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基于cAMP/PKA/NMDAR信号通路探讨黑逍遥散对APP/PS1双转基因AD小鼠海马神经元突触可塑性的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第17期30卷 27-34页

作者：胡韵韵吕育洁孟志鹏杨娇陈怡琴王虎平甘肃中医药大学兰州730000 甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室兰州730000 甘肃省中药新产品创制工程实验室兰州730000

目的:探究黑逍遥散通过调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)信号通路干预APP/PS1小鼠突触可塑性的作用及其机制。方法:选取4月龄雄性C57BL/6J小鼠12只作空白组,同月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠60只,随机... 详细信息

目的:探究黑逍遥散通过调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)信号通路干预APP/PS1小鼠突触可塑性的作用及其机制。方法:选取4月龄雄性C57BL/6J小鼠12只作空白组,同月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠60只,随机分为模型组、KW-6002(腺苷受体的拮抗剂)组(3 mg·kg^(-1))及黑逍遥散高、中、低剂量组(22.10、11.05、5.53 g·kg^(-1)),每组12只,对应药物连续干预90 d。透射电镜观察海马神经元突触超微结构,高尔基染色观察海马CA1区神经元树突棘密度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cAMP、PKA、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NR1)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2A(NR2A)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(NR2B)、突触后致密物质95(PSD95)、突触蛋白1(SYN1)的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测cAMP、PKA、NR1的mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠海马白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-4(IL-4)含量。结果:与空白组比较,模型组小鼠海马CA1区突触前膜与突触后膜分界线清晰程度欠佳,突触囊泡明显减少且分布散乱,突触后膜密度降低,海马CA1区神经元树突棘形态欠规整,排列不连续、密度减少(P<0.01),海马cAMP、PKA、NR1、NR2A、NR2B、PSD95、SYN1的蛋白表达降低(P<0.01),cAMP、PKA、NR1的mRNA表达下调(P<0.01),海马IL-12含量增多、IL-4含量减少(P<0.01);与模型组比较,各用药组小鼠海马CA1区突触前膜与后膜分界线清晰明了且结构完整,突触囊泡增多,排列密集,突触后膜密度增加,神经元树突棘形态较为规则,排列连续,成熟型树突棘密度增多(P<0.05,P<0.01),海马cAMP、PKA、NR1、NR2A、NR2B、PSD95、SYN1的蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),cAMP、PKA、NR1的mRNA表达提高(P<0.01),海马IL-12含量降低(P<0.01),IL-4含量增加(P<0.01)。结论:黑逍遥散能改善APP/PS1小鼠海马神经元结构形态,其作用机制可能与激活cAMP/PKA/NMDAR信号通路、修复突触可塑性有关。

关键词：黑逍遥散阿尔茨海默病突触可塑性环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)信号通路

六味地黄汤加减联合氯沙坦钾对糖尿病肾病大鼠ACE1/AngⅡ/AT1R轴及肠道菌群的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 1-9页

作者：杨超茅张顺宵李园园高建东上海中医药大学附属曙光医院宝山分院上海201999 上海中医药大学附属宝山医院上海201999 上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学中医肾病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂... 详细信息

目的:基于血管紧张素转换酶1(ACE1)/血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)轴,探讨六味地黄汤加减防治糖尿病肾病(DKD)肾脏损伤的可能作用机制。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为正常组8只,造模组42只,造模组大鼠高糖高脂饲料喂养6周后,予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg^(-1)诱导建立DKD大鼠模型。造模成功后随机分为模型组、中药组(六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^(-1))、西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^(-1))、中西药组(氯沙坦钾33 mg·kg^(-1)联合六味地黄汤加减颗粒剂21 g·kg^(-1)),连续灌胃8周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿蛋白(Up)、尿素氮(Bun)、血肌酐(SCr);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清ACE1、AngⅡ、AT1R水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肾组织ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达水平;苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)、过碘酸雪夫氏(PAS)染色后观察肾组织病理形态学改变;采集各组大鼠粪便标本进行16S rDNA高通量测序分析。结果:与正常组比较,模型组Up、FBG、Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平显著升高(P<0.01),肾组织病变严重,ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达显著增加(P<0.01),厚壁菌门/拟杆菌门(F/B)升高,乳杆菌属的物种丰度下降,穆氏菌属、双歧杆菌属的物种丰度升高;与模型组比较,各给药组Bun、SCr、ACE1、AngⅡ、AT1R水平均显著下降(P<0.01),肾脏病变程度有所改善,中药组、中西药组Up、FBG水平均显著下降(P<0.01),西药组和中西药组的ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白,中药组的AngⅡ蛋白表达显著减少(P<0.01)、中药组ACE1、AT1R蛋白表达明显减少(P<0.05),中药组、中西药组的F/B降低;西药组和中药组布劳特氏菌属的物种丰度升高,中药组、中西药组乳杆菌属、瘤胃球菌科未定属、双歧杆菌属的物种丰度升高,穆氏菌属的物种丰度下降,中药组、中西药组Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05);与西药组比较,中西药组Up水平均显著下降(P<0.01),中西药组的Bun水平明显降低(P<0.05);中西药组ACE1、AT1R水平显著降低(P<0.01),ACE1、AngⅡ、AT1R蛋白表达明显减少(P<0.05),肾脏病变程度改善较明显,双歧杆菌属的物种丰度升高,Chao 1和Ace指数明显增加(P<0.05)。结论:六味地黄汤加减联合氯沙坦钾可通过调节ACE1/AngⅡ/AT1R轴减轻肾脏纤维化,提升大鼠乳杆菌属、双歧杆菌属的物种丰度,降低穆氏菌属的物种丰度,并改善肠道菌群的丰富度、均匀度,减轻肾脏病理损伤。

关键词：血管紧张素转换酶1 血管紧张素Ⅱ 血管紧张素Ⅱ1型受体肠道菌群六味地黄汤加减

基于IGF-1/PI3K/Akt信号通路探讨红芪多糖对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 130-139页

作者：苗琳琳万生芳张磊李荣科魏昭辉朱小利安惠甘肃中医药大学基础医学院兰州730000 甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室兰州730030 甘肃中医药大学敦煌医学与转化教育部重点实验室兰州730030

目的:观察红芪多糖对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦平滑肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(IGF-1/PI3K/Akt)通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:将62只Wistar雄性大鼠随机分为空白组12只、造模组50只。造... 详细信息

目的:观察红芪多糖对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠胃窦平滑肌细胞凋亡及胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(IGF-1/PI3K/Akt)通路蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:将62只Wistar雄性大鼠随机分为空白组12只、造模组50只。造模组采用小剂量多次腹腔注射链脲佐菌素联合不规律高脂高糖饮食法4周构建大鼠DGP模型。将成模大鼠随机分为模型组、莫沙必利组和红芪多糖高、中、低剂量组。红芪多糖高、中、低剂量组分别予红芪多糖200、100、50 mg·kg^(-1)灌胃,莫沙必利组予枸橼酸莫沙必利1.35 mg·kg^(-1)灌胃,空白组和模型组予等体积纯净水灌胃,每日1次,连续8周。每2周测定大鼠随机血糖及体质量,检测胃排空率;苏木素-伊红(HE)染色观察胃窦组织平滑肌病理形态;原位末端标记法(TUNEL)染色检测胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数;免疫组化法检测胃窦组织平滑肌IGF-1、磷酸化(p)-PI3K、p-Akt蛋白的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃窦组织平滑肌中IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠各时间点随机血糖显著升高(P<0.01),体质量、胃排空率显著降低(P<0.01),胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数显著升高(P<0.01),IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠给药8周后随机血糖降低,体质量、胃排空率均明显升高(P<0.05,P<0.01)、胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数明显降低(P<0.05,P<0.01),IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与莫沙比利组比较,红芪多糖低剂量组给药6、8周后随机血糖升高、体质量减轻(P<0.05,P<0.01),红芪多糖低剂量组大鼠胃排空率降低、胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数升高(P<0.05),红芪多糖各剂量组p-PI3K/PI3K蛋白表达,以及红芪多糖低剂量组IGF-1、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与红芪多糖高剂量组比较,红芪多糖低剂量组给药6、8周后随机血糖升高、体质量减轻(P<0.05,P<0.01),红芪多糖低、中剂量组大鼠胃排空率降低、胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数升高(P<0.05,P<0.01),IGF-1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与红芪多糖中剂量比较,HPS低剂量组给药6、8周后体质量、大鼠胃排空率降低及胃窦组织平滑肌细胞凋亡指数升高(P<0.05,P<0.01),IGF-1、p-Akt/Akt、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:红芪多糖能够在一定程度上保护胃窦平滑肌细胞凋亡损伤并促进胃动力,其机制可能与激活IGF-1/PI3K/Akt信号通路,上调IGF-1、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达有关。

关键词：糖尿病胃轻瘫红芪多糖胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路胃窦平滑肌凋亡大鼠

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4味归肺经中药的黄酮成分簇“印迹模板”特征分析及其体外归经研究方法建立

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中国实验方剂学杂志 2024年第9期30卷 141-147页

作者：贺琪珺盛丹丹陈宇霞欧阳少琴邓凯文贺福元陈新宇湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学药学院中药炮制与制剂制备工程技术实验室中医药超分子机理与数理特征化实验室中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室中药药性与药效国家中医药管理局重点实验室长沙410208

目的:对归肺经4味中药黄酮成分簇的“印迹模板”特征进行研究,建立中药体外归肺经的研究方法。方法:以普通高等教育“十三五”国家级规划教材《中药学》中只归肺经的苍耳子、鱼腥草、金荞麦、射干等13味中药为基础,确定鱼腥草、金荞麦... 详细信息

目的:对归肺经4味中药黄酮成分簇的“印迹模板”特征进行研究,建立中药体外归肺经的研究方法。方法:以普通高等教育“十三五”国家级规划教材《中药学》中只归肺经的苍耳子、鱼腥草、金荞麦、射干等13味中药为基础,确定鱼腥草、金荞麦、射干、桑白皮4味代表中药,通过高效液相色谱法(HPLC)建立指纹图谱,并计算4味中药中所含各类成分的分子连接性指数,运用夹角余弦法计算其与平均分子连接性指数的相似性,以此建立构印定量关系,确定各成分归肺经次序。选择绿原酸、芦丁、槲皮苷、异槲皮苷、金丝桃苷、表儿茶素、野鸢尾苷共7种对照品验证模型的黄酮类成分整体的构印关系及其预测能力。结果:鱼腥草、金荞麦、射干和桑白皮共含有437种化学成分,其平均分子连接性指数相似度为0.9956,4味中药共含黄酮类成分204个,平均分子连接性指数相似度为0.9780,仅次于生物碱的0.9851。7个对照品的保留时间(t_(R))与分子连接性指数相似度(S)呈良好构印关系(t_(R)=831.4×S-790.3,r=0.8614,P系的体外中药归经研究方法。

关键词：中药归经肺经印迹模版定量构印关系分子连接性指数经络相似度

基于总量统计矩分析法与分子连接性指数探讨枳实、枳壳“同源异效”的物质基础

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 161-168页

作者：袁筱吴月峰李世雄刘有志于芷芩贺福元周晋湖南中医药大学药学院中药成药性与制剂制备湖南省重点实验室中医药超分子机理与数理特征化实验室长沙410208

目的:基于总量统计矩分析法与分子连接性指数(MCI)探讨枳实与枳壳“同源异效”的物质基础。方法:查阅国内外相关文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),建立枳实、枳壳的化学成分数据库,建立其超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,... 详细信息

目的:基于总量统计矩分析法与分子连接性指数(MCI)探讨枳实与枳壳“同源异效”的物质基础。方法:查阅国内外相关文献和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),建立枳实、枳壳的化学成分数据库,建立其超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,计算指纹图谱总量统计矩及其相似度参数;根据MCI将枳实、枳壳所有成分划分为不同的成分群;计算枳实、枳壳共有成分群0~8阶(^(0)χ~^(8)χ)MCI平均值。结果:枳实与枳壳的总量零阶矩(AUCT)分别为(10.57±2.45)×10^(6)、(5.09±0.89)×10^(6)μV·s,总量一阶矩(MCRT_(T))分别为(11.57±1.58)、(12.10±1.29)min,总量二阶矩(VCRTT)分别为(24.49±2.30)、(26.49±2.54)min^(2),表明枳实与枳壳定性、定量参数都存在明显差异;筛选出新橙皮苷、橙皮苷、芸香柚皮苷等相似度高的成分作为枳实、枳壳共有潜在药效成分;筛选出枳实中非共有成分alysifolinone、欧前胡素等,枳壳中非共有成分新北美圣草苷、异樱花苷等相似度高的作为枳实、枳壳各自潜在“异效”成分;将枳实与枳壳成分群划分为六类,枳实、枳壳成分群与总成分之间的相似度分别在0.872~0.979、0.918~0.997,枳实与枳壳的生物碱类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值分别为3.65、3.14,黄酮类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值均为8.47,挥发油类成分^(0)χ~^(8)χMCI平均值分别为2.71、3.48,表明枳实与枳壳化学成分(群)MCI存在一定差异。结论:枳实与枳壳化学成分(群)不仅是含量与种类的差异,其结构特点及构效关系也存在差异,可为深入阐释枳实、枳壳“同源异效”的科学内涵提供依据。

关键词：枳实枳壳同源异效分子连接性指数(MCI) 总量统计矩指纹图谱超高效液相色谱法(UPLC) 物质基础

葛根芩连汤及其加减方改善2型糖尿病胰岛素抵抗作用研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 256-263页

作者：刘艺敏吉燕华陈梦婕严小军刘红宁曾治君江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心江西省中医病因生物学重点实验室南昌330004

葛根芩连汤出自《伤寒杂病论》,为表里双解治疗协热下利的代表方剂,全方由葛根、黄芩、黄连、炙甘草配伍而成,四药合用可外疏内清,共达清热止利,表里同解之效。现临床上基于异病同治的原则将葛根芩连汤用于2型糖尿病(T2DM)的治疗,取得... 详细信息

葛根芩连汤出自《伤寒杂病论》,为表里双解治疗协热下利的代表方剂,全方由葛根、黄芩、黄连、炙甘草配伍而成,四药合用可外疏内清,共达清热止利,表里同解之效。现临床上基于异病同治的原则将葛根芩连汤用于2型糖尿病(T2DM)的治疗,取得了良好的疗效。T2DM是一种以血糖水平升高为主要特征的慢性代谢性疾病,其病因和发病机制十分复杂,主要与遗传、生活方式、环境及饮食等因素相关。临床观察及实验研究显示,葛根芩连汤及其药效成分可有效防治T2DM。临床上常将葛根芩连汤加减应用或联合西药应用,其治疗效果明显优于单独使用西药。临床实践证实葛根芩连汤可以有效缓解T2DM患者临床症状,减轻胃肠道等不良反应,并减少并发症的发生。实验研究表明葛根芩连汤可通过调控胰岛传导通路及炎症信号通路、缓解氧化应激反应、调节肠道菌群等方式来增强患者胰岛功能,改善胰岛素抵抗,从而治疗T2DM。但目前关于葛根芩连汤通过改善胰岛素抵抗治疗T2DM的机制尚待进一步研究,故该文就葛根芩连汤改善T2DM胰岛素抵抗的临床及实验基础研究进展进行系统综述,以期为葛根芩连汤治疗T2DM作用机制的后续深入研究及其临床防治提供理论和数据参考。

关键词：葛根芩连汤 2型糖尿病胰岛素抵抗临床应用作用机制

黄连解毒汤调控FBXL5/IRP2改善VaD小鼠脑铁代谢紊乱、髓鞘损伤及激越攻击行为

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：冯小霞陈晨邱静阳光湖北中医药大学第一临床学院湖北中医药大学附属医院中医肝肾研究及应用湖北省重点实验室湖北时珍实验室湖北省中医院

目的：探讨黄连解毒汤通过调控F盒富含亮氨酸重复序列蛋白5（FBXL5）/铁调节蛋白2（IRP2）通路对血管性痴呆（VaD）小鼠脑铁代谢紊乱、髓鞘损伤及攻击行为的影响。方法：将60只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、利培酮组(2 mg·k... 详细信息

目的：探讨黄连解毒汤通过调控F盒富含亮氨酸重复序列蛋白5（FBXL5）/铁调节蛋白2（IRP2）通路对血管性痴呆（VaD）小鼠脑铁代谢紊乱、髓鞘损伤及攻击行为的影响。方法：将60只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、利培酮组(2 mg·kg-1·d-1)和黄连解毒汤低、中、高剂量组(0.25、0.5、1 g·kg-1·d-1)，每组10只。采用双侧颈总动脉狭窄（BCAS）法建立VaD模型。从第7周开始给予药物干预2周。在第9周进行行为学评估，包括触摸逃避和居民入侵者测试。行为学测试结束后，收集下丘脑腹外侧腹内侧（VMHvl）组织样本。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测髓鞘相关糖蛋白（MAG）、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）、髓鞘碱性蛋白（MBP）、4-羟基-2-壬烯醛（4-HNE）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、转铁蛋白受体1（TFR1）、铁蛋白轻链（Ft-L）、膜铁转运蛋白1（FPN1）、FBXL5和IRP2表达；免疫荧光检测MBP荧光强度；透射电镜观察髓鞘超微结构改变；Perl's染色检测组织铁沉积；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测MDA和SOD水平。结果：与假手术组比较，模型组小鼠啃咬次数、攻击行为、易激惹评分明显升高，攻击潜伏期显著缩短（P<0.01）。MAG、MOG和MBP的表达水平以及MBP的荧光强度均显著降低（P<0.01）。髓鞘超微结构紊乱。Ft-L、TFR1表达升高，FPN1表达降低，铁沉积增加（P<0.01）。抗氧化剂GPX4和SOD降低，4-HNE和脂质过氧化产物MDA升高（P<0.01）。FBXL5蛋白表达降低，IRP2蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较，黄连解毒汤中、高剂量组和利培酮组小鼠啃咬次数、攻击行为和激惹评分降低（P<0.05，P<0.01），攻击潜伏期增加（P<0.01）。黄连解毒汤中、高剂量组MAG、MOG、MBP表达水平及MBP免疫荧光均升高（P<0.01）。超微板层结构排列有序；Ft-L、TFR1表达降低，FPN1表达升高，铁沉积减少（P<0.01）；GPX4、SOD表达水平升高，4-HNE、MDA表达水平降低（P<0.01）；FBXL5蛋白表达升高，IRP2蛋白表达降低（P<0.01）。结论：黄连解毒汤可能通过调控VMHvl区FBXL5/IRP2表达，改善VaD小鼠脑铁代谢紊乱、髓鞘损伤及激越攻击行为。

关键词：黄连解毒汤铁代谢紊乱髓鞘损伤血管性痴呆激越攻击行为

巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的作用及基于网络药理学的机制研究

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药学实践与服务 2024年第7期42卷 285-290,296页

作者：姜涛徐卫凡蒋益萍夏天爽辛海量海军军医大学药学系生药学教研室上海200433 福建中医药大学药学院福建福州350122

目的探讨巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的骨形成作用及其机制。方法以新生24 h Wistar大鼠所分离的成骨细胞为研究对象,用Aβ1-42寡聚体对成骨细胞进行损伤,并用巴戟天丸组方水提物进行药物干预。分别采用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活... 详细信息

目的探讨巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的骨形成作用及其机制。方法以新生24 h Wistar大鼠所分离的成骨细胞为研究对象,用Aβ1-42寡聚体对成骨细胞进行损伤,并用巴戟天丸组方水提物进行药物干预。分别采用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活性检测、过氧化氢酶(CAT)活性检测、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测、谷胱甘肽(GSH)活性检测以及丙二醛(MDA)活性检测。采用蛋白质印迹法检测骨形成相关蛋白骨形态发生蛋白2(BMP2)、成骨特异性转录因子(RUNX-2)、骨保护蛋白(OPG)的表达水平;明确巴戟天丸组方对Aβ损伤成骨细胞的作用后,采用网络药理学方法对潜在的作用机制进行预测。结果巴戟天丸组方可显著促进Aβ损伤成骨细胞的增殖,提高ALP、SOD、GSH活性,抑制MDA活性,并促进骨形成相关蛋白BMP2、RUNX-2、OPG的表达。网络药理学分析显示,巴戟天丸组方发挥改善Aβ损伤成骨细胞的作用主要与AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路以及神经活性配体与受体的相互作用通路等有关。结论明确巴戟天丸组方具有改善Aβ损伤成骨细胞的作用,并通过网络药理学方法探究其相关作用通路,为传统方剂巴戟天丸抗骨质疏松的临床应用提供借鉴。

关键词：成骨细胞巴戟天丸 Aβ沉积网络药理学

基于UPLC-Q-TOF/MS技术的龙生蛭胶囊成分快速分析

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世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：赵孟依毕成浩李梦娇董政委范家玮张晋岳河南中医药大学第一附属医院心脏中心/国家区域(中医)心血管诊疗中心山西中医药大学第一临床学院山东第一医科大学药学院药物研究所&山东省医学科学院天津中医药大学中药学院山西中医药大学西内教研室

龙生蛭胶囊是我国著名中药制剂。由黄芪、水蛭、川芎、当归、红花、桃仁、赤芍、木香、石菖蒲、地龙、桑寄生以及刺五加提取物组成。临床上常用来治心脑血管疾病。然而，龙生蛭胶囊的化学成分复杂且尚未完全了解，这阻碍了其药理学研究... 详细信息

龙生蛭胶囊是我国著名中药制剂。由黄芪、水蛭、川芎、当归、红花、桃仁、赤芍、木香、石菖蒲、地龙、桑寄生以及刺五加提取物组成。临床上常用来治心脑血管疾病。然而，龙生蛭胶囊的化学成分复杂且尚未完全了解，这阻碍了其药理学研究。本研究利用超高效液相色谱（UPLC）结合四极杆飞行时间质谱（Q-TOF/MS），通过其特征碎片和中性损失来快速分析和鉴定复方中的化学成分。共初步鉴定出97种化学成分，所建立的方法能够系统、快速地分析龙生蛭中的化学成分，为药效物质研究提供依据，对龙生蛭的质量控制具有重要意义。

关键词：龙生蛭胶囊中药方剂化学成分高效液相色谱四极杆飞行时间质谱