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高糖促进平滑肌细胞内基质金属蛋白酶-2的表达(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第6期24卷 56-60+143页

作者：郝锋于金德上海第二医科大学附属瑞金医院心内科上海第二医科大学附属瑞金医院心内科上海 200025 中国

目的:通过用高糖对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞进行干预,观察其对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法:用组织贴块法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,分组后分别予以葡萄糖0,1,5g/L进行干预。分别提取细胞总RNA和总蛋白分别进行逆转... 详细信息

目的:通过用高糖对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞进行干预,观察其对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。方法:用组织贴块法体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,分组后分别予以葡萄糖0,1,5g/L进行干预。分别提取细胞总RNA和总蛋白分别进行逆转录PCR(RT-PCR),Westernblotting检测,同时取出条件培养基经酶谱法(zymography)检测分泌于培养基中的MMP-2活性。结果:经mRNA,蛋白和酶活性检测,均发现在葡萄糖浓度为5g/L时,MMP-2的表达水平较对照和1g/L时明显增加。结论:高糖促进血管平滑肌细胞和内皮细胞内MMP-2表达,提示血管细胞外基质的降解在糖尿病患者动脉粥样硬化发生机制中起着一定作用。

关键词：葡萄糖基质金属蛋白酶明胶酶糖尿病动脉粥样硬化血管平滑肌

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上海第二医科大学附属瑞金医院

中国医院 2001年第3期5卷 63-64页

作者：黄波赵列宾上海第二医科大学附属瑞金医院上海市瑞金二路197号200025

瑞金医院原名广慈医院,创建于1907年,是一所隶属于上海市第二医科大学的三级甲等综合性教学医院,占地面积12万平方米,建筑面积18万平方米,绿化面积占总面积的30％以上。医院现有编制病床1358张,职工3242名,具有高级技术职称的技术人员36... 详细信息

瑞金医院原名广慈医院,创建于1907年,是一所隶属于上海市第二医科大学的三级甲等综合性教学医院,占地面积12万平方米,建筑面积18万平方米,绿化面积占总面积的30％以上。医院现有编制病床1358张,职工3242名,具有高级技术职称的技术人员367人。

关键词：上海第二医科大学瑞金医院医疗工作医院管理

激光血管成形术对兔血管平滑肌细胞增殖周期动力学的影响

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应用激光 1994年第2期14卷 87-89,86页

作者：方宁远张世华郑道声陆惠华盖保康上海第二医科大学附属仁济医院心内科

对２０只骼动脉粥样硬化模型兔进行激光血管成形术，检测术后不同时期成形段血管平滑肌细胞增殖周期动力学改变。结果表明，激光血管成形术后３天，血管平滑肌细胞Ｓ期，Ｇ２期和Ｍ期细胞数增加；术后２～４周达高峰，６周后不再增加，... 详细信息

对２０只骼动脉粥样硬化模型兔进行激光血管成形术，检测术后不同时期成形段血管平滑肌细胞增殖周期动力学改变。结果表明，激光血管成形术后３天，血管平滑肌细胞Ｓ期，Ｇ２期和Ｍ期细胞数增加；术后２～４周达高峰，６周后不再增加，动脉造影可见成形段血管部分或完全闭塞。

关键词：激光血管成形术细胞增殖动力学

转录因子NF-κB对血管成形术后血管狭窄和新生内膜形成的影响

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中国药理学通报 2005年第10期21卷 1204-1209页

作者：周俊陆国平戚文航上海第二医科大学附属瑞金医院心内科上海200025

目的探讨核转录因子NF-κB的反义和诱骗性寡核苷酸对大鼠颈动脉球囊损伤后血管增殖反应及相应细胞因子、细胞外信号调节激酶的影响。方法SD大鼠随机分为7组,每组分为6个时相点(6 h,1,3,5,7,14 d),每个时相点3只大鼠。制作血管球囊损伤... 详细信息

目的探讨核转录因子NF-κB的反义和诱骗性寡核苷酸对大鼠颈动脉球囊损伤后血管增殖反应及相应细胞因子、细胞外信号调节激酶的影响。方法SD大鼠随机分为7组,每组分为6个时相点(6 h,1,3,5,7,14 d),每个时相点3只大鼠。制作血管球囊损伤模型。相应时间点处死动物,使用病理形态学、逆转录聚合酶链反应、免疫组化、W esternb lot等方法测定血管病理形态改变、单核细胞趋化因子(Monocytes chemotactic prote in-1,MCP-1)的mRNA和蛋白质表达、NF-κB p65和细胞外信号调节激酶(Extra-cellu lar sig-nal regu lated k inase,ERK2)的蛋白质含量。结果模型组、正义组、Scramb le组血管内膜/中膜在d 5增加,14 d达到高峰。反义组、诱骗组、反义组+诱骗组干预后,血管内膜/中膜明显减小(P<0.05),反义组+诱骗组较反义组、诱骗组治疗效果不明显。MCP-1 mRNA表达在血管损伤后6 h即可检测到,3、5、7 d后持续表达增加,14 d后表达降低,免疫组化显示MCP-1蛋白质表达在6个时相点均为阳性染色,14 d达到高峰;反义组、诱骗组、反义组+诱骗组治疗后,与模型组、正义组、Scramb le组相比,MCP-1 mRNA表达和蛋白合成在各时相点均降低(P<0.05)。W estern b lot检测核蛋白抽提物显示核因子NF-κB p65在血管损伤后6 h有一定蛋白表达,1 d后蛋白表达明显增加,至7 d达高峰,14 d后蛋白表达略降低。ERK2在血管损伤后1 d蛋白表达开始增加,d 7达到峰值,14 d后与d 7相比无明显差异。反义组、诱骗组、反义组+诱骗组干预后,各时相点蛋白质表达均较模型组、正义组、Scramb le组减弱(P<0.05)。结论转录因子NF-κB调控MCP-1、ERK2基因表达和蛋白质合成;球囊损伤后血管壁细胞增殖在不同时相点有动态变化;脂质体介导局部转染反义、诱骗性寡核苷酸可抑制NF-κB激活对下游基因的调控,两者联合作用效果较单独应用未表现出更明显的作用。

关键词：核因子KB 新生内膜反义寡核苷酸诱骗寡核苷酸球囊损伤

血小板受体糖蛋白Ⅲa基因与心肌梗塞关系的研究

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中华心血管病杂志 1999年第2期27卷 111-112页

作者：陆林于金德乐玮陶蓉尤蓓何汝敏蔡煦朱鼎良龚兰生上海第二医科大学附属瑞金医院心内科

目的探讨血小板受体糖蛋白（ＧＰＩＩａ）基因变异与心肌梗塞（ＭＩ）发病的关系。方法运用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）技术对４０例ＭＩ患者和相应数量健康人作对照行ＧＰＩＩａ基因全部外显子筛查。同时，以ＲＦＬＰ和ＡＳＯ技术检... 详细信息

目的探讨血小板受体糖蛋白（ＧＰＩＩａ）基因变异与心肌梗塞（ＭＩ）发病的关系。方法运用变性梯度凝胶电泳（ＤＧＧＥ）技术对４０例ＭＩ患者和相应数量健康人作对照行ＧＰＩＩａ基因全部外显子筛查。同时，以ＲＦＬＰ和ＡＳＯ技术检测８２例ＭＩ和６８例健康人对照的ＧＰＩＩａ基因ＰｌＡ多态性，并与５０例美国健康白种人比较。结果发现ＧＰＩＩａ基因外显子５中存在核苷酸静止突变；１５０例中国人的ＧＰＩＩａＰＩＡ多态基因型均为ＰｌＡ１／ＰｌＡ１，与美国白种人比较，差异有显著性。结论表明中国人群的血小板受体ＧＰＩＩａ基因与ＭＩ发病无相关性。

关键词：心肌梗塞血小板受体糖蛋白基因变异

血管紧张素转化酶基因的插入/缺失多态性与心肌梗塞关系的研究

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中华心血管病杂志 1997年第1期25卷 30-33页

作者：陆林于金德况少青沈卫峰张继盛张大东何汝敏陈竺龚兰生上海第二医科大学附属瑞金医院心内科

本研究运用ＰＣＲ技术对我国人１１６例心肌梗塞（ＭＩ）和１０３例健康作对照的血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）基因插入／缺失多态性进行了检测，并与血清ＡＣＥ水平、ＭＩ发病、冠状动脉病变支数等指标进行比较。结果显示ＭＩ组缺失等位... 详细信息

本研究运用ＰＣＲ技术对我国人１１６例心肌梗塞（ＭＩ）和１０３例健康作对照的血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）基因插入／缺失多态性进行了检测，并与血清ＡＣＥ水平、ＭＩ发病、冠状动脉病变支数等指标进行比较。结果显示ＭＩ组缺失等位基因Ｄ频率０．４６和ＤＤ基因型频率０．２７显著高于对照组的０．３３和０．１２（分别为Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。同时发现缺失多态性与血清ＡＣＥ水平、ＭＩ组冠状动脉病变支数呈相关性。表明ＡＣＥ基因缺失多态性可能是我国人群ＭＩ发病的重要危险因素之一。

关键词：心肌梗塞多态性血管紧张素转化酶

cDNA芯片研发及其在肥胖患者脂肪基因差异表达研究中的应用

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生物化学与生物物理进展 2004年第12期31卷 1067-1078页

作者：赵萸骆天红王侃侃张济郑培烝赵春军刘优萍郑升顾燕云李果罗敏上海第二医科大学附属瑞金医院

为了加快基因功能的研究 ,利用已有的来源于不同组织的cDNA克隆 ,并通过交换和购买补充了低丰度和染色体覆盖不完全的部分cDNA ,研制开发出具有相当代表性、覆盖较完全的高密度cDNA表达型基因芯片 ,每张芯片上含有 384个质控DNA和 12 6... 详细信息

为了加快基因功能的研究 ,利用已有的来源于不同组织的cDNA克隆 ,并通过交换和购买补充了低丰度和染色体覆盖不完全的部分cDNA ,研制开发出具有相当代表性、覆盖较完全的高密度cDNA表达型基因芯片 ,每张芯片上含有 384个质控DNA和 12 6 30个cDNA探针 ,其中包括 12 5 0 8个Unigene和 12 2个表达序列标签 (EST) .利用这些芯片 ,对肥胖患者及正常人内脏脂肪组织基因表达谱进行了初步研究 ,并发现在肥胖患者内脏脂肪组织差异表达的基因 ,其中上调的有与凋亡相关的基因、与免疫有关的基因以及与能量代谢有关的基因等 ,而下调的主要是与脂肪酸及胆固醇合成有关的基因。

关键词： cDNA芯片,肥胖,脂肪组织,差异表达

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白藜芦醇对PPAR-γ激动作用的研究

中国药学杂志 2005年第12期40卷 905-908页

作者：葛恒张俊峰王彬尧王长谦上海第二医科大学附属仁济医院心内科上海200001

目的探讨白藜芦醇是否为过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ)的激动剂。方法在自身不表达PPAR-γ蛋白的U937细胞中电穿孔共转染PPARγ表达质粒和其报告质粒,从而构建PPAR-γ激动剂筛选模型。同时在U937细胞内单独转染PPAR-γ报告质... 详细信息

目的探讨白藜芦醇是否为过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ)的激动剂。方法在自身不表达PPAR-γ蛋白的U937细胞中电穿孔共转染PPARγ表达质粒和其报告质粒,从而构建PPAR-γ激动剂筛选模型。同时在U937细胞内单独转染PPAR-γ报告质粒作为阴性对照。转染细胞中加入已知PPAR-γ的激动剂吡格列酮30μmol·L-1和15,30μmol·L-1的白藜芦醇,培养24h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPAR-γ的能力。结果共转染细胞中加入吡格列酮后显著激动了PPAR-γ,使虫荧光素酶活性增强了4.2倍(P<0.001),验证了筛选模型的有效性。而加入15和30μmol·L-1白藜芦醇后,虫荧光素酶活性也分别提高1.78(P=0.033)和2.47倍(P=0.01)且与剂量相关(P=0.04)。而单独转染报告质粒的U937细胞加入上述药物后,虫荧光素酶活性无显著差异。结论白藜芦醇能够剂量依赖的激动PPAR-γ。

关键词：白藜芦醇过氧化物酶增殖刺激活受体γ 激动剂动脉粥样硬化炎症

开博通对激光血管成形术后平滑肌细胞增殖周期的影响

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应用激光 1995年第4期15卷 184-186,183页

作者：方宁远郑道声张世华陆惠华刘建平盖保康廖晓星上海第二医科大学仁济医院心内科

采用球囊拉伤动脉内膜加高脂饲养建立兔髂动脉粥样硬化模型．对模型兔进行Ｎｄ：ＹＡＧ激光血管成形术。应用流式细胞计数仪分析细胞中ＤＮＡ含量。结果表明，治疗组血管平滑肌细胞周期中增殖细胞数明显低于对照组，提示开博通能抑制激... 详细信息

采用球囊拉伤动脉内膜加高脂饲养建立兔髂动脉粥样硬化模型．对模型兔进行Ｎｄ：ＹＡＧ激光血管成形术。应用流式细胞计数仪分析细胞中ＤＮＡ含量。结果表明，治疗组血管平滑肌细胞周期中增殖细胞数明显低于对照组，提示开博通能抑制激光血管成形术后血管平滑肌细胞的增殖。

关键词：激光血管成形术血管紧张素平滑肌细胞增生