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椎间盘退变相关焦亡基因的综合分析

中国组织工程研究 2024年第21期28卷 3438-3444页

作者：谢越翟伟峰郭际贾永伟上海中医药大学上海市200120 上海中医药大学附属光华医院上海市201203

背景:椎间盘退变早期诊断和治疗尤为重要,髓核细胞焦亡在早期椎间盘退变过程中发挥着重要作用,但髓核细胞焦亡相关分子在早期椎间盘退变中发挥的作用及相关分子标志物仍不明确。目的:探讨焦亡相关差异表达基因在椎间盘退变过程中的诊断... 详细信息

背景:椎间盘退变早期诊断和治疗尤为重要,髓核细胞焦亡在早期椎间盘退变过程中发挥着重要作用,但髓核细胞焦亡相关分子在早期椎间盘退变中发挥的作用及相关分子标志物仍不明确。目的:探讨焦亡相关差异表达基因在椎间盘退变过程中的诊断及治疗价值。方法:整合GeO数据库椎间盘退变的公开数据集进行差异分析,与之前报道的33个焦亡基因取交集;使用基因本体论、京都基因和基因组百科全书对椎间盘退变焦亡相关基因进行通路富集分析,并使用基因集富集分析对椎间盘退变数据集进行富集分析;构建椎间盘退变样本中的免疫细胞谱,并将差异表达的细胞焦亡相关基因与免疫细胞进行相关性分析;构建蛋白质互作网络,筛选Hub基因以鉴定蛋白质相互作用网络中与椎间盘退变相关的关键基因;整合数据集绘制差异表达焦亡基因的受试者工作特征曲线,计算曲线下面积,探索目标基因的临床诊断价值;qRT-PCR验证正常人髓核细胞与椎间盘退变人髓核细胞之间焦亡相关基因的表达差异。结果与结论:①获得4426个与椎间盘退变相关的差异表达基因,交集后获得14个差异表达的焦亡相关基因;②基因本体论、京都基因和基因组百科全书分析揭示了重要的富集途径,主要与炎症、细胞周期、感染和NOD样受体通路相关;基因集富集分析显示氨基酸代谢、P53转录调节等通路在椎间盘退变患者中显著富集;免疫浸润分析提示椎间盘退变的发生发展与免疫细胞密切相关;③共筛选出5个Hub基因,分别为IL-1β、Caspase-1、AIM2、Caspase-5、NLRC4;④椎间盘退变关键生物标志物的获取及鉴定:将GeO两个数据集与焦亡基因取交集后发现NLRP3具有显著表达差异,受试者工作特征曲线显示NLRP3具有临床诊断意义;⑤qRT-PCR显示IL-1β、Caspase-5和NLRC4等Hub基因在椎间盘退变的髓核细胞中表达显著增加(Pe-1、AIM2以及NLRP3表达无差异(P>0.05);⑥提示细胞焦亡在椎间盘退变发生发展过程中发挥重要作用,其中焦亡相关基因NLRP3、IL1-β、Caspase-5、NLRC4具有早期诊断和治疗价值。

关键词：椎间盘细胞焦亡椎间盘退变免疫浸润诊断富集分析

淫羊藿苷调节酸性微环境减轻绝经后老年骨质疏松性疼痛

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中国组织工程研究 2024年第28期28卷 4461-4468页

作者：薛春阳王秀会上海中医药大学上海市201203

背景:前期研究已证明,淫羊藿苷在促进骨形成和抑制骨吸收方面具有重要作用,但其对骨质疏松介导的骨痛产生的影响尚未见报道。目的:探讨淫羊藿苷减轻绝经后老年性骨质疏松性骨痛的可能机制。方法:①动物实验:将200只C57BL/6小鼠随机分为4... 详细信息

背景:前期研究已证明,淫羊藿苷在促进骨形成和抑制骨吸收方面具有重要作用,但其对骨质疏松介导的骨痛产生的影响尚未见报道。目的:探讨淫羊藿苷减轻绝经后老年性骨质疏松性骨痛的可能机制。方法:①动物实验:将200只C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组、模型组、模型+淫羊藿苷组,模型+碳酸酐酶Ⅱ抑制剂组。除假手术组外,其余各组摘除小鼠卵巢建立绝经后骨质疏松模型。模型+淫羊藿苷组在造模后第2天灌胃淫羊藿苷,每2周进行1次疼痛行为学实验并取材,持续20周。microCT检测股骨骨量、苏木精-伊红染色及TRAP染色检测破骨细胞活性、免疫荧光染色检测神经元形态及相关离子通道表达。②细胞实验:提取小鼠骨髓来源的破骨细胞前体细胞,在体外使用RANKL/M-CSF体系诱导分化为破骨细胞并添加不同浓度淫羊藿苷(1,10μmol/L)干预。采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞分化,采用鬼笔环肽染色检测破骨细胞肌动蛋白环,采用骨板吸收实验检测破骨细胞噬骨功能,采用pH计检测体系pH值,采用Western Blot检测破骨细胞分化相关蛋白表达。此外,提取小鼠背根神经节来源神经细胞并用淫羊藿苷处理,采用CCK8检测神经元活性,采用降钙素基因相关肽染色检测神经元形态。结果与结论:①与模型组相比,模型+淫羊藿苷组小鼠骨密度更高,骨组织中抗酒石酸酸性磷酸酶阳性破骨细胞较少,神经元活性降低,神经元瞬时受体电位香草酸亚型1通道及碳酸酐酶Ⅱ表达减少;模型+淫羊藿苷组小鼠相对于模型组对疼痛的敏感性降低。②淫羊藿苷在体外有抑制破骨细胞分化及噬骨能力,且在相对无毒的pH范围内增强背根神经节神经元的活性,抑制背根神经节中降钙素基因相关肽的表达,并可抑制背根神经节中瞬时受体电位香草酸亚型1离子通道的表达。③结果表明淫羊藿苷通过对破骨细胞的作用调节酸性微环境可减轻绝经后骨质疏松症介导的骨痛。

关键词：淫羊藿苷骨质疏松疼痛酸性微环境破骨细胞分化神经元

组蛋白甲基转移酶在纤维化疾病中的作用机制及其中药干预研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第1期30卷 264-275页

作者：王佳胡宇婷陆奕宇上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

纤维化是介于良恶之间的类肿瘤病变,纤维化多发生于肝脏、肾脏、心脏、肺脏、骨髓等器官组织中,几乎可以影响每一个器官,并最终诱发多器官衰竭,引起癌变,严重危害生命健康。如能在纤维化阶段及时将病情阻断,防止癌变,具有重要意义。器... 详细信息

纤维化是介于良恶之间的类肿瘤病变,纤维化多发生于肝脏、肾脏、心脏、肺脏、骨髓等器官组织中,几乎可以影响每一个器官,并最终诱发多器官衰竭,引起癌变,严重危害生命健康。如能在纤维化阶段及时将病情阻断,防止癌变,具有重要意义。器官纤维化发病机制目前仍未完全明确,研究纤维化的发生发展与作用机制及治疗靶点的筛选具有重要的临床意义。组蛋白甲基转移酶主要定位于细胞核中参与构成多梳抑制复合物,使组蛋白H3的第27位赖氨酸发生三甲基化修饰(H3K27me3),并通过经典和非经典作用诱导基因沉默,发挥转录抑制或转录激活作用。他在细胞生长、增殖、分化及凋亡方面发挥重要作用,其作用与不同靶点和信号通路的调控有关。Zeste人类同源物2(eZH2)调节肌成纤维细胞的转化并参与多个组织的纤维化,近年来的研究显示eZH2在纤维化相关的上皮间质转化、氧化应激、炎症反应等病理生理过程中扮演重要角色。以eZH2为靶点各器官纤维化的研究、特异性eZH2抑制剂及eZH2相关中药活性成分与中药复方的研究逐渐成为热门研究方向,eZH2可能是器官纤维化的潜在有力靶点。探究eZH2的结构功能分布、在纤维化疾病的作用机制、其抑制剂的开发及挖掘靶向eZH2的中药及其活性成分,具有重要意义。综述eZH2在纤维化疾病中的研究进展,可以为纤维化的诊断,治疗及药物开发提供新的思路。

关键词：组蛋白甲基转移酶纤维化细胞与分子机制 Zeste基因增强子人类同源物2(eZH2) eZH2抑制剂中药及其活性成分

乳腺癌骨转移的蛋白质组学特性及代谢途径活化研究

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中国肿瘤临床 2024年第13期51卷 695-702页

作者：袁春露陈龙廖雅芳施佳诺章丹丹上海中医药大学交叉科学研究院上海市201203

目的:探究乳腺癌骨转移细胞的蛋白表达特征及调控骨转移的分子机制。方法:制备过表达萤火虫荧光素酶的人乳腺癌细胞系MCF-7-luc和骨转细胞亚系MCF-7-BOM-luc;左心室注射细胞建立乳腺癌骨转移裸鼠模型;应用小动物活性成像仪、微计算机断... 详细信息

目的:探究乳腺癌骨转移细胞的蛋白表达特征及调控骨转移的分子机制。方法:制备过表达萤火虫荧光素酶的人乳腺癌细胞系MCF-7-luc和骨转细胞亚系MCF-7-BOM-luc;左心室注射细胞建立乳腺癌骨转移裸鼠模型;应用小动物活性成像仪、微计算机断层扫描技术(micro-computed tomography,Micro-CT)检测骨转移及骨小梁变化;采用Transwell小室法评估细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过蛋白质组学、蛋白质印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术分析差异蛋白表达、上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,eMT)指标和信号通路活化情况;使用2-NBDG、eLISA法和Seahorse能量代谢仪分别检测葡萄糖摄取、L-乳酸含量和细胞能量代谢参数。结果:MCF-7-BOM-luc细胞迁移、侵袭、eMT特性以及骨骼转移能力方面优于MCF-7-luc。蛋白质组学发现MCF-7-BOM-luc中S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A,S100A4)表达增加,且差异蛋白主要集中在代谢途径。MCF-7-BOM-luc表现出e盒结合锌指蛋白1/2(zinc finger e-box binding homeobox 1/2,ZeB1/2)和波形蛋白(Vimentin)表达上升,e-钙黏蛋白(e-cadherin)下降,葡萄糖摄取、L-乳酸生成和糖酵解速率增强,及细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases1/2,eRK1/2)和信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的磷酸化水平提升。结论:MCF-7-BOM-luc通过激活eRK1/2和STAT3信号通路促进S100A4表达,从而增强eMT进程和糖酵解速率,具备骨转移恶性。通过蛋白质组学解析乳腺癌骨转移细胞的蛋白特征将为乳腺癌骨转移的诊断、预防和治疗提供潜力靶点。

关键词：乳腺癌骨转移蛋白质组学 S100钙结合蛋白A4 肿瘤代谢信号通路

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基于客观赋权法结合正交优选玉女煎提取工艺

中草药 2024年第2期55卷 460-469页

作者：骆艺珠李婷刘云张彤丁越上海中医药大学上海201203

目的基于现代制剂和古方标准煎液的质量一致性研究,优选玉女煎现代提取工艺参数。方法以玉女煎指标成分转移率和浸膏得率为评价指标,建立15批玉女煎标准煎液关键参数的范围,以其为标准,通过单因素和正交试验对玉女煎现代制剂工艺参数... 详细信息

目的基于现代制剂和古方标准煎液的质量一致性研究,优选玉女煎现代提取工艺参数。方法以玉女煎指标成分转移率和浸膏得率为评价指标,建立15批玉女煎标准煎液关键参数的范围,以其为标准,通过单因素和正交试验对玉女煎现代制剂工艺参数进行筛选。在分析中采用客观赋权法,确定评价指标的权重系数计算综合评分,并以15批标准煎液平均值综合评分为基准值,设计公式最终评分(Y)=1/|综合评分-15批标准煎液平均值综合评分|对综合评分进行预处理作为正交试验最终评分,筛选玉女煎提取最佳工艺。结果传统计算方法筛选的工艺制备的水提液浸膏得率超出标准煎液范围。通过客观赋权法和优化计算方式的实验显示各项指标均在15批标准煎液的范围内,筛选的玉女煎提取工艺为加水量10倍量,浸泡15 min,提取30 min。结论按照经方现代制剂的研究要求,采用客观赋权法和优化的计算方式筛选的玉女煎提取工艺制备提取液更接近于玉女煎标准煎液,为经典名方工艺筛选提供了新的思路和方法。

关键词：经典名方玉女煎正交试验现代制剂工艺客观赋权法 β-蜕皮甾酮芒果苷知母皂苷BⅡ 地黄苷D

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塞来昔布抑制凝血酶诱导的大鼠软骨细胞退变

中国组织工程研究 2024年第34期28卷 5446-5451页

作者：朱志恒丁佳滢葛杨硕黄春萌沈军王学宗郑昱新丁道芳上海中医药大学康复医学院上海市201203 上海中医药大学康复医学研究所上海市201203 上海中医药大学附属光华医院上海市200052 上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心上海市201203

背景:骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著高于正常人,且凝血酶可以诱导大鼠软骨细胞退变,提示抑制凝血酶功能可能成为治疗骨关节炎的一种方法。塞来昔布为临床治疗骨关节炎的常见药物,是否可以抑制凝血酶的促炎作用而改善大鼠软骨细胞退... 详细信息

背景:骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著高于正常人,且凝血酶可以诱导大鼠软骨细胞退变,提示抑制凝血酶功能可能成为治疗骨关节炎的一种方法。塞来昔布为临床治疗骨关节炎的常见药物,是否可以抑制凝血酶的促炎作用而改善大鼠软骨细胞退变尚未可知。目的:探讨塞来昔布对凝血酶诱导软骨细胞退变的影响。方法:使用eLISA试剂盒检测骨关节炎患者与正常人血清中凝血酶含量。体外提取、培养SD乳鼠关节软骨细胞,使用第一代细胞进行实验,将软骨细胞分对照组、凝血酶组和塞来昔布组。显微镜下观察3组细胞形态,并使用edu试剂盒检测细胞增殖情况;qRT-PCR检测软骨细胞外基质成分(聚集蛋白聚糖、弹性蛋白、软骨寡聚基质蛋白)、炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)的表达;免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1的表达;Western Blot检测分解代谢基因如基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2等蛋白的表达。结果与结论:(1)与正常人相比,骨关节炎患者血清中凝血酶含量显著增高;(2)塞来昔布可明显抑制凝血酶诱导的软骨细胞纤维样形态改变;(3)与凝血酶组相比,塞来昔布抑制了软骨细胞的增殖;(4)凝血酶组Ⅱ型胶原α1等软骨细胞外基质基因表达的下调被塞来昔布抑制(P <0.05);(5)凝血酶可促进软骨细胞炎症因子(白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α)、炎症趋化因子(单核细胞趋化蛋白2、单核细胞趋化蛋白7、粒细胞趋化蛋白6)以及分解代谢基因(基质金属蛋白酶9、基质金属蛋白酶13和环氧化酶2)的表达,在塞来昔布干预下,上述基因的表达下调(P <0.05);(6)结果提示,塞来昔布可以抑制凝血酶的促炎作用,从而改善大鼠软骨细胞退变。

关键词：软骨细胞凝血酶塞来昔布细胞增殖细胞退变

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促进康复动机的策略在卒中康复中的应用进展

中国康复医学杂志 2024年第2期39卷 280-287页

作者：周平陈思韵李文兮许东升同济大学上海市200092 上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学中医智能康复教育部工程研究中心

1动机的概念和意义动机是一个经常使用的概念,并被视为康复结果的一个重要决定因素[1]。动机是社会认知理论[2]和自我决定理论[3],两种常见行为理论的经验衍生因素。世界卫生组织的《国际功能和残疾分类》(international classification... 详细信息

1动机的概念和意义动机是一个经常使用的概念,并被视为康复结果的一个重要决定因素[1]。动机是社会认知理论[2]和自我决定理论[3],两种常见行为理论的经验衍生因素。世界卫生组织的《国际功能和残疾分类》(international classification of functioning,disability and health,ICF)将动机定义为一种全面心理功能——一种有意识或无意识的驱动力产生激励以促进行为的功能[4]。

关键词：社会认知理论自我决定理论心理功能概念和意义

沉默信息调节因子5在心血管疾病中的作用研究进展

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 405-409页

作者：于达云许锦文凌霜上海中医药大学交叉科学研究院上海201203

心血管疾病(cardiovascuar diseases,CVDs)的死亡率位居首位,严重威胁人类健康。沉默信息调节因子5(silent information regulator 5,SIRT5)作为一个新型的去酰基化修饰酶,广泛分布于心肌细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞等心血管细胞中... 详细信息

心血管疾病(cardiovascuar diseases,CVDs)的死亡率位居首位,严重威胁人类健康。沉默信息调节因子5(silent information regulator 5,SIRT5)作为一个新型的去酰基化修饰酶,广泛分布于心肌细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞等心血管细胞中,可通过脱乙酰化、脱琥珀酰化和脱丙二酰化而在多种CVDs中发挥重要作用。该文将从能量代谢、调控炎症反应和氧化应激等方面讨论SIRT5的病理生理学机制,以及SIRT5在心肌梗塞、心肌肥大、心律失常、动脉粥样硬化和心力衰竭等CVDs中所扮演的角色,并且总结了目前SIRT5相关抑制剂和激动剂的研究进展,从而为靶向SIRT5提供防治CVDs的策略。

关键词：心血管疾病沉默信息调节因子5 琥珀酰化线粒体能量代谢炎症

手法治疗肩周炎有效性和安全性的Meta分析

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中国全科医学 2024年第5期27卷 628-636页

作者：方仪德胡浩许金海丁兴马青山张亚运王燕妮莫文上海中医药大学附属龙华医院骨伤科上海市200032 上海中医药大学脊柱病研究所上海市200032

背景近年出现较多特色手法治疗肩周炎的随机对照试验(RCT),但缺乏新的关于手法治疗肩周炎有效性和安全性的系统评价。目的通过Meta分析方法评价手法治疗肩周炎的有效性和安全性,通过亚组分析了解包含“摇法”的手法是否较未包含“摇法... 详细信息

背景近年出现较多特色手法治疗肩周炎的随机对照试验(RCT),但缺乏新的关于手法治疗肩周炎有效性和安全性的系统评价。目的通过Meta分析方法评价手法治疗肩周炎的有效性和安全性,通过亚组分析了解包含“摇法”的手法是否较未包含“摇法”的手法效果更优。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、embase、Medline、中国知网(包括中国硕博士学位论文全文数据库、中国优秀硕士学位论文全文数据库)、中国生物医学文献数据库、万方数据知识服务平台中有关手法治疗肩周炎有效性和安全性的RCT,试验组干预措施为手法,对照组干预措施为非药物疗法,检索时间为建库至2023-03-01。由2名研究人员提取资料,并进行质量评价。采用Revman 5.3软件进行Meta分析。结果最终共纳入12篇文献,893例肩周炎患者,其中试验组451例,对照组442例。Meta分析结果显示,视觉模拟疼痛量表(VAS):手法治疗改善VAS程度优于物理治疗、针灸治疗、常规治疗(SMD=1.09,95%CI=0.81~1.37,Pey(C-M)评分:手法治疗改善C-M评分程度优于物理治疗组(MD=2.79,95%CI=2.27~3.32,Pegger's检验和Begger's检验提示无显著的发表偏倚(P=0.66、0.66)。手法操作导致的骨折、其他创伤等案例在纳入研究中均未见报道。结论现有文献证据表明手法治疗能有效降低肩周炎患者疼痛、肩关节功能障碍,提高患者肩关节活动度、总体有效率、治愈率,含有“摇法”的手法在VAS改善、被动前屈、被动外展方面能进一步提高疗效,总体手法安全性较高,但仍需更多大样本,高质量的RCT进一步证实。

关键词：肩周炎滑囊炎手法摇法随机对照试验 Meta分析