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单个生物纳米颗粒分析技术与应用

生物工程学报 2024年第5期40卷 1352-1364页

作者：丁翊捷李彩玉张师音葛胜祥厦门大学公共卫生学院、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心、传染病疫苗研发全国重点实验室福建厦门361102

纳米检测技术在病毒、外泌体、小细菌和细胞器等生物医学研究中发挥着举足轻重的作用。目前已知最小的病毒颗粒直径仅为17nm,近20年来研究火热的外泌体的粒径范围在30-150nm之间。这些生物颗粒尺寸微小、生物性质复杂,因此难以被富集和... 详细信息

纳米检测技术在病毒、外泌体、小细菌和细胞器等生物医学研究中发挥着举足轻重的作用。目前已知最小的病毒颗粒直径仅为17nm,近20年来研究火热的外泌体的粒径范围在30-150nm之间。这些生物颗粒尺寸微小、生物性质复杂,因此难以被富集和检测,但却具有重要的研究价值。可以对单个纳米级颗粒检测和分析的技术正在被越来越广泛地应用到这一领域。一方面这些技术使得那些超过了光学检测下限的对象被灵敏、稳定地检测到;另一方面,这些技术也对这些微纳颗粒的各种其他性质提供了巧妙的分析手段。如今,已经有若干基于纳米技术的商品化仪器先后问世,这些系统提供了完整的单颗粒检测方案,并根据各自的技术优势实现了独有的功能。但是这些技术在应用和检测能力上仍存在一定的局限性。本文从几个主流的商品化仪器的技术原理出发,对其在应用中的优势、局限性以及未来的发展趋势进行了综述,为研究人员选择和正确使用纳米检测技术提供了参考。

关键词：生物纳米颗粒光学检测病毒细胞外囊泡标志物检测

BRACO-19和TMPyP4在HBV-1.3mer质粒感染模型对HBV转录和复制的抑制作用

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中国病原生物学杂志 2024年第9期19卷 999-1003,1008页

作者：马海洋贺丽娜吕树娟余莉安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽合肥230032 动物源性传染病安徽省重点实验室

目的探讨G-四链体小分子配体BRACO-19和TMPyP4对乙型肝炎病毒转录和复制的影响。方法利用含有HBV全基因组1.3倍复制子(HBV 1.3-mer)质粒转染HepG2细胞感染模型,BRACO-19和TMPyP4分别作用48 h,酶联免疫吸附试验检测上清表面抗原(HBsAg)和... 详细信息

目的探讨G-四链体小分子配体BRACO-19和TMPyP4对乙型肝炎病毒转录和复制的影响。方法利用含有HBV全基因组1.3倍复制子(HBV 1.3-mer)质粒转染HepG2细胞感染模型,BRACO-19和TMPyP4分别作用48 h,酶联免疫吸附试验检测上清表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)表达水平,实时荧光定量PCR检测细胞内HBV Total RNA、3.5kbRNA以及DNA表达水平,将HBV DNA用plasmid SafeTMATP-Dependent DNase 37℃作用3 h后,定量PCR检测病毒cccDNA的表达;QGRS Mapper软件分析HBV推定的四链体形成序列(putative quadruplex-forming sequences,PQS),并在HBV 1.3-mer质粒DNA上设计PQS区域上下游引物及非PQS区域对照引物,两种小分子配体分别作用HBV 1.3-mer质粒DNA,qPCR stop试验分别定量PQS和非PQS区域DNA扩增水平,1%琼脂糖凝胶电泳可视化验证。结果20μmol/L BRACO-19和TMPyP4作用HepG2转染模型显著抑制HBsAg和HBeAg的表达水平,HBV的Total RNA、3.5 kb RNA、DNA和cccDNA水平相较于对照组均显著下调。通过不同浓度BRACO-19和TMPyP4作用HBV质粒DNA,qPCR stop试验发现随着BRACO-19和TMPyP4药物浓度递增可以显著抑制DNA聚合酶在基因组中三个HBV PQS区域的扩增。结论小分子配体BRACO-19和TMPyP4均能抑制HBV转染模型中的转录和复制,HBV基因存在富含鸟嘌呤的四链体形成序列,BRACO-19和TMPyP4特异性阻滞DNA聚合酶在HBV的PQS区域复制延伸。

关键词：乙型肝炎病毒 BRACO-19 TMPyP4 PCR stop assay

核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎实现临床治愈的影响因素分析

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中华临床感染病杂志 2024年第2期17卷 126-132页

作者：胡晓宇季佳李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病重症诊治全国重点实验室杭州310003

目的探究核苷(酸)类似物[nucleos(t)ide analogues,NAs]联合聚乙二醇干扰素(pegylated interferon,Peg IFN)α-2a治疗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)实现临床治愈的影响因素。方法收集2013年1月1日至2023年12月1日在浙江大学医学院附属第一医院感染科门诊就诊并接受NAs与Peg IFNα-2a联合治疗≥48周的141例CHB患者临床资料,并进行回顾性分析。根据疗效分为临床治愈组(n=45)和临床未治愈组(n=96),通过多因素Logistic回归分析临床治愈的影响因素。结果多因素分析显示,基线HBsAg1 lg IU/mL(OR=0.114,95%CI 0.027~0.484,P=0.003)、使用经治策略(OR=0.351,95%CI 0.128~0.960,P=0.041)是预测联合治疗疗效的影响因素。结论经治策略疗效优于初治策略,治疗基线HBsAg水平<1500 IU/mL的病例相较基线水平高者更有希望获得临床治愈,基础疗程建议为48周,并可在48周时根据HBsAg下降程度评估是否延长治疗时间。

关键词：慢性乙型肝炎核苷(酸)类似物聚乙二醇干扰素α-2a 临床治愈

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手足口病疫苗的真实世界研究

中华微生物学和免疫学杂志 2024年第6期44卷 553-559页

作者：廖梦俊邱凌娴陈璐黄悦黄守杰程通吴婷厦门大学公共卫生学院传染病疫苗研发全国重点实验室翔安创新实验室厦门361102

手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种儿童常见传染病,已成为全球范围内特别是亚太地区的重大公共卫生问题之一,严重影响儿童健康,给家庭和社会造成了严重的疾病负担。全球现有3种HFMD疫苗(均为EV71灭活疫苗),于2016年先... 详细信息

手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种儿童常见传染病,已成为全球范围内特别是亚太地区的重大公共卫生问题之一,严重影响儿童健康,给家庭和社会造成了严重的疾病负担。全球现有3种HFMD疫苗(均为EV71灭活疫苗),于2016年先后在中国上市。上市后的真实世界研究显示,EV71相关的HFMD发病率、重症和死亡人数开始下降,表现出良好的保护效果,且数据显示疫苗后时代我国HFMD病原谱发生显著变化。本文旨在对EV71疫苗上市后的真实世界研究进行综述。

关键词：手足口病 EV71疫苗流行病学特征真实世界研究

利用分子传播网络分析昆明市HIV-1 CRF01_AE毒株流行特点

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中华疾病控制杂志 2024年第5期28卷 574-580,585页

作者：程鹏刘家法王佳丽杨翠先何保翠张米李健健董兴齐云南省传染病医院云南省艾滋病关爱中心检验科昆明650301 昆明医科大学公共卫生学院流行病学教研室昆明650000 云南省传染病医院云南省艾滋病关爱中心首席专家办公室昆明650301

目的通过构建昆明市HIV-1 CRF01_AE毒株的分子传播网络,分析其流行特征并观察动态流行趋势,从而为当地制定疫情防控干预措施提供科学依据。方法选择2015―2021年云南省传染病医院接受治疗的253例昆明市HIV-1 CRF01_AE新发感染患者作... 详细信息

目的通过构建昆明市HIV-1 CRF01_AE毒株的分子传播网络,分析其流行特征并观察动态流行趋势,从而为当地制定疫情防控干预措施提供科学依据。方法选择2015―2021年云南省传染病医院接受治疗的253例昆明市HIV-1 CRF01_AE新发感染患者作为研究对象。运用反转录巢式聚合酶链式反应成功扩增其基因序列,序列比对后导入HyPhy 2.2.4软件进行成对基因距离的计算。运用GraphPad-Prism 8.0软件确定最佳基因距离阈值,使用Cytoscope 3.7.2软件实现网络可视化。运用Network-Analyzer和MCODE(Molecular Complex Detection)工具进行网络特征分析。结果在0.018最佳基因距离阈值下,253个研究对象中有118个(46.64%)进入网络分析,共形成了38个分子簇,其组成大小从2到17个节点不等。网络集群主要以异性传播(51.78%)和同性传播(37.94%)为主,年龄段主要分布于20~40岁(77.47%)。网络所有节点的总链接数为226,单个节点最高链接数为10。MCODE确定了3种重要的分子簇,3个分子簇分别定义为B、C、D型,B型由17个节点和19链接数组成,为同性传播集群呈低增长状态。C和D型均由5个节点和10链接数组成,为异性传播集群且呈静止状态。结论昆明市HIV-1 CRF01_AE毒株分子传播网络中的分子簇具有一定特殊性和聚集性。同性传播和异性传播人群已经成为昆明市HIV-1 CRF01_AE毒株感染的两大风险群体,同时两个群体还有发生交叉传播的现象。传播网络中有一个同性传播组成的集群规模较大,其传播风险和活跃度较高,需加强对其监测,并制定针对性的干预措施对集群中的“核心人群”进行防控。

关键词： HIV-1 CRF01_AE 分子传播网络成对基因距离分子簇

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中国鸽毛滴虫病的流行规律及中西医防治措施

中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 229-236页

作者：梁冰冰尉啸涵李复煌李秋明刘晓晔董虹北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京102206 北京市畜牧兽医总站北京100029 北京大学北京100871

鸽子是中国四大家禽产品之一,家鸽、肉鸽和观赏鸽等鸽养殖行业在中国各地区繁育广泛,然而由鸽源禽毛滴虫引起的一种导致鸽子消瘦、腹泻、生长发育迟缓等症状的寄生性单细胞原虫病的鸽毛滴虫病,阻碍兽医临床鸽养殖业的发展,带来的巨大经... 详细信息

鸽子是中国四大家禽产品之一,家鸽、肉鸽和观赏鸽等鸽养殖行业在中国各地区繁育广泛,然而由鸽源禽毛滴虫引起的一种导致鸽子消瘦、腹泻、生长发育迟缓等症状的寄生性单细胞原虫病的鸽毛滴虫病,阻碍兽医临床鸽养殖业的发展,带来的巨大经济损失。本文就中国鸽毛滴虫病的流行病学规律、毛滴虫检测方法进行综述,并总结归纳中西医防治毛滴虫病的策略,为防治临床鸽毛滴虫病相关疾病提供参考。

关键词：鸽毛滴虫流行规律中西医防治方案

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动物病原感染性呼吸系统疾病兽药研究进展及新药研发趋势分析

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畜牧兽医学报 2024年

作者：蔡子雯孙志刚司晓慧吕若一刘晓晔北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室北京农学院动物科学技术学院

动物病原感染性呼吸系统疾病对畜禽养殖业和宠物医疗构成重大挑战，病原体导致的传染性疾病不仅危害动物健康，也影响人类公共卫生安全。目前，针对这些疾病的新兽药开发面临瓶颈。本文重点归纳总结我国动物病原感染性呼吸疾病兽药的研... 详细信息

动物病原感染性呼吸系统疾病对畜禽养殖业和宠物医疗构成重大挑战，病原体导致的传染性疾病不仅危害动物健康，也影响人类公共卫生安全。目前，针对这些疾病的新兽药开发面临瓶颈。本文重点归纳总结我国动物病原感染性呼吸疾病兽药的研究进展，针对我国动物病原感染性呼吸系统疾病兽药种类、研发时间、用药规律，以及兽药剂型等特点进行了全面总结，以期归纳我国动物病原感染性呼吸道疾病兽药研发进展。同时本文针对动物呼吸系统兽药中化药和中药类别、剂型、临床应用等特点，分析出我国新兽药的未来研发趋势需要侧重于现有药物的高效应用，重点研究药物剂型优化和多靶点药物的开发，本文旨在为有效防控动物病原感染性呼吸系统疾病提供用药方案，为兽医临床新兽药未来研发的方向提供参考。

关键词：兽药动物呼吸系统疾病研究进展新药研发趋势

刚地弓形虫致密颗粒蛋白24多克隆抗体的制备与初步应用

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第3期36卷 279-285页

作者：付胜男杨云王聪罗庆礼余莉安徽医科大学基础医学院微生物学教研室、动物源性传染病安徽省重点实验室、人畜共患病安徽高校省级重点实验室安徽合肥230032

目的制备并鉴定鼠抗刚地弓形虫致密颗粒蛋白24(dense granule protein 24,GRA24)多克隆抗体,并探索其初步应用。方法利用MEGA-X软件比对弓形虫不同虫株GRA24编码区序列,使用Protean软件分析GRA24蛋白优势肽段,通过PCR反应扩增编码该肽... 详细信息

目的制备并鉴定鼠抗刚地弓形虫致密颗粒蛋白24(dense granule protein 24,GRA24)多克隆抗体,并探索其初步应用。方法利用MEGA-X软件比对弓形虫不同虫株GRA24编码区序列,使用Protean软件分析GRA24蛋白优势肽段,通过PCR反应扩增编码该肽段的碱基序列,并连接至p ET-28a载体中。将获得的GRA24截短蛋白原核表达质粒转化于大肠埃希菌BL21感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测蛋白表达与纯化。使用纯化的GRA24截短蛋白皮下注射免疫BALB/c小鼠获得GRA24截短蛋白多克隆抗体,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体效价,采用Western blotting检测抗体特异性,并将该抗体应用于免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)。结果SDS-PAGE结果表明成功构建重组质粒,考马斯亮蓝染色结果显示获得高纯度重组GRA24截短蛋白。ELISA结果显示,GRA24截短蛋白多克隆抗体效价在1∶208400以上;Western blotting检测发现,该抗体可识别弓形虫不同虫株内源性GRA24蛋白,特异性识别重组GRA24截短蛋白;间接IFA检测发现,弓形虫入侵宿主细胞16 h后分泌的GRA24蛋白定位于宿主细胞核中。结论成功制备广适性、高效价、强特异性的抗弓形虫GRA24多克隆抗体,可应用于Western blotting与IFA,为进一步研究GRA24功能奠定了基础。

关键词：刚地弓形虫致密颗粒蛋白24 多克隆抗体免疫荧光

2010-2021年中国发热伴血小板减少综合征流行病学分析

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疾病监测 2024年第7期39卷 824-830页

作者：岳玉娟任东升鲁亮中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室北京102206

目的分析2010—2021年中国发热伴血小板减少综合征(SFTS)发病、死亡以及在高发区的流行病学特征。方法采用集中度、圆形分布、空间制图等描述性流行病学方法分析SFTS的时间、空间和人群特征,采用χ^(2)检验分析高发区人群特征差异。结果... 详细信息

目的分析2010—2021年中国发热伴血小板减少综合征(SFTS)发病、死亡以及在高发区的流行病学特征。方法采用集中度、圆形分布、空间制图等描述性流行病学方法分析SFTS的时间、空间和人群特征,采用χ^(2)检验分析高发区人群特征差异。结果2010—2021年我国27个省份报告18968例SFTS病例,年均发病率为0.11/10万;有11个省份报告死亡病例973例,病死率为5.13%。病例分布具有季节性,呈单峰分布,高峰期在5—8月。2010—2021年发病率上升、回落再上升,而病死率下降。山东、河南、安徽、湖北和辽宁省的病例数占92.97%,死亡数占89.21%,并由此向西南、东北、东部、西部方向扩散。男女性别比为0.89∶1,50岁以上人群发病率较高,农民占86.02%;死亡病例中男女性别比为1.12∶1。河南省病例数在2015年达峰值后明显回落。2018年以来,山东和安徽省病例数居前2位。辽宁省病例男女性别比为1.15∶1,其余4省均女性多于男性。结论2010—2021年中国SFTS发病率呈上升趋势,病死率呈下降趋势,病例分布由高发区向西南、东北、东部、西部呈逐步扩张趋势。建议在有病例发生的地区加强SFTS预防知识的宣传教育,对于患者尽量做到早发现、早治疗,防止疫情扩散。

关键词：发热伴血小板减少综合征流行病学高发区