检索结果-南通市图书馆

新生猪胰岛移植治疗糖尿病病人的临床研究(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2011年第12期36卷 1134-1140页

作者：王维莫朝辉叶斌胡平安刘晟易受南中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所长沙410078 澳大利亚悉尼大学Westmead医院移植与肾病研究中心

目的:评估新生猪胰岛移植治疗1型糖尿病方法的安全性和有效性。方法:所有22例病人均接受经肝动脉新生猪胰岛移植治疗,移植后病人接受多种免疫抑制治疗方案;第1组14例病人使用环孢菌素、骁息和甲基强的松龙,没有接受猪C肽检测;第2组2例... 详细信息

目的:评估新生猪胰岛移植治疗1型糖尿病方法的安全性和有效性。方法:所有22例病人均接受经肝动脉新生猪胰岛移植治疗,移植后病人接受多种免疫抑制治疗方案;第1组14例病人使用环孢菌素、骁息和甲基强的松龙,没有接受猪C肽检测;第2组2例病人只使用环孢菌素和骁息,第3组6例病人的免疫抑制方案是OKT3、他克莫司、西罗莫司和甲基强的松龙。在移植治疗前和移植后1年,病人进行了血糖、外源性胰岛素用量、糖化血红蛋白、猪内源性反转录病毒(PERV)和肝功能的评估,第2组和第3组的8例病人接受了血清猪C肽检测。6例病人在移植后4～6年进行了复查。结果:第1组14例病人移植后胰岛素用量减少和HbA1c水平降低。第2组2例病人在移植后代谢指标没有变化,猪C肽检测阴性。第3组的6例病人在移植3个月以后,胰岛素用量均减少,HbA1c正常,6例病人血清均检测到有意义的猪C肽。其中2例病人接受了第2次新生猪胰岛移植,1例病人短暂脱离胰岛素治疗7 d。所有病人在移植后均未出现严重不良反应,没有PERV感染的证据。6例病人在新生猪胰岛移植4～6年后接受检查,此6例病人均在接受移植治疗1年后停止免疫抑制治疗,复查时6例病人均接受胰岛素治疗。其中4例病人严格限制糖的摄入,2例病人为自由饮食;这2例病人中,有1例出现2次酮症,有轻度糖尿病视网膜病变;1例出现1次由于急性胃肠炎导致的酮症;其余4例均未出现任何并发症。6例病人再次接受PERV检测均为阴性。结论:异种胰岛可以在人体内存活并发挥其功能,没有发现严重不良反应。

关键词：新生猪胰岛异种移植糖尿病病人

异种移植候选供体宁乡猪内源性逆转录病毒调查

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

异种移植候选供体宁乡猪内源性逆转录病毒调查

靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3治疗肝细胞癌的临床应用前景

第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学...

作者：邢晓为易受南董琼叶斌童琼娟叶征王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所

目的对异种移植候选供体宁乡猪携带的内源性逆转录病毒进行调查分析,为评价从猪到人异种移植中的生物安全性提供依据。方法从宁乡猪保种群中随机采集22头个体的血样标本,应用PCR技术分别对这些个体基因组中猪内源性逆转录病(porcine end...

目的对异种移植候选供体宁乡猪携带的内源性逆转录病毒进行调查分析,为评价从猪到人异种移植中的生物安全性提供依据。方法从宁乡猪保种群中随机采集22头个体的血样标本,应用PCR技术分别对这些个体基因组中猪内源性逆转录病(porcine endogenous retrovirus,PERV)env-A,env-B,env-C基因及线粒体基因CoⅡ进行扩增,明确宁乡猪种群携带PERV的亚型;RT-PCR分别扩增PERVpol,gag基因,了解PERV是否具有转录活性;为进一步探索宁乡猪基因组中PERV-A, -B的序列变异及其特性,在PERV env序列上游设计一对PERV-A,-B共用引物,分别用高保真酶从3头不同个体中PCR扩增1.8 kb PERV env序列,然后,将PCR产物克隆至pUCm-T载体,PCR扩增法鉴定阳性克隆,并分别用限制性内切酶KpnⅠ和MboⅠ对所扩增的PCR产物进行酶切鉴定,测序分析不同酶切图谱的阳性克隆;最后,用两对不同的引物对PERV-C阳性的个体中的PERV-A/C重组序列进行PCR扩增,分析这些个体中是否存在PERV-A/C重组。结果所检测的21头宁乡猪均带有PERV前病毒DNA,PERV env-A,env-B,env-C存在于所有的个体中,说明宁乡猪具有3个PERV亚型,即:PERV-A,PERV-B, PERV-C三种。RT-PCR扩增结果表明,PERV pol,gag在所有个体中均有表达,说明宁乡猪中PERV均具有转录活性。应用共用引物PCR扩增1.8 kb PERV env序列后,克隆至pUCm-T载体,筛选得到42个阳性克隆,对所插入的片段PCR扩增并用KpnⅠ和MboⅠ进行双酶切,结果发现KpnⅠ酶切后的有6种酶切谱,MboⅠ酶切后的有8种酶切谱,结合两种酶切谱的结果共得到11种不同的克隆,其中PERV-A约为30%,该结果表明,宁乡猪中存在多种变异的PERV-A和PERV-B序列。PERV-A/C重组筛查结果发现,90%以上的宁乡猪带有PERV-A/C重组序列,提示该猪种携带PERV具有较强的跨种系感染能力。结论宁乡猪带有PERV前病毒DNA,PERV在该猪种中具有转录活性,该猪种携带3种PERV亚型,即:PERV-A,PERV-B,PERVC。在该猪种基因组中存在多种PERV-A和PERV-B变异序列,不易从基因组中剔除,而且绝大多数个体中均存在PERV-A/C重组,增加了PERV跨种系感染的风险,从生物安全性角度考虑,该猪种不宜作为异种移植候选供体为人类提供器官和细胞来源。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 2021年第2期37卷 153-160页

作者：李程张惠文容鹏飞国家卫生部移植医学工程技术研究中心人类重大疾病动物模型研究湖南省重点实验室中南大学细胞移植与基因治疗研究所中南大学湘雅三医院放射科长沙410013

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)是一种锚附着在细胞膜表面的癌胚蛋白质,在肝细胞癌中过表达。GPC3可以作为肝细胞癌的生物标志物,肝癌病人的血清GPC3水平对于预后评估存在重要价值。此外,肝癌细胞中GPC3具有免疫反应性,可以作... 详细信息

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)是一种锚附着在细胞膜表面的癌胚蛋白质,在肝细胞癌中过表达。GPC3可以作为肝细胞癌的生物标志物,肝癌病人的血清GPC3水平对于预后评估存在重要价值。此外,肝癌细胞中GPC3具有免疫反应性,可以作为治疗靶点,有关靶向GPC3治疗肝细胞癌的临床试验已经展开。本文简述了GPC3的结构及其在肝细胞癌发生发展中的作用,回顾了靶向GPC3治疗肝细胞癌的临床研究结果,并总结了GPC3相关临床应用的最新进展:新的抗GPC3抗体正在研发,它们与其它靶向药物联用的临床试验正在展开;有关GPC3靶向的TRAB、GPC3疫苗和GPC3基于嵌合抗原受体(CAR)-T疗法的研究正在进行。我们认为,靶向GPC3治疗肝细胞癌的方案具有广阔的临床应用前景,期待更多的研究聚焦于此,为靶向GPC3疗法提供更充分的科学依据。

关键词：肝细胞癌磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3 靶向治疗 T细胞重定向抗体嵌合抗原受体T细胞免疫疗法

湖南大围子猪SLA-DR基因克隆及其生物信息学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2009年第9期25卷 770-773页

作者：王燕邢晓为薛立群黄生强吴晓丽王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所湖南长沙410013 湖南农业大学动物科学技术学院湖南长沙410128

目的:研究湖南大围子猪SLA-DR基因特性,评价该猪种在异种器官移植中是否具有应用前景。方法:应用RT-PCR扩增大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,插入pUCM-T载体,双向测序,用NCBI中的BLAST和ExPASY软件进行生物信息学分析。结果:大围子猪SLA-... 详细信息

目的:研究湖南大围子猪SLA-DR基因特性,评价该猪种在异种器官移植中是否具有应用前景。方法:应用RT-PCR扩增大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,插入pUCM-T载体,双向测序,用NCBI中的BLAST和ExPASY软件进行生物信息学分析。结果:大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因扩增片段大小分别为1177bp和909bp,均包含完整的开放阅读框,分别编码252和266个氨基酸残基。生物信息学分析结果表明,大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB与人类相应的DRA、DRB相比,氨基酸同源性分别为82%和73%。SLADRα链与人CD4分子结合部位介于第124至136位氨基酸,大围子猪SLA-DRA在该结合区域与人类相应的DRA存在两个氨基酸差异,即:第127位(lle→Val),第136位(Ser→Thr);SLADRβ链与人CD4分子结合部位位于第134至148位氨基酸,大围子猪SLA-DRB在该结合区域与人类相应的DRB相比氨基酸序列完全相同。与国际GenBank已登录的许多猪种相比,SLA-DRA基因同源性高达100%,而SLA-DRB基因在各猪种之间具有很高的多态性。结论:克隆湖南大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,该基因与人类相应的HLA-DRA和HLA-DRB基因高度同源,提示该猪种有望作为异种移植的候选供体。

关键词： SLA-DR基因湖南大围子猪基因克隆异种移植

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

湖南沙子岭猪内源性逆转录病毒的研究

遗传 2006年第7期28卷 799-804页

作者：邢晓为薛立群黄生强黎淑娟王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所长沙410013 湖南农业大学动物科学技术学院长沙410128

为评价从猪到人异种移植的生物安全性提供依据,从湖南沙子岭猪的保种群内随机采集31头个体的耳样组织,应用PCR和RT-PCR技术分别检测这些组织中内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的前病毒DNA和mRNA,并对PCR扩增的灵... 详细信息

为评价从猪到人异种移植的生物安全性提供依据,从湖南沙子岭猪的保种群内随机采集31头个体的耳样组织,应用PCR和RT-PCR技术分别检测这些组织中内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)的前病毒DNA和mRNA,并对PCR扩增的灵敏性进行评估。多组织RT-PCR检测3头沙子岭猪肾、心、肝、肺、脾等组织中PERV的表达情况,了解其在各组织中的分布情况;最后,扩增、测序该猪种的env基因,结果用NCBI中的BLAST软件进行分析。PCR和RT-PCR结果表明,所检测的31头沙子岭猪均带有PERV前病毒DNA,耳样组织中均有PERV mRNA表达,其中有2头个体携带env-A、env-B、env-C3种囊膜蛋白基因,而其余的29头个体只带有env-Ae、nv-B两种囊膜蛋白基因,未检测到env-C基因。多组织RT-PCR扩增结果表明,3头沙子岭猪的肾、心、肝、肺、脾等组织中,pol、gage、nv-A、env-B基因均有表达,未检测到env-C基因表达。测序沙子岭猪的env基因,结果发现,沙子岭猪env-B和env-C基因与其他猪种序列比较分别存在2和10个碱基的差异,而env-A基因序列没有差异,说明不同的猪种之间env基因存在多态性。以上结果表明,沙子岭猪种群携带PERV,其亚型主要以PERV-A,B为主;PERV在该猪种肾、心、肝、肺、脾等多种组织中的分布没有明显组织特异性,且93.5%(29/31)个体表现为env-C基因缺失,提示沙子岭猪作为候选猪种可能在异种移植中具有较好的应用前景。

关键词：猪内源性逆转录病毒亚型沙子岭猪异种移植组织分布

M2型巨噬细胞在糖尿病小鼠同种异体胰岛移植中的抗排斥作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2017年第7期42卷 783-789页

作者：梁琪刘婷冯丽邓灵灵容鹏飞王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗中心长沙410013 中南大学湘雅三医院超声科长沙410013

目的:探讨腹膜腔来源的M2型巨噬细胞对糖尿病小鼠同种异体胰岛移植的抗排斥作用。方法:体外分离诱导C57BL/6小鼠腹膜腔M2型和M0型细胞,流式细胞术鉴定巨噬细胞表型。链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导C57BL/6雄性小鼠的糖尿病模型作... 详细信息

目的:探讨腹膜腔来源的M2型巨噬细胞对糖尿病小鼠同种异体胰岛移植的抗排斥作用。方法:体外分离诱导C57BL/6小鼠腹膜腔M2型和M0型细胞,流式细胞术鉴定巨噬细胞表型。链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导C57BL/6雄性小鼠的糖尿病模型作为受体,分离BALB/c小鼠胰岛细胞移植于C57BL/6糖尿病小鼠左肾包膜下。将移植后糖尿病小鼠随机分为3组,每组8只。于胰岛移植术后1,3,7 d分别经尾静脉输注PBS(islet+PBS组)、2.5×106个M0型巨噬细胞(islet+M0组),2.5×106个M2型巨噬细胞(islet+M2组)。移植术后取尾静脉血监测受体血糖水平的变化,记录胰岛存活时间,并于移植后10 d每组随机抽取2只小鼠处死取左肾做病理学检查,观察移植物形态结构和胰岛素表达水平。结果:Islet+PBS组、islet+M0组和islet+M2组移植物的中位存活时间分别为6.5(4~10),7.5(4~10)和24(﹥15)d;与islet+PBS组和islet+M0组比较,islet+M2组移植物调节血糖正常水平时间和中位存活时间明显延长(P移植10 d后移植物结构完整,胰岛素染色阳性;而islet+PBS组和islet+M0组胰岛移植物均被排斥,胰岛素染色阴性,局部见大量淋巴细胞浸润。结论:腹膜腔来源的M2型巨噬细胞能减轻受体对胰岛移植物的免疫排斥反应,延长胰岛移植物的存活时间,从而提高受体对血糖的耐受能力。

关键词： M2型巨噬细胞胰岛移植免疫耐受腹膜腔

人类间充质干细胞来源的外泌体对猪胰岛抗缺氧能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实用器官移植电子杂志 2018年第5期6卷 368-374页

作者：聂唯马小倩陈则夷杨策军容鹏飞王维中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所湖南长沙410013 湖南省异种移植工程技术中心湖南长沙410013

目的探讨来自人类脐带源间充质干细胞条件培养基(human umbilical cord-derived MSCconditioned medium,Hu-MSC-CM)中的外泌体能否增加新生猪胰岛细胞(neonatal porcine islet cell clusters,NICCs)在缺氧环境下的生存和功能。方法 NICCs在低氧条件下(1%O_2)分别用含外泌体的条件培养基、去除外泌体的条件培养基和常规培养基进行培养。荧光激活细胞分选仪和细胞外通量测定法分别检测外泌体对细胞活性和功能的影响,实时定量PCR检测NICCs中缺氧耐受相关基因HIF-1α、PDH2及VEGF的表达。结果与常规培养基组和去除外泌体的条件培养基组相比,含外泌体的条件培养基组培养的NICCs其存活率、活性和功能均有所提高[IEQ:7 800±210比5 894±188、4 740±273,P 细胞存活率(%):77.2±7.0比68.8±1.8、61.5±5.1,P 细胞中HIF-1α、PDH2及VEGF基因表达均显著高于另外两组。结论人类脐带源MSC-条件培养基可以减轻NICCs在缺氧过程中导致的功能障碍,外泌体在诱导低氧抵抗方面发挥重要作用。

关键词：间充质干细胞新生猪胰岛细胞低氧功能活性

AAV体外介导hCTLA4-Ig在新生猪胰岛细胞中的表达与生物学活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2007年第1期32卷 36-40页

作者：莫朝晖王维刘涛曾秋华吴小兵谢艳红中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗研究所长沙410013 中南大学中国预防医学科学研究所病毒基因工程国家重点实验室北京100052 中南大学湘雅三医院内分泌科长沙410013

目的:探讨AAV-hCTLA4-Ig体外感染猪胰岛细胞后,hCTLA4-Ig基因的表达能力及生物学活性。方法:腺相关病毒载体(AAV)介导hCTLA4-Ig体外转染新生猪胰岛细胞(NIPs),用RT-PCR和免疫细胞化学法检测胰岛细胞内hCTLA4-Ig mRNA及蛋白质水平的表达... 详细信息

目的:探讨AAV-hCTLA4-Ig体外感染猪胰岛细胞后,hCTLA4-Ig基因的表达能力及生物学活性。方法:腺相关病毒载体(AAV)介导hCTLA4-Ig体外转染新生猪胰岛细胞(NIPs),用RT-PCR和免疫细胞化学法检测胰岛细胞内hCTLA4-Ig mRNA及蛋白质水平的表达。转染后的新生猪胰岛细胞与人淋巴细胞共孵育,通过ELISA法检测培养基中IL-2,IFN-γ,TNF-α细胞因子水平的变化。并观察转染组与对照组葡萄糖刺激后的胰岛素释放反应。结果:转染组NIPs可检测到hCTLA4-Ig基因及蛋白表达;与人淋巴细胞共孵育后IL-2,TNF-α,IFN-γ浓度明显低于对照组(P0.05)。结论:AAV-CTLA4-Ig体外转染的胰岛细胞能够表达具有生物学活性的hCTLA4-Ig,可抑制T细胞激活,而胰岛细胞生理功能不受影响。

关键词： CTLA4-Ig 基因转染新生猪胰岛细胞

超声分子靶向显像体外胰岛移植立即经血液介导的炎症反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2015年第6期40卷 632-638页

作者：高峰梁琪李俊玲董琼马小倩王维中南大学粉末冶金研究院长沙410083 中南大学湘雅三医院细胞移植与基因治疗中心长沙410013

目的:探讨采用赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Lys-Gly-Asp-Ser,KGDS)血栓靶向超声造影剂显示体外胰岛移植立即经血液介导的炎症反应(immediately blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR)可行性,为无创、实时、动态地研究和评价IB... 详细信息

目的:探讨采用赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Lys-Gly-Asp-Ser,KGDS)血栓靶向超声造影剂显示体外胰岛移植立即经血液介导的炎症反应(immediately blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR)可行性,为无创、实时、动态地研究和评价IBMIR探索一种新的分子影像学方法。方法:7 m L新鲜全血+1 000胰岛当量(islet equivalent quantit y,IEQ)新生猪胰岛体外制作IBMIR模型。实验分为3组,均重复3次:A组对照组,不加造影剂;B组加普通超声造影剂;C组加靶向超声造影剂。将上述各组Loops管道固定于摇床,并浸于37℃的水浴中。采用超声造影模式实时观察Loops管内的回声,记录超声发现血栓出现的时间;并采用Line成像模式存储在硬盘,脱机分析血栓超声增强强度。实验开始后10,30,60 min 3个时间点,经70μm过滤网过滤Loops管内血液,测定过滤液体的凝血系统[凝血酶抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,ATA),D-二聚体(D-dimer)]、补体系统(C3a,C5b-9)及胰岛素含量等指标,过滤网内血块做病理学检测。结果:A组没有加入造影剂,超声不能发现血栓形成;B组、C组加入超声造影剂后超声可以发现血栓,其中B组加入自制普通超声造影剂,血栓在超声图像上显示为周边及内部无增强,呈充盈缺损改变,发现血栓时间为(7.3±0.5)min,相应血栓超声增强强度的灰阶值为31.22±3.56;C组加入靶向超声造影剂,超声清晰显示环状增强的血栓,发现血栓时间为(13.2±0.6)min,其超声增强强度的灰阶值为75.85±5.21。B组、C组血栓灰阶值及发现时间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。血液学检测证实各实验组均发生了IBMIR;病理结果显示胰岛与新鲜全血接触后,其表面形成血栓壳,加入带荧光的靶向超声造影剂,荧光显微镜可以清楚观察到胰岛周边呈明亮的荧光光环,与血栓壳位置、形态、范围完全吻合。结论:超声分子影像技术可以靶向显像体外IBMIR,为无创评估IBMIR的发生及其范围、程度提供了可能。

关键词：胰岛立即经血液介导的炎症反应超声分子影像