1的表达及上调p27的表达,对cyclinA和cyclinB的表达无明显影响,p16在三组结肠癌细胞中均无表达.研究结果表明,NGX6在HT-29细胞中通过下调cyclinE、cyclinD1和上调p27的表达,阻滞细胞周期于G0/G1期,从而发挥其在结肠癌中的抑瘤作用.

关键词： NGX6 HT-29细胞细胞周期细胞周期素细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制物(CKI)

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鼻咽癌组织的显微切割及其RNA线性扩增

生物化学与生物物理进展 2005年第5期32卷 463-467页

作者：周艳宏曾朝阳熊炜罗晓敏李小玲范松青张文玲刘华英李征杨一新武明花唐珂曹利沈守荣李桂源中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 中南大学湘雅三医院消化内科长沙410083

从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,... 详细信息

从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,显微切割技术来获得高纯度鼻咽癌细胞,利用RNA线性扩增技术得到cDNA微阵列实验所需RNA.结果表明:利用RNAlater技术可以很好地保持组织RNA的稳定,通过优化显微切割和RNA线性扩增的条件获得了cDNA微阵列实验所需的高纯度、高质量RNA.

关键词： RNAlater技术手工显微切割 RNA线性扩增技术 cDNA微阵列

Hippo信号通路在肝细胞癌诊治中作用的研究进展

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中南大学学报（医学版） 2021年第6期46卷 637-643页

作者：马佳美黄晓曦中南大学湘雅医学院附属海口医院消化内科海口570208

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,发病率和病死率均较高,然而其发生和发展机制仍不清楚。Hippo信号通路主要通过由核心分子构成的激酶链转导信号,抑制转录共激活因子入核,减少下游促增殖基因转录。... 详细信息

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,发病率和病死率均较高,然而其发生和发展机制仍不清楚。Hippo信号通路主要通过由核心分子构成的激酶链转导信号,抑制转录共激活因子入核,减少下游促增殖基因转录。近年来发现Hippo信号通路不仅调控肝发育和肝切除后的再生,而且与HCC的发生也密切相关。Hippo信号通路可调控HCC细胞增殖、转移、自噬、代谢重编程及免疫微环境,参与HCC对多种药物产生耐药的过程。研究Hippo信号通路在HCC中的作用对发现新的治疗靶点有重要意义。

关键词：肝细胞癌 Hippo信号通路 Yes相关蛋白含PDZ结合基序的转录共激活因子治疗

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幽门螺杆菌根除失败的原因

中南大学学报（医学版） 2020年第1期45卷 79-84页

作者：辜雷阳惠湘中南大学湘雅医院消化内科

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与慢性活动性胃炎、消化性溃疡、黏膜相关淋巴组织(mucosaassociated lymphoid tissue,MALT)淋巴瘤、胃癌密切相关,还与一些胃肠外疾病相关。根除Hp可显著改善胃黏膜炎性反应,阻止或延缓胃黏膜... 详细信息

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染与慢性活动性胃炎、消化性溃疡、黏膜相关淋巴组织(mucosaassociated lymphoid tissue,MALT)淋巴瘤、胃癌密切相关,还与一些胃肠外疾病相关。根除Hp可显著改善胃黏膜炎性反应,阻止或延缓胃黏膜萎缩、肠化生的发生和发展,部分逆转萎缩,不同程度地降低胃癌的发生风险。近年来,Hp的根除失败率上升。导致Hp根除失败的原因很多,既往研究认为Hp对抗生素耐药是根除失败的主要原因,而新近的研究发现患者依从性差为其主要原因。

关键词：幽门螺杆菌抗生素耐药依从性根除失败

结肠癌中NGX6抑制EGFR/K-ras/JNK/c-Jun/cyclin D1信号通路的研究

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生物化学与生物物理进展 2008年第5期35卷 570-576页

作者：王晓艳沈守荣刘芬彭娅李桂源范松青中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 中南大学湘雅二院病理科长沙410011

候选抑瘤基因NGX6具有抑制结肠癌增殖和转移的作用,研究表明其为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的负性调控因子,并可下调JNK通路中重要分子MADD(MAP-kinase activating death domain)的表达,其抑瘤机制是否... 详细信息

候选抑瘤基因NGX6具有抑制结肠癌增殖和转移的作用,研究表明其为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的负性调控因子,并可下调JNK通路中重要分子MADD(MAP-kinase activating death domain)的表达,其抑瘤机制是否与抑制EGFR介导的JNK信号通路的活性有关?在已建立的转染NGX6的细胞模型基础上,借助蛋白质印迹(Western blot)和免疫组化方法在细胞和组织水平检测NGX6转染前后EGFR/K-ras/JNK/c-Jun/cyclin D1信号通路中重要蛋白质的表达.结果表明,NGX6转染后结肠癌细胞HT-29在裸鼠体内成瘤明显受抑,差异有统计学意义.Western blot结果显示,在结肠癌细胞中NGX6可明显下调EGFR、K-ras、p-JNK、c-Jun和cyclin D1的表达;进一步采用Western blot和免疫组化法验证NGX6在体内对上述关键分子表达的影响,发现NGX6可抑制裸鼠移植瘤组织中EGFR、K-ras、p-JNK、c-Jun和cyclin D1的表达,与体外结果一致.上述研究表明,NGX6在结肠癌中主要通过抑制EGFR介导的JNK通路的活性而发挥其抑瘤作用,该研究为深入探讨NGX6的机制提供了重要的实验依据.

关键词：结肠癌 NGX6基因 EGFR JNK信号通路

以腹胀、双下肢水肿、气促为表现的POEMS综合征1例及文献复习（英文）

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中南大学学报（医学版） 2019年第6期44卷 706-713页

作者：张嘉怡欧阳泽颖李荣冷爱民刘霆中南大学湘雅医院消化内科长沙410008 中南大学湘雅二医院消化内科长沙410011

POEMS综合征是一种少见的副肿瘤性疾病。中南大学湘雅医院消化内科收治1例60岁女性POEMS综合征患者,其腹胀病史超过1年,并伴有严重的双下肢水肿及气促;检查结果提示多发性周围神经病变、M蛋白血症、脾肿大、淋巴结肿大、甲状腺功能减退... 详细信息

POEMS综合征是一种少见的副肿瘤性疾病。中南大学湘雅医院消化内科收治1例60岁女性POEMS综合征患者,其腹胀病史超过1年,并伴有严重的双下肢水肿及气促;检查结果提示多发性周围神经病变、M蛋白血症、脾肿大、淋巴结肿大、甲状腺功能减退、血管外容量负荷超载、硬化性骨病变、VEGF升高和肺动脉高压。根据POEMS综合征的最新诊断标准,患者满足2个强制性主要标准、2个其他主要标准和3个次要标准,排除鉴别诊断后POEMS综合征诊断明确。患者接受地塞米松及来那度胺治疗,临床症状得到明显改善。POEMS综合征的发病机制尚不完全清楚,VEGF水平的升高可能与上述临床表现有关。该患者病史超过14个月,严重影响其生活质量,临床上应提高对POEMS综合征早期诊断和早期治疗的意识。

关键词： POEMS综合征血管内皮生长因子肺动脉高压水肿 Castleman病

一个新硝基还原酶基因NOR1编码区单核苷酸多态及与鼻咽癌的关联分析

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生物化学与生物物理进展 2003年第3期30卷 401-405页

作者：熊炜曾朝阳肖炳燚熊芳聂新民范松青彭聪李伟芳王蓉沈守荣李小玲李桂源中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 中南大学湘雅医院网络信息科长沙410078 中南大学湘雅三医院消化内科长沙410078

NOR1基因是中南大学湘雅医学院肿瘤研究所克隆的一个鼻咽癌表达下调新基因 ,生物信息学预测NOR1基因含有硝基还原酶结构域 ,该基因可能参与亚硝胺类化学致癌物在体内的代谢过程 ,从而与鼻咽癌的发生密切相关 .通过采用病例对照的研究方... 详细信息

NOR1基因是中南大学湘雅医学院肿瘤研究所克隆的一个鼻咽癌表达下调新基因 ,生物信息学预测NOR1基因含有硝基还原酶结构域 ,该基因可能参与亚硝胺类化学致癌物在体内的代谢过程 ,从而与鼻咽癌的发生密切相关 .通过采用病例对照的研究方法 ,利用测序技术对 144名鼻咽癌患者和匹配的 144名正常人NOR1基因编码区单核苷酸多态 (codingregionsinglenucleotidepolymorphisms ,cSNPs)进行基因分型 ,关联分析结果显示所检测到的两个cSNPs之间存在连锁不平衡 ,且均与鼻咽癌发病相关 ,两个cSNPs及它们所组成的单倍型相对危险度分别为 1 3 6、 1 64和 1 3 7.两个cSNPs的多态性改变均使NOR1基因编码蛋白一级结构发生了变化 ,这种改变可能影响NOR1基因编码蛋白的结构和功能 .

关键词：硝基还原酶基因 NORl编码区单核苷酸多态鼻咽癌关联分析