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血液透析水处理系统PVC管道内表面细菌生物膜研究

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中南大学学报（医学版） 2009年第10期34卷 1029-1035页

作者：杨莎贾珂彭佑铭刘虹刘映红陈星刘伏友中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾病研究所肾脏病与血液净化学湖南省重点实验室长沙410011

目的:研究血液透析水处理系统PVC管道内表面生物膜形态、细菌种类和数量以及内毒素含量的特点。方法:取反渗机前、后点管样进行大体肉眼观察和扫描电镜观察。将管样生物膜制成溶液,进行菌落计数及种类鉴定。将PVC管道中有代表性的7个管... 详细信息

目的:研究血液透析水处理系统PVC管道内表面生物膜形态、细菌种类和数量以及内毒素含量的特点。方法:取反渗机前、后点管样进行大体肉眼观察和扫描电镜观察。将管样生物膜制成溶液,进行菌落计数及种类鉴定。将PVC管道中有代表性的7个管样生物膜制成溶液,进行内毒素定性及定量测定。结果:反渗机前点管道内表面有活性炭粉末沉积,电镜示主要由成簇状生长的杆菌、球菌和活性炭粉末混杂而成,菌种鉴定以革兰氏阴性杆菌为主,后点管道内表面肉眼无明显异常,电镜示仍存在与前点形状大小相同的细菌,数量极少,结构松散。内毒素含量大致在2.0～4.0 EU/mL。定量结果为软水器后点内毒素含量(2.821±0.807)EU/mL,活性炭罐后点(3.635±0.427)EU/mL,反渗机前点(3.687±0.271)EU/mL,反渗机后点(2.041±0.295)EU/mL,动力泵出口点(1.983±0.390)EU/mL,死腔1点(2.373±0.535)EU/mL,死腔2点(2.858±0.690)EU/mL。结论:不论是血液透析水处理系统反渗机前点或后点PVC管道内表面均存在生物膜。内毒素含量由高到低依次为:反渗机前点,活性炭罐后点,死腔2点,软水器后点,死腔1点,反渗机后点,动力泵出口点。了解PVC管道内表面细菌生物膜细菌和内毒素分布的特点,有助于血液透析水处理系统生物膜的控制策略的研究。

关键词：细菌生物膜血液透析水处理系统内毒素

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16年腹膜透析的基础和临床研究回顾

中南大学学报（医学版） 2009年第3期34卷 269-276页

作者：刘伏友彭佑铭邹莎琳凌光辉聂静唐文彬周循段绍斌李军刘映红刘虹袁芳肖力卓莉陈俊香陈星成梅初朱健玲朱笑萍罗季安樊敏张浩孙林中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾病研究所肾脏病与血液净化学湖南省重点实验室长沙410011 中南大学湘雅三医院肾内科长沙410013

总结16年以来中南大学湘雅二医院肾内科腹膜透析的基础与临床研究的经验与成果。在国内率先成功构建了腹膜透析及腹膜纤维化动物模型,分离、鉴定了腹膜间皮细胞;利用细胞、分子生物学方法,系统研究了腹膜透析液的生物相容性、腹膜间皮... 详细信息

总结16年以来中南大学湘雅二医院肾内科腹膜透析的基础与临床研究的经验与成果。在国内率先成功构建了腹膜透析及腹膜纤维化动物模型,分离、鉴定了腹膜间皮细胞;利用细胞、分子生物学方法,系统研究了腹膜透析液的生物相容性、腹膜间皮细胞透析损伤的分子机制与防治措施,观察了促纤维化细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1),结缔组织生长因子(CTGF)及过氧化物酶体增生物激活受体-γ(PPAR-γ)等在腹膜纤维化发病机制中的重要作用,并初步阐明了它们的基因表达调控机制。首次在腹膜透析研究领域中利用纳米载体介导TGF-β1-shRNA与pCTGF-shRNA质粒在腹膜细胞与组织中的表达。在临床研究方面,研究了腹膜透析置管定位新方法、腹膜透析溶质转运特点及其机制、腹膜透析治疗模式及其他并发症的防治。

关键词：腹膜透析腹膜纤维化生物相容性溶质转运

单克隆免疫球蛋白相关C3肾小球病合并系统性硬化症一例

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中华肾脏病杂志 2020年第12期36卷 953-955页

作者：陈惠滟朱雪婧袁曙光成梅初中南大学湘雅二医院肾内科湖南省肾脏病与血液净化重点实验室长沙410011

本文报道1例罕见的单克隆免疫球蛋白相关C3肾小球病合并系统性硬化症。患者为老年男性,临床表现为蛋白尿、水肿、肾功能不全,血、尿免疫固定电泳发现单克隆IgG-κ轻链,骨髓细胞学及活检均未见异常,肾活检光镜示系膜细胞及系膜基质增生,... 详细信息

本文报道1例罕见的单克隆免疫球蛋白相关C3肾小球病合并系统性硬化症。患者为老年男性,临床表现为蛋白尿、水肿、肾功能不全,血、尿免疫固定电泳发现单克隆IgG-κ轻链,骨髓细胞学及活检均未见异常,肾活检光镜示系膜细胞及系膜基质增生,免疫荧光示补体C3(4+),IgA(-),IgG(-),IgM(-),电镜示多节段电子致密物沉积,持续存在抗Scl-70抗体强阳性,且整个病程逐渐进展为系统性硬化症。本文通过文献复习,阐述两者之间的可能相关联系,以提高临床医生对两种疾病的认识。

关键词：免疫球蛋白类硬皮病系统性副蛋白血症

乙肝相关性冷球蛋白血症相关性肾小球肾炎一例

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中华肾脏病杂志 2019年第7期35卷 534-536页

作者：游静朱雪婧朱健玲刘虹中南大学湘雅二医院肾内科湖南省肾脏病与血液净化重点实验室长沙410011

冷球蛋白血症表现为血清中持续存在异常免疫球蛋白,后者在低温下沉淀并在升温时再次溶解,主要分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,乙肝病毒感染为Ⅱ型混合型冷球蛋白血症的少见病因。我们报道一例乙肝相关性冷球蛋白血症相关性肾小球肾炎,27岁男性,因乙... 详细信息

冷球蛋白血症表现为血清中持续存在异常免疫球蛋白,后者在低温下沉淀并在升温时再次溶解,主要分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,乙肝病毒感染为Ⅱ型混合型冷球蛋白血症的少见病因。我们报道一例乙肝相关性冷球蛋白血症相关性肾小球肾炎,27岁男性,因乙型肝炎病毒复制活跃,以反复发作皮疹及肾炎综合征为主要临床表现,经免疫抑制、抗乙肝病毒药物和血浆置换治疗后肾功能恢复。

关键词：乙型肝炎病毒冷球蛋白血症冷球蛋白血症相关肾小球肾炎

MicroRNA-302c通过结缔组织生长因子调控腹膜透析相关腹膜纤维化

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中国血液净化 2019年第3期18卷 192-196页

作者：李勰家周循孙林刘伏友肖力刘虹张磊中南大学湘雅二医院肾内科肾脏疾病与血液净化湖南省重点实验室湖南410011

目的通过观察microRNA-302c(miR-302c)对腹膜间皮细胞结缔组织生长因子(connect tissue growth factor,CTGF)表达及上皮细胞-间充质细胞转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨miR-302c对腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)相关腹膜纤维化的作用及机制。方法收集PD患者腹膜透析流出液中腹膜间皮细胞,检测miR-302c、CTGF、EMT及纤维化相关指标的表达,并分析其相关性;体外培养人腹膜间皮细胞株,通过转染慢病毒过表达miR-302c,检测腹膜间皮细胞CTGF、EMT及纤维化相关指标的变化。结果 PD患者腹膜透析流出液中miR-302c水平降低(F=443.165,P及Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)(F=10.673,P=0.031)表达上调,同时也抑制了TGF-β1诱导的CTGF表达上调(F=8.340,P=0.044)。结论 miR-302c可能通过CTGF调控PD过程中腹膜间皮细胞EMT及纤维化。

关键词：腹膜透析 microRNA-302c 上皮细胞-间充质细胞转分化腹膜纤维化结缔组织生长因子

蛋白激酶Cδ对高葡萄糖刺激的HK-2细胞p66Shc磷酸化及线粒体转位的影响

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中华医学杂志 2013年第44期93卷 3542-3546页

作者：宋盼爱肖力杨玉艳阳石坤刘伏友孙林中南大学肾脏病研究所湖南省血液净化与肾脏病重点实验室湘雅二医院肾内科长沙410011

目的观察高葡萄糖作用下蛋白激酶C（PKC）δ对人肾小管上皮细胞株（HK-2）p66Shc转录后蛋白磷酸化及线粒体转位的影响.方法以HK-2细胞作为体外观察的细胞,采用不同浓度的D-葡萄糖进行刺激,分别用实时定量PCR（RT-PCR）和Western印迹... 详细信息

目的观察高葡萄糖作用下蛋白激酶C（PKC）δ对人肾小管上皮细胞株（HK-2）p66Shc转录后蛋白磷酸化及线粒体转位的影响.方法以HK-2细胞作为体外观察的细胞,采用不同浓度的D-葡萄糖进行刺激,分别用实时定量PCR（RT-PCR）和Western印迹法检测PKCδ和p66Shc基因表达及蛋白磷酸化水平;然后将HK-2细胞分为3组：5 mmol/L低葡萄糖组、30 mmol/L高葡萄糖组、30 mmol/L高葡萄糖＋粗糠紫苦素（Rottlerin） 1.0 μmol/L组.采用Western印迹法和细胞免疫荧光方法检测p66Shc蛋白磷酸化水平及其线粒体转位情况.结果高葡萄糖处理HK-2细胞后,PKCδ和p66Shc mRNA及蛋白磷酸化水平明显高于对照组[其中PKCδ mRNA及其磷酸化蛋白的表达量随着D-葡萄糖浓度（15、30、45 mmol/L）的增加分别上调0.9、1.3和1.6倍及0.4、1.5和2.0倍,均P＜0.05],且呈剂量和时间依赖;高糖＋Rottlerin组p66Shc蛋白磷酸化水平及其线粒体转位明显低于对照组,（高糖＋ Rottlerin组在180 min时线粒体p66Shc磷酸化蛋白表达量下调3.1倍,P＜0.01）.结论高葡萄糖可诱导HK-2细胞PKCδ和p66Shc的转录及磷酸化,PKCδ可促进高葡萄糖诱导的p66Shc磷酸化及其线粒体转位.

关键词：糖尿病肾病葡萄糖蛋白激酶Cδ p66Shc 线粒体转位

转化生长因子β1基因-509C／T多态性与原发性肾病综合征肾小管间质损伤的关系

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中华肾脏病杂志 2009年第10期25卷 750-754页

作者：李瑛刘伏友彭佑铭李军郭宁段绍斌凌光辉刘映红许向青中南大学湘雅二医院肾内科湖南省肾脏疾病与血液净化学重点实验室中南大学肾脏病研究所长沙410011

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）基因启动子-509C／T多态性与原发性肾病综合征（PNS）患者的易感性和肾小管间质损伤（TID）程度的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术，检测98例PNS患者和128名健... 详细信息

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）基因启动子-509C／T多态性与原发性肾病综合征（PNS）患者的易感性和肾小管间质损伤（TID）程度的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术，检测98例PNS患者和128名健康对照者TGF-β1基因启动子-509C／T位点的基因型，并根据肾活检病理TID程度分级分组比较。采用双抗体夹心ELISA法，测定所有受试对象的血清TGF-β1水平。同时测尿蛋白量（24h）、Scr、BUN、血压等。结果（1）PNS患者及健康对照人群均能检测出T、C两种TGF-β1等位基因，存在TT型、TC型、CC型3种基因型。（2）TGF-β1基因-509C／T位点多态性在PNS患者和健康人群中的分布差异无统计学意义；等位基因频率在两组间差异也无统计学意义。（3）TID轻度组、重度组TGF-β1基因-509C／T位点的基因型频率和健康对照组比较，差异有统计学意义（均P〈0．01）。TID重度组患者的T等位基因频率和TT基因型频率明显高于TID轻度组和健康对照组（均P〈0．01），而TID轻度组和健康对照组间差异无统计学意义。（4）TID重度、轻度组及健康对照组TGF-β1血清水平两两比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。PNS组TT基因型患者血清TGF-β1水平高于CC和CT基因型患者，且与CC基因型间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TGF-β1基因-509C／T多态性与PNS的发病无关，但其T等位基因可能是PNS患者TID的重要遗传因素。血清TGF-β1水平升高和TID程度与TT基因犁有关。

关键词：肾病综合征转化生长因子β1 多态性单核苷酸肾小管间质损伤

IgA肾病患者扁桃体CD4+CD25+T细胞及J链mRNA阳性IgA细胞与临床病理的关系

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中华肾脏病杂志 2009年第11期25卷 873-874页

作者：黄红东彭佑铭刘虹刘莎杨新明刘伏友中南大学湘雅二医院肾内科湖南省肾脏疾病与血液净化学重点实验室湖南省人民医院肾内科友谊医院内科中南大学湘雅二医院耳鼻喉科

不少学者认为IgA肾病(IgAN)与扁桃体自身免疫反应有一定联系。IgAN患者扁桃体CD4+CD25+T细胞减少和分泌J链mRNA阳性IgA细胞增多,且CD4+CD25+T细胞数与J链mRNA阳性IgA细胞数呈负相关。我们分析其与临床病理的关系。一、对象和方法1.标本... 详细信息

不少学者认为IgA肾病(IgAN)与扁桃体自身免疫反应有一定联系。IgAN患者扁桃体CD4+CD25+T细胞减少和分泌J链mRNA阳性IgA细胞增多,且CD4+CD25+T细胞数与J链mRNA阳性IgA细胞数呈负相关。我们分析其与临床病理的关系。一、对象和方法1.标本收集:以37例IgAN患者为研究对象。留取新鲜尿液及时检查尿沉渣。容器中加甲苯(约2 ml/100

关键词： IgA肾病扁桃体 CD4+CD25+T细胞 J链mRNA阳性IgA细胞

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术中透视在腹膜透析置管中的临床应用

中南大学学报（医学版） 2012年第12期37卷 1265-1268页

作者：成梅初符晓陈俊香李军刘伏友周循中南大学湘雅二医院肾内科中南大学肾脏病研究所湖南省肾脏病与血液净化学重点实验室长沙410011

目的:探讨腹膜透析置管时术中透视预防导管功能障碍中的作用。方法:168例终末期肾衰竭(ESRF)患者非随机分组:A组(常规手术组)和B组(常规手术+术中透视组)。所有患者随访时间1年。记录所有患者临床资料和置管相关并发症以及导管功能障碍... 详细信息

目的:探讨腹膜透析置管时术中透视预防导管功能障碍中的作用。方法:168例终末期肾衰竭(ESRF)患者非随机分组:A组(常规手术组)和B组(常规手术+术中透视组)。所有患者随访时间1年。记录所有患者临床资料和置管相关并发症以及导管功能障碍的发生情况。结果:两组患者中9例出现出血性并发症(5.36%),其中出口处出血3例,切口血肿2例,血性引流液4例;膀胱穿孔和肠穿孔各1例(1.20%);透析液渗漏4例(2.38%),其中右侧胸腔积液2例,阴囊水肿2例;感染性并发症5例(2.98%),其中感染性腹膜炎1例,出口处感染4例,所有感染病例均得到控制。两组之间机械性并发症及感染性并发症发生率无显著性差异(P>0.05)。168例患者中无1例发生导管立即功能障碍,14例导管迟发功能障碍(8.33%),其中导管漂位9例(5.36%),其他原因所致5例(2.98%);11例患者导管功能障碍发生在术后30 d内,3例患者在术后30 d以后出现导管功能障碍(便秘所致)。A组患者导管迟发功能障碍12例(11.65%),其中导管漂位10例(83.33%),其他原因所致2例;B组患者导管迟发功能障碍2例,1例导管漂位,1例便秘,A组患者导管迟发功能障碍发生率明显高于B组,两组之间差异有统计学意义(P及时发现置管时的导管位置异常,可有效预防迟发导管功能障碍,提高腹膜透析通路建立的成功率。

关键词：腹膜透析置管 X线透视检查并发症导管功能障碍