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蛋白质印迹法确证为"阴性"的窗口期人类免疫缺陷病毒感染者的筛查试验结果及流行病学特征

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中华传染病杂志 2024年第3期42卷 176-180页

作者：汤琰沈振华孙榕郎晶晶张勇赵冰上海市浦东新区疾病预防控制中心微生物检验科上海200136 上海市浦东新区公利医院检验科上海200136 苏州大学附属儿童医院科研处苏州215025

目的分析蛋白质印迹法确证为"阴性"的窗口期人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的筛查试验结果,以期找到尽快识别窗口期HIV感染者的方法。方法2014年至2021年在上海市浦东新区各级医疗机构经第4代化学发光免疫测定筛查为HIV阳性者的血清(血浆... 详细信息

目的分析蛋白质印迹法确证为"阴性"的窗口期人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者的筛查试验结果,以期找到尽快识别窗口期HIV感染者的方法。方法2014年至2021年在上海市浦东新区各级医疗机构经第4代化学发光免疫测定筛查为HIV阳性者的血清(血浆)样本中,纳入蛋白质印迹法确证为"阴性"且第4代酶联免疫吸附测定筛查为阳性者共100名(200份样本)。根据随访结果,将纳入对象分成早期感染组(24例)和未感染组(76名),进行第4代快速诊断试验(RDT)筛查,比较其筛查结果与随访结果的阳性符合情况,并分析早期HIV感染者的流行病学资料。统计学分析采用χ^(2)检验。结果200份样本中,早期感染48份(24.00%)。第4代RDT筛查抗原和(或)抗体阳性共106份,与随访结果为早期感染的符合率为45.28%(48/106),其中第4代RDT筛查抗原阳性与随访结果为早期感染的符合率为100.00%(36/36),高于抗体阳性的24.68%(19/77),差异有统计学意义(χ^(2)=57.49,P检测HIV,差异有统计学意义(χ^(2)=5.71,P=0.017);6例年龄≥50岁者中仅1例主动检测HIV,18例年龄检测HIV,差异有统计学意义(χ^(2)=4.53,P=0.033)。结论蛋白质印迹法确证为"阴性"的样本有可能为假阴性,联合第4代筛查试验综合评估能筛查出窗口期感染者。另外,需进一步加强高危人群的宣传教育和监测工作。

关键词：第4代化学发光免疫测定第4代酶联免疫吸附测定第4代快速诊断试验

利什曼原虫K26基因的克隆、表达和检测我国内脏利什曼病特异抗体的效果评价

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中国人兽共患病学报 2024年

作者：丁丹王颖高春花莫筱瑾石锋张璟贾孝凯危芙蓉上海市浦东新区疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心

目的分别克隆并表达分离于我国3种类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫K26基因，并对其检测我国内脏利什曼病特异抗体的效果进行评价。方法分别将我国新疆喀什（KS-6株）、四川九寨沟县（SC6株）和新疆伽师县（JIASHI-1株）K26基因进... 详细信息

目的分别克隆并表达分离于我国3种类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫K26基因，并对其检测我国内脏利什曼病特异抗体的效果进行评价。方法分别将我国新疆喀什（KS-6株）、四川九寨沟县（SC6株）和新疆伽师县（JIASHI-1株）K26基因进行全基因合成并加入BamH I 与Xho I酶切位点，分别将K26基因连接至双酶切的pET32a表达载体，转入大肠埃希菌（E. coli）BL21 （DE3）中经1 mmol/L 的异丙基-β-D-半乳糖苷（IPTG）进行诱导表达，用组氨酸标签亲和纯化柱（Ni-NTA树脂）纯化重组蛋白。用制备的3种抗原分别作为包被抗原，以酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）检测病原学确诊的内脏利什曼病患者及其它寄生虫病患者和健康者血清中抗体，以评价其检测的敏感性和特异性。用美国InBios公司rK39（Recombinant K39， rK39）试条进行平行检测。同时用χ2检验比较3种抗原检测的敏感性。结果成功构建利什曼原虫pET32a-K26重组质粒，并在原核细胞中成功表达。以KS-6株、SC6株、JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白为包被抗原的ELISA法和rK39试条法检测黑热病患者血清的敏感性分别为90.00%（99/110）、92.73%（102/110）、90.91%（100/110）和93.64%（103/110），共检测45份其他寄生虫病患者血清包括日本血吸虫病、疟疾、细粒棘球蚴病、华支睾吸虫病、并殖吸虫病和弓形虫病均无交叉反应，健康者血清（40份）也无假阳性反应，特异性均为100.00%。KS-6株、SC6株和JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白ELISA法和rK39试条法的阳性检出率差异无统计学意义(χ2KS-6= 0.97，P =0.33；χ2SC6=0.07，P =0.79；χ2JIASHI-1=0.57，P =0.45)。3种K26抗原的阳性检出率之间的差异无统计学意义(χ2=0.53，Ｐ=0.97)。结论重组K26抗原在内脏利什曼病诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：内脏利什曼病 rK26 基因克隆表达酶联免疫吸附试验 rK39 评价

利什曼原虫K26基因的克隆、表达及用于我国内脏利什曼病特异性抗体检测的效果评价

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中国人兽共患病学报 2024年第8期40卷 763-767页

作者：丁丹王颖高春花莫筱瑾石锋张璟贾孝凯危芙蓉上海市浦东新区疾病预防控制中心上海200136 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心上海200025

目的克隆并表达分离于我国3种类型的利什曼原虫K26基因,并用其检测我国内脏利什曼病特异性抗体,同时进行效果评价。方法分别将我国新疆喀什(KS-6株)、四川九寨沟县(SC6株)和新疆伽师县(JIASHI-1株)K26基因进行全基因合成并加入Bam H I与... 详细信息

目的克隆并表达分离于我国3种类型的利什曼原虫K26基因,并用其检测我国内脏利什曼病特异性抗体,同时进行效果评价。方法分别将我国新疆喀什(KS-6株)、四川九寨沟县(SC6株)和新疆伽师县(JIASHI-1株)K26基因进行全基因合成并加入Bam H I与Xho I酶切位点,分别将K26基因连接至双酶切的pET32a表达载体,转入大肠埃希菌(***)BL21(DE3)中经1 mmol/L的异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用组氨酸标签亲和纯化柱(Ni-NTA树脂)纯化重组蛋白。用制备的3种抗原分别作为包被抗原,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病原学确诊的内脏利什曼病患者及其它寄生虫病患者和健康者的血清中和抗体,以评价其检测的敏感性和特异性。用美国InBios公司rK39试条进行平行检测,比较3种抗原检测的敏感性。结果成功构建利什曼原虫pET32a-K26重组质粒,并在原核细胞中成功表达。以KS-6株、SC6株、JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白为包被抗原的ELISA法和rK39试条法检测黑热病患者血清的敏感性分别为90.00%(99/110)、92.73%(102/110)、90.91%(100/110)和93.64%(103/110),共检测45份其他寄生虫病患者(包括日本血吸虫病、疟疾、细粒棘球蚴病、华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病和弓形虫病)的血清均无交叉反应,健康者血清(40份)也无假阳性反应,特异性均为100.00%。KS-6株、SC6株和JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白ELISA法和rK39试条法的阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)_(KS)-6=0.97,P=0.33;χ^(2)_(SC6)=0.07,P=0.79;χ^(2)_(JIASHI)-1=0.57,P=0.45)。3种K26抗原的阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.53,P=0.97)。结论重组K26抗原在内脏利什曼病诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：内脏利什曼病 rK26 基因克隆表达酶联免疫吸附试验 rK39 评价

2013—2022年上海浦东新区麻疹和风疹疑似病例的检测结果分析

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上海预防医学 2024年第6期36卷 534-539页

作者：王筱张爱华傅慧琴杨玉颖崔晓娴郝莉鹏周艳秋潘丽峰上海市浦东新区疾病预防控制中心上海200136 复旦大学浦东预防医学研究院上海200136 上海市疾病预防控制中心上海200336

【目的】了解2013—2022年上海市浦东新区麻疹、风疹的流行特征,为适时调整消除麻疹、控制风疹的策略提供数据支持。【方法】采用酶联免疫吸附法检测疑似病例血清标本的麻疹和风疹IgM抗体,采用逆转录-聚合酶链反应法扩增麻疹病毒N基因C... 详细信息

【目的】了解2013—2022年上海市浦东新区麻疹、风疹的流行特征,为适时调整消除麻疹、控制风疹的策略提供数据支持。【方法】采用酶联免疫吸附法检测疑似病例血清标本的麻疹和风疹IgM抗体,采用逆转录-聚合酶链反应法扩增麻疹病毒N基因C末端630个核苷酸序列并测序,构建亲缘关系树。【结果】1529例麻疹疑似病例中麻疹IgM抗体阳性率为33.55%(513/1529),3—5月份阳性率(20.73%)最高,集中在0~岁(63.16%,96/152)和20~岁(45.61%,161/353)人群。风疹IgM抗体阳性率为6.80%(104/1529),10~20岁(27.27%,18/66)人群居多。男性的麻疹和风疹IgM抗体阳性率高于女性(P上海市浦东新区的麻疹和风疹IgM抗体阳性率明显降低,麻疹IgM抗体阳性率集中在0~岁和20~岁年龄段,风疹IgM抗体阳性率集中在10~岁年龄段。应继续加强适龄儿童接种相关疫苗,对暴露风险大的年龄段人群进行查漏补种和加强免疫,加强输入性麻疹病例的监测、内防外控,达到消除麻疹、控制风疹的目标。

关键词：麻疹风疹亲缘性分析消除

脊髓灰质炎疫苗不同序贯免疫程序的安全性及基础免疫效果评价

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中国生物制品学杂志 2024年第5期37卷 587-592页

作者：张瑞邓鹏飞杨丹丹薛曹怡肖绍坦杨天上海市浦东新区疾病预防控制中心复旦大学浦东预防医学研究院上海200136

目的评价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral live attenuated poliomyelitis vaccine,OPV)和脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)不同序贯免疫程序的安全性及基础免疫效果。方法选取上海市浦东新区居住的≥2月龄婴... 详细信息

目的评价口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(oral live attenuated poliomyelitis vaccine,OPV)和脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine,IPV)不同序贯免疫程序的安全性及基础免疫效果。方法选取上海市浦东新区居住的≥2月龄婴儿为研究对象,分别于2、3、4月龄进行OPV全程(O-O-O组)、序贯IPV和OPV(I-I-O组)及IPV全程(I-I-I组)基础免疫程序接种,免疫后由家长通过填写自我观察表进行主动监测相关不良反应。免疫前后经上臂静脉采血,分离血清,微量中和试验法检测血清中脊髓灰质炎病毒中和抗体水平,并计算抗体阳转率及几何平均滴度(GMT)。采用Logistic多因素回归法分析组别、性别、户籍、出生体质量和免疫前Ⅰ/Ⅲ型抗体是否阳性等因素对基础免疫后Ⅰ/Ⅲ型抗体阳转率的影响。结果O-O-O组有1例嗜睡,1例哭闹;I-I-O组有1例嗜睡;I-I-I组有1例哭闹。O-O-O、I-I-O和I-I-I组免疫前Ⅰ型中和抗体GMT分别为41.39、8.21和12.56,Ⅲ型中和抗体GMT分别为7.57、4.02和8.08,组间差异均无统计学意义(F分别为2.815和0.608,P分别为0.061和0.545)。免疫前Ⅰ型抗体阳性率分别为24.04%、34.07%和41.00%,组间差异有统计学意义(χ2=13.459,P=0.001);Ⅲ型抗体阳性率分别为13.94%、9.89%和18.00%,差异无统计学意义(χ2=5.188,P=0.075)。免疫后Ⅰ型中和抗体GMT分别为1311.84、1812.59和833.24,Ⅲ型中和抗体GMT分别为911.97、1752.68和419.50,组间差异均有统计学意义(F分别为76.848和202.632,P均<0.001);免疫后Ⅰ型抗体阳转率分别为98.56%、100%和100%,Ⅲ型抗体阳转率分别为99.04%、100%和99.44%,组间差异均无统计学意义(χ2分别为2.973和1.045,P分别为0.122和0.789)。组别、性别、户籍、出生体质量和免疫前Ⅰ/Ⅲ型抗体是否阳性对基础免疫后Ⅰ/Ⅲ型抗体阳转率均无影响。结论3种序贯免疫程序具有良好的安全性,且在基础免疫后均能获得较高的抗体阳转率。

关键词：脊髓灰质炎病毒减毒活疫苗灭活疫苗序贯免疫安全性免疫效果

上海浦东新区15~65岁人群乙肝感染状况及危险因素分析

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公共卫生与预防医学 2024年第5期35卷 33-36页

作者：万千陈诹张鸿吴平安辛辛上海市浦东新区疾病预防控制中心复旦大学浦东预防医学研究院上海200136

目的了解上海浦东新区15~65岁人群乙肝感染状况,分析危险因素,为乙肝防制提供依据。方法采用分层二阶段整群随机抽样等方法抽取浦东新区15~65岁常住人口,开展问卷调查、实验室检测,描述并比较不同特征人群的乙肝感染状况,分析HBsAg阳性... 详细信息

目的了解上海浦东新区15~65岁人群乙肝感染状况,分析危险因素,为乙肝防制提供依据。方法采用分层二阶段整群随机抽样等方法抽取浦东新区15~65岁常住人口,开展问卷调查、实验室检测,描述并比较不同特征人群的乙肝感染状况,分析HBsAg阳性的危险因素。结果共调查1093人,HBsAg阳性率4.94%,乙肝疫苗接种率为36.96%,乙肝易感率43.64%。HBsAg阳性的危险因素为年龄35岁以上(35~44岁/15~24岁OR=4.25,95%CI:1.09~16.61;45~65岁/15~24岁OR=4.59,95%CI:1.33~15.79)、男性(OR=2.33,95%CI:1.27~4.28)、肝炎家族史(OR=5.50,95%CI:2.10~14.36)、肌肉或静脉注射(OR=3.22,95%CI:1.51~6.90)、创伤性美容(OR=7.66,95%CI:2.23~26.30)、修面或修足(OR=9.27,95%CI:2.44~35.23)。结论上海浦东新区15~65岁人群乙肝感染率较低。但对年龄35岁以上,有肝炎家族史、肌肉或静脉注射、创伤性美容、修面或修足等高危行为的人群,仍需通过开展乙肝筛查、接种乙肝疫苗、加强公共场所管理等多种措施加以干预。

关键词：乙型肝炎病毒乙肝表面抗原危险因素

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阶梯设计在疫苗临床研究中的应用

中国预防医学杂志 2024年第7期25卷 936-942页

作者：张笑银吴燕飞金来润朱凤才李靖欣泰州市疾病预防控制中心江苏泰州1225300 上海市浦东新区疾病预防控制中心免疫预防科复旦大学浦东预防医学研究院东南大学公共卫生学院江苏省疾病预防控制中心国家卫生健康委员会肠道病原微生物重点实验室江苏省医学创新中心

阶梯设计是一种以分阶段实施干预措施的研究设计,多用于评估群体层面上某种“利大于弊”的政策干预效果。该设计的主要特点是不需要单独设立对照组,在资源有限只能分阶段逐步实施干预的情况下仍保持传统随机对照试验的优势。近年来,阶... 详细信息

阶梯设计是一种以分阶段实施干预措施的研究设计,多用于评估群体层面上某种“利大于弊”的政策干预效果。该设计的主要特点是不需要单独设立对照组,在资源有限只能分阶段逐步实施干预的情况下仍保持传统随机对照试验的优势。近年来,阶梯设计在国外被越来越多地应用于各类疫苗的临床效力评估及上市之后的保护效果评估,如流感疫苗、人乳头瘤病毒疫苗、乙肝疫苗、埃博拉疫苗等。本研究从基本原理、适用情况、设计类型、设计要素以及应用实例等方面对阶梯设计在疫苗评价中的应用进行了介绍,旨在为我国今后开展阶梯设计的疫苗临床研究提供参考。

关键词：阶梯设计疫苗临床试验研究设计

尿铁调素与2型糖尿病肾病的关系及其临床意义

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中国综合临床 2024年第4期40卷 265-270页

作者：慕开达张进安张菁杨燕萍杨晓荣李广欣杨志远上海健康医学院附属周浦医院内分泌科上海201318 上海市金山区疾病预防控制中心上海201599

目的分析尿液中铁调素在不同分期2型糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)患者中的表达水平及其与DKD及相关指标的关系。方法选择上海健康医学院附属周浦医院2022年6月至2023年12月内分泌科住院2型糖尿病患者139例为研究对象。DKD... 详细信息

目的分析尿液中铁调素在不同分期2型糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)患者中的表达水平及其与DKD及相关指标的关系。方法选择上海健康医学院附属周浦医院2022年6月至2023年12月内分泌科住院2型糖尿病患者139例为研究对象。DKD分期通过尿微量白蛋白/尿肌酐比值(urinary albumin/creatinine ratio,UACR)判定:A1期为UACR300 mg/g。按照DKD分期进行分组,其中A1期患者50例(A1组),A2期DKD患者47例(A2组),A3期DKD患者42例(A3组)。采用酶联免疫吸附测定法测定尿铁调素,同时检测空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、血肌酐及糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)并进行比较,分析尿铁调素与其他指标的相关性、DKD风险因素及诊断价值的评价。呈正态分布的计量资料以x^(-)±s表示,3组间均数比较,若方差齐性,采用方差分析检验;若方差不齐,采用韦尔奇检验;计数资料组间构成比或率采用χ^(2)检验;相关性分析采用Pearson相关性分析;多因素分析采用二元Logistic回归模型;采用受试者特征曲线分析尿铁调素在诊断DKD中的价值。结果A1组尿铁调素为(5.3±1.0)μg/L,A2组为(7.7±2.5)μg/L,A3组为(10.1±2.7)μg/L,3组间差异有统计学意义(F=58.92,P0.05)。其次,通过二元Logistic回归分析提示尿铁调素水平的升高是DKD发生的风险因素(OR=4.147,95%CI:2.154~7.984,P生物学标志物。

关键词：糖尿病肾病铁调素 2型糖尿病尿液诊断

大肠埃希菌生物被膜表型、基因型与多重耐药的相关性分析

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医学临床研究 2024年第5期41卷 754-757页

作者：卢立全刘丹徐素梅上海市浦东新区人民医院检验科(上海市病原真菌医学检验重点实验室) 上海201200 上海市浦东新区疾病预防控制中心微生物检验科上海200136 上海国际医学中心检验科上海201321

【目的】探讨大肠埃希菌生物被膜表型、基因型与大肠埃希菌多重耐药的相关性。【方法】收集临床分离的230株大肠埃希菌,采用多重PCR法进行基因分型,采用改良结晶紫方法测定生物被膜形成能力,采用K-B法进行药敏试验。统计并分析大肠埃希... 详细信息

【目的】探讨大肠埃希菌生物被膜表型、基因型与大肠埃希菌多重耐药的相关性。【方法】收集临床分离的230株大肠埃希菌,采用多重PCR法进行基因分型,采用改良结晶紫方法测定生物被膜形成能力,采用K-B法进行药敏试验。统计并分析大肠埃希菌耐药情况,大肠埃希菌生物被膜表型与多重耐药情况,大肠埃希菌基因型与多重耐药情况,大肠埃希菌生物被膜基因型与多重耐药的关系。【结果】大肠埃希菌对氨苄西林、头孢呋辛、环丙沙星耐药率均较高,对哌拉西林耐药率较低,对亚胺培南无耐药性;大肠埃希菌生物被膜表型分为强、中等、弱、无,分别占3.91%、31.30%、57.83%、6.96%,其中中等和弱占比较高,生物被膜形成能力越强,其多重耐药率越高;大肠埃希菌基因型中CTX-M-9基因型菌株数占比最高,为35.65%;Spearman相关性分析显示,大肠埃希菌生物被膜形成能力与多重耐药率呈正相关(P=0.012)。【结论】大肠埃希菌生物被膜形成能力与多重耐药率有关,各基因型对多种抗生素均表现为耐药,临床应合理应用抗生素。

关键词：肠致病性大肠杆菌抗药性,细菌细菌/遗传学基因型