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ELISA法对大鼠血清中HLX43药代动力学的探索性研究

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：刘嘉豪张二辉刘晓平皖南医学院上海佐临生物科技有限公司

目的: 以酶联免疫吸附法（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以 ELISA 的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Hu... 详细信息

目的: 以酶联免疫吸附法（ELISA）为基础建立可快速检测大鼠血清中的抗体偶联药物HLX43结合抗体以及总抗体的分析方法，并用来探索大鼠单次静脉注射给药的药代动力学特征。方法：以 ELISA 的检测原理为基础，在96孔板上包被Goat anti-Human IgG（检测总抗体）或Anti-payload antibody（检测结合抗体），加入待测样品，用Goat anti-human IgG Monkey ads-HRP作为检测抗体进行检测，加入TMB底物显色一段时间后，加入终止液中止反应，使用酶标仪SoftMax软件在双波长450 nm/630 nm下读取吸收度，采用 A450 nm-A630 nm 读值进行数值拟合，参考相关法规要求进行初步验证后，SD大鼠静脉注射15 mg/kg HLX43取血检测血药浓度，并计算药代动力学参数。结果：确定分析方法的线性范围为200～6 000 ng/mL，对分析方法的标准曲线、精密度、准确度、钩状效应、稀释线性以及选择性（基质效应）的考察结果均可接受。对SD大鼠血清样品进行定量分析，得到HLX43的药代动力学参数，检测结合抗体和检测总抗体的方法所得出的t1/2分别为110.9 h和110.6 h，Cmax分别为343.3 μg/mL和386.3 μg/mL，AUC0-inf分别为13 977.511 h·μg·mL-1和16 916.523 h·μg·mL-1。结论：本研究建立了两种快速灵敏的方法用于HLX43的药动学研究，为抗体偶联药物的临床研究奠定了基础。

关键词：酶联免疫吸附分析(ELISA) 定量测定抗体偶联药物药代动力学

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直肠扁桃体2例临床病理分析

临床与实验病理学杂志 2023年第3期39卷 331-335页

作者：方三高徐中海严凤杨梦雪谢建英南京金域医学检验所有限公司病理科南京210000 上海金域医学检验所有限公司病理科上海200120

目的探讨直肠扁桃体(rectal tonsil,RT)的临床病理特征、诊断与鉴别诊断。方法收集2例RT的临床资料,采用免疫组化检测CK、CD3、CD20、CD21、BCL-2、CD38、CD68、κ、λ、p53及Ki-67的表达,并结合相关文献总结其临床病理特征。结果例1,女... 详细信息

目的探讨直肠扁桃体(rectal tonsil,RT)的临床病理特征、诊断与鉴别诊断。方法收集2例RT的临床资料,采用免疫组化检测CK、CD3、CD20、CD21、BCL-2、CD38、CD68、κ、λ、p53及Ki-67的表达,并结合相关文献总结其临床病理特征。结果例1,女性,59岁,因便秘与腹泻交替入院行常规体检并活检。例2,女性,40岁,偶尔出现直肠出血,经标准内镜平台接受内镜黏膜下剥离术切除直肠壁突出的息肉样包块。2例临床均误诊为内痔,经术后病理确诊为RT。肿瘤呈边界清楚的息肉样实体,镜下病变由累及固有层或黏膜下层的离散结节性淋巴样增生性病变组成,轮廓形似小号扁桃体,其固有层可见淋巴滤泡伴密集的成熟性淋巴细胞与反应性浆细胞混合。免疫表型:CD20在生发中心、CD3在滤泡外呈斑驳状阳性;BCL-2除生发中心外呈阳性;κ和λ共阳性表明RT属于多克隆疾病,Ki-67增殖指数较低(1%~3%)。随访4~6个月,均未见复发与转移。结论RT是种少见的直肠良性淋巴增生,应与其他类似病变如派尔斑、淋巴滤泡性直肠炎及淋巴瘤等鉴别,充分认识其临床病理特征有助于确诊。

关键词：直肠扁桃体肠道相关淋巴组织淋巴瘤临床病理鉴别诊断

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脑组织标本病理大切片的制作方法及质量流程改进

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临床与实验病理学杂志 2019年第7期35卷 866-867页

作者：谢建英杨柳柳居根吕杨敏徐玉兵上海金域医学检验所有限公司病理科

脑组织因其组织结构及病理变化的特殊性,常规切片往往会出现组织结构不完整、病变不连续等问题,从而影响诊断医师的观察和诊断。病理大切片能够保留标本组织结构的完整性,可以完好的显示病变组织与正常组织的演变关系,为病理医师更全面... 详细信息

脑组织因其组织结构及病理变化的特殊性,常规切片往往会出现组织结构不完整、病变不连续等问题,从而影响诊断医师的观察和诊断。病理大切片能够保留标本组织结构的完整性,可以完好的显示病变组织与正常组织的演变关系,为病理医师更全面的观察整个组织结构提供帮助。

关键词：脑组织病理大切片质量流程改进脱水

LC-MS/MS法测定蛋白降解靶向嵌合体药物ARV-471在小鼠体内的浓度及其药动学

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中国临床药理学与治疗学 2025年

作者：吴浩蒋品郑威张瑜左坚皖南医学院上海美迪西生物医药股份有限公司

目的：以ARV-471作为蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）代表药物，建立高效液相色谱-三重四极杆质谱联用（HPLC-MS/MS）方法测定ARV-471在小鼠血浆中的浓度，用于研究小鼠体内的药动学特征。方法：以维拉帕米为内标，小鼠血浆样品经甲醇沉... 详细信息

目的：以ARV-471作为蛋白降解靶向嵌合体（PROTAC）代表药物，建立高效液相色谱-三重四极杆质谱联用（HPLC-MS/MS）方法测定ARV-471在小鼠血浆中的浓度，用于研究小鼠体内的药动学特征。方法：以维拉帕米为内标，小鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白后，离心取上清液进行LC-MS/MS分析。采用ACQUITY UPLC HSS T3（1.8 μm，2.1×50 mm）色谱柱；以乙腈（含0.1%甲酸）和2 mmol/L甲酸铵水溶液（含0.1%甲酸）为流动相进行梯度洗脱；流速为0.6 mL/min；进样体积为2 μL；采用电喷雾离子源（ESI）、正离子扫描、多反应检测（MRM）模式。考察该方法的专属性、标准曲线和定量限、精密度与准确度、回收率与基质效应、以及稳定性和稀释可靠性，并对小鼠静脉注射5 mg/kg和口服灌胃给药30 mg/kg的ARV-471后的血药浓度和药动学参数进行测定和计算。结果：ARV-471在2.0～2 000.0 ng/mL浓度范围内线性关系良好，批内和批间准确度在85.0%～115.0%之间，批内和批间精密度RSD小于15%，专属性、基质效应、稳定性等均符合指导原则要求。药代动力学参数显示：雄性和雌性小鼠灌胃给药30 mg/kg的ARV-471后，Cmax分别为（2 947.19 ± 454.77）和（2 682.02 ± 342.23）ng/mL，AUC0-t分别为（23 357.37 ± 3 488.00）和（20 161.23 ± 1 871.32）ng·h·mL-1，T1/2分别为（3.11 ± 0.18）和（2.93 ± 0.62）h，Tmax分别为（1.83 ± 0.41）和（2.00 ± 0.00）h；雄性和雌性小鼠静脉注射5 mg/kg的ARV-471后，AUC0-t分别为（18 219.07 ± 2 059.41）和（17 238.01 ± 2 380.55）ng·h·mL-1，T1/2分别为（2.76 ± 0.23）和（2.73 ± 0.20）h；雄雌小鼠的绝对生物利用度分别为（19.49 ± 1.81）% 和（21.37 ± 3.19）%。结论：本研究建立了一种快速、灵敏的方法用于ARV-471的药动学研究，为PROTAC类药物的药动学研究奠定了基础。

关键词：蛋白降解靶向嵌合体药动学高效液相色谱-串联质谱法

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多发性骨髓瘤14例确诊分析

中国基层医药 2020年第14期27卷 1764-1766页

作者：程荣先解兴欣宋洪平王靖霖张建明重庆金域医学检验所有限公司实验诊断部 400039

目的探讨骨髓细胞形态学检查诊断多发性骨髓瘤的要点及意义。方法回顾性分析重庆金域医学研究所有限公司实验诊断室2019年1-6月确诊的多发性骨髓瘤患者14例(男性6例,女性8例)的临床资料,分析骨髓细胞形态学诊断要点,随访14例确诊患者治... 详细信息

目的探讨骨髓细胞形态学检查诊断多发性骨髓瘤的要点及意义。方法回顾性分析重庆金域医学研究所有限公司实验诊断室2019年1-6月确诊的多发性骨髓瘤患者14例(男性6例,女性8例)的临床资料,分析骨髓细胞形态学诊断要点,随访14例确诊患者治疗后疾病转归。结果14例患者中,血红蛋白最低为47 g/L,最高105 g/L,平均73 g/L;患者年龄范围54~85岁,平均67岁。根据欧洲血液学会议分型标准确诊为小浆细胞型(Ⅰ型)4例,幼浆细胞型(Ⅱ型)6例,原浆细胞型(Ⅲ型)2例,网状细胞型(Ⅳ型)2例。确诊对症治疗后,14例患者症状、体征、血常规相关检验等均得到不同程度的改善和好转,骨髓瘤细胞百分比均下降或明显下降,符合部分或完全缓解的标准。结论多发性骨髓瘤患者常伴有贫血,临床表现多种多样,部分患者起病慢、首发症状不明显、无典型体征,骨髓细胞形态学检查可检出异常浆细胞,骨髓细胞形态学检查对早期诊断和鉴别诊断多发性骨髓瘤有重要的意义。

关键词：多发性骨髓瘤浆细胞白血病浆细胞骨髓检查红细胞贫血诊断鉴别体征和症状回顾性研究

染色体微阵列技术在自然流产病因诊断中的应用

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中华医学遗传学杂志 2016年第4期33卷 442-446页

作者：袁海明陈梦帆邓小燕吕芬广州金域医学检验中心有限公司 510330

目的探讨自然流产与染色体异常的关系以及染色体微阵列（chromosomalmicroarrayanalysis，CMA）技术在自然流产病因诊断中的应用价值。方法收集自然流产样本440例，对其进行CMA检测。结果在440例流产样本中，成功检测417例，成功率为94... 详细信息

目的探讨自然流产与染色体异常的关系以及染色体微阵列（chromosomalmicroarrayanalysis，CMA）技术在自然流产病因诊断中的应用价值。方法收集自然流产样本440例，对其进行CMA检测。结果在440例流产样本中，成功检测417例，成功率为94．7％。染色体异常的样本为209例（50．1％），其中染色体数目异常129例（61．7％），结构异常40例（19．1％），嵌合体38例（18．1％），纯合子区域2例（1．0％）。结论相较于染色体核型分析，CMA可为流产物检测提供更全面的信息，为患者的病因诊断和再生育风险评估提供指导。

关键词：自然流产染色体核型分析染色体微阵列染色体数目异常染色体结构异常嵌合体染色体纯合区域

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HP亚甲蓝染色改良法分析

临床与实验病理学杂志 2022年第2期38卷 243-244页

作者：张淑正张效娟张占蛟南京金域医学检验所有限公司病理科南京210032

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)是主要存在于胃黏膜上皮和胃腺体黏膜之间的一种细菌,是短杆状、两端微弯的革兰阴性杆菌。HP与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等关系密切。随着免疫组化和分子病理技术的迅猛发展,部分病理学检查中常用... 详细信息

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)是主要存在于胃黏膜上皮和胃腺体黏膜之间的一种细菌,是短杆状、两端微弯的革兰阴性杆菌。HP与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等关系密切。随着免疫组化和分子病理技术的迅猛发展,部分病理学检查中常用的特殊染色方法和项目渐渐被取代或作用被弱化,但显示HP的特殊染色方法仍然被广泛应用,且其特染方法种类较多,其中以亚甲蓝染色法的HP阳性检测率相对较高[1-2]。

关键词：幽门螺杆菌亚甲蓝染色染色背景

广州市环境及空调冷却水中釜山军团菌的分离与鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第2期34卷 96-99页

作者：范晓姗胡朝晖顾全赵利伟严慧朱庆义广州金域医学检验中心有限公司 510330

目的对广州市环境水源及中央空调冷却水中分离的两株疑似嗜肺军团菌进行分子生物学鉴定。方法通过培养特征、生化反应特性、军团菌属特异性引物PCR鉴定、PCR-酶切分型方法，16SrRNA基因、mip基因和rpoB基因序列分析，确定两株疑似嗜肺... 详细信息

目的对广州市环境水源及中央空调冷却水中分离的两株疑似嗜肺军团菌进行分子生物学鉴定。方法通过培养特征、生化反应特性、军团菌属特异性引物PCR鉴定、PCR-酶切分型方法，16SrRNA基因、mip基因和rpoB基因序列分析，确定两株疑似嗜肺军团菌的分类地位。结果两株疑似嗜肺军团菌均为革兰氏阴性杆菌，在BCYEa平板上生长，36℃培养48h可见白色菌落，氧化酶、明胶液化与马尿酸水解实验均为阳性，尿素酶、硝酸盐还原实验阴性，按表型特征极易鉴定为嗜肺军团菌。军团菌属特异性引物PCR扩增阳性，PCR-酶切分型结果为单-226bp片段。16SrRNA基因、mip基因和rpoB基因序列比对与系统进化分析显示两株菌与釜山军团菌最相似。结论这是我国首次分离得到釜山军团菌，且同时存在于自然环境中和空调冷却塔水中；由于其生化特征，易错误鉴定为嗜肺军团菌，PCR-酶切分型与多基因鉴定的方法可有效鉴定釜山军团菌。

关键词：釜山军团菌 PCR-酶切分型基因序列分析

染色体微阵列技术在2000例儿科患者中的应用

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中华医学遗传学杂志 2016年第2期33卷 247-251页

作者：袁海明朱钧萍邓小燕陈梦帆李欣蔚吕芬广州金域医学检验中心有限公司 510330

目的讨论出生缺陷与染色体异常的关系以及染色体微阵列（chromosomalmicroarrayanalysis，CMA）在儿科遗传病诊断中的应用价值。方法收集临床评估的出生缺陷患儿外周血样本2000例，应用CMA进行分析。结果在2000例出生缺陷患儿中，522例... 详细信息

目的讨论出生缺陷与染色体异常的关系以及染色体微阵列（chromosomalmicroarrayanalysis，CMA）在儿科遗传病诊断中的应用价值。方法收集临床评估的出生缺陷患儿外周血样本2000例，应用CMA进行分析。结果在2000例出生缺陷患儿中，522例找出了致病原因，检出率达26．1％。其中24例为非整倍体，11例为嵌合体，11例为单亲二倍体，其余476例为染色体微缺失／微重复，这些异常应用染色体核型分析很难检出。结论相对于染色体核型分析，CMA可显著提高出生缺陷患儿的检出率。

关键词：出生缺陷染色体微阵列染色体核型分析拷贝数变异