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上海5家宠物医院环境不动杆菌的耐药性检测及一株皮特不动杆菌的测序分析

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微生物学通报 2025年第2期 725-735页

作者：张玉杰王晓旭徐锋沈莉萍鞠龚讷唐聪圣齐新永徐平王建上海市动物疫病预防控制中心

【背景】不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境... 详细信息

【背景】不动杆菌属(Acinetobacter)细菌是医院感染常见的条件致病菌，其耐药菌株的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】了解上海市宠物医院环境中不动杆菌属的流行现状及耐药性。【方法】从上海市5个区的5家宠物医院采集环境样品，经细菌分离、纯化后利用细菌鉴定质谱仪鉴定分离株种属，并通过微量肉汤稀释法检测不动杆菌属分离株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)，并对其中1株耐碳青霉烯类分离菌进行基因组测序及遗传特征分析。【结果】730份环境样品共分离获得124株革兰氏阴性菌，经鉴定14株属于不动杆菌属，其中9株为鲁氏不动杆菌(A. lwoffii)。14株不动杆菌均对米诺环素敏感，但其中2株皮特不动杆菌(A. pittii)和2株鲁氏不动杆菌为碳青霉烯类多重耐药不动杆菌，5株鲁氏不动杆菌对复方新诺明耐药，1株约氏不动杆菌(A. johnsonii)对环丙沙星耐药。基因组测序结果表明，碳青霉烯类多重耐药皮特不动杆菌携带NDM-1、OXA-500和OXA-727等相关耐药基因，多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)结果表明分离株为ST1037型，单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)分析该菌株与来源于浙江省的临床尿液分离株A. pittii AP43的进化距离最近。【结论】上海市5家宠物医院环境中的不动杆菌分离株耐药率较低(<40%)，存在多重耐药现象(5株不动杆菌分别耐≥3种药物)且皮特不动杆菌携带多种耐药基因。

关键词：宠物医院不动杆菌属碳青霉烯耐药性测序

某父母代种鸡场肠炎沙门菌的分离与感染情况调查

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黑龙江畜牧兽医 2025年第2期 74-78页

作者：吴惠明张硕张启龙刘晓冬刘海莹李志军郑博君殷雨晴梅力高晓龙罗伏兵李刚北京市动物疫病预防控制中心北京102629

为了解某父母代种鸡场肠炎沙门菌的感染情况,试验采集37,45,53周龄肉鸡的泄殖腔拭子、环境拭子等共661份临床样品进行禽沙门菌的分离培养,并对分离菌株进行了生化鉴定、PCR鉴定、血清学鉴定,另外对采集的15,28,37,53周龄鸡血清进行D群... 详细信息

为了解某父母代种鸡场肠炎沙门菌的感染情况,试验采集37,45,53周龄肉鸡的泄殖腔拭子、环境拭子等共661份临床样品进行禽沙门菌的分离培养,并对分离菌株进行了生化鉴定、PCR鉴定、血清学鉴定,另外对采集的15,28,37,53周龄鸡血清进行D群沙门菌抗体检测。结果表明:共分离得到48株疑似禽沙门菌,分别命名为3701,4501~4530,5301~5317。其中1株来源于37周龄养殖环节的泄殖腔拭子样品(分离率为0.9%),30株来源于45周龄孵化环节的死鸡胚样品(分离率为75.0%),17株来源于53周龄孵化环节的死鸡胚样品(分离率为28.3%)。48株分离菌均符合沙门菌的生化特性,经PCR鉴定均为肠炎沙门菌。48株肠炎沙门菌均与O9、O12、Hg、Hm血清凝集,均属于D群肠炎沙门菌。鸡群15周龄时血清D群沙门菌抗体均为阴性;28周龄时血清D群沙门菌抗体开始转阳,平均阳性率为11.3%;37周龄时血清D群沙门菌抗体平均阳性率为48.6%;53周龄时血清D群沙门菌抗体平均阳性率为71.0%。说明该种鸡场鸡群在28周龄前就已经感染了肠炎沙门菌,53周龄时仍有部分感染鸡在持续排菌。

关键词：肠炎沙门菌细菌分离抗体阳性率调查禽沙门菌

2020—2021年上海市马传染病血清学检测结果与分析

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畜牧与兽医 2025年第1期57卷 86-90页

作者：向蒙冯桂丹杨显超夏炉明吴秀娟卢军赵洪进王建上海市动物疫病预防控制中心上海201103

旨在了解上海市马传染病的流行现状,为上海市马传染病防控和净化提供参考。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2020—2021年上海地区16个马场采集的571份马匹的血清样品进行了西尼罗河热、马流感、马传染性贫血、非洲马瘟、马病毒性动脉炎... 详细信息

旨在了解上海市马传染病的流行现状,为上海市马传染病防控和净化提供参考。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2020—2021年上海地区16个马场采集的571份马匹的血清样品进行了西尼罗河热、马流感、马传染性贫血、非洲马瘟、马病毒性动脉炎、日本脑炎、马鼻疽、马媾疫、伊氏锥虫病以及马梨形虫病(马巴贝斯虫和马驽巴贝斯虫)抗体检测。结果:西尼罗河热、马流感、日本脑炎、马巴贝斯虫病、马驽巴贝斯虫病抗体阳性率分别由2020年的18.16%、68.28%、0.24%、12.35%、0.24%下降到2021年的10.76%、57.59%、0、10.76%、0;马传染性贫血、非洲马瘟、伊氏锥虫病、马媾疫、马病毒性动脉炎、马鼻疽均无阳性病例。分析表明,上海马场传染病的总体阳性率2021年比2020年低,呈明显下降趋势。

关键词：上海市马传染病 ELISA 血清学调查

基于山羊痘病毒融合蛋白的间接ELISA检测方法的建立及初步应用

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中国动物传染病学报 2025年

作者：肖琨王永璇田芬彭郁霖胡鹏飞程振涛六盘水市动物疫病预防控制中心贵州大学动物科学学院贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室盘州市动物疫病预防控制中心

为建立山羊痘病毒（GTPV）间接ELISA检测方法，本研究表达出了GTPV 059-P32-L1R融合蛋白作为检测抗原，优化各试验条件并进行评价。结果显示，重组059-P32-L1R蛋白以包涵体形式表达，经Western blot鉴定可知其具有良好的抗原性。经优化... 详细信息

为建立山羊痘病毒（GTPV）间接ELISA检测方法，本研究表达出了GTPV 059-P32-L1R融合蛋白作为检测抗原，优化各试验条件并进行评价。结果显示，重组059-P32-L1R蛋白以包涵体形式表达，经Western blot鉴定可知其具有良好的抗原性。经优化后的间接ELISA方法中，059-P32-L1R蛋白的包被浓度为0.5 μg/mL；阳性血清1:800稀释后，OD450仍大于0.344，敏感性好；对GTPV具有特异性；批内及批间的重复变异系数均小于10.9%；与商用试剂盒检测符合率达95.8%。本研究成功表达出GTPV重组059-P32-L1R融合蛋白，并建立了间接ELISA检测方法，为GTPV的防控技术研究提供了工具与参考。

关键词：山羊痘病毒原核表达酶联免疫吸附试验融合蛋白

全预混冻干非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR试剂的研究和初步应用

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中国动物传染病学报 2025年

作者：马静钟斐刘琳张军汪葆玥胡冬梅毕一鸣徐琦顾小雪刘玉良倪建强周智任永强李琦中国动物疫病预防控制中心华润科学技术研究院有限公司

非洲猪瘟的防控有赖于及时准确的诊断，荧光PCR是检测非洲猪瘟病毒的主要技术。本研究通过优化冻干工艺研制出非洲猪瘟病毒全预混荧光PCR试剂，检测过程中只需要加入去离子水和待检核酸就可以完成检测，降低了操作误差，检测灵敏度可达... 详细信息

非洲猪瘟的防控有赖于及时准确的诊断，荧光PCR是检测非洲猪瘟病毒的主要技术。本研究通过优化冻干工艺研制出非洲猪瘟病毒全预混荧光PCR试剂，检测过程中只需要加入去离子水和待检核酸就可以完成检测，降低了操作误差，检测灵敏度可达1拷贝/微升。稳定期和加速稳定性试验表明，37和50℃30天检测性能不受影响。同时，配套使用便携式Q3-Plus荧光PCR仪，在50min内可完成核酸检测，且可直接连接手机读取信号，无需电脑等设施。对218份临床样品的检测表明，冻干试剂和现配试剂的阳性率均为38.99% （85/218），相符性为100% 。本试验研制的全预混非洲猪瘟病毒荧光PCR试剂具有便于运输、准确性高、仪器拓展性好的特点，对在养殖场的现地检测有重要意义。

关键词：非洲猪瘟病毒荧光PCR 冻干试剂全预混

基于猪流行性腹泻病毒S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法的建立

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中国兽医科学 2025年第1期55卷 73-79页

作者：柴茂马震原杨海波王淑娟赵雪丽刘影王东方王翠谢彩华闫若潜河南省动物疫病预防控制中心河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室河南商郑州450000

为建立基于猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法,利用真核表达系统表达PEDV S蛋白主要抗原区,将纯化的S蛋白免疫小鼠后制备抗PEDV S蛋白的单克隆抗体,经各组分和反应条件优化,建立了检测PEDV S蛋白抗体的竞争ELISA方... 详细信息

为建立基于猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法,利用真核表达系统表达PEDV S蛋白主要抗原区,将纯化的S蛋白免疫小鼠后制备抗PEDV S蛋白的单克隆抗体,经各组分和反应条件优化,建立了检测PEDV S蛋白抗体的竞争ELISA方法。结果表明,表达的S蛋白大小为92 k Da,制备出IgG1亚类的抗S蛋白单克隆抗体5B3D6,建立的竞争ELISA方法S/N临界值为0.400,样品检测时间短(55 min),重复性稳定(变异系数小于10%),特异性强(无交叉反应),与血清中和试验的总符合率高(97.08%)。该方法为PEDV抗体评估和猪流行性腹泻防控提供了有力支撑。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白单克隆抗体竞争ELISA

2016—2023年上海市浦东新区和松江区畜禽源大肠埃希菌耐药性比较

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 38-47页

作者：方雅红张妤孙冰清姜芹龚志亮李闽商军张亦菲上海市动物疫病预防控制中心上海长宁201103 上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海浦东201299 上海市松江区动物疫病预防控制中心上海松江201699

为了调查2016—2023年上海市浦东新区和松江区(下文简称“两区”)畜禽源大肠埃希菌(***)的耐药性变迁情况,本试验从两区畜禽养殖场分别采集401和490份畜禽肛拭子进行大肠埃希菌的分离鉴定,并调查养殖场的抗菌药物使用情况;采用微量肉汤... 详细信息

为了调查2016—2023年上海市浦东新区和松江区(下文简称“两区”)畜禽源大肠埃希菌(***)的耐药性变迁情况,本试验从两区畜禽养殖场分别采集401和490份畜禽肛拭子进行大肠埃希菌的分离鉴定,并调查养殖场的抗菌药物使用情况;采用微量肉汤稀释法测定分离的大肠埃希菌对10大类14种抗菌药物的敏感性。结果显示,两区不同养殖场的抗菌药物使用情况存在差异。两区分别分离到333和350株大肠埃希菌,分离率为83.04%和71.43%。两区分离菌株对四环素(87.09%,82.00%)、磺胺异噁唑(77.78%,82.00%)、氨苄西林(82.58%,70.30%)和复方新诺明(70.87%,76.90%)的耐药率较高,对头孢他啶(6.61%,6.90%)和黏菌素(0.90%,0.90%)较为敏感,未检测到美罗培南耐药菌株;多重耐药菌株占比分别为87.99%和81.71%。8年间,两区分离菌株对多数抗菌药物的耐药率、多重耐药菌株占比和耐药谱数量整体呈下降趋势,松江区下降趋势更明显。结果表明,浦东新区和松江区畜禽源大肠埃希菌对部分抗菌药物的耐药率高且多重耐药情况严重,在减抗背景下,两区耐药水平均有缓解,松江区缓解程度更大。

关键词：大肠埃希菌耐药性兽用抗菌药减量化行动浦东新区松江区

“检测淘汰法”在温州地区规模猪场动物疫病净化中的应用

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浙江农业科学 2025年第1期66卷 189-192页

作者：吴波章国永赵妍麻武飞周轩伦温州市动物疫病预防控制中心浙江温州325000 苍南县动物疫病预防控制中心浙江苍南325800

为推动及改进规模猪场动物疫病净化,该试验以“检测淘汰法”为核心,以本底调查、免疫程序优化、免疫干扰分析和生物安全体系改进等为配套的净化集成技术,将温州一个规模猪场作为示范场点,以O型口蹄疫和非洲猪瘟为净化对象。净化实施后... 详细信息

为推动及改进规模猪场动物疫病净化,该试验以“检测淘汰法”为核心,以本底调查、免疫程序优化、免疫干扰分析和生物安全体系改进等为配套的净化集成技术,将温州一个规模猪场作为示范场点,以O型口蹄疫和非洲猪瘟为净化对象。净化实施后该猪场生产防疫指标有所改善,口蹄疫免疫抗体合格率从76.84%提高至91.09%,口蹄疫野生型抗体阳性率从4.21%降低至0,口蹄疫野生型核酸阳性率从3.68%降低至0,非洲猪瘟野生型核酸阳性率一直维持在0。在示范场跟踪监测4 a后,推广至全市10家规模猪场,O型口蹄疫免疫抗体合格率整体呈现逐年上升趋势,口蹄疫感染抗体阳性数和病毒核酸阳性数整体呈现逐年下降趋势,非洲猪瘟病毒核酸阳性数历年跟踪监测检出率均为0。

关键词：猪检测淘汰法疫病净化口蹄疫非洲猪瘟

动物结核分枝杆菌复合群间接ELISA诊断方法的建立

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中国动物传染病学报 2025年

作者：庄勇向蒙冯桂丹杨显超夏炉明肖文轩张蒙王建张鹭复旦大学生命科学学院上海市动物疫病预防控制中心

本研究通过前期已构建好一些优势抗原的表达载体库，以生物信息学工具分析候选抗原的理化性质、二级结构、B细胞抗原表位，选择优势抗原，以纯化后的融合抗原ECX作为包被抗原，将HRP标记的ProteinG作为酶标的二抗，成功建立了一种用于... 详细信息

本研究通过前期已构建好一些优势抗原的表达载体库，以生物信息学工具分析候选抗原的理化性质、二级结构、B细胞抗原表位，选择优势抗原，以纯化后的融合抗原ECX作为包被抗原，将HRP标记的ProteinG作为酶标的二抗，成功建立了一种用于多动物结核分枝杆菌复合群间接ELISA 诊断的方法。该方法适用于实验室样品批量检测，其敏感性为0.912，特异性为0.949。应用本研究建立的动物结核分枝杆菌间接ELISA法和商品化动物结核分枝杆菌夹心ELISA抗体检测试剂盒（INGENASA，西班牙），两种方法共检测犬、猫、野生动物、SPF实验动物血清共552份。其中间接ELISA方法共检出6份血清抗体阳性，阳性检出率为1.09%（6/552）；商品化夹心法试剂盒共检出8份血清抗体阳性，阳性检出率为1.45%（8/552）；两者之间阳性重合数为6份，阳性重合率为85.72%（6/7）；阴性重合数为544份，阴性重合率为99.82%（544/545）。结果表明，两种诊断方法的检测结果具有较高的一致性。本方法的建立，与国外商品化试剂盒比较，不但有望实现这类检测产品的国产替代，同时实现了一种方法对不同物种来源血清的快速检测。

关键词：抗原结核分枝杆菌复合群 ECX 间接ELISA