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重型创伤性脑损伤患者术后发生肠道屏障功能障碍的危险因素及其预警效能分析

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中华创伤杂志 2024年第2期40卷 127-132页

作者：丁春龙陈俊杰奚少东周勤伟王辉军邱杰刘慧泽张叶磊郑昀旭董富康东南大学附属中大医院无锡分院神经外科无锡214000

目的探讨重型创伤性脑损伤(sTBI)患者术后发生肠道屏障功能障碍(IBD)的危险因素及其预警效能。方法采用回顾性队列研究分析2020年5月至2023年2月东南大学附属中大医院无锡分院收治的101例sTBI患者的临床资料,其中男63例,女38例;年龄21~8... 详细信息

目的探讨重型创伤性脑损伤(sTBI)患者术后发生肠道屏障功能障碍(IBD)的危险因素及其预警效能。方法采用回顾性队列研究分析2020年5月至2023年2月东南大学附属中大医院无锡分院收治的101例sTBI患者的临床资料,其中男63例,女38例;年龄21~81岁[(53.4±14.2)岁]。患者均行急诊手术。根据术后是否发生IBD,将患者分为IBD组(67例)和非IBD组(34例)。记录两组患者性别、年龄、基础疾病(高血压、糖尿病)、颅内血肿类型(硬膜下血肿、硬膜外血肿、脑内血肿)、术前格拉斯哥昏迷评分(GCS)、脑疝、术中初始颅内压(iICP)、手术时间、去除骨瓣、ICU治疗时间、肠内营养启动时间及使用广谱抗生素等。采用单因素及多因素二元Logistic回归分析,评估上述指标与sTBI患者术后发生IBD的相关性并确定其独立危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评价各危险因素对IBD的预警效能。结果单因素分析结果显示,术前GCS、脑疝、术中iICP、去除骨瓣、ICU治疗时间、肠内营养启动时间、使用广谱抗生素与sTBI患者术后发生IBD有一定的相关性(P0.05)。多因素二元Logistic回归分析结果表明,术前GCS≤5分(OR=2.49,95%CI 1.17,5.32,P23 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)(OR=1.20,95%CI 1.03,1.39,P24 h(OR=10.03,95%CI 1.26,80.21,P23 mmHg、肠内营养启动时间>24 h是sTBI患者术后发生IBD的独立危险因素。术中iICP对sTBI患者术后发生IBD的预警价值最大,术前GCS预警价值次之,肠内营养启动时间预警价值最低。

关键词：颅脑损伤肠危险因素肠道屏障功能

深低温冷冻对大鼠髌腱组织内肌腱干细胞生物学特性影响的研究

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中国修复重建外科杂志 2017年第7期31卷 845-852页

作者：代广春李荥娟徐宏亮林禹丞刘俊延徐林芮云峰东南大学医学院附属中大医院骨科南京210000 东南大学医学院南京210000 东南大学医学院附属中大医院老年科南京210000 东南大学医学院附属中大医院无锡分院骨科江苏无锡214000

目的探讨深低温冷冻处理对大鼠髌腱组织中肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的成活、细胞活力、早期凋亡、迁移能力及肌腱相关基因表达的影响。方法取12只4月龄雄性SD大鼠双侧髌腱组织,其中6只大鼠12条髌腱组织(实验组)进行... 详细信息

目的探讨深低温冷冻处理对大鼠髌腱组织中肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的成活、细胞活力、早期凋亡、迁移能力及肌腱相关基因表达的影响。方法取12只4月龄雄性SD大鼠双侧髌腱组织,其中6只大鼠12条髌腱组织(实验组)进行深低温冷冻处理;剩余髌腱组织(对照组)不作处理,作为正常对照。取两组髌腱组织用0.3%Ⅰ型胶原酶消化获得有核细胞,分别用锥虫蓝染色检测有核细胞成活率、结晶紫染色检测有核细胞克隆形成能力;取两组髌腱组织分离培养TDSCs,并传至第3代,采用Alamar Blue法检测细胞体外增殖能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞早期凋亡率;Transwell法检测细胞迁移能力;实时荧光定量PCR检测细胞肌腱相关基因Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,Col1α1)、scleraxis(Scx)和tenomodulin(Tnmd)m RNA表达。结果与对照组(91.00%±3.63%)比较,实验组原代有核细胞成活率为61.65%±4.76%,差异有统计学意义(t=12.010,P=0.000)。两组有核细胞接种后,均呈克隆样生长;培养12 d,实验组每1 000个有核细胞克隆集落形成数为(8.41±0.33)个,较对照组(15.19±0.47)个显著减少(t=28.910,P=0.000)。实验组TDSCs占活性有核细胞比例为1.37%±0.09%,较对照组1.67%±0.10%显著减少(t=5.508,P=0.003)。第3代TDSCs培养14 d内两组细胞生长趋势一致;两组各时间点吸光度(A)值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。实验组及对照组TDSCs早期凋亡率分别为1.67%±0.06%、1.63%±0.06%,比较差异无统计学意义(t=0.707,P=0.519)。镜下见,两组均有TDSCs黏附于Transwell小室下室,实验组细胞数为(445.00±9.70)个,对照组为(451.50±12.66)个,比较差异无统计学意义(t=0.998,P=0.342)。实验组Col1α1、Scx、Tnmd的m RNA相对表达量分别为3.498±0.065、0.062±0.002、(4.211±0.211)×10–5,对照组分别为3.499±0.113、0.062±0.001、(4.341±0.274)×10–5,比较差异均无统计学意义(t=0.013,P=0.991;t=0.042,P=0.969;t=0.653,P=0.549)。结论大鼠肌腱组织经深低温冷冻后其有核细胞成活率降低,但肌腱组织仍保留大量有活性TDSCs,且细胞增殖能力、早期凋亡率、体外迁移能力及成肌腱分化能力未见明显异常。

关键词：深低温冷冻肌腱干细胞肌腱缺损同种异体肌腱移植成肌腱分化

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老年股骨颈骨折治疗研究进展

中国修复重建外科杂志 2019年第8期33卷 1033-1040页

作者：周洋洋倪英杰李荥娟陈辉芮云峰东南大学附属中大医院创伤骨科南京210009 东南大学创伤骨科研究所南京210009 东南大学附属中大医院老年髋部骨折多学科综合诊疗协作组(MDT) 南京210009 东南大学附属中大医院创伤救治中心南京210009 无锡市锡山人民医院骨科江苏无锡214105 东南大学附属中大医院无锡分院骨科江苏无锡214105 东南大学附属中大医院老年科南京210009

目的介绍保守治疗、内固定、人工关节置换术和多学科综合诊疗(multidisciplinary team,MDT模式等治疗老年股骨颈骨折的研究进展。方法广泛查阅国内、外近年相关文献,对多种老年股骨颈骨折治疗方法、新治疗模式的特点和应用进行总结分析... 详细信息

目的介绍保守治疗、内固定、人工关节置换术和多学科综合诊疗(multidisciplinary team,MDT模式等治疗老年股骨颈骨折的研究进展。方法广泛查阅国内、外近年相关文献,对多种老年股骨颈骨折治疗方法、新治疗模式的特点和应用进行总结分析。结果老年非移位型股骨颈骨折应手术治疗,保守治疗继发移位风险高。移位型骨折则应尽早进行手术,人工半髋、全髋关节置换术后患者的远期功能结果没有差别。人工半髋关节置换术中出血量少、手术时间短,适合基础情况不佳的高龄患者;人工全髋关节置换术适合基础情况较好、对生活质量要求较高的老年患者。MDT可有效减少患者术前等待时间和住院时间、降低内科并发症发生率、改善患者营养状况和降低患者死亡率。结论内固定、人工关节置换术等术式和MDT新模式用于老年股骨颈骨折的治疗均取得了显著成果。

关键词：股骨颈骨折保守治疗内固定人工关节置换术多学科综合诊疗老年患者

b FGF对颅脑损伤大鼠脑水肿、神经功能损伤及自噬相关蛋白表达的影响

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中国病理生理杂志 2019年第2期35卷 320-325页

作者：王文宏孔君林小祥李剑侠陈陆馗东南大学附属中大医院神经外科江苏南京210001 东南大学附属中大医院江北分院神经外科江苏南京210044

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)对颅脑损伤(CI)大鼠脑水肿、神经功能损伤及自噬相关蛋白表达影响。方法:采用Feeney's自由落体硬膜外撞击法构建大鼠颅脑损伤模型,成年雄性SD大鼠随机分为对照(control)组、CI组及b FGF低、中和... 详细信息

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)对颅脑损伤(CI)大鼠脑水肿、神经功能损伤及自噬相关蛋白表达影响。方法:采用Feeney's自由落体硬膜外撞击法构建大鼠颅脑损伤模型,成年雄性SD大鼠随机分为对照(control)组、CI组及b FGF低、中和高剂量组,每组10只;对照组不给予硬膜外撞击,其它处理同模型组;b FGF低、中和高剂量组在建模成功30 min后分别给予2、4和6μg的b FGF腹腔注射,连续注射7 d。用改良神经功能评分法对大鼠神经功能进行评分。取大鼠脑组织,测定大鼠脑组织含水量,ELISA法测定脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,WST-8法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Western blot法测定脑组织中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和beclin-1的水平。结果:与control组相比,CI组神经功能评分明显升高(P <0.05);与CI组相比,b FGF低、中和高剂量组大鼠神经功能评分降低,脑组织含水量也降低(P <0.05),脑组织中TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低(P <0.05),MDA含量降低(P <0.05),SOD和GSH-Px活性升高(P <0.05),LC3-Ⅱ和bec-lin-1蛋白水平降低(P <0.05)。结论:b FGF能够改善颅脑损伤大鼠神经功能,降低脑组织含水量,减少自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和beclin-1的表达,这可能与其减轻炎症反应及氧化损伤有关。

关键词：颅脑损伤碱性成纤维细胞生长因子神经功能炎症自噬

干细胞、组织工程支架与神经营养因子在脊髓损伤治疗中的应用

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中国组织工程研究 2020年第25期24卷 4088-4093页

作者：季航宇顾军谢凌寒吴小涛东南大学附属中大医院脊柱外科江苏省南京市210009 东南大学附属中大医院无锡分院骨科江苏省无锡市214105

背景:干细胞具有多向分化潜能,组织工程支架可以为其提供支持,神经营养因子则可以促进干细胞的分化,3者联合移植治疗方案促进脊髓损伤功能恢复是当前研究热点之一。目的:综述近年来干细胞、组织工程支架、神经营养因子及其联合移植治疗... 详细信息

背景:干细胞具有多向分化潜能,组织工程支架可以为其提供支持,神经营养因子则可以促进干细胞的分化,3者联合移植治疗方案促进脊髓损伤功能恢复是当前研究热点之一。目的:综述近年来干细胞、组织工程支架、神经营养因子及其联合移植治疗脊髓损伤的研究进展。方法:作者检索PubMed、Sciencedirect、Medline、中国知网等数据库2000年1月至2019年10月的相关文章。英文检索词为“spinal cord injury,mesenchymal stem cells,issue engineering,neurotrophic factor”,中文检索词为“脊髓损伤,间充质干细胞,组织工程,神经营养因子”,检索文献类型为研究原著,初检文章712篇,再经过严格筛选后,对符合要求的79篇文献进行分类综述。结果与结论:单纯的干细胞移植并不能重建脊髓的复杂结构和稳定性,而单纯的生物材料、神经营养因子也不能替代脊髓损伤过程中的神经元丢失,因此联合移植是脊髓损伤治疗的研究方向。但是由于脊髓损伤的部位、损伤的组织及其修复时的营养需求各异,如何将干细胞、组织工程支架、神经营养因子联合的方案最优化仍是一个巨大的挑战。

关键词：脊髓损伤干细胞间充质干细胞组织工程支架神经营养因子

终末期肾病患者骨量异常风险预测模型的建立与验证

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中华肾脏病杂志 2024年第5期40卷 345-357页

作者：陆静王雨佳张玉霞陈志清李永琪伍敏汤日宁东南大学医学院南京210009 东南大学附属中大医院肾内科东南大学肾脏病研究所南京210009 东南大学附属中大医院溧水分院肾内科南京211200

目的旨在早期识别终末期肾病(end‐stage renal disease,ESRD)患者骨量异常的危险因素,并建立和验证骨量异常风险预测模型及构建动态列线图。方法本研究为回顾性横断面研究,回顾性收集2022年1月至2023年5月就诊于东南大学附属中大医院... 详细信息

目的旨在早期识别终末期肾病(end‐stage renal disease,ESRD)患者骨量异常的危险因素,并建立和验证骨量异常风险预测模型及构建动态列线图。方法本研究为回顾性横断面研究,回顾性收集2022年1月至2023年5月就诊于东南大学附属中大医院肾内科的ESRD患者的临床资料。按7∶3的比例将患者随机分为训练组和验证组,根据双能X线吸收测量仪测量的骨密度T值进一步将患者分为骨量正常组和骨量异常组。分别使用向后逐步Logistic回归、最小绝对值收敛和选择算子法(least absolute shrinkage and selection operator,LASSO)构建ESRD患者骨量异常风险预测模型。采用赤池信息准则(akaike information criterion,AIC)、贝叶斯信息准则(bayesian information criterion,BIC)和准确性评估两个模型的性能,进而选取最优模型。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)的曲线下面积(area under curve,AUC)、校准曲线、拟合优度检验(Hosmer‐Lemeshow test)和决策曲线(decision curve analysis,DCA)对最优模型进行评价以判断其区分度、校准度和临床实用性。在最优模型基础上,构建个体化动态列线图。结果最终共纳入254例ESRD患者,其中男性160例(63.0%),血液透析161例(63.4%),骨量异常202例(79.5%)。训练组(n=178)和验证组(n=76)骨量异常患病率差异无统计学意义(79.2%比80.3%,χ^(2)=0.036,P=0.849)。LASSO和逐步回归模型最终纳入的变量及变量参数一致,均为年龄、体重指数(body mass index,BMI)、高血压、糖尿病和骨钙素(osteocalcin,OC)5个变量。两个模型在训练组中的AIC、BIC和准确性也相同,分别为113.45、132.54和0.837。因此,本研究中LASSO模型和逐步回归模型性能一致,可视为同一模型,将其命名为Model。预测模型Model在训练组和验证组的AUC分别为0.923(95%CI 0.884~0.963)和0.809(95%CI 0.675~0.943),在训练组的最佳截断值为0.858,敏感性为0.801,特异性为0.973,准确性为0.837;取该截断值时,验证组的敏感性为0.689,特异性为0.800,准确性为0.711。校准曲线、拟合优度检验(P>0.05)和DCA曲线显示预测模型Model具有良好的校准度和临床应用价值。同时,使用预测模型的5个预测因子构建了动态列线图。结论基于预测模型,一个具有良好预测性能的动态列线图被构建,为ESRD患者骨量异常的早期筛查和辅助诊断提供了一种可视化的实用工具,有助于临床医师对患者进行个性化诊断。

关键词：肾功能衰竭,慢性骨和骨组织骨质疏松列线图终末期肾病骨量异常 LASSO回归预测模型

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发生于手部的栅栏状有包膜神经瘤

临床皮肤科杂志 2019年第4期48卷 220-221页

作者：陈诚董正邦崔成军王飞东南大学附属中大医院无锡分院皮肤科江苏无锡214000 东南大学附属中大医院皮肤科江苏南京210000

报告1例发生于手部的栅栏状有包膜神经瘤。患者男,82岁。右手拇指肤色结节10余年。皮肤科检查:右手拇指外侧一边界清楚,直径0.5 cm的肤色结节,表面光滑。皮损组织病理检查:表皮大致正常,真皮中部见边界清楚的圆形或卵圆形结节,周围有增... 详细信息

报告1例发生于手部的栅栏状有包膜神经瘤。患者男,82岁。右手拇指肤色结节10余年。皮肤科检查:右手拇指外侧一边界清楚,直径0.5 cm的肤色结节,表面光滑。皮损组织病理检查:表皮大致正常,真皮中部见边界清楚的圆形或卵圆形结节,周围有增厚的胶原纤维包膜,其内为相互交织的梭形细胞束,梭形细胞胞核细长,可见裂隙。免疫组化:肿瘤细胞S-100蛋白(+)及神经束膜细胞上皮膜抗原(EMA)(+)。诊断:栅栏状有包膜神经瘤。

关键词：神经瘤有包膜栅栏状

甲状旁腺素通过Wnt/β-catenin信号通路诱导内皮细胞发生内皮-脂肪细胞转分化

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中华肾脏病杂志 2019年第6期35卷 432-440页

作者：倪利华宋凯云汪晓晨王立婷张玉霞陈思洁郭雨汤日宁刘必成东南大学附属中大医院肾内科东南大学肾脏病研究所南京210009 东南大学附属中大医院溧水分院肾内科南京211200

目的观察甲状旁腺素(PTH)是否可诱导内皮细胞内皮-间充质转分化(EndMT)及进一步转化为脂肪细胞,并对其可能机制进行探讨。方法(1)动物实验:构建慢性肾脏病(CKD)合并甲状旁腺功能亢进大鼠模型。油红O脂肪染色检测大鼠骨髓脂肪组织含量,... 详细信息

目的观察甲状旁腺素(PTH)是否可诱导内皮细胞内皮-间充质转分化(EndMT)及进一步转化为脂肪细胞,并对其可能机制进行探讨。方法(1)动物实验:构建慢性肾脏病(CKD)合并甲状旁腺功能亢进大鼠模型。油红O脂肪染色检测大鼠骨髓脂肪组织含量,免疫荧光双染检测骨髓内皮细胞分化抗原31(CD31)和成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)的表达情况。(2)细胞实验:体外培养人脐静脉内皮细胞,使用Western印迹检测不同浓度(0、10-11、10-9、10-7 mol/L,48 h)及时间(0、12、24、48 h,10-7 mol/L PTH)PTH干预下EndMT标志物CD31、FSP1和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达变化及不同浓度PTH干预下核转录因子β连环蛋白(β-catenin)表达变化,免疫荧光观察CD31、FSP1和β-catenin的表达及定位。PTH干预后脂肪细胞培养基进一步诱导分化1周,Western印迹和油红O脂肪染色分别检测脂肪细胞标志物过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)、CCAAT增强子结合蛋白-α(C/EBP-α)的表达和细胞脂肪量。使用siRNA阻断β-catenin信号通路,分为对照siRNA组、β-catenin siRNA组、PTH+对照siRNA组和PTH+β-catenin siRNA组。Western印迹检测各组内皮细胞CD31、FSP1的蛋白表达及进一步诱导成脂后PPAR-γ的表达,油红O脂肪染色检测脂肪量。结果(1)CKD大鼠骨髓脂肪细胞多于对照组(P<0.05),骨髓内皮细胞存在CD31和FSP1共表达。(2)PTH干扰降低内皮细胞CD31的蛋白表达,增加FSP1和α-SMA表达,且呈浓度和时间依赖性。10-7 mol/L PTH组和48 h组以上指标分别与0 mol/L PTH组和0 h组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。10-7 mol/L PTH干预48 h细胞质大量表达FSP1,并伴随CD31表达减少。进一步诱导分化成脂,PTH组PPAR-γ和C/EBP-α蛋白表达、脂肪量均高于对照组(均P<0.05)。PTH干扰增加核转录β-catenin表达且呈浓度依赖性。10-7 mol/L PTH组β-catenin蛋白表达与0 mol/L PTH组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组β-catenin主要在细胞膜上表达,PTH组β-catenin大量进入细胞核中。与PTH+对照siRNA组比较,PTH+β-catenin siRNA组CD31、PPAR-γ蛋白表达和脂肪量均减少,FSP1蛋白表达增加(均P<0.05)。结论PTH可诱导内皮细胞通过EndMT发生内皮-脂肪细胞转分化,从而参与CKD骨质疏松的发生。其作用与经典Wnt/β-catenin信号通路有关,阻断β-catenin能减轻PTH诱导的EndMT和脂肪细胞形成。

关键词：慢性肾疾病-矿物质和骨代谢异常甲状旁腺素人脐静脉内皮细胞脂细胞 Wnt信号通路内皮间充质转分化

慢性腱病模型大鼠肌腱干细胞体外成脂和成肌腱的分化能力

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中国组织工程研究 2014年第45期18卷 7320-7326页

作者：陈辉林禹丞徐宏亮王宸芮云峰东南大学附属中大医院骨科江苏省南京市210000 东南大学附属中大医院无锡分院骨科江苏省无锡市214000

背景:慢性腱病是一种常见的肌腱退行性病变,好发于运动员以及肌腱过度劳损的人群。由于慢性腱病的发病机制尚未阐明,临床上还缺乏有效的治疗手段。目的:体外研究比较慢性腱病大鼠和正常大鼠来源肌腱干细胞成脂、成肌腱分化能力。方法:... 详细信息

背景:慢性腱病是一种常见的肌腱退行性病变,好发于运动员以及肌腱过度劳损的人群。由于慢性腱病的发病机制尚未阐明,临床上还缺乏有效的治疗手段。目的:体外研究比较慢性腱病大鼠和正常大鼠来源肌腱干细胞成脂、成肌腱分化能力。方法:从慢性腱病大鼠以及正常大鼠髌腱中分离培养原代肌腱干细胞,传代培养至第3代,体外观察细胞形态学变化。将两种来源肌腱干细胞(P3)单层培养至细胞融合,分为2组,成脂诱导组用成脂诱导培养基培养,对照组用基础培养基培养。成脂诱导分化21 d后,将两种来源肌腱干细胞的成脂诱导组和对照组分别行油红O染色定量分析。实时荧光定量PCR检测各组细胞成脂性基因C/EBPα和PPARγ2的m RNA的表达。将两种来源的肌腱干细胞体外单层培养至70%-80%融合时,行实时荧光定量PCR检测慢性腱病来源肌腱干细胞以及正常肌腱干细胞成肌腱相关基因Col1a1,Scx,Tnmd和Dcn的m RNA的表达。结果与结论:肌腱干细胞体外培养至第3代时,正常肌腱来源的肌腱干细胞保持细长纺锤形的典型的干细胞形态,而慢性腱病来源的肌腱干细胞虽然形态发生改变,但仍保持纺锤形形态。肌腱干细胞(P3)体外成脂诱导分化21 d后,慢性腱病来源的肌腱干细胞胞体变大、变圆,可见大量油红O染色阳性的细胞,油红O染色阳性率显著高于正常大鼠(P=0.004)。实时荧光定量PCR结果显示,慢性腱病大鼠来源肌腱干细胞的成脂性基因(C/EBPα和PPARγ2)m RNA的表达均显著高于正常大鼠(P=0.004),肌腱特异性基因Col1a1,Scx,Tnmd以及Dcn m RNA表达量均明显低于正常大鼠(P=0.009)。说明与正常大鼠来源的肌腱干细胞相比,慢性腱病来源的肌腱干细胞体外成肌腱分化的能力减弱,而成脂分化的能力增强,此结果为进一步揭示慢性腱病发病机制提供了细胞生物学依据。

关键词：干细胞分化肌腱干细胞慢性腱病髌腱成脂分化成肌腱分化油红O染色成脂性基因(C/EBPα PPARγ2) 肌腱特异性基因(Col1a1 Tnmd以及Dcn) 国家自然科学基金