检索结果-南通市图书馆

日本血吸虫脱尾童虫表膜结合短肽的筛选与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 27-32页

作者：刘彦张组萍王可耕顾孔珍蔡立汀曾庆仁南华大学医学院寄生虫学教研室衡阳421001 中南大学基础医学院细胞与分子生物学实验中心长沙410013

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Shistosoma japonicum)脱尾童虫表膜特异性结合而不与尾蚴表膜结合的短肽并鉴定。方法利用M13噬菌体十二肽库,经体外逆向差异筛选日本血吸虫尾蚴和脱尾活童虫,从第3轮回收的结合噬菌体中随机挑取1... 详细信息

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Shistosoma japonicum)脱尾童虫表膜特异性结合而不与尾蚴表膜结合的短肽并鉴定。方法利用M13噬菌体十二肽库,经体外逆向差异筛选日本血吸虫尾蚴和脱尾活童虫,从第3轮回收的结合噬菌体中随机挑取15个克隆进行测序获取目标噬菌体后,采用ELISA法、洗脱回收率实验(以M13KE为阴性对照)和免疫组织化学法检测日本血吸虫脱尾童虫、尾蚴与噬菌斑克隆的特异性结合。荧光显微镜观察人工合成的阳性噬菌体短肽与日本血吸虫脱尾童虫体外的特异性结合。构建目的片段pEGFP-C2质粒体外转染日本血吸虫脱尾童虫。结果经3轮逆向差异筛选后.噬菌体回收率从第1轮的3.50×10^(-5)%到第3轮的3.20×10^(-2)%,富集度明显提高。DNA测序结果表明,15个噬菌体克隆分别含有ZL6、ZL4和ZL1等3个不同的短肽序列。ELISA结果显示,M13噬菌体短肽ZL4(MppZL4)、MppZL6和MppZL1分别与脱尾童虫膜蛋白结合后的P/N值为6.72,3.65和2.22,分别与尾蚴膜蛋白结合后的P/N值为1.58,5.15和1.20。洗脱回收率实验结果显示.MppZL4与脱尾童虫洗脱回收率[(4.60±0.27)×10^(-2)%]远高于MppZL6[(2.10±0.23)×10^(-3)%]、MppZL1[(1.20±0.28)×10^(-3)%]和M13KE[(1.30±0.60)×10^(-7)%)(P<0.01)。免疫组化结果显示,日本血吸虫脱尾童虫与MppZL4特异性结合.阳性率为83.0%(83/100)。荧光显微镜检测结果显示,人工合成的RhB-ZL4可与日本血吸虫脱尾童虫体外特异性结合。构建的ZL4/pEGFP-C2质粒体外可成功转染日本血吸虫脱尾童虫。结论筛选获得的短肽ZL4能与日本血吸虫童虫表膜特异性结合.不与尾蚴表膜结合。

关键词：日本血吸虫表膜噬菌体展示技术

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第2期35卷 143-148页

作者：田菁燕胡维新田尔明石奕武申群喜汤立军江元山 AR 72205 University of Arkansas for Medical Sciences Arkansas Cancer Research Center USA Little Rock 中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心长沙410078

为从人类多发性骨髓瘤细胞株中克隆新的恶性相关基因 ,构建人类多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库。从ARH 77细胞中提取mRNA并逆转录合成双链cDNA ,经PCR扩增后 ,插入表达载体 ,得到ARH 77细胞cDNA表达文库。将文库菌落印迹至尼龙膜 ,... 详细信息

为从人类多发性骨髓瘤细胞株中克隆新的恶性相关基因 ,构建人类多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库。从ARH 77细胞中提取mRNA并逆转录合成双链cDNA ,经PCR扩增后 ,插入表达载体 ,得到ARH 77细胞cDNA表达文库。将文库菌落印迹至尼龙膜 ,分区培养提取质粒DNA ,建立基因池 ,并分别转染NIH/ 3T3细胞。经G418筛选并计集落数 ,选择克隆数最多的基因池进入第二轮。如此反复进行。通过测序 ,排除所有已知的癌基因、抑瘤基因、细胞因子及其受体 ,获得了有转化活性的cDNA克隆A6 2 17。进一步使用RACE技术对 5′端进行快速扩增 ,获得全长为 130 0bp的cDNA序列 ,该基因由 8个外显子组成 ,编码产物为 2 6 3个氨基酸组成的多肽链。将该基因暂时命名为多发性骨髓瘤转化基因 2 (tumor associatedgene 2fromhumanmultiplemyeloma ,hMMTAG2 )。该基因定位于人类染色体 1q42 .13。生物信息学分析发现 ,hMMTAG2编码有多个蛋白激酶的磷酸化位点、N 肉豆蔻酸化位点及核定位信号 ,提示该基因的表达产物可能是细胞核内的一种信号分子。

关键词：多发性骨髓瘤 ARH-77细胞株基因克隆多发性骨髓瘤转化基因2(hMMTAG2)

日本血吸虫成虫体外传代培养细胞的生物学鉴定

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第5期24卷 395-397页

作者：刘伟曾铁兵曾庆仁蔡春张祖萍龚燕飞蔡力汀张顺科徐锡萍中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室南华大学医学院病原生物学研究所衡阳421001 中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心长沙410013 中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心中南大学湘雅医学院电镜室

本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表... 详细信息

本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表明1640-40特定培养基对血吸虫成虫中的部分细胞体外传代培养获得成功。

关键词：日本血吸虫成虫细胞传代培养超微结构染色体核型

日本血吸虫童虫表膜结合多肽的亲和筛选与初步鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第3期28卷 172-175页

作者：魏琦刘彦曾庆仁陈欲晓周军刘碧源邹艳杨胜辉蔡力汀李立新兰玲梅中南大学基础医学院免疫学教研室长沙410013 中南大学基础医学院细胞与分子生物学实验中心长沙410013 中南大学湘雅三医院实验中心长沙410013 湖南中医药高等专科学校基础医学部株洲410013

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进... 详细信息

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进行测序。根据测序结果 ,选取出现次数最多的噬菌体克隆作为目标噬菌体,免疫组化检测目的噬菌体,并回输到已感染日本血吸虫的小鼠体内,2.5h后处死小鼠,回收肝脏和日本血吸虫童虫,分别洗脱与肝脏和童虫结合的噬菌体,进行统计学分析。结果经3轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的0.77×10-8到第3轮的0.75×10-5,说明噬菌体得到了有效富集。DNA测序结果表明,20个噬菌体克隆中的15个克隆呈现QHPRIRKOOOOO序列。免疫组化结果显示,表达该序列的噬菌体能与童虫表膜有效结合;体内回输试验证实,该噬菌体能有效地靶向结合于体内日本血吸虫童虫表膜。结论筛选获得的短肽QHPRIRKOOOOO能有效地靶向结合日本血吸虫童虫表膜。

关键词：日本血吸虫童虫噬菌体展示技术表膜靶向性

褪黑素对年龄相关的小鼠脑组织核转录因子和突触素活性的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2011年第12期31卷 2043-2047页

作者：周丽曾庆仁周军中南大学湘雅三医院医学实验中心湖南长沙410013 中南大学相雅医学院分子生物学实验中心湖南长沙410013

目的研究褪黑素(melatonin,MT)对不同年龄小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和目的核转录因子(NF-kB)以及突触素(SYN)的表达,探讨MT与年龄相关的作用机理。方法 40只雄性B6C3F1小鼠分为4组,5.5个月(年轻组)20只,26个月(老年组)20只,年... 详细信息

目的研究褪黑素(melatonin,MT)对不同年龄小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和目的核转录因子(NF-kB)以及突触素(SYN)的表达,探讨MT与年龄相关的作用机理。方法 40只雄性B6C3F1小鼠分为4组,5.5个月(年轻组)20只,26个月(老年组)20只,年轻组和老龄组各10只为对照组,10只为MT处理组。动物每天喂以0.04 mg/kg的MT,2.5月后取小鼠脑组织,采用免疫组化染色法检测GFAP、NF-kBp65和SYN表达活性变化。结果发现大脑中的NF-kB随着年龄的增长而增长,在MT处理的老年组小鼠大脑则呈现相反的趋势(P细胞的GFAP表达随着年龄增长而提高,但在MT处理的老年组没有显著性差异(P>0.05)。结论神经胶质酸性蛋白(GFAP)的表达在老年鼠几乎不受MT作用的影响,但MT降低了NF-kB p65的表达水平并提高SYN的活性,减缓大脑的老化过程,起到了保护大脑的作用。

关键词：老龄化大脑褪黑素炎症 NF-kBp65 突触素

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黄蘑多糖Fb对小鼠免疫功能的调节作用

吉林大学学报（医学版） 2005年第5期31卷 692-695页

作者：马岩马颖哲张家颖李晓梅吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心吉林长春130021

目的:研究黄蘑多糖Fb(polysaccharid Fb from Huangmo)对小鼠免疫功能的调节作用。方法:健康成年小鼠40只,随机分为对照组、环磷酰胺(CTX)免疫抑制组、黄蘑碱溶性多糖活性组分(Fb)正常小鼠给药组和Fb环磷酰胺伍用(M)给药组,采用NK细胞... 详细信息

目的:研究黄蘑多糖Fb(polysaccharid Fb from Huangmo)对小鼠免疫功能的调节作用。方法:健康成年小鼠40只,随机分为对照组、环磷酰胺(CTX)免疫抑制组、黄蘑碱溶性多糖活性组分(Fb)正常小鼠给药组和Fb环磷酰胺伍用(M)给药组,采用NK细胞介导的细胞毒试验测定自然杀伤细胞(NK)的活性,淋巴细胞转化试验测定T淋巴细胞增殖功能,鼠脾T淋巴母细胞增殖分析法测定白细胞介素2(IL-2)的活性,观察Fb对各组小鼠免疫指标的影响。同时通过明胶酶谱分析检测脾脏基质金属蛋白酶(MMPs)的表达。结果:黄蘑多糖Fb能提高免疫抑制小鼠的NK细胞活性,T淋巴细胞转化率(LTT)和IL-2的活性(P0.05),Fb组和M组MMP-9活性明显升高(P细胞转化率,其他免疫指标亦显示轻度上调作用。

关键词：担子菌纲多糖类/药理学环磷酰胺免疫天然明胶酶A 明胶酶B

逆转录病毒载体介导的HSVtk基因表达及提高重组逆转录病毒滴度的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验和临床病毒学杂志 2004年第4期18卷 332-336页

作者：曾赵军胡维新罗赛群陈迁中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心长沙410078

目的　探讨逆转录病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSVtk)基因表达及提高逆转录病毒滴度的措施。方法　将HSVtk基因插入逆转录病毒载体pRevTRE中 ,构建重组逆转录病毒载体。通过微乒乓感染法导入包装细胞PA317中 ,以潮霉素B筛选克... 详细信息

目的　探讨逆转录病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSVtk)基因表达及提高逆转录病毒滴度的措施。方法　将HSVtk基因插入逆转录病毒载体pRevTRE中 ,构建重组逆转录病毒载体。通过微乒乓感染法导入包装细胞PA317中 ,以潮霉素B筛选克隆细胞 ,浓缩克隆细胞上清制备重组逆转录病毒。在不同时间及不同丁酸钠浓度下 ,检测分析经筛选获得阳性克隆靶细胞中有无HSVtk基因的表达及如何获得高滴度的重组病毒液。结果　成功构建了重组逆转录病毒载体RevTRE tk ,制备的重组病毒感染靶细胞后有HSVtk基因的表达。结论　通过微乒乓感染法在包装细胞PA317培养 30h和 10mmol L丁酸钠浓度下 ,经冷冻超速离心能获得携HSVtk基因的高滴度逆转录病毒颗粒 ,为其基因治疗的应用及研究奠定了基础。

关键词： HSV tk基因逆转录病毒载体高滴度表达介导包装细胞重组病毒潮霉素筛选

Epstein-Barr病毒相关淋巴上皮瘤样肝内胆管癌3例并文献复习

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中南大学学报（医学版） 2024年第2期49卷 319-329页

作者：彭璐珊彭先楚段赛丽张哲嘉中南大学湘雅医院病理科长沙410008 中南大学基础医学院细胞与分子生物学实验室长沙410013 中南大学湘雅医院普通外科长沙410008

肝淋巴上皮瘤样癌(Lymphoepithelioma-like carcinoma,LELC)是一种极其罕见的恶性肿瘤,其特点是未分化的恶性上皮细胞及明显的淋巴浸润。肝LELC主要包括淋巴上皮瘤样肝细胞癌(lymphoepithelioma-like hepatocellularcarcinoma,LEL-HCC)和淋巴上皮瘤样肝内胆管癌(lymphoepithelioma-likeintrahepatic cholangiocarcinoma,LEL-CC)。EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染被认为是LELC癌变的重要因素。中南大学湘雅医院自2005年以来共收治3例EBV相关LEL-CC患者,CT均提示肝脏肿块,经手术切除后,3例患者EBV编码的RNA(EBV-encoded RNA,EBER)和CK19表达均为阳性,病理学证实为EBV相关的LEL-CC。2例患者术后预后良好,1例患者术后接受相关免疫治疗及化学治疗。结合现有文献分析,笔者认为可将肝LELC纳入肝肿瘤的分类,这将为肝LELC的精准诊断及治疗提供新思路。

关键词：淋巴上皮瘤样癌淋巴上皮瘤样肝内胆管癌肝细胞癌 EB病毒

维普期刊数据库博看期刊

“细胞凋亡的诱导与检测”整合性实验的实践与探索

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国免疫学杂志 2013年第2期29卷 202-204页

作者：翁秀芳袁萍沈关心吴雄文尹丙姣华中科技大学同济医学院基础医学院细胞分子生物学实验中心武汉430030

现行的医学教育改革和整合课程体系的实践，主要通过以器官或系统为主线进行基础知识的整合、基础与临床的结合，并综合应用灵活多样的教学形式，有效地改善了传统医学基础教育课程设置多、不同学科之间交叉重复，以及课程教授形式单一... 详细信息

现行的医学教育改革和整合课程体系的实践，主要通过以器官或系统为主线进行基础知识的整合、基础与临床的结合，并综合应用灵活多样的教学形式，有效地改善了传统医学基础教育课程设置多、不同学科之间交叉重复，以及课程教授形式单一等问题对教学效果的影响，体现了国际医学教育的发展趋势，在培养医学生系统与主动的学习医学知识以及创新能力挖掘方面显示出了较大的优势[1,2]。

关键词：细胞凋亡实验检测医学教育改革医学基础教育国际医学教育课程体系培养医学生