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米非司酮对豚鼠子宫内膜接受性的影响

Acta Pharmacologica Sinica 2002年第2期23卷 85-90页

作者：刘承权王忠兴袁瑶上海市计划生育科学研究所上海市计划生育科学研究所上海中国 200032 计划生育药具国家重点实验室

目的:从细胞及分子水平分析低剂量米非司酮在子宫内膜对胚泡接受性中的作用.方法:以组织学方法观察内膜形态变化;免疫组织学方法测定LIF及IL-6在子宫内膜的基因表达以及用半定量反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定内膜雌、孕激素受体nRN... 详细信息

目的:从细胞及分子水平分析低剂量米非司酮在子宫内膜对胚泡接受性中的作用.方法:以组织学方法观察内膜形态变化;免疫组织学方法测定LIF及IL-6在子宫内膜的基因表达以及用半定量反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)测定内膜雌、孕激素受体nRNA水平等方法来评估子宫内膜的成熟度.结果:米非司酮在剂量为0.03mg·kg-1·d-1时,可明显延缓子宫内膜的成熟,抑制间质细胞蜕膜化,降底LIF和IL-6在内膜的基因表达和增高内膜雌、孕激素受体mRNA水平.结论:小剂量米非司酮可直接作用于子宫内膜,影响内膜的成熟而抑制内膜对胚泡的接受性.

关键词：米非司酮子宫内膜豚鼠细胞因子

人受精蛋白β整联蛋白配体区cDNA的克隆、表达及抗体制备

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2001年第3期33卷 303-308页

作者：丁蓓蓓沈卫英蒋俶王健高尔生申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室!上海200032

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ... 详细信息

从人睾丸中抽提mRNA ,合成双链cDNA ,利用合成的PCR引物扩增受精蛋白 β(fertilinβ)的整联蛋白配体区cDNA(hf2 79)。序列分析表明 ,该区编码 93个氨基酸 ,与文献报道完全相同。将hf2 79插入质粒 pGEX 4T 2 ,构建 pGEX hf2 79表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,表达菌株经IPTG诱导 ,可产生大量可溶性的表达蛋白GST HF93。SDS PAGE分析表明融合蛋白表观分子量为 38kD ,其含量占菌体可溶性蛋白的 5 0 %以上。表达产物经谷胱甘肽转硫酶 (GST)亲和层析柱纯化 ,得到 90 %以上纯度的融合蛋白。融合蛋白经凝血酶酶切 2h可得HF93肽。再经GST亲和层析柱去除GST ,得到纯度大于 80 %的HF93肽。将其和SDS PAGE凝胶上切下的HF93多肽条带一起用于免疫BALB/c小鼠 ,经ELISA检测 ,证明获得了较高滴度的抗体

关键词：人受精蛋白β整联蛋白配体区基因克隆基因表达大肠杆菌抗体

重组人绒毛膜促性腺激素嵌合肽12的聚丙烯酰胺凝胶电泳制备

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生物化学与生物物理学报 2002年第5期34卷 671-674页

作者：邹永水徐万祥何远孙志达薛小琳上海市计划生育科学研究所计划生育药具国家重点实验室

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜... 详细信息

利用板状聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)方法 ,建立了一步分离纯化基因工程表达蛋白质的新技术。在构建的人绒毛膜促性腺激素嵌合肽 (CP1 2 )表达率约为 1 %的情况下 ,借助分析制备两用型板状PAGE装置 ,通过下行和上行两次电泳以及用透析膜隔离形成收集槽这两步改进 ,从包涵体抽提液中一步纯化了目的表达产物。结果表明 ,一次上样总蛋白质量为 3～ 4mg的PAGE ,可获得 5 0～ 1 0 0 μgCP1 2蛋白 ,其相对均一性达到 95 %。研究提示此改良的制备性PAGE新技术 ,是一种分离纯化低分子量目的蛋白质的好方法

关键词：人绒毛膜促性腺激素基因工程嵌合肽聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化

应用液质联用法同时测定新西兰家兔血浆中左炔诺孕酮和炔雌醇浓度及其药动学

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第8期31卷 823-831页

作者：李钊郭湘洁谢淑武周洁芸朱焰上海市计划生育科学研究所国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室复旦大学生殖与发育研究院上海200032

目的建立液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定新西兰家兔血浆中左炔诺孕酮(LNG)和炔雌醇(EE)浓度的方法,并探讨LNG/EE复方避孕贴多次给药后药动学特征。方法 6只雌性新西兰家兔连续10次给予LNG/EE复方避孕贴(5 cm×4 cm,每贴含LNG 5.35... 详细信息

目的建立液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定新西兰家兔血浆中左炔诺孕酮(LNG)和炔雌醇(EE)浓度的方法,并探讨LNG/EE复方避孕贴多次给药后药动学特征。方法 6只雌性新西兰家兔连续10次给予LNG/EE复方避孕贴(5 cm×4 cm,每贴含LNG 5.35 mg,EE 0.11 mg),每3 d1贴,连续给药30 d,分别于给药后不同时间耳缘静脉采血,血浆样品经丹酰氯衍生化后,采用HPLC-MS/MS测定血浆中LNG和EE浓度,并采用DAS3.0软件计算首末次给药的主要药动学参数。结果 LNG的线性范围为0.10~20.00μg·L^(-1),最低定量限为0.10μg·L^(-1),提取回收率均>78.30%,日内精密度79.99%,日内精密度<3.28%、日间精密度<12.76%。首次给药后EE的药动学参数:C_(max)为(0.18±0.04)μg·L^(-1),T_(max)为(2.50±1.30)h,AUC(0-768)为(2.65±0.56)h·μg·L^(-1);末次给药后EE的药动学参数:C_(max)为(0.17±0.07)μg·L^(-1),T_(max)为(2.17±0.26)h,AUC(0-768)为(2.02±0.82)h·μg·L^(-1)。结论建立的HPLC-MS/MS法准确灵敏,可用于同时测定血浆中LNG和EE的浓度。新西兰家兔给予LNG/EE复方避孕贴后首末次主要药动学参数无显著性差异,且多次给予此避孕贴后体内血药浓度无蓄积。

关键词：左炔诺孕酮炔雌醇避孕贴衍生化药动学

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小鼠着床丝氨酸蛋白酶2cDNA的克隆、表达及抗体制备

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生物化学与生物物理学报 2003年第7期35卷 649-654页

作者：黄哲平王健余浩黄萍沈维雄左嘉客杨增明申庆祥上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室东北农业大学生命科学学院上海市计划生育科学研究所国家计划生育药具重点实验室上海200032 哈尔滨150030

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(... 详细信息

以孕 4 .5天小鼠子宫着床位点总cDNA为模板 ,用PCR方法扩增获得着床丝氨酸蛋白酶 2 (ISP2 )的cDNA。序列分析表明 ,该cDNA序列中的开放阅读框编码 2 79个氨基酸 ,并与文献报道完全相同 ,但在 3′非翻译区多 2 0 4bp ,已登录于GenBank(登录号 :AF4 4 2 819)。为了获得重组ISP2 (rISP2 ) ,构建了pGEX 4T 2 ISP2表达质粒 ,进而在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达融合蛋白质GST ISP2 ,经SDS PAGE回收的融合蛋白质用牛凝血酶酶切 ,再经SDS PAGE回收获得rISP2。用rISP2作为免疫原免疫家兔获得ISP2多克隆抗血清。用该抗血清进行免疫组化研究表明 ,ISP2在妊娠早期的小鼠子宫内膜腺上皮有特异性的高表达。

关键词： ISP2 PCR 基因表达抗体制备

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禁欲时间对男性精液质量的影响

复旦学报（医学版） 2003年第4期30卷 391-393页

作者：李文英武俊青高尔生杨秋英陶建国陈锡宽上海市计划生育科学研究所-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精子... 详细信息

目的了解不同禁欲时间的男性精液质量状况,为临床治疗不育提供参考。方法对来自全国7个省市562名健康男性的精液质量进行分析。结果随着禁欲时间的延长,精液量、精子密度、精子总数都有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论精子数目过少的男性,禁欲时间可以稍长,但不宜超过7 d。精子活力差而精子数量足够的男性,则禁欲时间可以稍短,3 d左右即可。

关键词：禁欲时间男性不育症精液质量流行病学质量控制

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子宫内膜增生症的药物治疗研究进展

中国新药杂志 2016年第23期25卷 2683-2687页

作者：马阿影谢淑武朱焰复旦大学生殖与发育研究院上海市计划生育科学研究所生殖药理组国家人口计生委计划生育药具重点实验室

子宫内膜增生症是常见妇科病,临床主要表现为子宫异常出血,并伴有癌变倾向。目前临床治疗可选择手术或药物,主要取决于增生类型、生育愿望和年龄等患者自身条件。临床保守治疗中孕激素的应用最为广泛且效果明确,目前常用的有醋酸甲羟孕... 详细信息

子宫内膜增生症是常见妇科病,临床主要表现为子宫异常出血,并伴有癌变倾向。目前临床治疗可选择手术或药物,主要取决于增生类型、生育愿望和年龄等患者自身条件。临床保守治疗中孕激素的应用最为广泛且效果明确,目前常用的有醋酸甲羟孕酮、左炔诺孕酮等,也有研究表明促性腺激素释放激素激动剂、选择性雌激素受体调节剂以及新型醋酸诺美孕酮、地诺孕素、二甲双胍、染料木黄酮等也具有潜在的辅助治疗子宫内膜增生症的作用。本文将对近几年子宫内膜增生症药物治疗的研究进展作一综述。

关键词：子宫内膜增生症孕激素促性腺激素释放激素激动剂选择性雌激素受体调节剂二甲双胍染料木黄酮

中国7省市年轻男性精液质量的灰关联综合评价

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复旦学报（医学版） 2003年第5期30卷 466-469页

作者：梁翠玲武俊青高尔生陶建国杨秋英复旦大学-上海市计划生育科学研究所流行病室-计划生育药具国家重点实验室上海200032

目的　综合评价中国 7省市的年轻男性精液质量状况。方法　灰色关联分析评定 1998年 12月至1999年 12月在上海、河南、浙江、山西、青岛、河北、贵州 7省市年轻男性的精液质量状况。结果　 7个地区年轻男性精液质量从优到差的顺序如下 ... 详细信息

目的　综合评价中国 7省市的年轻男性精液质量状况。方法　灰色关联分析评定 1998年 12月至1999年 12月在上海、河南、浙江、山西、青岛、河北、贵州 7省市年轻男性的精液质量状况。结果　 7个地区年轻男性精液质量从优到差的顺序如下 :山西 (Y4)、上海 (Y1)、河北 (Y6)、贵州 (Y7)、青岛 (Y5)、河南 (Y2 )、浙江 (Y3 )。经相似程度的聚类分析可大致评定为两个等级。结论　 7个地区年轻男性精液质量可评定为两个等级 :山西、上海地区较优 ,其他地区略差。

关键词：精液质量男性灰关联分析综合评价

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新型避孕药的研究进展及其非避孕益处的应用进展

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第10期 840-841页

作者：朱焰国家卫健委计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所生殖药理组复旦大学生殖与发育研究院

避孕药的发展目标为为育龄人群提供安全、可接受和高效的避孕方法。近10年来,由雌、孕激素组合而成的复方口服避孕药（COC）已有很大改变。在历经第1,2和3代发展后,"第4代孕激素"逐渐成为市场主流,新型孕激素和天然雌激素17β-雌二醇（E... 详细信息

避孕药的发展目标为为育龄人群提供安全、可接受和高效的避孕方法。近10年来,由雌、孕激素组合而成的复方口服避孕药（COC）已有很大改变。在历经第1,2和3代发展后,"第4代孕激素"逐渐成为市场主流,新型孕激素和天然雌激素17β-雌二醇（E2）的应用使新一代COC更加安全,并且对环境更加友好。越来越多的研究显示,避孕药除避孕作用外,还可改善或治疗其他妇科疾病,如降低卵巢癌和子宫内膜癌的发生率,减少异位妊娠、痛经和经前紧张症等的发生,治疗月经过多和功能性子宫出血,改善围绝经期症状,预防绝经后骨质疏松,治疗子宫内膜异位症和高雄激素血症（多囊卵巢综合征）等。现有的临床数据支持将COC作为一种治疗方案用于辅助生育技术,如调整月经周期,选择合适的促排卵开始的时间,避免对体外受精的结局产生不利影响。此外,一些抗生育调节药物还显示出抗肿瘤活性,并可降低化疗的副作用,提高化疗效果。如甲地孕酮已被批准用于改善恶病质和厌食症;孕酮受体拮抗剂米非司酮和优力司特高剂量时可用于紧急避孕,低剂量时可用于改善子宫肌瘤临床症状。醋酸诺美孕酮（nomegesterone acetate,NOMAc）,最新上市的COC是2011年欧盟批准由2.5 mg诺美孕酮和1.5 mg天然雌激素17雌二醇组成的诺美孕酮/E2单相口服片,商品名"Zoely",该产品是使用方案为24 d/4 d,连续服用24 d,停4 d。最新研究显示,Nomac不仅发挥避孕作用,还显示出强的抗子宫异位内膜异位生长的作用。我们研究组首次发现Nomac可明显抑制I型子宫内膜癌细胞增殖,拮抗顺铂等化疗药物导致的恶病质,其作用机理与调节Hedghog、Wnt和m TOR通路中相关因子的活性和表达量相关,更多的研究还在进行中。地诺孕素（dienogest;DNG）DNG具有强的、抑制子宫内膜细胞间质细胞因子分泌的药理学效应,2007年以治疗子宫内膜异位症为适应症在日本上市,其临床疗效与Gn RH激动剂相当,且无Gn RH导致的低雌激素状态和骨密度降低。近几年该药物正在我国进行临床推广应用,国内已有众多的临床应用报道。醋酸烯诺孕酮（nestorone,ST-1435,NES）NES的突出特点为口服生物利用度低,但非胃肠道给药时是目前抗排卵活性最强的孕激素（按Mc Phail index计算）,因而通过非胃肠道系统将NES制备成长效缓释制剂成为研发热点。人口理事正在同时研发含NES的女性和男性的长效避孕药具。150μg NES/15μg EE/的阴道环Ⅲ期临床试验已于2017年完成。NES/E2阴道环的Ⅱ期临床正在招募中。将NES与睾酮合用于男性避孕的研究也取得了成果。醋酸优力司特（Ulipristal,UPA）UPA对孕酮受体具有强亲和力,被认为是选择性孕酮受体抑制剂（SPRM）。2010年30 mg UPA被美国FDA批准用于紧急避孕,用于无保护性行为或已知（或怀疑）避孕失败120 h内（或5 d内）的紧急避孕。2013年欧盟批准5 mg UPA用于子宫肌瘤的术前应用,商品名为Esmya?和Fibristal;。作为人体激素的衍生物,避孕药总体上具有很好的安全性。在一定时间内使用合适的避孕药不仅可减少意外妊娠,提高生活幸福指数,还有助于保护女性生殖健康。此外,孕激素在不同剂量下表现出多种药理活性,具有临床应用价值,值得深入研发。

关键词：避孕药抗肿瘤化疗