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肾复康对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞HK-2纤维化模型的影响及其机制研究

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中药药理与临床 2020年第4期36卷 154-158页

作者：黄上周琳刘劲松李仲普郭玉星张晓白林哲湖南中医药大学附属中西医结合医院肾脏科长沙410000 中南大学湘雅二院肾脏疾病与血液净化湖南省重点实验室长沙410000

目的:探讨肾复康含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞株HK-2间质转化的影响及其分子机制。方法:以HK-2细胞作为研究对象,常规培养后将细胞进行如下分组及刺激处理:空白对照组、模型对照组(10 ng/ml TGF-β1刺激)、... 详细信息

目的:探讨肾复康含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞株HK-2间质转化的影响及其分子机制。方法:以HK-2细胞作为研究对象,常规培养后将细胞进行如下分组及刺激处理:空白对照组、模型对照组(10 ng/ml TGF-β1刺激)、32 g/kg尿毒清30%含药血清组(30%尿毒清含药血清+TGF-β1刺激)、18.32 g/kg肾复康10%、30%含药血清组(10%或30%肾复康含药血清+TGF-β1刺激)。MTT法检测肾复康含药血清对HK-2细胞活力的影响;显微镜下观察各组细胞间形态学的差异;ELISA法检测各组细胞上清液中I型胶原(collagen I)和纤维连接蛋白(fibronectin)的水平;q-PCR法检测各组细胞内E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和整联蛋白连接激酶(ILK)基因的表达水平;蛋白免疫印迹法检测Smad2/3总蛋白、核蛋白表达及其磷酸化水平;蛋白免疫印迹法检测下游的ILK蛋白表达水平。结果:肾复康含药血清对HK-2细胞的存活率无抑制作用;与空白对照组比较,模型对照组细胞形态由上皮样的铺路石状变成间质样的长梭形,E-cadherin的mRNA水平显著下调(P及核内水平显著上调(P及核内水平明显下调(P<0.05或P<0.01)。结论:肾复康能逆转TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞HK-2纤维化模型的上皮间质转化,其作用机制可能与其抑制胞内Smad2/3-ILK信号通路的活化有关。

关键词：肾复康肾纤维化上皮间质转化转化生长因子β1(TGF-β1) Smad蛋白2/3 整联蛋白连接激酶

肾复康对TGF-β1诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制

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中药药理与临床 2021年第4期37卷 143-147页

作者：齐亮刘劲松周琳黄上罗运花肖波飞张晓白林哲湖南中医药大学附属中西医结合医院肾脏科长沙410000 中南大学湘雅二院肾脏疾病与血液净化湖南省重点实验室长沙410000

目的:探讨肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制。方法:采用噻唑兰(MTT)法检测不同浓度肾复康对NRK-49F细胞增殖的作用;试验随机设置空白对照组、模型对照组,糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(... 详细信息

目的:探讨肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制。方法:采用噻唑兰(MTT)法检测不同浓度肾复康对NRK-49F细胞增殖的作用;试验随机设置空白对照组、模型对照组,糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)3 mmol/L组、肾复康0.25、0.5、1 g/mL组。试剂盒检测细胞上清乳酸含量;采用实时荧光定量PCR检测α-肌动蛋白(α-Sma)、I型胶原(Col1a1)、己糖激酶(hexokinase,Hk)、6-磷酸果糖激酶-2(Pfk-2)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4)mRNA表达水平;免疫荧光检测α-SMA的蛋白表达水平;Western Blot法检测HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平。结果:肾复康在0、0.125、0.25、0.5和1 g/mL浓度对NRK-49F细胞增殖无抑制作用;与空白对照组相比,模型对照组乳酸水平显著升高,α-Sma、Col1a1、Hk、Pfk-2和Glut4 mRNA表达水平显著上调,α-SMA荧光强度增强,HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平显著上调(P及肾复康0.5、1 g/mL组乳酸水平显著降低,α-Sma、Col1a1、Hk、Pfk-2和Glut4 mRNA表达水平明显下调(P<0.05或P<0.01),α-SMA荧光水平明显减弱,HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论:肾复康能够抑制成纤维细胞的转分化纤维生成,且其机制可能与抑制糖酵解有关。

关键词：肾复康成纤维细胞肾纤维化 α-平滑肌肌动蛋白糖酵解

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湖南省长沙县慢性肾脏病的流行病学研究

中华肾脏病杂志 2010年第1期26卷 9-14页

作者：李瑛周乐天刘伏友李军彭佑铭杨丽君彭翔唐文彬何雅億吴静文彭金定王德军陈军中南大学湘雅二医院肾内科湖南省肾脏疾病与血液净化重点实验室中南大学肾脏病研究所长沙410011 湖南省长沙县疾病预防控制中心湖南省长沙市雨花区疾病预防控制中心

目的研究我国中南地区长沙县农村人群中慢性肾脏病（CKD）的患病情况及相关危险因素。方法在湖南省长沙县采用分层多级随机抽样的方法，抽取果园镇、安沙镇及干杉乡20岁以上的常住居民1950人，进行CKD及相关危险因素的问卷调查、体格检... 详细信息

目的研究我国中南地区长沙县农村人群中慢性肾脏病（CKD）的患病情况及相关危险因素。方法在湖南省长沙县采用分层多级随机抽样的方法，抽取果园镇、安沙镇及干杉乡20岁以上的常住居民1950人，进行CKD及相关危险因素的问卷调查、体格检查和血尿检测。结果在资料完整的1727名居民中，经过人口年龄、性别构成比校正后，白蛋白尿的患病率为8．5％；血尿的患病率为5．1％；肾功能下降的患病率为1．5％。该人群CKD的患病率为14，6％，知晓率为16．5％。多因素Logistic回归提示，年龄增加10岁、高胆固醇血症、高三酰甘油血症、高血压和糖尿病与白蛋白尿独立相关；女性、年龄增加10岁、高三酰甘油血症和高尿酸血症与肾功能下降独立相关；女性与血尿独立相关。结论在我国经济迅速发展的中南地区农村中，人群CKD的患病率为14．6％，知晓率为16．5％，CKD的疾病谱与我国大城市和发达国家类似。

关键词：肾疾病慢性普查患病率流行病学乡村

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糖尿病肾脏疾病的早期诊断

临床内科杂志 2023年第6期40卷 361-365页

作者：张丹艳丁凯月仰智璇孙林中南大学湘雅二医院肾内科肾脏疾病与血液净化学湖南省重点实验室长沙410000

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病常见的微血管并发症,也是终末期肾病的主要原因。随着社会经济的发展及人均寿命的增加,DKD发病率呈上升趋势,为患者和社会带来沉重的负担。尿白蛋白排泄增加和肾小球滤过率下降是DKD的主要临床特征,但此时... 详细信息

糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病常见的微血管并发症,也是终末期肾病的主要原因。随着社会经济的发展及人均寿命的增加,DKD发病率呈上升趋势,为患者和社会带来沉重的负担。尿白蛋白排泄增加和肾小球滤过率下降是DKD的主要临床特征,但此时肾脏已出现损伤且不可逆。因此,DKD的早期诊断及治疗至关重要。随着相关研究的深入,越来越多的新型生物标志物被认为能够早期预警DKD发生,并对患者进展为终末期肾病的风险进行预测,从而指导治疗方案的制定。此外,影像及超声检查在辅助DKD早期诊断中亦发挥重要作用。本文综述了近年来国内外新型生物标志物和影像学在DKD诊断中的研究进展,旨在为DKD早期诊治提供参考。

关键词：糖尿病肾脏疾病早期诊断生物标志物影像学

1例血、尿免疫固定电泳图谱不一致的处理与分析

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国际检验医学杂志 2021年第16期42卷 2043-2045页

作者：成平周翔张三勇姜文玲许向青朱雪婧夏运成中南大学湘雅二医院肾内科/肾脏疾病与血液净化学湖南省重点实验室湖南长沙410011

近年来,单克隆免疫球蛋白(M蛋白)相关疾病逐渐受到临床医生的关注与重视,涉及科室广泛,除血液科、肾内科对相关检查有较深了解外,大部分科室(如心内科、神经内科、消化内科、脊柱外科、老年病科、风湿免疫科等)对M蛋白检测技术和结果解... 详细信息

近年来,单克隆免疫球蛋白(M蛋白)相关疾病逐渐受到临床医生的关注与重视,涉及科室广泛,除血液科、肾内科对相关检查有较深了解外,大部分科室(如心内科、神经内科、消化内科、脊柱外科、老年病科、风湿免疫科等)对M蛋白检测技术和结果解读知之较浅,以致不能精准判断患者的病情进展及疗效。免疫固定电泳是利用区带电泳的分离作用与抗体特异性免疫沉淀标记作用相结合的定性检测技术,是目前对M蛋白检测与分型应用最多、最广的技术[1-2]。

关键词：单克隆免疫球蛋白免疫固定电泳游离轻链 β巯基乙醇

钙蛋白颗粒与慢性肾脏病G3~5D期患者冠状动脉钙化的相关性研究

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中国血液净化 2024年第1期23卷 35-40页

作者：陈雨柔王书婷廖晟淳叶朝阳上海中医药大学附属曙光医院肾病科上海201203 上海中医药大学中医肾病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室(上海中医药大学) 上海市中医临床重点实验室

目的分析钙蛋白颗粒(calciprotein particles,CPPs)与慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)G3~5D期冠状动脉钙化的相关性,探讨CPPs分别对于血液透析(hemodialysis,HD)和非HD患者冠状动脉钙化的预测价值以及影响因素。方法本研究采用... 详细信息

目的分析钙蛋白颗粒(calciprotein particles,CPPs)与慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)G3~5D期冠状动脉钙化的相关性,探讨CPPs分别对于血液透析(hemodialysis,HD)和非HD患者冠状动脉钙化的预测价值以及影响因素。方法本研究采用单中心、横断面调查方法纳入CKD G3~5D患者75例,根据CKD分期分层、冠状动脉钙化积分(coronary artery calcification score,CACS)分组,将患者分为钙化组和无钙化组,比较CKD各期2组间CPPs的差异。应用二元Logistics回归分析CKD G3~5期(非透析)冠状动脉钙化的危险/保护因子。Kruskal-Wallis检验和Pearson卡方检验评估CPPs与HD冠状动脉钙化严重程度的关系。应用单因素线性回归分析CKD G3~5D期冠状动脉钙化人群CPPs的影响因素。结果二元Logistics回归分析结果显示CPPs(每SD增加)是CKD G3~5期(非透析)冠状动脉钙化的独立保护因素,CPPs浓度每增加1个SD(10.20)与冠状动脉钙化风险降低73.4%相关(OR=0.266,95%CI:0.077~0.916,P=0.036)。Kruskal-Wallis检验结果显示CPPs随着冠状动脉钙化严重程度升高(H=6.557,P=0.037),同时CACS水平随着CPPs增多而升高(H=7.440,P=0.024)。Pearson卡方检验结果显示相比于低水平CPPs组,中、高水平CPPs组高度冠状动脉钙化的HD人群(CACS>100)占比更大,3组之间不同钙化严重程度的人群比例差异具有统计学意义(χ^(2)=9.800,P=0.044)。单因素线性回归分析结果显示在CKD G3~5D期冠状动脉钙化患者中,CPPs与eGFR-EPI呈负相关(β=-0.424,P=0.004),与血肌酐(β=0.453,P<0.001)、血钙(β=0.328,P=0.014)呈正相关。结论CPPs是CKD G3~5期(非透析)患者冠状动脉钙化的保护因子,与之相反,对于HD患者,CPPs越高提示冠状动脉钙化严重程度越高。eGFR-EPI、血肌酐、血钙可能是是CKD G3~5D期冠状动脉钙化患者CPPs变化的影响因素。

关键词：钙蛋白颗粒慢性肾脏病冠状动脉钙化

原发性肾病综合征肾小管间质损伤的病理和临床研究

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医学临床研究 2007年第11期24卷 1895-1897页

作者：李瑛刘伏友彭佑铭杨丽李军刘映红段绍斌凌光辉许向青中南大学湘雅二医院肾脏内科湖南省肾脏疾病与血液净化学重点实验室湖南长沙410011

【目的】探讨成人原发性肾病综合征（PNS）肾小管间质损伤（TID）的病理特点与临床指标的关系。【方法】对195例PNS患者TID进行分组（0-1分和≥2分组）。比较24 h尿蛋白总量、血肌酐和尿酸,血胆固醇和甘油三酯与TID的关系。【结果】轻... 详细信息

【目的】探讨成人原发性肾病综合征（PNS）肾小管间质损伤（TID）的病理特点与临床指标的关系。【方法】对195例PNS患者TID进行分组（0-1分和≥2分组）。比较24 h尿蛋白总量、血肌酐和尿酸,血胆固醇和甘油三酯与TID的关系。【结果】轻微病变和系膜增生患者TID程度较轻,多为0-1分,而局灶节段肾小球硬化和IgA肾病患者TID程度较重,大多为≥2分,肾小球硬化率与TID程度密切相关。TID为0-1分和≥2分两组患者24 h尿蛋白总量、血胆固醇和甘油三酯相比较差异无显著性（P〉0.05）,但后者血肌酐和血尿酸明显高于前者（P〈0.05）。TID与血肌酐和血尿酸显著相关（P〈0.01）,但与尿蛋白总量和血脂无关。【结论】不同肾小球病理类型的PNS患者TID程度具有不均一性,但肾小球硬化率与TID程度有较好的一致性。PNS患者血肌酐和尿酸与TID相关,可作为预测肾小管间质病变的临床指标。

关键词：肾变病综合征/病理学肾小管

腹膜透析相关感染性腹膜炎致病菌及耐药性的单中心分析

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中国血液净化 2012年第12期11卷 650-652页

作者：刘映红龙露平陈国纯李军成梅初张宏青刘伏友中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾脏病研究所湖南省肾脏疾病与血液净化重点实验室长沙410011 中南大学肾脏病研究所湖南省肾脏疾病与血液净化重点实验室长沙410011

目的分析腹膜透析(简称腹透)相关感染性腹膜炎患者病原菌分布及耐药性变化。方法回顾中南大学湘雅二医院近5年来腹透相关感染性腹膜炎患者一般情况、细菌培养及药敏试验、疗效及转归,并进行统计学分析。结果①46例次病原菌培养阳性24例... 详细信息

目的分析腹膜透析(简称腹透)相关感染性腹膜炎患者病原菌分布及耐药性变化。方法回顾中南大学湘雅二医院近5年来腹透相关感染性腹膜炎患者一般情况、细菌培养及药敏试验、疗效及转归,并进行统计学分析。结果①46例次病原菌培养阳性24例次(52.2%),其中G+菌9例次(37.5%),G-菌8例次(33.3%),真菌7例次(29.2%)。②G+菌对头孢类抗生素耐药率高,对万古霉素、替考拉宁等的耐药率低。G-菌对替卡西林/棒酸、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、泰能等耐药率低。③G+菌、G-菌、培养阴性腹膜炎患者治愈率分别为88.9%、75%、73%;真菌性腹膜炎患者均拔管。结论腹膜透析相关感染性腹膜炎病原菌及耐药性已发生很大变化,需努力提高腹透液培养阳性率及腹膜炎的治愈率。

关键词：腹膜炎腹膜透析耐药性

基于网络药理学和体外细胞实验分析黄芪治疗IgA肾病的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2021年第15期27卷 139-147页

作者：庞爽赵栓徐夏莲於佳炜丁小强复旦大学上海200433 复旦大学附属中山医院上海肾脏疾病临床医学中心上海市肾脏疾病与血液净化重点实验室上海200032

目的:基于网络药理学方法分析黄芪治疗免疫球蛋白A肾病(IgAN)的多成分、多靶点、多通路作用机制,为该药材的基础研究和临床应用提供依据。方法:通过GeneCards,TCMID及中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)等数据库检索和文献挖掘筛选... 详细信息

目的:基于网络药理学方法分析黄芪治疗免疫球蛋白A肾病(IgAN)的多成分、多靶点、多通路作用机制,为该药材的基础研究和临床应用提供依据。方法:通过GeneCards,TCMID及中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)等数据库检索和文献挖掘筛选黄芪活性成分、作用靶点及与IgAN相关的疾病靶点,运用Cytoscape 3.7.1软件绘制网络图,利用网络拓扑分析黄芪治疗IgAN的关键靶点,采用R语言中的不同软件包分别进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。在此基础上,通过体外细胞实验验证黄芪中活性成分黄芪甲苷对人肾小球系膜细胞磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/肿瘤抑制基因p53(PI3K/Akt/p53)信号通路的激活作用。结果:筛选得到黄芪25个活性成分,49个药物-疾病共同作用靶点。GO功能富集分析包含条目84个,主要涉及细胞核激素受体结合、细胞核受体活性、脱氧核糖核酸结合转录激活因子活性等。KEGG通路富集分析包含通路88条,主要与PI3K/Akt信号通路、低氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体(AGE/RAGE)信号通路等密切相关。体外细胞实验证实,黄芪甲苷可通过调控PI3K/Akt/p53信号通路抑制重组人血小板衍生生长因子BB诱导的人肾小球系膜细胞增生。结论:黄芪多种活性成分可能通过作用于细胞凋亡、氧化应激和炎症反应等相关的靶点及通路,起到治疗IgAN的作用,为IgAN的新药开发及机制研究提供了思路。

关键词：黄芪免疫球蛋白A(IgA) IgA肾病网络药理学黄芪甲苷分子机制体外细胞实验