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紫色红曲霉磁受体IscA1的基因克隆及功能分析

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西北农业学报 2021年第5期30卷 752-760页

作者：黄胜男刘应保张佳兰高梦祥长江大学生命科学学院湖北荆州434025

为初步揭示磁受体IscA1在紫色红曲霉中的生物学功能,采用同源克隆方法,经PCR扩增和DNA测序,获得紫色红曲霉(Monascus purpureus SKY219)中IscA1的编码区序列。进一步的生物信息学分析发现,IscA1蛋白具有典型的Fe-S簇生物合成超家族和磁... 详细信息

为初步揭示磁受体IscA1在紫色红曲霉中的生物学功能,采用同源克隆方法,经PCR扩增和DNA测序,获得紫色红曲霉(Monascus purpureus SKY219)中IscA1的编码区序列。进一步的生物信息学分析发现,IscA1蛋白具有典型的Fe-S簇生物合成超家族和磁受体的保守结构域,含有60个可能的磷酸化修饰位点,为不稳定的亲水蛋白,主要定位于线粒体。其二、三级结构组成以无规则卷曲为主,其次是α-螺旋、β-转角。蛋白互作的分析结果发现,IscA1可以与Fe-S簇装配辅助蛋白IscA2及Grx5发生非特异性结合,IscA1和Grx可以被分子伴侣DnaJ蛋白激活,IscA1和不同蓝光受体蛋白之间存在较强的亲和力。表明IscA1在紫色红曲霉的Fe-S簇合成和磁感应中发挥重要作用。

关键词：磁受体 IscA1基因紫色红曲霉基因克隆生物信息分析

太湖周边地下水中高硝酸盐负荷促进反硝化功能菌群富集

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中国环境科学 2024年

作者：王卓群陈扣平吴吉春王保战柳旭南京大学地球科学与工程学院南京农业大学生命科学学院

反硝化功能菌群在降解硝态氮污染中发挥着重要作用，目前对其内部种间关系与硝酸盐负荷的联系仍了解有限.太湖周边地区地下水资源是重要的储备水源，但部分区域的地下水硝酸盐负荷超出了范围.本研究以太湖周边地区14个不同硝酸盐浓度的... 详细信息

反硝化功能菌群在降解硝态氮污染中发挥着重要作用，目前对其内部种间关系与硝酸盐负荷的联系仍了解有限.太湖周边地区地下水资源是重要的储备水源，但部分区域的地下水硝酸盐负荷超出了范围.本研究以太湖周边地区14个不同硝酸盐浓度的地下水样品作为研究对象，运用微生物测序技术探究了地下水细菌群落多样性并识别出反硝化功能菌群，通过共现网络分析探究了反硝化功能菌群内部种间关系对硝酸盐负荷的响应.结果表明:(1)高硝态氮组与低硝态氮组间细菌群落组成存在显著差异;(2)细菌群落α多样性、β多样性受到硝酸盐负荷的显著影响;(3)高硝态氮组地下水反硝化功能菌群内部种间关系较低硝态氮组更为密切.本研究表明地下水硝酸盐负荷对反硝化功能菌群内部种间关系具有显著影响，为太湖周边地区地下水反硝化功能菌群与硝态氮的互作机制研究提供了新的见解.

关键词：太湖地下水微生物多样性硝态氮共现网络

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一株粘细菌H-1的分离鉴定及抗菌活性分析

内蒙古农业大学学报（自然科学版） 2012年第3期33卷 130-135页

作者：陶龙鑫刘沛生冯福应刘惠荣内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010018

粘细菌是一类具有复杂的多细胞行为的革兰氏阴性细菌。其代谢产物具有丰富,多样,新颖的生物活性,具有极大的研究价值。本文采用兔粪诱导的方法,对内蒙古贺兰山土壤中分离到的一株粘细菌(H-1)进行了子实体和菌落形态学的初步观察、生理... 详细信息

粘细菌是一类具有复杂的多细胞行为的革兰氏阴性细菌。其代谢产物具有丰富,多样,新颖的生物活性,具有极大的研究价值。本文采用兔粪诱导的方法,对内蒙古贺兰山土壤中分离到的一株粘细菌(H-1)进行了子实体和菌落形态学的初步观察、生理生化和分子鉴定、抗细菌与抗真菌的活性分析。结果显示,该菌株具有与黄色粘球菌相似的形态及生理生化特征,且其16S rDNA序列与黄色粘球菌的16S rDNA序列具有100%的同源性,说明该菌株为黄色粘球菌。抗菌活性表明,H-1菌株具有明显的抗大肠杆菌活性,也具有一定的抗枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌活性。该菌株对酿酒酵母、马铃薯晚疫病菌和核盘菌等真菌也有一定的抑制作用,但对黑痣病菌无明显抗性。该工作的完成为内蒙古地区粘细菌的深入研究及新药研发奠定了基础。

关键词：粘细菌分离鉴定抗菌活性

转基因豆粕MON89788对生长期蛋鸡生长性能、血液生理生化指标的影响

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饲料研究 2013年第8期36卷 16-19,47页

作者：刘文达周传凤史雪萍徐玉王述柏青岛农业大学动物科技学院青岛农业大学生命科学学院

试验将960只1日龄海兰褐健康雏鸡随机分为4组,对照组(1组)饲喂非转基因豆粕基础日粮,试验组(2、3和4组)分别以25%、50%和100%转基因豆粕代替饲粮中的非转基因豆粕。试验期90 d。试验结果表明:在1～42和43～90 d,2、3和4组的试验鸡与1组... 详细信息

试验将960只1日龄海兰褐健康雏鸡随机分为4组,对照组(1组)饲喂非转基因豆粕基础日粮,试验组(2、3和4组)分别以25%、50%和100%转基因豆粕代替饲粮中的非转基因豆粕。试验期90 d。试验结果表明:在1～42和43～90 d,2、3和4组的试验鸡与1组相比,日增质量、日采食量、料重比和成活率均差异不显著(P>0.05)。90 d时,3个试验组所测的9项血液常规指标和13项血清生化指标与1组比较均差异不显著(P>0.05)。说明与对照组相比,饲喂转基因豆粕(MON89788)未对海兰褐蛋鸡1～90日龄的生长性能和血液生理生化指标造成显著影响。

关键词：转基因豆粕生长期蛋鸡生长性能血液生理生化

烟草根皮层原生质体质膜钾通道的特性研究(英文)

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武汉植物学研究 2005年第6期23卷 524-529页

作者：刘卫群王卫民石永春宋纯鹏河南农业大学农学院郑州450002 河南大学生命科学学院开封475001

采用膜片钳技术对烟草根皮层原生质体质膜上的钾通道进行全细胞记录,从而深入研究烟草K+的吸收机制和调控机理。结果表明,内向钾通道在膜电压低于-40 mV时,可以被K+激活。内向电流可以被钾通道的专一抑制剂TEA+抑制。动力学分析表明内... 详细信息

采用膜片钳技术对烟草根皮层原生质体质膜上的钾通道进行全细胞记录,从而深入研究烟草K+的吸收机制和调控机理。结果表明,内向钾通道在膜电压低于-40 mV时,可以被K+激活。内向电流可以被钾通道的专一抑制剂TEA+抑制。动力学分析表明内向钾电流产生的K+表观解离常数(Km)≈15.2 mm o l/L,类似于低亲和性钾通道。该通道具有依赖于胞外K+浓度的特性,对胞外NH4+、C a2+、M g2+浓度变化反应敏感,内向K+电流可被不同程度地抑制。

关键词：膜片钳 K^+通道烟草全细胞吸收机制

棉铃虫钙粘蛋白N端多肽多克隆抗体制备及对Bt抗性的初步检测

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昆虫知识 2010年第2期47卷 293-298页

作者：黄晶晶韩斌常菊花沈文飚沈晋良南京农业大学生命科学学院南京210095 南京农业大学植物保护学院南京210095

用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定。通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,在... 详细信息

用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定。通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到pET-30a原核表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,得到35ku的重组融和蛋白,融合表达的包涵体经过变性、Ni-NTA柱亲和纯化、复性等方法处理包涵体,获得可溶性纯化蛋白,用纯化后蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA检测其效价高于1∶16000;利用最终获得的多克隆抗体对室内纯合Bt抗/感品系的棉铃虫中肠钙粘蛋白进行Western blot分析,结果显示敏感和抗性品系之间有明显差异,表明其能够应用对Bt抗性进行初步检测。

关键词：棉铃虫钙粘蛋白原核表达多克隆抗体 Bt抗性

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内蒙古西部地区土壤真菌的多样性分析

科学技术与工程 2020年第35期20卷 14447-14454页

作者：马强夏冬双武志华王雪寒任兴波丁一秀刘惠荣内蒙古农业大学生命科学学院呼和浩特010018

为明确内蒙古西部地区土壤真菌的多样性,从内蒙古西部地区采集土壤样品170份,提取土壤样品的总DNA,通过聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis PCR-DGGE),对真菌的丰富度... 详细信息

为明确内蒙古西部地区土壤真菌的多样性,从内蒙古西部地区采集土壤样品170份,提取土壤样品的总DNA,通过聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis PCR-DGGE),对真菌的丰富度和香农指数进行分析,并研究了土壤真菌多样性与土壤类型、土壤利用方式及土壤环境参数的相关性。结果显示,内蒙古西部地区土壤真菌的多样性较为丰富,丰富度指数处于11~25.4,香农指数处于2.33~3.17。在内蒙古西部同一地区的不同类型土壤中的真菌多样性差异显著。其中,棕钙土、栗钙土、石质土的丰富度最高,草甸土最低;同一地区相同类型土壤中草地的真菌数量比耕地丰富,林地土壤真菌数量相对较少,未利用土壤真菌多样性指数最低。真菌多样性与土壤环境参数的相关性分析结果显示二者之间并无显著的相关性。经过18S rRNA基因序列比对共得到了9个属的真菌,Penicillium(青霉属)、Aureobasidium(短柄霉属)、Pyrenochata(棘壳菌属)、Rhodocybella(红盖菇属)、Vanderwaltozyma、Kazachstania、Cystofilobasidium、Saccharomyces(酵母菌属),还有一株未被培养的优势菌。内蒙古西部地区的真菌资源较为丰富,其多样性受土壤类型及利用方式影响较大,作为与人类活动息息相关的一种重要的微生物资源,研究成果为今后该地区真菌资源的开发利用奠定了基础。

关键词：聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE) 土壤真菌多样性内蒙古

食药用菌表观遗传和蛋白质翻译后修饰研究进展

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食用菌学报 2024年第2期31卷 1-9页

作者：王子仇昊李烨凡刘锐赵明文南京农业大学生命科学学院江苏南京210095

食药用菌具有较高的营养价值和药用价值。随着人们对健康的重视程度日益提高,对食药用菌的需求量也不断增加。表观遗传和蛋白质翻译后修饰不仅调控食药用菌的生长发育,还调控食药用菌的次级代谢产物合成。笔者综述了近年来食药用菌中表... 详细信息

食药用菌具有较高的营养价值和药用价值。随着人们对健康的重视程度日益提高,对食药用菌的需求量也不断增加。表观遗传和蛋白质翻译后修饰不仅调控食药用菌的生长发育,还调控食药用菌的次级代谢产物合成。笔者综述了近年来食药用菌中表观遗传和蛋白质翻译后修饰的研究进展,以期为食药用菌的菌株改良,精准栽培及行业发展提供参考。

关键词：食药用菌表观遗传蛋白质翻译后修饰次级代谢产物生物合成

猪雌激素受体基因PvuII多态性与产仔数性状的关系

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遗传 2002年第3期24卷 267-270页

作者：柳淑芳杜立新闫艳春山东农业大学动物科技学院泰安271018 山东农业大学生命科学学院泰安271018

雌激素受体 (estrogenreceptor ,ESR)能调控雌激素的合成 ,影响繁殖功能。将ESR基因作为控制猪产仔数的候选基因 ,分析其PvuII多态性与高产猪种莱芜猪和国外引进猪种长白猪产仔数的关系。序列分析发现 ,PCR扩增区 5 6bp的PvuII酶切片段... 详细信息

雌激素受体 (estrogenreceptor ,ESR)能调控雌激素的合成 ,影响繁殖功能。将ESR基因作为控制猪产仔数的候选基因 ,分析其PvuII多态性与高产猪种莱芜猪和国外引进猪种长白猪产仔数的关系。序列分析发现 ,PCR扩增区 5 6bp的PvuII酶切片段位于RFLP分析获得的 3 7kb正向序列的起始部分。因ESR基因在高产仔数的莱芜猪中的PvuII多态性分布不能证实B基因为优势基因 ,故推测 3 7kb条带对该猪种产仔数可能不起决定作用。

关键词：猪雌激素受体基因 PvuⅡ多态性产仔数性状