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何首乌对Aβ1-40诱导的大鼠海马神经元内BDNF表达的影响

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中南大学学报（医学版） 2006年第2期31卷 194-199页

作者：邱光伍校琼罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:探讨Aβ1-4 0对海马CA 1区神经元脑源性神经营养因子(brain-derived neurotroph icfactor,BDNF)表达的影响,以及何首乌对其的干预作用。方法:右侧海马微量注射Aβ1-4 0,观察海马BDNF的表达变化;并使用何首乌浸膏对大鼠模型进行干... 详细信息

目的:探讨Aβ1-4 0对海马CA 1区神经元脑源性神经营养因子(brain-derived neurotroph icfactor,BDNF)表达的影响,以及何首乌对其的干预作用。方法:右侧海马微量注射Aβ1-4 0,观察海马BDNF的表达变化;并使用何首乌浸膏对大鼠模型进行干预治疗。动物存活3 0 d后,用“Y”迷宫检测各组动物学习和记忆能力;采用免疫组织化学方法和W estern-b lot检测海马CA 1区神经元BDNF的表达;应用尼氏染色法观察海马CA 1区神经元数目和形态。结果:Aβ1-4 0能够导致大鼠学会躲避电刺激所需的“尝试次数”明显增加;BDNF蛋白的表达明显下降,并可以在海马观察到Aβ1-4 0的沉积;CA 1区的神经元出现胞体肿胀、排列散乱等形态改变,且使用何首乌对动物模型干预治疗3 0 d后,大鼠的躲避电刺激所需的“尝试次数”明显下降;海马CA 1区神经元BDNF表达明显上调。结论:使用Aβ1-4 0在体内能够下调海马CA 1区神经元BDNF表达。何首乌干预治疗3 0 d,能够改善动物的学习和记忆能力,并能减少Aβ1-4 0对海马CA 1区神经元BDNF表达的抑制作用。

关键词：海马脑源性神经营养因子何首乌大鼠

proBDNF对培养的海马神经元存活的影响及其机制

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中南大学学报（医学版） 2007年第5期32卷 800-805页

作者：王慧陈旦伍校琼黄菊芳罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:初步探讨proBDNF(precursor of brain-derived neurotrophic factor)对海马神经元的可能作用及其机制。方法:采用体外培养胚鼠海马神经元,并给予proBDNF,preBDNF(propeptide of proBDNF)和抗proBDNF血清处理;30min,1h和48h后行尼氏染色,ELK-p(Ets domain protein),ErK2(extracellularsignal regulated kinase)和c-fos免疫细胞化学染色。结果:给予proBDNF处理后,可见培养细胞内ELK-p,ErK2和c-fos表达明显上调,部分细胞核深染;而用抗血清中和内源性proBDNF后,ELK-p、ErK2和c-fos均下调,且细胞出现肿胀、空泡样变化。preBDNF处理组细胞与正常对照组类似。结论:proBDNF可维持海马神经元的存活,其机制可能与激活ErK和ELK信号通路有关。

关键词： proBDNF ERK ELK 海马

猪后肢动脉生成过程中血管内皮细胞eNOS的表达

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中南大学学报（医学版） 2006年第1期31卷 63-65页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410013

目的:研究猪后肢动脉生成过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其活性。方法:猪股动脉行单侧结扎术,另一侧行假手术,两周后处死动物。应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中eNOS表达,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用... 详细信息

目的:研究猪后肢动脉生成过程中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其活性。方法:猪股动脉行单侧结扎术,另一侧行假手术,两周后处死动物。应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中eNOS表达,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用Le ica激光共聚焦显微镜观察并拍照,图片用S ilicon G raph icsOctane进行处理。结果:在正常小动脉血管中eNOS的表达非常低,呈弱阳性;在生长的侧支血管中eNOS的表达显著上调,呈强阳性。在正常血管和生长的侧支血管中eNOS的表达都定位于内皮细胞。在生长的侧支血管中,P-eNOS表达水平非常高,免疫双重染色证实eNOS和P-eNOS的表达共同定位于内皮细胞。结论:侧支血管发育过程中,eNOS的表达被上调,并具有生物活性,高水平和具有活性的eNOS可能通过调节内皮细胞的增殖、移动及对炎症的控制,从而对侧支血管的生长发挥重要作用。

关键词：猪动脉生成一氧化氮合酶磷酸化的一氧化氮合酶

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大鼠骨髓基质干细胞向神经元样细胞的分化

中南大学学报（医学版） 2004年第1期29卷 18-20页

作者：李昌琪刘丹伍校琼卢大华罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410078

目的 :体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)向神经元样细胞的分化。方法 :用DMEM培养液冲洗骨髓 ,收集骨髓细胞接种在培养瓶中体外扩增、纯化。用诱导剂诱导BMSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化ABC法鉴定神经丝蛋白 (NF 2 0 0 )、... 详细信息

目的 :体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)向神经元样细胞的分化。方法 :用DMEM培养液冲洗骨髓 ,收集骨髓细胞接种在培养瓶中体外扩增、纯化。用诱导剂诱导BMSCs分化为神经元样细胞。用免疫组化ABC法鉴定神经丝蛋白 (NF 2 0 0 )、微管相关蛋白 (MAP 2 )、神经元特异核蛋白 (NeuN)、巢蛋白 (Nestin)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、GAD和ChAT的表达。结果 :BMSCs经诱导后 ,胞体增大 ,并伸出细长突起 ,与神经元形态相似。免疫组化显示大部分细胞NF 2 0 0 ,MAP 2 ,NeuN和Nestin表达阳性 ,(3± 0 .8) %的细胞GAD表达阳性 ,(5± 0 .3) %的细胞ChAT表达阳性 ,而GFAP表达阴性。结论 :BMSCs可被诱导分化为神经元样细胞 ,部分细胞可表达GAD与ChAT。

关键词：大鼠骨髓基质干细胞神经元样细胞细胞分化免疫组化ABC法细胞培养

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降钙素基因相关肽与神经元保护作用

中南大学学报（医学版） 2004年第5期29卷 595-597页

作者：王春旭刘正清中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系湖南长沙410013

降钙素基因相关肽是一种重要的舒血管活性肽。降钙素基因相关肽在神经组织分布广泛 ,对神经元起着保护作用。这种保护作用的机制包括 :调节离子浓度 ,调节Bcl 2和c fos等基因的表达。

关键词：降钙素基因相关肽神经元保护作用血管活性肽神经组织 c-fos 神经营养因子 Bcl-2 表达离子浓度联合作用

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抗冻缓冲液保存冰冻切片的研究

中南大学学报（医学版） 2004年第2期29卷 166-169页

作者：雷德亮罗学港 Peter R.Mouton Donald K.Ingram 中南大学湘雅医学院人体解剖学和神经生物学系长沙410013 National Institute of Health

目的 :研究抗冻缓冲液 (anti freezebuffer,AFB)对冰冻切片的长期保存作用。方法 :4只 1 2～ 1 5月龄的雌性C5 7BL/6NIA小鼠常规灌注取脑 ,5 0 μm冰冻切片 ,将切片于 2 0℃保存于抗冻缓冲液中 ,分别于切片的当日、切片后 3个月、6个月... 详细信息

目的 :研究抗冻缓冲液 (anti freezebuffer,AFB)对冰冻切片的长期保存作用。方法 :4只 1 2～ 1 5月龄的雌性C5 7BL/6NIA小鼠常规灌注取脑 ,5 0 μm冰冻切片 ,将切片于 2 0℃保存于抗冻缓冲液中 ,分别于切片的当日、切片后 3个月、6个月和 1 2个月 ,行 β NADPH酶组织化学和GFAP免疫组织化学染色。结果 :于 2 0℃冰箱保存在AFB内的冰冻切片 ,至 6个月时 ,β NADPH酶组织化学显示的含一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)的神经元和毛细血管与新鲜标本没有区别 ;至 1 2个月时 ,GFAP免疫组织化学染色显示的星形胶质细胞与新鲜标本没有区别。结论 :AFB可较长时间保存组织切片的抗原成份和酶活性。

关键词：抗冻缓冲液冰冻切片酶活性抗原成份 β-NADPH酶组织化学 GFAP免疫组织化学

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静脉移植物巨噬细胞浸润途径的实验研究

中南大学学报（医学版） 2005年第2期30卷 179-182页

作者：伍校琼蔡维君罗学港中南大学湘雅基础医学院人体解剖学与神经生物学系长沙410078

目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphi... 详细信息

目的:探讨外膜是否是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。方法:应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再塞标本中CD68(巨噬细胞的标记物)、CD31(内皮细胞的标记物)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphicsOctane进行处理,并对CD68阳性细胞进行计数。结果:在正常静脉血管,外膜中有少量CD68阳性细胞,中膜和内膜中少见;在病变的血管中,CD68免疫阳性细胞在外膜、中膜和内膜都可观察到,与正常血管相比差异有统计学意义(P<0. 05),且有从外膜向中膜和内膜迁移的趋势;中膜CD68免疫阳性细胞的分布和中膜毛细血管的生成过程密切相关。结论:外膜可能是静脉移植物巨噬细胞浸润的一条重要途径。

关键词：巨噬细胞浸润静脉移植物实验研究 CD68阳性细胞激光共聚焦显微镜免疫阳性细胞组织化学技术免疫荧光内皮细胞静脉血管正常血管毛细血管标记物外膜中膜内膜统计学

大鼠坐骨神经横断后脊髓、背根神经节及坐骨神经 Slit 2表达的变化

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解剖学杂志 2006年第1期29卷 85-88页

作者：易西南郑林丰许愿忠张建伟罗学港中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系

目的：观察 Slit 2在大鼠坐骨神经横断模型中的表达变化,为进一步研究 Slit/Robo 在周围神经再生中的作用提供实验依据。方法：SD 大鼠坐骨神经横断后用原位杂交及免疫组织化学方法检测 Slit 2在脊髓、背根神经节(DRG)和横断神经近、远... 详细信息

目的：观察 Slit 2在大鼠坐骨神经横断模型中的表达变化,为进一步研究 Slit/Robo 在周围神经再生中的作用提供实验依据。方法：SD 大鼠坐骨神经横断后用原位杂交及免疫组织化学方法检测 Slit 2在脊髓、背根神经节(DRG)和横断神经近、远端内的表达变化,图像分析方法测定阳性细胞数及平均积分光密度值。结果：正常脊髓前角运动神经元、DRG 和神经干内 Slit 2有一定的基础表达。损伤后近端神经胶质瘤、神经远端 Slit 2表达增高；DRG 内的 Slit 2表达呈现一定的时间变化,7 d 为表达高峰,14 d 下降。结论：Slit 2存在于正常成年大鼠周围神经系统,损伤可致其表达改变,Slit 2可能在周围神经再生中发挥重要作用。

关键词： Slit 周围神经原位杂交免疫组化大鼠

内向矫正性钾通道Kir4．1和Kir7．1在大鼠睫状体的分布

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解剖学杂志 2007年第6期30卷 766-769页

作者：蒙艳斌潘爱华周聪发何旭峰中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系

目的:在蛋白水平探讨Kir4.1和Kir7.1在大鼠睫状体的分布情况。方法:用间接免疫荧光组织化学和免疫荧光双标记在冰冻切片上检测Kir4.1和Kir7.1在大鼠睫状体的分布和定位。结果:Kir4.1蛋白分布于睫状体的色素上皮细胞和无色素上皮细胞的... 详细信息

目的:在蛋白水平探讨Kir4.1和Kir7.1在大鼠睫状体的分布情况。方法:用间接免疫荧光组织化学和免疫荧光双标记在冰冻切片上检测Kir4.1和Kir7.1在大鼠睫状体的分布和定位。结果:Kir4.1蛋白分布于睫状体的色素上皮细胞和无色素上皮细胞的胞质和胞膜,内层的无色素上皮细胞免疫活性较强,免疫双标显示Kir4.1蛋白与谷氨酰胺合成酶蛋白重叠分布,Kir4.1蛋白免疫活性在睫状体的扁平部和睫状突上无明显差异。Kir7.1蛋白分布于睫状体的无色素上皮细胞和睫状肌,与特异性标记睫状上皮的Ezrin蛋白双标显示Kir7.1分布在无色素上皮的基底面,其免疫活性在睫状突强表达,在睫状体扁平部弱表达。结论:Kir4.1和Kir7.1均分布于大鼠睫状体的无色素上皮的基底面,可能与房水的生成有重要关系。睫状肌的Kir7.1分布,与调节睫状肌的舒缩、参与房水的排出密切相关。

关键词： Kir4.1 Kir7.1 睫状体无色素上皮睫状肌睫状体